מאמר שיטה

שיטת ניקוד מהירה פנוטיפי נוירולוגיות להערכת מחלת התקדמות בSOD1-G93A מודל העכבר של ALS

DOI:

10.3791/53257

⸱

6 באוקטובר 2015

 ,  ,  ,  ,  , 
1ALS Therapy Development Institute

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול וידאו זה מתאר שיטה רגישה, אמינה ומהירה להערכת הליקויים העצביים-שריריים במודל עכבר טרנסגני של טרשת אמיוטרופית צידית.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

העכבר הטרנסגני SOD1-G93A הוא המודל החייתי הנפוץ ביותר של טרשת אמיוטרופית צידית (ALS). ב-ALS TDI פיתחנו פרוטוקול סינון פנוטיפי, המודגם בסרטון כאן, המעריך באופן אמין את התפקוד העצבי-שרירי של עכברי SOD1-G93A בצורה מהירה. פרוטוקול זה כולל מערכת ניקוד נוירולוגית פשוטה (NeuroScore) שנועדה להעריך את תפקוד הגפיים האחוריות. NeuroScore מתמקדת בתפקוד הגפיים האחוריות מכיוון שליקויים בגפיים האחוריות הם הסימן הנוירולוגי המוקדם ביותר המדווח למחלה בעכברי SOD1-G93A. הפרוטוקול שפותח על ידי ALS TDI מספק הערכה בלתי משוחדת של הופעת שיתוק (שיתוק קל או חלקי), התקדמות וחומרת השיתוק והוא רגיש מספיק כדי לזהות שינויים הנגרמים על ידי תרופות בהתקדמות המחלה. בדוח זה, השילוב של כתב יד מפורט עם וידאו ממזער את אי הבהירות בניקוד ואת השונות בין הנסיינים ובכך מאפשר לאמץ את הפרוטוקול על ידי מעבדות אחרות ומאפשר השוואות בין מחקרים המתקיימים במסגרות שונות. אנו מאמינים שפרוטוקול וידאו זה יכול לשמש ככלי אימון מצוין לחוקרי ALS בהווה ובעתיד.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מאז הפיתוח שלה באמצע שנתי ה -1990 דגם העכבר מהונדס SOD1-G93A היה מודל החיה הנפוצה ביותר של מחלת ניוון (ALS) 1. מודל עכבר מהונדס זה מהונדס גנטי לביטוי יתר טופס מוטציה של גן סופראוקסיד דיסמוטאז Cu / Zn האנושי 1 (SOD1) חסת גליצין קשור-ALS למוטצית אלאנין בחומצת אמינו 93 (G93A). המוטציה G93A היא אחד של מוטציות רבות בגן SOD1 שהאיפור באופן קולקטיבי כחמישית ממקרי ה- ALS המשפחתיים 2.

מודל SOD1-G93A הפך סוס עבודה מחקר לפיתוח תרופות ALS כי בנוסף לקשר הגנטי הברור שלה לALS, היא דומה רבות של התכונות פתולוגיים של ALS בבני אדם כגון אובדן מוטורי נוירון, חולשת שרירים מתקדמת וניוון, עם סופו של דבר שיתוק ומוות 3. אם כי, כפי שקורה לעתים קרובות עם מודלים של בעלי חיים מהונדסים, יש דו טבועהשתנות ological קשורות עם SOD1 לעכברים-G93A. סקוט ואח '. קבע כי קבוצות של לפחות 24 עכברי מין מאוזן בהתאמה המלטה יש צורך במחקר עיצובי סמים יעילות כדי להתגבר על הרעש שנוצר על ידי השונות הביולוגיות 4. המספר הגדול של בעלי חיים הנדרשים במחקרים אלה, בשילוב עם התקדמות המחלה האגרסיבית ואת הצורך בניטור יומי אוסר על השימוש בטכניקות משוכללות, גוזל זמן ופוטנציאל דחק למדידת כוח ותפקוד עצבית-שרירית (לדוגמא, electromyography, כוח אחיזה, rotorod , וכיוצא בזה.). במקום זאת, הוא מדגיש את הצורך בin vivo כלי הקרנה שבאופן מהימן מעריך את התפקוד העצבית-שרירית של SOD1 לעכברים-G93A באופן מהיר.

בALS TDI פרוטוקול פותח שמאפשר ההערכה אמינה של התפקוד העצבית-שרירית של SOD1 לעכברים-G93A בפחות מ -30 שניות לכל עכבר בממוצע. encompa פרוטוקול זהsses הערכה יומית של פונקצית hindlimb באמצעות מערכת פשוטה נוירולוגיות ניקוד (NeuroScore) אשר מתוארת בדוח זה בעיתונות ובוידאו. על תפקוד hindlimb NeuroScore מתמקד בגלל גירעונות hindlimb הם המוקדם ביותר שדווחו סימן נוירולוגיות של מחלה בעכברי SOD1-G93A 5,6. יתר על כן, הפרוטוקול שפותח על ידי ALS TDI מספק הערכה בלתי מוטה של ​​תחילת paresis (שיתוק קל או חלקי), התקדמות והחומרה של שיתוק והוא רגיש מספיק כדי לזהות שינויים בהשפעת סמים בהתקדמות מחלה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הניסויים שנערכו בהתאם לפרוטוקולים שתוארו על ידי המכונים הלאומי לבריאות מדריך לטיפול והשימוש בבעלי חיים ואושרו על ידי הוועדה של ALS TDI טיפול בבעלי חיים מוסדיים ושימוש (IACUC).

1. בעלי חיים, שיכון, ועיצוב הלימוד

הערה: המושבה עכבר SOD1-G93A נגזרה מB6SJLTgN המתח הגבוה 1Gur עותק (SOD1G93A) המיוצר במקור על ידי et al גורני 7.. המושבה כיום מתוחזק על ידי חציית זכרים C57BL / 6-SJL מהונדסים עם נקבות C57BL / 6-SJL F1 wild-type. בעלי החיים F1 נוצרים על ידי חציית זכרים SJL עם נקבות B6. עכברים נשלחים לשבועון TDI ALS ב35-45 ימים של גיל.

  1. לאפשר עכברים לפחות אחד שבוע להסתגל למתקן בעלי החיים (מחזור אור / חושך של 12 שעות בטמפרטורה של C ° 18-23 ולחות 40-60%) לפני הקצאה למחקר.
  2. SOD1-G93A זכר בית מיקרופוןדואר עכבר אחד בכל כלוב, מאז הקבוצה שוכנו זכרים נוטים להילחם. עכברי הבית הנקבה SOD1-G93A עד שני לכלוב. לספק העשרה סביבתית, בצורה של בקתות פלסטיק. לספק כרצונך מזון ומי מודעה, אלא אם העכברים הם חלק ממחקר הדורש מתן תרופה במי שתייה / אוכל. במקרים אלה, מנה ומזון שיא ומים.
  3. בגין מחקר סמים יעילות סביב גיל 50 יום וכולל 64 עכברי מין מאוזן בהתאמה המלטה (32 לכל מחזור). לבסוף, להבטיח כי החוקרים עורכים המחקרים עיוורו לתנאי ניסוי.
    הערה: מומלץ כי מחקר סמים יעילות טיפוסי מתחיל בגיל 50 יום אך המבוסס על הסוג של התערבות טיפולית שזה עשוי להיות עדיף להתחיל המחקר מוקדם או במאוחר.
    הערה: מחקר עם 32 עכברים למחזור הוא מופעל כדי לזהות סמים לוואי מין ספציפי. אם אין השוואות בין המינים ספציפיים נדרשות, 24 עכברים למחזור צריכים להספיק כדי לזהות סמים השפעות הכוללות.

2. משקל גוף

  1. משקל גוף רשומה לכל העכברים בלימוד יומי עם דיוק של עשירית גרם. הערה: משקל גוף הוא אינדיקטור רגיש להתקדמות מחלה ושל כל חולשה שעלולה להיגרם כתוצאה מטיפול תרופתי כרוני.
  2. משקל גוף העכבר להשתנות במידה ניכרת במהלך יום, להיות גבוה יותר בבקרים, ובכך לרשום אותם בערך באותו הזמן בכל יום.

3. מערכת נוירולוגיות ניקוד (NeuroScore)

  1. להעריך ציוני נוירולוגיות (NS) עבור כל עכבר יומי על ידי התבוננות בעכבר תחת שלושה התנאים הבאים מבוצעים ברצף:) העכבר מושעה בזנבו, ב) העכבר מותר ללכת, ולאחר תחילת paresis ג) עכבר ממוקם על צידו.
    1. לבדיקת ההשעיה זנב, להחזיק את העכבר כ 1.5 "מבסיס הזנב מעל החוט של הכלוב בביתם במשך 1-2 שניות, הרחק מאגן המזון, ואילו הערהארווינג hindlimbs. חזור על בדיקת ההשעיה 3 פעמים ולהקליט את התוצאה העקבית ביותר.
    2. למבחן ההליכה, הנח את העכבר על משטח נקי שמספק כמה מתיחה ומרחק הליכה של 25 סנטימטר (למשל., מגבת נייר מודבקת למטה למניעת החלקה). אפשר העכבר כדי ללכת כולל של 75 סנטימטר (אורך 3X של מגבת נייר) תוך התבוננות בהליכה שלה.
    3. למבחן "רפלקס ליישר", הצב את העכבר על צדו ימני או השמאלי ובאמצעות תחנה-שעון למדוד את הזמן שלוקח לתקן את עצמו עד ללא עזרה משני הצדדים. הערה: רק משפט אחד של מבחן זה נדרש.
  2. לקבוע NS של כל hindlimb (ימין או שמאל) באופן עצמאי בסולם מ 0 עד 4. הערה: לדוגמא ציון של 0, 1 מציין כי hindlimb עזבה NS הוא 0, ואילו hindlimb NS הנכון הוא 1.
  3. להקצות עשרות נוירולוגיות (0-4) המתאימות לקבוצה של תצפיות (סיכום שנקבעו בלוח 1) הבאה:
    1. הקצאת NS 0 (Pre-סימפטומטי) אם הבא הוא ציין: כאשר העכבר הוא מושעה בזנב, hindlimb מציגה נוטה החוצה נורמלי כלומר, הוא מוארך מקו האמצע לרוחב באופן מלא והוא נשאר בתפקיד זה במשך 2 שניות או ארוך יותר. כאשר העכבר מותר ללכת, הליכה נורמלית הוא ציין.
    2. הקצאת 1 NS (סימפטומים ראשונים) אם הבא הוא ציין: כאשר העכבר הוא מושעה בזנב, hindlimb מציגה נוטה החוצה נורמלי, כלומר, הוא התמוטט או באופן חלקי התמוטט לכיוון קו האמצע לרוחב או שרועד בהשעית זנב או שהוא חזר בו / שלובות. כאשר העכבר מותר ללכת, הליכה רגילה או מעט איטית הוא ציין.
    3. הקצאת NS 2 (Onset של paresis) אם הבא הוא ציין: כאשר העכבר הוא מושעה בזנב, hindlimb היא באופן חלקי או לחלוטין התמוטט, לא להאריך הרבה. (יש עדיין עשויה להיות תנועה משותפת). כאשר העכבר מותר ללכת, hindlimb משמשת לmot קדימהיון עם זאת הבהונות כלפי מטה להתכרבל לפחות פעמיים במהלך הליכה של 90 סנטימטר או כל חלק של כף הרגל גורר לאורך תחתית כלוב / שולחן. כאשר העכבר ממוקם בצדו הימני והשמאלי, הוא מסוגל לתקן את עצמו בתוך 10 שניות משני הצדדים.
    4. הקצאת 3 NS (שיתוק) אם הבא הוא ציין: כאשר העכבר הוא מושעה בזנב, יש שיתוק נוקשה בhindlimb או תנועה משותפת מינימאלית. כאשר העכבר מותר ללכת קדימה יש תנועה עם זאת hindlimb לא נמצאת בשימוש לתנועה קדימה. כאשר העכבר ממוקם בצדו הימני והשמאלי, הוא מסוגל לתקן את עצמו בתוך 10 שניות משני הצדדים. הערה: לעתים רחוקות, לאחר תחילת השיתוק, לחות שתן עלולה להופיע בhindlimbs. לחות שתן שלא טופלה עלולה לגרום לשמאל שתן "לשרוף" ונגעים בעור. פנק את לחות שתן על ידי גזירת השיער, להחיל מים חמים סופג להסיר את השתן, ובעדינות למחוק יבש. אם נגעים בעור נמצאים תחול antibioמשחה טיק.
    5. הקצאת 4 NS (נקודת סיום הומנית) אם הבא הוא ציין: כאשר העכבר הוא מושעה בזנב, יש שיתוק נוקשה בhindlimbs. כאשר העכבר מותר ללכת, אין תנועה קדימה. כאשר העכבר ממוקם בצדו הימני והשמאלי הוא לא מסוגל לתקן את עצמו בתוך 10 שניות מצד או. כלומר, היעדר ליישר רפלקס.

4. הזנת נתונים וניתוח

  1. במהלך מחקר יעילות תרופה, להזין נתונים שנאספו עבור כל עכבר למערכת ניהול מידע מעבדה (LIMS) או לתוכנת גיליון אלקטרוני זמינה באופן מסחרי.
    הערה: תוכנת LIMS המפותחת TDI ALS היא מאגר מרכזי לכל הנתונים שנאספו ממחקרים פנימיים, מה שהופך את הנתונים הללו בנוחות נגישה לאורך זמן לחוקרי ALS TDI. LIMS עוקב כל עכבר בודד, עם זיהוי הייחודי שלה, חזרה לשושלת, משקל הגוף או ציון הנוירולוגיות בכל הימים העיון,וכולל את כל תצפיות אחרות ציינו במהלך חייו. LIMS סופו של דבר יוצר גיליון אלקטרוני המשמש לניתוחים שלאחר מכן.
  2. עם השלמת מחקר סמים יעילות, כלומר, כאשר כל העכברים להגיע לנקודת הסיום ההומנית, תוכנת גיליון אלקטרוני שימוש (ראה טבלה של חומרים) כדי לחשב את NS המשולב לכל עכבר, עבור כל יום על ידי ממוצעי hindlimb ימין ועל שמאל NS . בשלב הבא, לחשב את הגיל החציוני בכל NS לכל עכבר ומספר הימים בכל עכבר מבלה בNS מסוים.
  3. ניתוח שינויים הכוללים בNS לאורך זמן על ידי יבוא נתונים מהתוכנה הגיליון האלקטרוני לתוכנה הסטטיסטית (ראה טבלה של חומרים). להתאים את הנתונים הללו באמצעות מודל של רגרסיה לוגיסטית סודר האומד את NS הצפוי, עם גיל החציונים בNS ותרופה לטיפול בתופעות ברגרסיה. שימוש במבחן כיכר צ'י יומן הדרגה להעריך את הסתברות סבירות השפעה ולקבוע אם אפקט תרופה-טיפול על התקדמות NS הוא סטטיסטיly משמעותי (ראה קובץ קוד נוסף להוראות צעד-אחר-צעד).
    הערה: p-value <0.05 נחשב משמעותי מבחינה סטטיסטית.
    הערה: שיטה זו של ניתוח סטטיסטי מכבדת את הטבע הסידורי של נתונים NS והטבע המשתנה של מסלולי NS לעכברים בודדים. הוא העדיף משום מסלולי NS בודדים יכולים להיות שונים במידה ניכרת וכתוצאה מכך ממוצעי קבוצה הקשורים זמן NS שאינם מספיק רעיוני של תגובות NS. בנוסף, בחלק מהמקרים NS יכול להשתנות, במיוחד כאשר בטווח אפס-על-אחד.
  4. לבסוף, תוכנת גרפים שימוש (ראה טבלה של חומרים) כדי ליצור "סודר צפוי NS לעומת חציון גיל בNS" גרפים לבעלי חיים שטופל בתרופה ושליטה (איור 2; ראה נוסף קוד קובץ להוראות צעד-אחר-צעד). השתמש בגרפים אלה כדי להעריך נוחות משמרות בין קבוצות שטופלה בתרופה ושליטה על ידי ביון מהציר y הגיל החציוני של תחילת מחלה (i.דואר., NS 2) על ציר x.
    הערה: ההבדל בגיל החציוני בין שתי הקבוצות מייצג שינוי תוצאת משימוש בסמים ומטופל כאמצעי מעשי של סדר הגודל של השפעה.
    הערה: משמרות ימינה בלעומת העקומה הצפויה NS חציון הגיל מצביע על האטת התקדמות מחלה סימפטומטית. לעומת זאת, משמרות שמאלה בעיקול לעומת הגיל החציוני הצפוי NS מצביעות מואצות התקדמות מחלה סימפטומטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

נתוני ציון הנוירולוגית של 90 גברים ו -94 נקבות עכברים שאינם מטופלים SOD1-G93A למדו בALS TDI בשינה 2014 הוערכו. התוצאות מראות כי יש לי עכברי זכרים בדרך כלל התקדמות מחלה אגרסיבית יותר מאשר נקבות עכברים, כפי שמעידים חלק גדול יותר של תוחלת החיים שלהם ליום 1 בNS בהשוואה לנשים. NS 2 וNS 3 להתרחש בתדירות כמעט שווה על פני מינים. NS 0 הוצא מהניתוח, כי זה נחשב פנוטיפ "נורמלי". 4 NS גם לא נכלל כי על פי הגדרה זה יכול להתרחש רק פעם אחת בחיים של SOD1-G93A עכבר (טבלה 2 ואיור 1)....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בדו"ח זה, אנו מתארים פרוטוקול וידאו מהיר ופשוט, שאם מיושם כהלכה, מסוגל באופן מהימן הערכת התקדמות המחלה בעכברי SOD1-G93A וזיהוי שינויים בהשפעת סמים. בעוד קבוצות שונות פיתחו מערכות ניקוד פנוטיפי לSOD1 לעכברי G93A-8-10, הם לעתים קרובות לא מספקים פרטים מספיקים על ההליך ואינם מתאימים לשכפול. כתוצאה מכך, מערכות ניקוד משמשות מחוץ לקבוצה הספציפית שמפתחת אותם רק לעתים נדירות. בדוח זה, שילוב של כתב יד מפורטת עם וידאו ממזער בהירויות ניקוד והשתנות הבין-הנסיין ובכך מאפשרות לפרו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ברצוננו להודות לבת' לוין על הביקורת על כתב היד, לואלרי טסינרי על פיתוח פרוטוקול הגנוטיפ, ולמאט פרולה וקרלוס מאיה על הטיפול יוצא הדופן שלהם בבעלי חיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
B6SJLTgN(SOD1G93A)1זן גורמעבדת ג'קסון, בר הרבור, ME002726זן עכברים ששימש במחקר זה
BreedersBiomedical Research Models, Inc., Worcester, MAMaintenance
Colony Scale NavigatorOHAUS, Parsippany, NJדגם N14120משמש לשקילת עכברים
Nutra-GelHBio-Serv, Flemington, NJמזון רטוב מסופק לעכברים חולים
מוקרנים מעבדה בעלי חיים דיאטההרלן, אינדיאנפוליס, IN2918-111914Mצ'או דיאטת
צ'או בדרגת מעבדה סאני-צ'יפסהרלן טקלד, אינדיאנפוליס, IN7090מצעים
JMPH מכון SAS, בע"מ, SAS קמפוס דרייב, קארי, קרוליינה הצפונית  v10.0.2תוכנה סטטיסטית
Microsoft ExcelMicrosoft, One Microsoft Way, Redmond, WAExcel 2013 (v 15.0)תוכנת גיליון אלקטרוני
GraphPad Prism 5GraphPad software Inc., La Jolla, CAv5.4תוכנת גרפים
Mouse HutsBio-Serv, Flemington, NJK3272להעשרה סביבתית
#S4798

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
  2. Rosen, D. R., et al. Mutations in Cu/Zn superoxide dismutase gene are associated with familial amyotrophic lateral sclerosis. Nature. 362 (6415), 59-62 (1993).
  3. Gurney, M. E. The use of transgenic mouse models of amyotrophic lateral sclerosis in preclinical drug studies. J Neurol Sci. 152, Suppl. 1 (6415), (1997).
  4. Scott, S., et al. Design, power, and interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
  5. Hegedus, J., Putman, C. T., Gordon, T. Time course of preferential motor unit loss in the SOD1 G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurobiol. Dis. 28 (2), 154-164 (2007).
  6. Gordon, T., Ly, V., Hegedus, J., Tyreman, N. Early detection of denervated muscle fibers in hindlimb muscles after sciatic nerve transection in wild type mice and in the G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurol. Res. 31 (1), 28-42 (2009).
  7. Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
  8. Kim, K., Moore, D. H., Makriyannis, A., Abood, M. E. AM1241, a cannabinoid CB2 receptor selective compound, delays disease progression in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Eur. J. Pharmacol. 542 (1-3), 1-3 (2006).
  9. Weydt, P., Hong, S. Y., Kliot, M., Moller, T. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
  10. Azari, M. F., et al. Behavioural and anatomical effects of systemically administered leukemia inhibitory factor in the SOD1(G93A G1H) mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis. Brain Res. 982 (1), 92-97 (2003).
  11. Guan, Y., et al. Thiazolidinediones expand body fluid volume through PPARgamma stimulation of ENaC-mediated renal salt absorption. Nat. Med. 11 (8), 861-866 (2005).
  12. Savcheniuk, O. A., et al. The effect of probiotic therapy on development of experimental obesity in rats caused by monosodium glutamate. Fiziol. Zh. 60 (2), 63-69 (2014).
  13. Smittkamp, S. E., Brown, J. W., Stanford, J. A. Time-course and characterization of orolingual motor deficits in B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J mice. Neuroscience. 151 (2), 613-621 (2008).
  14. C, M., Gurney, M. E. A low expressor line of transgenic mice carrying a mutant human Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) gene develops pathological changes that most closely resemble those in human amyotrophic lateral sclerosis. Acta Neuropathol. 93 (6), 537-550 (1997).
  15. Wegorzewska, I., Baloh, R. H. TDP-43-based animal models of neurodegeneration: new insights into ALS pathology and pathophysiology. Neurodegener. Dis. 8 (4), 262-274 (2011).
  16. Hatzipetros, T., et al. C57BL/6J congenic Prp-TDP43A315T mice develop progressive neurodegeneration in the myenteric plexus of the colon without exhibiting key features of ALS. Brain Res. 1584, 59-72 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים