Method Article

כוונון טור מקוטע זרימה מקבילה והפעלת איתור Multiplexed

DOI:

10.3791/53448

December 15th, 2015

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להפעלה וכוונון של עמודות כרומטוגרפיה של זרימה מקוטעת מקבילה כדי לאפשר זיהוי מרובה.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

טכנולוגיית זרימה אקטיבית (AFT) היא צורה חדשה של טכנולוגיית עמודות שתוכננה להתגבר על הטרוגניות זרימה כדי להגביר את ביצועי ההפרדה במונחים של יעילות ורגישות ולאפשר זיהוי מרובה. צורה זו של AFT משתמשת בעמודת זרימה מפולחת מקבילה (PSF). אביזר קצה לשקע עמוד PSF מורכב מ -2 או 4 יציאות, הניתנות לריבוב לחיבור של עד 4 גלאים. עמודת ה-PSF מאפשרת לא רק פלטפורמה לגילוי מרובה אלא גם שילוב של גלאים הרסניים ולא הרסניים כאחד, ללא צינורות נפח מת נוספים, בו זמנית. ניתן לכוונן את כמות הזרימה דרך כל יציאה גם באמצעות ניהול לחץ כך שתתאים לדרישות של גלאים ספציפיים. כדי להשיג זיהוי מרובה באמצעות עמודת PSF ישנם מספר פרמטרים הניתנים לשליטה כדי להבטיח ביצועי הפרדה אופטימליים ואיכות התוצאות; כלומר מידות צינור לכל יציאה, בחירת יציאה לכל סוג גלאי והתאמת זרימה. פרוטוקול זה נועד להראות כיצד להשתמש ולכוונן עמודת PSF המתפקדת במצב זיהוי מרובה.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עמודות זרימת טכנולוגיה פעילה

עמודות כרומטוגרפיה טכנולוגית זרימה פעילה (AFT) פותחו לאחרונה להתגבר חוסר יעילות בהפרדות הקשורים זרימת ההטרוגניות 1-6 וגם כדי לאפשר זיהוי מרובב. בפירוט שתקשורת מסוים זה התהליך התפעולי של המקביל מפולח זרימת טור (PSF) עם זיהוי מרובב. היתרונות הפונקציונליים המפתח של טור כוחות הביטחון הפלסטיניים הם: (1) התזרים מאזור המרכז הרדיאלי של מיטת העמודה מבודד מאזור הפריפריה או קיר של זרימה, (2) הנפח של שלב נייד שחייבים להיות מעובד על ידי זיהוי מקור מצטמצם, וניתן multiplexed מקורות (3) זיהוי להרחיב מידע מדגם ללא הקניית....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הערה: פרוטוקול זה מכיל הוראות כיצד להשתמש בעמודת כוחות הביטחון הפלסטיניים במערכת HPLC יחד עם גלאים מרובים לאיתור מרובב. הפרוטוקול נכתב בהנחת שהקורא יש לו ידע בסיסי וניסיון בכרומטוגרפיה ושיטות זיהוי HPLC שונים.

זהירות: עיין בגיליונות נתוני בטיחות חומרים (MSDS) עבור כל החומרים וריאגנטים לפני השימוש (כלומר, MSDS למתנול). להבטיח את השימוש של כל נהלי הבטיחות המתאימים בעת טיפול בחומרים ממסים ונוזלית כרומטוגרפיה eluent ביצועים גבוהים (HPLC). להבטיח שימוש נכון של בקרות הנדסה של HPLC, מכשור איזון וגלאי אנליטיות, ולהבטיח את השימוש בציוד מגן אישי (משקפי מגן, כפפ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ניתוח HPLC מרובב בוצע באמצעות טור AFT במצב כוחות הביטחון הפלסטיניים (איור 1) ולהגדיר כפי שמודגם באיור 2. סוג זה של התקנה אפשר קפה מדגם להיות מנותח בו זמנית באמצעות UV-Vis, DPPH ו- MS בסך הכל רוזן יון מצב (TIC). התרכובות של קפה המדגם שהגיב לDPPH אז יכולות להיות מתאימות בקלות עד UV-Vis וMS - תגובות TIC מבוססות על היישור של זמן שמירה כפי שמודגמות באיור 3, מאז chromatograms נרשמו בו זמנית. איפה תגובה חיובית ר.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה כלל האפיון ואפיון של קפה באמצעות HPLC עם גילוי ריבוב העסקת עמודה מקבילה זרימה מפולחת (כוחות הביטחון הפלסטיניים). המרובב HPLC באמצעות עמודות כוחות הביטחון הפלסטיניים מאפשר אפיון וזיהוי של גורמים כימיים מפתח על ידי הפחתת מורכבות נתוני המדגם תוך קבלת מידה רבה יותר של מידע מולקולה ספציפית בתוך שבריר של הזמן שלוקח באמצעות תהליכים רב-גילוי קונבנציונליים. טור כוחות הביטחון הפלסטיניים לא רק מאפשר פלטפורמה לגילוי מרובב, אלא גם שילוב של שניהם גלאים הרסניים ולא הרסניים, ללא נפח מת נו.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי UWS ו-ThermoFisher Scientific. אחד המחברים (DK) מודה על קבלת פרס אוסטרלי לתארים מתקדמים.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
מכשירגלאים מרובים לבחירה לזיהוי מרובה. גלאים לבחירה עשויים לדרוש מכשור נוסף, למשל , משאבה.
זרימה מפולחת מקבילה עמודת HPLCתרמו פישר מדעילא מוגדרבקרוב להיות ממוסחר
מתנולכל מותגHPLC כיתה
PEEK צינורותכל מותגאורכים שונים ותעודת זהות.
פקקי עמודיםכל מותגלחסימת יציאות היקפיות שאינן בשימוש.
חותך צינור הצצהכל מותג
איזון סולם אנליטיכל מותג
עצור שעוןכל מותג
כלי איסוף Eluentכל בקבוקונידגימה של מותג 1-2 מ"ל יכולים לשמש ככלי איסוף נוזלים
HPLC

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. The design of a new concept chromatography column. Analyst. 136 (24), 5127-5130 (2011).
  2. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. Enhanced separation performance using a new column technol....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Parallel Segmented Flow ColumnMultiplexed DetectionActive Flow TechnologyHPLC ProcedureFlow Rate AdjustmentDetector ConfigurationPort TuningMobile Phase PreparationDPPH Radical AssayRetention Time Alignment

Related Articles