הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

תנאים המשפיעים על המרחב חברתי ב

12.4K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/53242

⸱

5 בנובמבר 2015

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biology, University of Western Ontario, 2Department of Biology, York College/CUNY, 3Department of Entomology, Cornell University

במאמר זה

סיכום

ניתן לכמת את השפעת הגנים והסביבה על המרחב החברתי של Drosophila melanogaster באמצעות פרדיגמה אנליטית רבת עוצמה אך ישירה. אנו מראים כאן גורמים שונים שיכולים להשפיע על המרחב החברתי הזה, ולכן יש לקחת אותם בחשבון בעת תכנון ניסויים בפרדיגמה זו.

תקציר

Assay המרחב החברתי שתואר כאן יכול לשמש כדי לכמת את האינטראקציות חברתיות של r תסיסנית melanogaste - או חרקים קטנים אחרים - בצורה ישירה. כפי שהוכחנו בעבר 1, בתא דו-ממדי, שהכח ראשון זבובים כדי ליצור קבוצה חזק, לאחר מכן מאפשר להם לקחת מרחק העדיף אחד מהשני. לאחר הזבובים התיישבו, אנו מודדים את המרחק לשכנה הקרובה ביותר (או המרחב חברתי), עיבוד תמונה סטטית עם תוכנה חופשית באינטרנט (ImageJ). הניתוח של המרחק לשכן הקרוב ביותר מאפשר לחוקרים לקבוע את ההשפעות של גורמים גנטיים וסביבתיים על אינטראקציה חברתית, תוך פיקוח על ערפלנים אפשריים. גורמים מגוונים כגון יכולת טיפוס, שעה ביום, מין, ומספר הזבובים, יכולים לשנות מרווח חברתי של זבובים. כך אנו מציעים סדרה של בקרות ניסיוניות כדי למתן תופעות בלבול אלה. assay זה יכוללשמש לפחות שתי מטרות. ראשית, חוקרים יכולים לקבוע כיצד המשמרת שלהם האהובה הסביבתית (כגון בידוד, טמפרטורה, מתח או רעלים) תשפיע מרווח חברתי 1,2. שנית, חוקרים יכולים לנתח את הבסיס הגנטי ועצבי של צורה בסיסית זו של התנהגות חברתית 1,3. באופן ספציפי, השתמשנו בו ככלי אבחון כדי ללמוד את התפקיד של גני orthologous חשבו להיות מעורבים בהתנהגות חברתית באורגניזמים אחרים, כגון גני מועמדים לאוטיזם בבני האדם 4.

מבוא

אינטראקציות חברתיות הן קריטיות להתפתחות התקינה והבריאות של יחידים בתוך קבוצה כולה, וניתן לצפות על פני מינים רבים, מבני האדם (הומו סאפיינס) לאורגניזמים פשוטים יותר כמו זבובי פירות (דרוזופילה melanogaster) 5,6. זבוב פירות או אמצעי נפוץ נתח אדם בודד לעבד מידע חושי במהלך אינטראקציות אלה, בין אם זה יהיה: שמיעה,, חוש הריח, מישוש, או gustation חזותיים. אנחנו ואחרים משערים כי יש neurocircuitry פוטנציאלי משותף שבבסיס תגובות התנהגותיות לאינטראקציות חברתיות וכי התאים עצביים והגנים מעורבים עשויים להיות האבולוציונית נשמרים 7. ברגע האינטראקציה הראשונית התרחשה, מרחב חברתי בין האנשים האינטראקציה תהיה גם עלייה (הימנעות חברתית 8) או ירידה (היווצרות קבוצה / צבירה 5). אינטראקציות מורכבות יותר, כמו תוקפנות או חיזור, אז יכולות להתרחש.

= "Jove_content" ילדה> גם כלים מתוחכמים ושיטות, ולא השקעות גדולות בזמן והכשרה נדרשות לכמת צורה פשוטה זו של התנהגות חברתית, מה שהופך אותו לכלי אנליטי חזק. כאן, אנו מסבירים פרוטוקול פשוט שמכמת מרחק בין זבוב, או מרחב חברתי, להעריך אינטראקציה חברתית בקבוצות יציבה של דרוזופילה melanogaster, המשמש במחקרים 1-4,9 הבאים. מרחב חברתי מתייחס למדד של המרחק בין זבוב והשכן הקרוב ביותר שלה 10. המרחב חברתי הוא עקבי לאוכלוסיית נתונה של ד melanogaster כאשר תנאי ניסוי נשמרים (בממוצע כ בתוך 1-2 אורכי גוף), ומשתנים ביחס לחוויה החברתית של הזבובים, הגדלת אם היחיד נשמר בבידוד 1. חזון נכון יש צורך לשמור על מרחק חברתי נורמלי, אבל לא odorants הקלאסי או תפיסת CVA 1. מידה של מרחב חברתי יכולה להיות כךמשמש ככלי אבחון לניתוח אינטראקציות חברתיות ולכמת התנהגות חברתית בד melanogaster 1. אנו מתארים כאן בפרטים כיצד לבצע כימות זה, ובאיזו מידת משתנים ניסיוניים נפוצים משפיעים על התנהגות זו.

אנו מראים כי הנטייה של החדר שבו assay מבוצע, כמו גם את מספר הזבובים - במידה - עושה משפיעה מרחב חברתי. זה היה הראה בעבר כי תא גיאומטריה משפיעה על תנועת גישוש ספונטנית של זבובים 11,12, ותופעה זו עשויה להשפיע בסופו של בו הם מחליטים להתיישב. עם זאת, כל עוד צפיפות הזבוב (זבוב / 2 סנטימטר) ותא הנטייה נשמר זהה, המרחב החברתי של הזבובים גם נשאר קבוע. החוסן של assay זה בא לידי ביטוי בעובדה שמעבדות עצמאיות באמצעות גדלים שונים קאמריים, צורה, וכיוון יכול לשכפל את התוצאה מוצגת על ידי מוטציות של "שגן ITE (המשפיע על פיגמנטציה עין), שהוא מרחב עלייה חברתי (משולש אנכי או אופקי במעגל 1, כיכר אופקית עם זרימת אוויר ב 3).

התוצאות שלנו גם מצביעות על כך שהשמירה על הזמן שבו ניסוי המרחב החברתי מתבצע היא חיונית לעקביות של התוצאות, כפי שאנו מראים כי גברים, אך לא נשים, הן עוד מלבד בערבים. עם זאת, ההבדלים בין ראו שעות היום והערב אינם בשל הבדלי פעילות של הזבובים, ואנחנו דנים טיעונים המעידים כי רמות הפעילות אינם מתואמים עם מרחב חברתי.

לבסוף, יש בסיס גנטי לקביעת המרחב החברתי, כפי שצוין על ידי המוטציה הלבנה כבר תאר 1,3, וההבדלים בין זנים טהורים ו- נתפס פראיים השונים של זבובים שאנו מציגים כאן.

לכן, assay זה עושה F כלי מצויןאו לומד את ההשפעות של גנטי, כמו גם גורמים סביבתיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. ציוד וריאגנטים שנוצרו בבית (ראה רשימה של חומרים לאחרים)

  1. הכן מנגנון הרדמה קרה תסיסנית כפי שתואר בעבר 8.
  2. הכן aspirator לטוס כפי שתואר קודם לכן 13.
  3. הכן תאי מרחב חברתיים ובעלי.
    1. להזמין או לעשות שמשות זכוכית ומפרידי אקריליק ליצור תאי המרחב החברתיים. כל תא שטח החברתי מורכב משני לוחות זכוכית מרובעות (17.6 סנטימטר על 17.6 סנטימטר, בעובי של 0.3 סנטימטרים), שני מפרידי אקריליק משולש ישר הזווית (בגובה של 16.5 סנטימטר, בסיס של 8.9 סנטימטר, בעובי של 0.3 סנטימטר ), ושני חללים מלבניים (9 סנטימטר ב -1.5 סנטימטר בעובי של 0.3 סנטימטרים) (איור 1 א).
    2. להרכיב את הזכוכית ותא מרחב החברתי אקריליק כך שהוא זהה לתא באיור 1. כדי לעשות זאת, להתחיל על ידי הצבת spacer אחד המשולש שטוח על גבי חלונית רבועה אחד של זכוכית כך שהזווית הנכונהשל spacer המשולש מיושר עם אחת הפינות של חלונית רבועה. לאחר מכן, הנח את שטוח spacer המשולש השנייה על גבי חלונית מרובעת, שיקוף spacer המשולש הראשון.
      הערה: הקפד ללבוש כפפות כדי לא לזהם את החתיכות עם שמנים וריחות מהידיים שלך.
    3. מניחים שני מפרידי מלבניים קטנים שטוחים על גבי חלונית הכיכר, בצד של חלונית שאינו מכוסה. מפרידי אקריליק על גבי המטוס הרבוע צריכים עכשיו ליצור זירה משולשת.
    4. הנח חלונית כיכר שנייה של זכוכית על גבי מפרידי אקריליק כזה שיהיה מיושר מעל חלונית המקורית של זכוכית מתחת.
    5. השתמש בארבעה קליפים קלסר כדי לאבטח את השמשות ומפרידים יחד כדי ליצור את תא המרחב החברתי. הנח קליפ אחד ליד הפינה, על הצד של כל אחד ממפרידים המשולשים הארוך, הבטחתם בתוך שמשות הזכוכית. באותו אלה צדדים, למקם קליפ בפינה הסמוכה, על כל אחד מהמפרידים מלבניים, ההבטחה בצד שמשות הזכוכית.
    6. להרכיב עמדת תמיכה ומהדק בקבוק כזה שמהדק ישמור קאמרי המרחב החברתי בתנוחה זקופה, כתא המרחב החברתי נשען על הקצה שלה על גבי משטח העבודה.
    7. לכל חוזר בניסוי, להרכיב תא מרחב חברתי ולתמוך לעמוד.
  4. הכן מנגנון תגובת assay טיפוס כדי לבדוק את יכולת הטיפוס של הזבובים שנבדקו.
    1. השתמש במנגנון נגדי, כפי שתואר בעבר 14,15.
  5. להבטיח תנאי תאורה הומוגנית על ידי ביצוע הניסוי על משטח עבודה מכוסה בכיסוי ספסל לבן ומול רקע לבן.

2. הכנת הזבובים לפני הניסוי

  1. לשמור על זבובים בבקבוקים המכילים תסיסנית סטנדרטית לטוס מזון. שמור אותם בתא דגירה של 25 מעלות צלזיוס בשעתי אור 12 / מחזור כהה.
  2. אחת ליומיים לפני הדוארxperiment, לאסוף ומין זבובים בהרדמה קרה, כפי שתוארו בעבר 8.
    1. צ'יל מנגנון ההרדמה הקר ב-4 ° C. מקום זבובים לתוך צינורות 50 מיליליטר פלסטיק. באופן מלא להטביע את צינורות פלסטיק המכילים זבובים לתוך קרח בדלי קרח מבודד, לחכות לפחות 5 דקות לזבובים להפוך נייחים.
    2. מניחים את הזבובים בגיליון פוליאתילן של מנגנון ההרדמה הקר. ב RT, להשתמש סטראו להפריד זכרים מנקבות. לשמור על זבובים, בקבוצות, בבקבוקונים המכילים תסיסנית סטנדרטית לטוס מזון, שלא יעלה על 40 זבובים בכל בקבוקון.
  3. שעות לפני תחילת הניסוי, להבטיח שהטמפרטורה של החדר שבו הניסוי יבוצע היא בין 24-25 מעלות צלזיוס והלחות היא כ -50%.
  4. העבר את הזבובים לתוך צלוחיות חדשות המכילות מזון, ולמקם אותם לשעה 2 על משטח העבודה שבו הניסוי יבוצע.
    הערה: לאלה experimenTS, הזנים לטוס השתמשו היו זני תסיסנית melanogaster: קנטון-מיוחדים או קנטון-S (CS), w 1,118 Cs 10 (או W - W 1,118 outcrossed 10 פעמים לקנטון-S), זבובי אורגון וסמרקנד היו כל מהמעבדה שלנו מניות 16; זבובי אלווד נאספו בסתיו 2011 בשכונת אלווד של הנטינגטון, בלונג איילנד, ניו יורק, ארה"ב 8. מלבד כאשר צוינו אחרת, התוצאות שהוצגו היו שהושגו עם קנטון-S הזבובים (בגוונים של אדום).

3. ביצוע הניסוי

  1. בצע את הניסוי 12:00-03:00 (זמן Zeitgeber - הזמן בשעות לאחר תחילת האור - של 4 ZT 7).
  2. להכין את חדר המרחב החברתי להעברת זבובים.
    1. מניחים שטוח קאמרי המרחב חברתי על משטח עבודה, כאשר הצד המכיל מפרידי מלבניים הקרובים ביותר לגוף שלך.
    2. הסר oקליפ ne הקרוב גופך ולהחליק spacer אחד מלבני החוצה, יצירת פער של כ 1 סנטימטר בין מפרידי מלבניים.
    3. באמצעות קלטת וסמן, לתייג את תא המרחב החברתי בפינה עליונה עם מין, מתח, ומספר חוזר. תשמור על מנת להבטיח את הקלטת אינו מכסה חלק מהזירה הפנימית המשולשת.
  3. העבר את הזבובים לתוך תא המרחב החברתי.
    1. העברת זבובים מהבקבוקון המכיל מזון שלהם לתוך בקבוקון חדש, ריק. לשאוב עף מהבקבוקון הריק ולהעביר אותם לתא המרחב החברתי.
      1. שאיפה לצייר זבובים לתוך קצה aspirator. הנח את הקצה לתוך פער 1 סנטימטר בין מפרידי מלבניים של חדר המרחב החברתי ולנשוף בקצב עקבי כדי לאלץ את הזבובים לזירה הפנימית המשולשת.
      2. מייד להחליק spacer המלבני בחזרה למקומו, לסגור את הבסיס של הזירה הפנימית המשולשת, ולמקם את הקליפ קלסר על גב.
  4. על כרית הולמת, הנמצא על ספסל שבו שונה מהעבודה הניסיונית מתרחשת, להחזיק את תא המרחב החברתי זקופות כך שהמפרידים מלבניים נמצאים בצד התחתון. פעמים לירה שלוש כדי להבטיח את כל הזבובים נפלו לתחתית של הזירה.
    הערה: בשל spacer אקריליק הבולט של גודל התא הקטן ביותר (איור 1D), לדפוק מרפקים על משטח עבודה, תוך שמירה על אחיזה מאובטחת על מנגנון כדי להבטיח את הזבובים נפלו לתחתית.
  5. התחל טיימר.
  6. מניחים את חדר המרחב החברתי על משטח העבודה ולהשתמש במהדק עמדת תמיכה ובקבוק כדי לשמור אותו זקוף. הנח שליט או מדבקה של אורך ידוע שטוחה נגד קאמרי המרחב החברתי, אבל לא מכסה כל חלק של הזירה הפנימית המשולשת.
    1. לניסויים ממוקמים אופקי, אל תניח את תא המרחב החברתי בעמדת התמיכה; במקום להניח את שטוח קאמרי המרחב החברתי על משטח העבודה.
  7. כאשר הזבובים התיישבו, בדרך כלל לאחר כ -30 דקות, לקחת תמונה של חדר המרחב החברתי. ודא שהמסגרת מכילה הזירה כולה הפנימית המשולשת, השליט, ואת התווית.
  8. חזור על הניסוי עבור כל גנוטיפ ומצב (באופן אידיאלי 3 משכפל פנימי ו -3 חזרות עצמאיות).

4. ניתוח נתונים המרחב החברתי

  1. לייבא פקודות מאקרו הבאים בImageJ 17
    1. ImageJ זמין כאן: http://rsbweb.nih.gov/ij/.
    2. אתה יכול ליצור פקודת 'מרחקים מדוד "בתפריט התוספים ידי שמירת פקודות מאקרו להלן בקובץ בשם" Measure_Distances.txt' בתיקיית ImageJ / תוספים, בתת-תיקיית מאקרו, ובאמצעות העזרה> פקודת עדכון תפריט. "
    3. עותק ב.txt להגיש פקודות מאקרו שמסופקים בנתונים משלימים ופורסמו במקור ב 3.
  2. העלה את התמונות למחשב, ולפתוח pictu אחדמחדש באמצעות ImageJ.
    1. צור קנה מידה על ידי ציור קו מ0 סנטימטר עד 1 סנטימטר על סימני השליט בתמונה, ותחת לשונית ניתוח, לבחור את תכונת Scale Set להגדיר סולם של 1 סנטימטר למרחק ש( אותה גישה למדבקה של אורך ידוע). בחר את האפשרות הגלובלית לפני היישום בקנה מידה לתמונה.
    2. לחתוך את התמונה באמצעות תכונת היבול תחת לשונית התמונה כך שהיא כוללת את כל הזבובים, תוך הסרת כמה שיותר את שאר התמונה ככל האפשר.
    3. להפוך את התמונה בשחור לבן על ידי בחירה של 8 ביט מסוג האופציה תחת לשונית התמונה.
    4. הסר את כל רעשי הרקע מהתמונה על ידי לחיצה על תכונת הסף תחת האפשרות התאם של כרטיסיית התמונה. גרור את המחוונים כדי לשפר או להסיר את הניגוד, כך שגופו של כל זבוב שניתן לראות ללא כל סימנים אחרים בתמונה באופן ברור. אם יש סימנים שאינם זבובים, ללכוד אותם עם הכלי המלבני ולמחוק אותם.
    5. הגדר אתמדידות באמצעות כלי מדידת הסט תחת הלשונית לנתח. בחר איזור, מרכז המסה, מרכז הצורה, ותווית תצוגה. לאחר מכן, בחר כוללים החלקיקים לנתח תחת הלשונית לנתח כדי ליצור רשימה ממוספרת של כל הכתמים השחורים המייצגים את הזבובים.
      1. בעת שימוש בניתוח חלקיקים; גודל קבוצה .01-.1 (לא לבחור יחידת פיקסל); המעגליות .00-1.00; קווי המתאר תכנית; הצגת תוצאות, ולהוסיף למנהל.
      2. ודא שכל נקודה שחורה (כל חלקיק) הוא ייצוג מדויק של הזבובים שנמצאים בתמונה המקורית, על ידי השוואת הרשימה הממוספרת לתמונה המקורית.
        הערה: אם כמה זבובים, כי הם קרובים מאוד זה לזה שנספרו כחלקיק אחד, למתוח קו לבן כדי להפריד בין שני זבובים על התמונה בינארי ידני.
    6. בעוד הרשימה נבחרה, להשתמש השכן הקרוב ביותר - מאקרו רשימת המרחקים תחת אפשרות מאקרו השנייה בכרטיסיית התוספים כדי ליצור רשימה חדשה המכילה את המרחקים, בסנטימטרים, מבית EAפרק לטוס לשכן הקרוב ביותר שלהם.
  3. העתק את מרחקי השכן הקרובים ביותר מImageJ ולהדביק לתוך טור של תוכנת גיליונות אלקטרוניים.
    1. לקמפל את כל הנתונים מכל חוזר על אותו הגיליון האלקטרוני ולארגן על ידי גנוטיפ ומצב.
  4. לבצע ניתוח נתונים באמצעות תוכנה סטטיסטית. בניסוי זה, גרף Pad פריזמה (גרסת 6 לMacOSX, GraphPad תוכנה, ארה"ב סן דייגו קליפורניה, www.graphpad.com) שימשה לכיוון אחד ANOVA, ובדיקות קרוסקל-ווליס, Tukey של ופוסט-הוק הבדיקות של Dunnet.
  5. חלוקת המרחקים כדלקמן הפצה פרמטרית שאינו 1, ונתונים מיוצגים תיבה והשפם של Tukey (לחסל חריגים) כ.

5. Assay (לשלוט בהתנהגות) טיפוס

  1. השתמש בassay טיפוס כביקורת לזבובי מבחן טיפוס יכולת 14,15,18.
    1. השתמש במנגנון נגדי כך ששלושה ניסויים גניתן להפעיל במקביל.
  2. העברה 50 עד 100 זבובים נאיביים (זבובים שלא נבדקו בעבר) בשלושה בקבוקוני בדיקה שונים, ולהצמיד אותם ל-1, 3 rd וחריצים שעבר בחלק התחתון של מכשיר נגדי, עם צלוחיות ריקות טריות במקומות הפוכים.
  3. מניחים צלוחיות טריות, ריקות בחריצים הריקים בחלק התחתון של המכשיר.
  4. הקש מטה המנגנון שלוש פעמים, כך שכל הזבובים נמצאים בתחתית של כל צינור, כדי ליזום את הניסוי.
  5. התחל טיימר במשך 15 שניות (זמן מספיק לשל 3-7 ימים קנטון-S הישן ~ 100% כדי להגיע לבקבוקון העליון - ראה איור 3F).
  6. חלק את החלק העליון של המנגנון נגד הזרם, כדי לעקור את הבקבוקונים העליונים על ידי חריץ אחד.
  7. לאסוף זבובים על ידי הקשה על המנגנון למטה, להביא את כל הזבובים בבקבוקונים התחתון.
    1. 1 st ו- 2 nd צינורות (או 3 rd ו-4, ה -5 ו-6) מתאים בהתאמה לזבובים שלא הגיעו לראש והזבובים שהגיעו לבקבוקון העליון.
  8. לחשב את מדד ביצועים (PI).
    1. לספור את מספר הזבובים בכל בקבוקון.
    2. PI הוא אחוז הזבובים מסוגלים לטפס על הצינור העליון.
    3. אמצעי לצרכן לעקוב אחרי התפלגות נורמלית 1, ונתונים מיוצגים כגרפי עמודה של ממוצע פלוס מינוס סטיית התקן לממוצע (SEM).
      הערה: לחלופין, PI ניתן מחושב כאחוז של זבובים יוכלו להגיע לחלק העליון של הבקבוקון נמוך יותר (לזבובים בוגרים, 5 שניות היא הזמן מספיק כדי לכמת את הבדל ביכולת טיפוס בין נגוע ולא נגועים בן 12 ימים קנטון-S לכמת מתמונה עדיין: לראות תוצאות). אחרים השתמשו באמצעים שונים של ביצועים בgeotaxis השלילית מושרה בהלה, כי הם גם מתאימים לכמת טיפוס היכולת 19-22.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

תא המרחב החברתי יכול לשמש ככלי ללכמת את ההתנהגות החברתית של תסיסנית melanogaster. מפרידי אקריליק וזגוגיות נחתכים יחד כדי ליצור זירה משולשת פנימית המספקת אזור דו-ממדי שבטס יכול ליצור קבוצות יציבה ללא נוכחות רב רמזים שעלולים להיות מבלבלים. כאשר זבובים מועברים לזירה האנכית, הם נבהלו שטפחו כלפי מטה, והם מגיבים בהתנהגות בריחה: geotaxis השלילית. הם מטפסים לקודקוד של המשולש הזקוף, נאלץ לקבוצה חזק, ולאחר מכן מסופקים זמן לעבור עוד טופס אחד את השני, ולחקור את הזירה. לאחר 20 עד 40 ד...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

בפרוטוקול זה, נוהל מפורט לכימות של המרחב החברתי שתואר. כמה צעדים חיוניים כדי להבטיח את הניסוי מוצלח הם: 1) תמיד להשתמש בכפפות בעת הניקוי והקמת המנגנון, כדי לשמור על שמנים משלך וריחות מהחדר הפנימי של המנגנון, 2) להבטיח זבובים נאספים לפחות יום אחד לפני הניסוי כדי לצמצם כל השפעה אפשרית של הרדמה קרה, 3) 2 שעות לפני הניסוי לספק בקבוקונים חדשים המכילים מזון טרי, כדי להבטיח את הזבובים לא מורעבים, וניקו את עצמם, 4) בשעה 2 אלה, בואו הזבובים להתאקלם להם סביבה חדשה, 5) שים לב לתנאי הטמ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

תודות

המחברים רוצים להודות לד"ר תדמירי ונקטש על עידודו להכין את כתב היד הזה, לדובה ברנמן וסלווין צ'וי על הערותיהם הבונות, לאליסה בורג וויין רסבנד על עיצוב המאקרו ב-ImageJ לכל מרחקי הטיסה ולמרחקי השכנים הקרובים ביותר. המחברים רוצים גם להודות לסוקרים על הערותיהם הבונות.

A.A.A, M.C.C. ו-A.F.S היו אחראים על תכנון המחקר; S.N.J., A.A.A, M.N., Z.R. ו-A.J.M. ביצעו את הניסויים. A.A.A, M.N., A.J.M. ו-M.C.C ו-A.F.S. ניתחו את הנתונים; A.R.M. ו-A.F.S. כתבו את כתב היד.

עבודה זו נתמכה על ידי פרסי המחקר של PSC-CUNY, במימון משותף של קונגרס הסגל המקצועי ואוניברסיטת העיר ניו יורק ל-A.F.S.; על ידי מימון פנימי מאוניברסיטת ווסטרן ל-A.F.S.; על ידי מלגת מתמטיקה, ביולוגיה, כימיה וגיאולוגיה למורים בהכשרה ועל ידי מלגת ברית לואיס סטוקס להשתתפות מיעוטים ל-A.A.A.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מיקרוסקופ זום סטריאו ניקון   SMZ-645כל היקף סטנדרטי אחר לטיפול בזבובים יעבוד
מברשות צבע קטנות לדחיפת זבובים
ג'אז-מיקספישר33545כל מזון דרוזופילה סטנדרטי אחר יעבוד
מיני טיימר אזעקה/שעון
  עטי
סרט
קליפס קלסר בגודל בינוניסיכותלהחזקת התאים יחד: 1-1/4 אינץ' (32 מ"מ) קליפסים בינוניים עם קיבולת 5/8 אינץ'
תמיכה קטנהSupportStands Carolina 707161להחזיק את התאים בכיוון אנכי
מהדק בורטהמצלמה הדיגיטלית של קרולינה707362
ניקון  קולפיקס S8000 כדי לצלם את תמונות הסטילס
סרגלכדי להיות מסוגל לשנות את קנה המידה של לוח התמונה
המשולש וכיסויכדי לספק רקע לבן ואור הומוגני.
דפיקה: כל משטח עכבר עובד.
פריזמה 6GraphPad תוכנה בע"מפריזמה 6 עבור Mac OS Xכל תוכנת ניתוח סטטיסטי עם t-test, חד כיווני ושני ANOVA תעבוד
עצרשארפידבק את קטן הספסל הלבן משטח

מקורות

  1. Simon, A. F., et al. A simple assay to study social behavior in Drosophila.: measurement of social space within a group. Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).
  2. Kaur, K., Simon, A. F., Chauhan, V., Chauhan, A. Effect of bisphenol A on the behavior of Drosophila melanogaster. - Potential use of Drosophila as a model in the study of neurodevelopmental disorders. Behavioural Brain Research. , (2015).
  3. Burg, E. D., Langan, S. T., Nash, H. A. Drosophila social clustering is disrupted by anesthetics and in narrow abdomen ion channel mutants. Genes Brain Behav. 12, 338-347 (2013).
  4. Wise, A., et al. The autism candidate gene Neurobeachin (Rugose) mutants in Drosophila exhibit neuro-developmental disorders, aberrant synaptic properties, altered locomotion, impaired adult social behavior and activity patterns. J Neurosci. , 1-9 (2015).
  5. Parrish, J. K., Edelstein-Keshet, L. Complexity, pattern, and evolutionary trade-offs in animal aggregation. Science. 284, 99-101 (1999).
  6. Sokolowski, M. B. Social interactions in ‘‘simple’’ model systems. Neuron. 65, 780-794 (2010).
  7. Rittschof, C. C., Robinson, G. E. Genomics: moving behavioural ecology beyond the phenotypic gambit. Animal Behaviour. 92, 263-270 (2014).
  8. Fernandez, R. W., et al. Straightforward assay for quantification of social avoidance in Drosophila melanogaster. JoVE. (94), e52011(2014).
  9. Hahn, N., et al. Monogenic heritable autism gene neuroligin impacts Drosophila. social behaviour. Behav Brain Res. 252, 450-457 (2013).
  10. Mogilner, A., Edelstein-Keshet, L., Bent, L., Spiros, A. Mutual interactions, potentials, and individual distance in a social aggregation. J Math Biol. 47, 353-389 (2003).
  11. Liu, L., Davis, R. L., Roman, G. Exploratory activity in Drosophila requires the kurtz nonvisual arrestin. Genetics. 175, 1197-1212 (2007).
  12. Soibam, B., et al. Open-field arena boundary is a primary object of exploration for Drosophila. Brain Behav. 2, 97-108 (2012).
  13. Ejima, A., Griffith, L. C. Ch. 30. Drosophila Neurobiology - A laboratory Manual., Ch. , Cold Spring Harbor Press. 475-481 (2010).
  14. Benzer, S. Behavioral mutants of Drosophila melanogaster. isolated by countercurrent distribution. PNAS. 58, 1112-1119 (1967).
  15. Connolly, J. B., Tully, T. Drosophila: A practical approach. Roberts, D. B. 1, 2nd, IRL Press. 265-317 (1998).
  16. Simon, A. F., Shih, C., Mack, A., Benzer, S. Steroid control of longevity in Drosophila melanogaster. Science. 299, 1407-1410 (2003).
  17. Rasband, W. S. ImageJ. , US National Institutes of Health. Maryland, U.S.A. (1997).
  18. Simon, A. F., et al. Drosophila, vesicular monoamine transporter mutants can adapt to reduced or eliminated vesicular stores of dopamine and serotonin. Genetics. 181, 525-541 (2009).
  19. Barone, M. C., Bohmann, D. Assessing neurodegenerative phenotypes in Drosophila .dopaminergic neurons by climbing assays and whole brain immunostaining. JoVE. (74), e50339(2013).
  20. Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila. models of neurodegeneration. JoVE. , e2504(2011).
  21. Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila. Exp Gerontol. 40, 386-395 (2005).
  22. Simon, A. F., Liang, D. T., Krantz, D. E. Differential decline in behavioral performance of Drosophila melanogaster. with age. Mech Ageing Dev. 127, 647-650 (2006).
  23. Khalil, S., Jacobson, E., Chambers, M. C., Lazzaro, B. P. Systemic bacterial infection and immune defense phenotypes in Drosophila melanogaster. JoVE. , (2015).
  24. Fernandez, R. W., Akinleye, A. A., Nurilov, M., Rouzyi, Z., Simon, A. F. 54th Annual Drosophila Research Conference, Washinton D.C., , (2013).
  25. Suh, G. S. B., et al. A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila. Nature. 431, 854-859 (2004).
  26. Helfrich-Förster, C. Differential control of morning and evening components in the activity rhythm of Drosophila melanogaster.--Sex-specific differences suggest a different quality of activity. J. Biol. Rhythms. 15, 135-154 (2000).
  27. Fujii, S., Krishnan, P., Hardin, P. E., Amrein, H. Nocturnal male sex drive in Drosophila. Curr Biol. 17, 244-251 (2007).
  28. Pellegrino, A. C., et al. Weather forecasting by insects: modified sexual behaviour in response to atmospheric pressure changes. PLoS One. 8, e75004(2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

בדיקת מרחב חברתיניתוח התנהגות זבוביםניתוח ב-ImageJמרחק השכן הקרוב ביותרגורמים סביבתייםגורמים גנטייםהרכבת תאהכנת זבוביםעיבוד תמונה
תנאים המשפיעים על המרחב חברתי ב
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.