מאמר שיטה

שבץ בחומר הלבן צדדי דגם Murine של קורטיקליים לחקר ניוון אקסונלית ולבן Matter לנוירוביולוגיה

DOI:

10.3791/53404

⸱

17 במרץ 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן אנו מציגים מתודולוגיה לייצור שבץ מוחי מוקדי בחומר לבן של עכברים על ידי הזרקה מקומית של מעכב סינתאז תחמוצת החנקן (eNOS) בלתי הפיך (L-Nio). מוצגות שתי וריאציות סטריאוטקטיות, מעקב עצבי רטרוגרדי ותיוג ודיסקציה של רקמות טריות המרחיבות את היישומים הפוטנציאליים של טכניקה זו.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שבץ המשפיעים חשבונות בחומר לבנים של עד 25% של מצגות שבץ קליניות, מתרחש בשקט בשיעורים שעשויות להיות 5-10 לקפל יותר, ותורם רב להתפתחות של דמנציה וסקולרית. דגמים מעטה לשבץ חומר לבן מוקדים להתקיים זה חוסר הדגמים המתאימים עכב את הבנת מנגנוני הנוירולוגית המעורבת בתגובת פציעה ותיקון לאחר סוג זה של שבץ. המגבלה העיקרית של מודלי שבץ קורטיקליים אחרים היא שהם לא focally להגביל את האוטם אל החומר הלבן או אומתו בעיקר במינים שאינם בעכברים. זה מגביל את היכולת ליישם המגוון הרחב של כלי מחקר בעכברים ללמוד לנוירוביולוגיה לשבץ חומר לבן. כאן אנו מציגים מתודולוגיה לייצור האמין של שבץ מוחה מוקדים בעניין בעכברים לבן באמצעות זריקה מקומית של מעכב eNOS בלתי הפיך. כמו כן, אנו מציגים כמה וריאציות על הפרוטוקול הכללי כולל שני stereotactic ייחודיוריאציות, מעקב עצבי מדרדר, כמו גם תיוג רקמות טרי לנתיחה המרחיב את היישומים האפשריים מאוד של טכניקה זו. וריאציות אלו מאפשרות גישות מרובות כדי לנתח את השפעות הנוירולוגית של צורה נפוצה, אלתרה זה של שבץ.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שבץ מוחי המשפיע על החומר הלבן התת-קורטיקלי הוא ישות קלינית נפוצה, המהווה עד 25% ממקרי השבץ הקליני מדי שנה בארה"ב 1. נזק איסכמי לחומר הלבן מתרחש גם בשקט בקצב גבוה משמעותית ותורם להתפתחות דמנציה וסקולרית 2,3. נכון לעכשיו, לחולים עם צורה זו של איסכמיה מוחית יש מעט אפשרויות טיפול, אם בכלל. למרות החשיבות הקלינית של מחלה זו, קיימים מעט מודלים של בעלי חיים רלוונטיים מבחינה קלינית 4,5.

מטרת פרוטוקול זה היא לייצר נגע איסכמי מוקדי בתוך החומר הלבן של העכבר. מודל עכברי זה של מחלות אנושיות מאפשר מחקר ספציפי של תגובת פגיעה אקסונלית לשבץ מוחי וכיצד האלמנטים התאיים של החומר הלבן, כלומר אוליגודנדרוציטים ואסטרוציטים יחד עם אקסונים, מגיבים ומתקנים לאחר שבץ מוחי.

דיווחים קודמים תיארו מודל של שבץ חומר לבן תת-קורטיקלי באמצעות אנדותלין-1 (ET-1) 6 הדומה לזה המתואר כאן. מספר שינויים מרכזיים בפרוטוקול הניסוי בוצעו ובכך השימושים הפוטנציאליים במודל זה התרחבו 7,8. פרוטוקול זה מספק אסטרטגיה אמינה וניתנת לשינוי ליצירת שבץ מוקדי בתוך החומר הלבן של מוח העכבר.

היתרונות העיקריים של מודל זה הם השימוש במעכב כימי אנדותל תחמוצת החנקן סינתאז (eNOS) N(5)-(1)-iminoethyl-L-ornithine HCl (L-Nio) 9 ללא השפעות פרקריניות ידועות על אלמנטים תאיים של חומר לבן, שהיה סיבוך של מודלים המשתמשים באנדותלין-1 10. בנוסף, המיקוד הסטריאוטקטי של החומר הלבן בעכבר מאפשר שימוש בכל מגוון של זנים טרנסגניים או נוק-אאוט, ומרחיב מאוד את הכלים הזמינים לקביעת השפעת השבץ על החומר הלבן במוח. כאן, שתי וריאציות על טכניקה זו מתוארות ומדגימות כמה מהווריאציות הנוספות שניתן להשתמש בהן כדי לשפר את ההבנה של נזק אקסונלי וחומר לבן ותיקון לאחר שבץ מוחי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השימוש בבעלי חיים בפרוטוקול זה בוצע בהתאם לנהלים שאושרו על ידי האוניברסיטה של ​​טיפול בבעלי חיים קליפורניה בלוס אנג'לס ועדת שימוש.

הערה: התחל על ידי זיהוי אוכלוסיית murine היעד. במחקרים קודמים, wild-type זכרו רק עכברי C57 / BL6 שמשו, אולם עכברים מהונדסים או נוק אאוט שונים יכולים לשמש גם. שים לב קואורדינטות stereotactic מבוססים על האנטומיה C57 / BL6. מומלץ לכל משתמש בתחילה לאמת לוקליזציה של שבץ חומר לבן.

1. אינדוקציה שבץ החומר הלבן - גישת זוויתי המדיאלי

  1. בגין על ידי הכנת פיפטה זכוכית משך באמצעות צינור נימי 0.5 מ"מ כך בקוטר דיסטלי הוא בין 15-25 מיקרומטר 11.
  2. הכן aliquot סטרילי 10 μl של L-נ.י.ו. (N (5) - (1) -iminoethyl-L-ornithine HCl) ב 27.4 מ"ג / מ"ל ​​(130 מיקרומטר) מלח רגיל 0.9% סטרילי.
  3. מילוי מראש פיפטה זכוכית המשךעם קטן נפח של L-נ.י.ו. (2-5 μl) על ידי הדבקת פיפטה זכוכית צינורות לחבר לקו ואקום. הנח את פיפטה שטוח על גבי ספסל והכנס סוף נכנס הפתרון L-נ.י.ו..
    1. החלתי את הוואקום עד לפחות 2 מ"מ של חלק 0.5 מ"מ של פיפטה מתמלא. כבה את הוואקום למשוך את פיפטה. מניח אותו בצד עד שלב 1.12.
  4. מניחים את העכבר בתא אינדוקציה ולגרום הרדמה של העכבר באמצעות isoflurane 32% תקן זרמו מאדה (5 L / min בשאיפה עם 5 חמצן L / min ו -0.5 ליטר / דקה N 2) 1 דקות או עד anesthesized עמוק. העברת העכבר מנגנון stereotactic מצויד מיקרוסקופ stereotactic. תחזוקה לספק הרדמה באמצעות 32% isoflurane זרמו מאדה (2 ליטר / דקה בשאיפה עם 5 חמצן L / min ו -0.5 ליטר / דקה N 2) וכן חרטומו. בדוק עומק ההרדמה עם קמצוץ הבוהן.
  5. התאם את הזרוע הזריק ל -36 °.
  6. אפיXA משך בעל פיפטה זכוכית אל הקצה הדיסטלי של מערכת הזרקה בלחץ נמוך נפח וצרף אותו בזרוע הזרקה של ההתקנה stereotactic.
  7. מעיל הדובדבן החיה הרדים עם וזלין משחה דמעה מלאכותית מקום מעל שתי העיניים. כן שדה כירורגי סטרילי על ידי צבת וילון סטרילי מעל הראש של החיה עם פתח 5-10 סנטימטר מעל הראש. כן משטח כירורגית aspetic ידי גילוח הפרווה המכסה את הגולגולת. נקה את הקרקפת בבטאדין לסירוגין ו מטליות אלכוהול 70%.
  8. לעשות חתך בקרקפת קו האמצע 1.5 ס"מ עם מספריים בסדר סטרילי לחשוף את פני הגולגולת. לייבש את הגולגולת עם מקלון צמר גפן סטרילי באמצעות מיקרוסקופ stereotactic בהגדלה 1-3X, להסיר את כל רקמת periosteal שמעליה באמצעות כלי הנקודות מיקרו סטרילי.
  9. סמן את גבחת כנקודת התייחסות באמצעות סמן נקודה בסדר.
  10. לקדוח craniotomy 2 מ"מ ellipitical באמצעות מקדח כירורגית Stip בסדר סטרילי0; החל בדיעבד על גבחת והארכת anteriorly רק השמאלי של קו האמצע. סר שבר עצם מכסת רקמות רכות כך בקליפת המוח ניתן דמיינה.
  11. שמור בתחום כירורגית קליפת המוח משטח לח ידי החלת טיפות לסירוגין של תמיסת מלח סטרילית.
  12. להטביע טפטפת זכוכית משך לזרוע מזרק של המנגנון stereotactic. יישר את הקצה הדיסטלי של פיפטה עם גבחת ואפס את הקואורדינטות stereotactic.
  13. לקדם את פיפטה הקדמי / האחורי (A / P) המדיאלי / לרוחב (M / L) קואורדינטות מופיע בלוח 1 הראשון.
  14. לקדם את פיפטה אל פני שטח קליפת המוח ואפס מדידת גב / גחון (D / V).
  15. לאט להעביר את פיפטה לתוך המוח עד שמגיעים D / V הראשון לתאם בטבלה 1.
  16. באמצעות מערכת הזרקה בלחץ נמוך נפח נקבע על 20 psi במשך 20 פולסים msec, להזריק 100 nl של L-נ.י.ו. לתוך המוח ולחכות 5 דקות כדי למנוע ריפלוקסאת מסלול פיפטה.
    1. השתמש reticle מכויל העינית של המיקרוסקופ stereotactic וכן הגדלה של 3X.
    2. בהתאם לכך, לעקור סך של 0.100 מ"מ 3 (0.5 אורך מ"מ טפטף בקוטר 0.5 מ"מ, מקביל ל -100 NL) מן פיפטה זכוכית משך עבור כל קבוצה של קואורדינטות. באמצעות reticule, למדוד ולתקנן שכן כל להגדיר משתנה בהתאם הגדלה וקשקשת בשימוש.
    3. למדידת נפח מדויקת במהלך כל זריקה, מתקרב פיפטה זוויתי עם מיקרוסקופ מהצד כך המניסקוס נוזל-האוויר יש נוף sagittal. המניסקוס אמור להופיע באותו מישור המוקד של שני הקיר הפנימי והחיצוני של פיפטה.
  17. לאט למשוך את פיפטה וחזר על צעדי 1.13-1.16.3 על הסט השני ושלישי של קואורדינטות מופיעות בלוח 1.
  18. לאחר הזריקה האחרונה, להסיר את פיפטה ולמקם שעוות עצם מספיק כדי למלא את אתר craniotomy. אpproximate קצות הפצע בקרקפת להיקשר עם דבק עורי.
  19. להזריק 0.1 מיליליטר של 0.5% Marcaine לשולי הפצע באמצעות מחט 30 G סטרילי כדי למנוע למנוע כאב מקומי המשויכים חתך בקרקפת.
  20. מחזירים את החיה לאנטיביוטיקה שלאחר הניתוח דיור ואספקה ​​(0.48 מ"ג / מ"ל ​​trimethoprim-sulfamethoxazole, או 0.5 מ"ג / מ"ל ​​levofloxacin) במי השתייה במשך 5 ימים.

2. אינדוקצית שבץ חומר לבן - גישת זוויתי אחורית

  1. בצע שלבים 1.1-1.12 כפי בפרוטוקול הגישה זוויתי המדיאלי, למעט להתאים את הזרוע ההזרקה של ההתקנה stereotactic ל -45 מעלות בכיוון הקדמי אל האחורי.
  2. לקדם את פיפטה A / P ו- M / L קואורדינטות תחילה סיפקה בטבלה 2.
  3. שלבים נותרים שלמים 1.14-1.20 כמו בפרוטוקול הגישה זוויתי לרוחב.

3. תיוג המדרדר עצבי

  1. כן סטרילית 10aliquot μl של L-נ.י.ו. ב 54.8 מ"ג / מ"ל ​​סליין 0.9% נורמלי.
  2. כן aliquot סטרילי של 20% Fluororuby (או 20% אמינים dextran biotinylated או 2% Fluorogold) סליין 0.9% נורמלים.
  3. לדלל יחד 1: 1 עבור ריכוזי הסופי של 27.4 מ"ג / מ"ל ​​L-נ.י.ו. ו -10% Fluororuby.
  4. בצעו את פרוטוקול שבץ כנ"ל בצעדים 1.3-1.23.
  5. דמיינו את נותב ניאון מקורי בסעיף הרקמה על ידי קיבעון זלוף, cryosectioning מיקרוסקופ כפי שתואר לעיל 8.

עיבוד רקמות 4. Immunofluorescence

  1. בהפרש שלאחר שבץ מתאים הנעים בין 3 שעות ל -14 ימים לאחר שבץ, להרדים עכברים באמצעות מנת יתר isoflurane או מקומיים IACUC אושרו הליך.
  2. פתח את חלל בית החזה באמצעות מספריים בזווית וכנס מחט פרפר 23 G לתוך החדר השמאלי.
  3. מניח חתך קטן העלייה הימנית באמצעות מספריים בסדר לאפשר מסלול יצוא של נוזל זלוף.
  4. Transcardially perfuse עם 30-40 מ"ל של תמיסת מלח פוספט שנאגרו קר ואחריו 30-40 מ"ל של paraformaldehyde 4% קר בשיעור של 10 מ"ל / דק 'ב RT.
  5. לערוף את העכבר להסיר את המוח באמצעות מספריים סטרילי כדי לפתוח את הגולגולת בדיעבד ולאחר מכן הסר בעדינות את הגולגולת שמעליה עם מרית, מניחים את המוח לתוך 4% קר PFA למשך 24 שעות, ולאחר מכן להעביר סוכרוז 30% ב PBS במשך 48 שעות .
  6. כן ארבעים סעיפים צפים מיקרון באמצעות cryostat ולבצע עיבוד נוגדנים כפי שתואר לעיל 6-8. במחקר זה, השתמש הנוגדנים הבאים: ארנב 200 נגד neurofilament (דילול 1: 500); ארנב-vimentin אנטי (1: 500); עז נגד GFAP (1: 500); ארנב נגד תייבא-1 (1: 1,000).

עיבוד רקמות 5. חלבון או ניתוח RNA

  1. בהפרש שלאחר שבץ מתאים הנעים בין 3 שעות ל -14 ימים לאחר שבץ, להרדים באמצעות מנת יתר isoflurane או מקומיים IACUC אושר הליך.
  2. לערוף אתעכבר ולהסיר את המוח באמצעות מספריים סטרילי כדי לפתוח את הגולגולת בדיעבד ולאחר מכן הסר בעדינות את הגולגולת שמעליה עם מרית.
  3. הכנס מרית 4 מ"מ סטרילי בקדמת המוח לנתק את הנורה חוש הריח ואת עצבי הראייה. הרם בעדינות את המוח מתוך calvarium ומניחים למאגר לנתיחה קר כקרח (תמיסת מלח מאוזן של 1x האנק, 25 מ"מ HEPES-KOH, pH 7.4, 35 גלוקוז מ"מ, 4 מ"מ סודיום ביקרבונט, ו 0.01 מ"ג / מ"ל ​​cyclohexamide).
  4. באמצעות בלוק מוח סכיני גילוח חדשים סטרילי, להכין 2-3 לוחות מ"מ המכילים שבץ ומקום למאגר לנתיחה קר.
  5. תחת מיקרוסקופ לנתח, לזהות את הקורטקס המוטורי הבסיסי חומר לבן בחצי הכדור מוזרק. במרווחים שלאחר בתנועה ארוכה באזור ניתן לזהות ויזואלית על ידי נימק מוקדים וחיוורון המיאלין.
    הערה: במרווחי מוקדם שלאחר שבץ, הזרקה של L-נ.י.ו. מעורבב עם 1 μl של 10% מהיר גרין יכול לאפשר זיהוי חזותי של שבץ ( איור 4 א).
  6. תחת הדרכתו של מיקרוסקופ לנתח באמצעות אזמל טרי, בזהירות לנתח את האזור של חומר לבן המכיל את השבץ, המזוהה באמצעות תיוג ירוק מהיר או אובדן רקמות. סר הקורטקס שמעליה בסטריאטום בסיסית כפי רצוי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בעזרת המודל שהוצג, קליפת הסנסורית הבסיסית forelimb חומר הלבן יכולה להיות ממוקדת באופן מהימן. מודל שבץ כימי מושרה זו מפיק אובדן axonal ו המיאלין מוקדי, astrocytosis, ו microgliosis (איור 1), כפי שנראה בדרך כלל אוטמי אַגמִימִי אדם. באמצעות שלוש זריקות, מודל שימושי קליני הוא הקים עם ליקוי מוקדם על מטלות מוטוריות forelimb 7 וחלק קטן אך משמעותי של חוויות רקמת מוח איסכמיה כי immunohistochemical, immunofluorescent, וטכניקות ביו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מספר הדגמים הקודמים של שבץ קורטיקליים תואר כולל זריקות מוקד של אנדותלין -1 לתוך הקפסולה הפנימית, חומר לבן קורטיקליים בסטריאטום ב 6,15 עכברוש 12-14 והעכבר. מודלים מאוחרים יותר של משייכות מוקדים קטנות נצלו הזרקת microemboli כולסטרול בעורק התרדמה 16 ו חסימת photothrombotic של עורקיק חודר יחיד 17. כל המודלים הללו יתרונות וחסרונות 5. המודל המתואר כיום מייצר נגע כי יש מספר מאפייני מחקים אוטמים אַגמִימִי אדם כוללים מומים אקסונלית ואו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

SN ו MDD קיבל תמיכה מ- NIH K08 NS083740 ומחלקת UCLA לנוירולוגיה. AJG מודה תמיכה על ידי ד"ר מרים ושלדון אדלסון למחקר רפואי וקרן לארי L. Hillblom. Kln בתודה מודה תמיכה ממרכז שבץ איגוד הלב האמריקני 14BFSC17760005 אס"א-Bugher. חולה, EGS ו STC נתמכו על ידי NIH R01 NS071481. JDH מודה תמיכה מ- NIH K08 NS083740.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
L-N5-(1-אימינואתיל)אורניתין, דיהידרוכלורידקלביוכימים400600-20MG
איזופלורןפניקס פרמצבטיקה, בע"מNDC 57319-559-06
צינורות נימייםמכשירי דיוק עולמיים50-821-807
פיקוספריצרפארקר מכשורפיקוספריצר II
הגדרה סטריאוטקטיתKent Scientific
KOPFדגם 720
סטריאומיקרוסקופ SZ51אולימפוס88-124
מספריים עדיניםFine Scientific Tools14084-08
מלקחייםמכשיר הרווארדPY2 72-8547
מלקחיים מעוקליםמכשיר הרווארדPY2 72-8598
כלי דיסקציה קההFine Scientific Tools10066-15
מקדחהDremel8220-1/28
מקדחיםFine כלים מדעיים19007-05
Vetbond3M1469SB 
מרקאיןHOSPIRANDC 0409-1610-50
Trimethoprim-SulfamethaxoleSTI PharmacyNDC 54879-007-16
FluororubyFluorochrome Inc30 מ"ג
ParaformaldehydeFisherO4042-500
סוכרוזפישרBP220-10
CryostatLeica CM3050 S
14047033518 מגלשות זכוכיתפישר12-544-7
ירוק מהיר סיגמאF7252-5G
מיקרוסקופ דיסקציהניקוןSMZ1500
23 גרם מחט פרפרפישר14-840-35
10x Hank's Balanced Salt SolutionLife Technologies14065056
1 M HEPES-KOH, PH 7.4Affymetrix16924
D-גלוקוזSigmaG8270
נתרן ביקרבונטסיגמאS5761
ציקלוהקסמידסיגמא01810
חולץ פיפטה KSC51725

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129, 28-292 (2014).
  2. Saini, M., et al. Silent stroke: not listened to rather than silent. Stroke. 43, 3102-3104 (2012).
  3. Koton, S., et al. Burden and outcome of prevalent ischemic brain disease in a national acute stroke registry. Stroke. 44, 3293-3297 (2013).
  4. Jiwa, N. S., Garrard, P., Hainsworth, A. H. Experimental models of vascular dementia and vascular cognitive impairment: a systematic review. J Neurochem. 115, 814-828 (2010).
  5. Sozmen, E. G., Hinman, J. D., Carmichael, S. T. Models that matter: white matter stroke models. Neurotherapeutics. 9, 349-358 (2012).
  6. Sozmen, E. G., Kolekar, A., Havton, L. A., Carmichael, S. T. A white matter stroke model in the mouse: axonal damage, progenitor responses and MRI correlates. J Neurosci Methods. 180, 261-272 (2009).
  7. Rosenzweig, S., Carmichael, S. T. Age-dependent exacerbation of white matter stroke outcomes: a role for oxidative damage and inflammatory mediators. Stroke. 44, 2579-2586 (2013).
  8. Hinman, J. D., Rasband, M. N., Carmichael, S. T. Remodeling of the axon initial segment after focal cortical and white matter stroke. Stroke. 44, 182-189 (2013).
  9. McCall, T. B., Feelisch, M., Palmer, R. M., Moncada, S. Identification of N-iminoethyl-L-ornithine as an irreversible inhibitor of nitric oxide synthase in phagocytic cells. Brit j pharmacol. 102, 234-238 (1991).
  10. Gadea, A., Aguirre, A., Haydar, T. F., Gallo, V. Endothelin-1 regulates oligodendrocyte development. J Neurosci. 29, 10047-10062 (2009).
  11. Dean, D. A. Preparation (pulling) of needles for gene delivery by microinjection. CSH prot. , (2006).
  12. Hughes, P. M., et al. Focal lesions in the rat central nervous system induced by endothelin-1. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 62, 1276-1286 (2003).
  13. Whitehead, S. N., Hachinski, V. C., Cechetto, D. F. Interaction between a rat model of cerebral ischemia and beta-amyloid toxicity: inflammatory responses. Stroke. 36, 107-112 (2005).
  14. Frost, S. B., Barbay, S., Mumert, M. L., Stowe, A. M., Nudo, R. J. An animal model of capsular infarct: endothelin-1 injections in the rat. Behav Brain Res. 169, 206-211 (2006).
  15. Horie, N., et al. Mouse model of focal cerebral ischemia using endothelin-1. J Neurosci Methods. 173, 286-290 (2008).
  16. Wang, M., et al. Cognitive deficits and delayed neuronal loss in a mouse model of multiple microinfarcts. Neuroscience. 32, 17948-17960 (2012).
  17. Shih, A. Y., et al. The smallest stroke: occlusion of one penetrating vessel leads to infarction and a cognitive deficit. Nat Neurosci. 16, 55-63 (2013).
  18. Jung, K. J., et al. The role of endothelin receptor A during myelination of developing oligodendrocytes. J Korean Med Sci. 26, 92-99 (2011).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

White Matter StrokeMurine ModelSubcortical StrokeFocal InfarctionStereotactic InjectionL Nio InjectionAxonal DegenerationMicroglial ReactivityAstrocyte MorphologyNeuronal Tracing

מאמרים קשורים