מאמר שיטה

הזרקת עורק Intra-כסל עבור דוגמנות יעילה וסלקטיבי של מיקרוסקופיים עצם גרור

DOI:

10.3791/53982

⸱

26 בספטמבר 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Lester and Sue Smith Breast Center, Baylor College of Medicine, 2Department of Molecular and Cellular Biology, Baylor College of Medicine, 3Graduate Program in Developmental Biology, Baylor College of Medicine, 4Department of Molecular and Human Genetics, Baylor College of Medicine, 5McNair Medical Institute, Baylor College of Medicine, 6Dan L. Duncan Cancer Center, Baylor College of Medicine

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כתב יד זה מספק את ההליך המפורט של הזרקת עורק תוך כסל (IIA), טכניקה להעברת תאים סרטניים במיוחד לרקמות הגפיים האחוריות כולל עצמות כדי ליצור גרורות ניסיוניות בעצמות. למרות שהוקם בתחילה עם מודלים של גידולי שד, ניתן להרחיב פרוטוקול זה בקלות לסוגי סרטן אחרים.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הזרקת עורק תוך-כסלי (IIA) היא גישה יעילה להחדרת נגעים גרורתיים של תאי סרטן שונים בבעלי חיים. בהשוואה לזריקות התוך-לבביות והתוך-טיביאליות הנמצאות בשימוש נרחב, הזרקת IIA מביאה מספר יתרונות. ראשית, הוא יכול לספק כמות גדולה של תאים סרטניים במיוחד לעצמות הגפיים האחוריות, ובכך לספק אירועי קולוניזציה מסונכרנים מרחבית-זמנית בשלב מוקדם ולאפשר כימות חזק וזיהוי מהיר של תאי גידול מפוזרים. שנית, הוא מזריק תאים סרטניים למחזור הדם מבלי לפגוע ברקמות המקומיות, ובכך נמנע מתהליכי דלקת וריפוי פצעים המבלבלים את תהליך התיישבות העצם. שלישית, הזרקת IIA גורמת לצמיחה גרורתית מועטה מאוד באיברים שאינם עצם, ובכך מונעת מבעלי חיים להיכנע לגרורות חיוניות אחרות, ומאפשרת ניטור רציף של נגעי עצמות עצלים. יתרונות אלה שימושיים במיוחד לבדיקת ההתקדמות מתאי סרטן בודדים למיקרו-גרורות מרובות תאים, שהייתה חמקמקה ברובה בעבר. בשילוב עם גישות מתקדמות של הדמיה ביולוגית והיסטולוגיה של העצם, ניתן ליישם את הזרקת IIA למטרות מחקר שונות הקשורות לגרורות בעצמות.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

גרורות מהוות יותר מ -90% של מקרי מוות שנגרם על ידי גידולים מוצקים. עצם הוא האיבר הנפוץ ביותר מושפע גרורות של סוגי סרטן שונים, בעיקר סרטן השד וסרטן הערמונית. כאשר אובחן במרפאה, גרורות בעצמות בדרך כלל כבר נכנסו בשלבים מתקדמים גם עם שינויים osteolytic או osteoblastic בעצם, מלווה לעתים קרובות עם סימפטומים נוירולוגיים.

מחקרים קודמים התמקדו בעיקר על גרורות בעצמות osteolytic גלויה 1-3, אולם בשלב זה אנו מוגבלים הבנה של micrometastases בעצמות לפני תחילת תהליך osteolytic. זהו, לפחות באופן חלקי בשל העדר מודלים וגישות ניסיוני המתאימים. גנטי במודלים של עכברים מהונדסים של סרטן השד לעתים קרובות גרורים לריאות, אבל הרבה פחות יעיל לעצמות 4. כמו כן, גידולים המושתלים orthotopically לעתים רחוקות לפתח גרורות בעצמות ספונטניות, עם כמה טרופי עצם 4T1 חלב carcinomתת-שיבוטים MSP ביטוי יתר במודל עכבר מהונדס PyMT כחריגים 5-7. קידוח Intra-השוקה יכול לספק תאים סרטניים עד העצם 8-10, אבל זה גם נגרם לו נזק ודלקת לרקמות מקומיות. נכון לעכשיו הזרקה תוך לב של שורות תאי סרטן השד כבר הגישה הגדולה לחקור עצם קולוניזציה 11-13. עם זאת, לאחר תאים סרטניים מוכנסים חדר השמאלי רק חלק מוגבל ולבסוף יגיע עצם ומח עצם, ולכן קשה לעקוב אחר גרורות מיקרוסקופיות באופן לכימות.

במחקר זה, אנו קובעים טכניקה, כלומר עורק התוך הכסל (IIA) הזרקת 14, כדי לספק תאים סרטניים באופן סלקטיבי לרקמות הגפיים האחוריות, ובכך להעשיר תאים סרטניים עצם ומח העצם ללא גרימת נזק לרקמות מקומיות. בגלל סגוליות העצם, גישה זו גם מאפשרת מספיק זמן עבור תאים סרטניים עצלים בסופו של דבר ליישב לפניimals להיכנע גידולים או גרורות עיקריים באיברים חיוניים אחרים. בשילוב עם מגוון רחב של טכניקות אחרות, כגון הדמיה פליטת אור, מכתים immunofluorescence ועצמות histomorphometry, הזרקת IIA שימושית פוטנציאלי עבור טווח רחב של מטרות המחקר הקשורים גרורות בעצמות, במיוחד כדי לעקוב אחר התקדמות מתאי סרטן יחיד אל התא רב micrometastases. בפרט, הראינו כי הזרקת IIA מאפשר לנו לדמיין את יחסי הגומלין בין תאים סרטניים מסוגים שונים סביב התאים במיקרו-סביבה של העצם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל עבודת החיה נעשתה בהתאם להנחיות לטיפול בבעלי החיים של ביילור לרפואה.

1. תא הכנה

הערה: שורות תאי הסרטן שונות יכולות לשמש להזרקת IIA בהתאם למטרות מחקר. השתמשנו שורות תאי סרטן השד MCF7, 4T1, 4T07, מד"א- MB-361, מד"א- MB-231, מד"א- MB-436 ו שורת תאים סרטן הערמונית C4-2 במחקר שלנו. אנו משתמשים בדרך כלל הן GFP- ו גחלילית תאים סרטניים שכותרתו בלוציפראז למחקר שלנו ולהראות כמה נתונים כאן מקו תא GFP-בלוציפראז שכותרתו MCF7.

  1. לשמור על התאים DMEM המכיל 10% FBS ו 0.1 מ"ג / פניצילין, סטרפטומיצין מ"ל ב 37 ° C ב 5% CO 2.
  2. לפני הזרקת IIA, trypsinize תאים ב 80 - 90 מפגש% עם 0.25% הפתרון טריפסין / EDTA. השתמש קר PBS כדי לשטוף תאים פעמיים, מחדש להשעות התאים 10 מ"ל PBS עבור ספירת תאים. כדי להסיר PBS, תאי צנטריפוגות ב 800 XG במשך 5 דקות.
  3. מחדש להשעות תאיםבריכוז של 5 x 10 מ"ל 6 תאים / ב PBS קר כקרח.
  4. השתמש 100 μl GFP- ותאים סרטניים שכותרתו בלוציפראז גחלילית להזרקה IIA של עכבר אחד.
    הערה:. לפיכך, מספר תאים שקיבלה כל חיה הוא 5 x 10 5 מספר זה ייתכן שיהיה צורך לשנות מבוסס על האגרסיביות של שורות תאים.
  5. שמור השעיות תא על קרח.
    הערה: Vibrations עשוי להיות נחוץ כדי למנוע צבירת תא מדי כמה דקות עד שהוא מוכן להזרקה. עבור שורות תאים מסוימים (כגון מד"א- MB-231), נהלים מחמירים יותר (למשל, עובר דרך 45 מיקרומטר מסננת התא) עשוי להיות נחוץ כדי למנוע צבירה. שימו לב כי לסתום כלי עלול לגרום נמק רקמות, ולכן בלבול הניסויים.

2. הכנת בעלי חיים

  1. לניהול כאב בעלי חיים, לתת 5 מ"ג / ק"ג / יום carprofen (או משכך כאבים אחר) עם תוסף תזונה כדי העכברים לא פחות מ -24 שעות לפני הניתוח. לְנַהֵלמנה של 0.1 מ"ג / מ"ל ​​עצירות תת עורי 60 דקות לפני הניתוח. הערה: הליך פומבי הוא להשתיל מזרן אסטרדיול לחלק האחורי של חיות כדי לספק אסטרדיול נוסף. זה יאיץ את הגדילה של תאי ER + סרטן (למשל, תאי MCF-7) 9.
  2. להרדים 4 - עכבר בן 6 בשבוע (כ -20 גר ') עם קטמין (80 - 100 מ"ג / ק"ג) ו xylazine (10 -12.5 מ"ג / מ"ל) על ידי הזרקת intraperitoneal.
  3. אשר את הרמה המתאימה של הרגעה של עכבר 20 גרם על ידי צביטת בוהן לבין התצפית של ירידה של 50% ב קצב נשימה ורוד רירי (למשל, עור אוזן עכבר עור כפה). שמור עוקבים אחר הסימנים החיוניים הללו כל 15 דקות במהלך הניתוח. הערה: אין תנועה של החיה מציינת כי בעל החיים הוא הרדים מספיק ומוכן לניתוח.
  4. השתמש במשחת וטרינר על עיניים כדי למנוע יובש.
  5. לגלח את העכבר על הבטן התחתונה, במיוחד באזור המפשעה בדיוק במקום הניתוח ההזרקה תהיהלְהִתְרַחֵשׁ.
    הערה: זה אינו הכרחי אם עכברים בעירום athymic משמשים.
  6. שים את העכבר על גבה, להפיץ את הרגליים בעמדות הטבעיות שלהם לתקוע את בוהן לקרטון לנתיחה ניידת עם קלטת.
  7. נגב את אזור המפשעה תקין עם 70% אתנול איזופרופיל ספוג צמר גפן סטרילי, אחריו עם מספר פעמים לקרצף כירורגית בבטאדין.

3. וריד מיקום עורקי הכסל המשותף ופרדה

  1. לעשות חתך בעור של 1.0 - 1.2 ס"מ ארוך בין ה 4 ו -5 th הפטמות בבטן הימנית התחתונה באמצעות להבי אזמל סטרילי פלדה, # 10 פחמן שנערך ידית מס '3. לאחר מכן השתמש וילון ניתוח סטרילי כדי לכסות את הגוף החי למעט במקום החתך.
  2. הזז את החיה מיקרוסקופ לנתיחה גבי ספסל סטנדרטי. השתמש גדלה של 4X להזרקה.
  3. תחת גדלת 4X של מיקרוסקופ לנתיחה, הכנס מלקחי הפרדה בוטים בין רקמת השומן ואת peritoneuמ ', ולדחוף את הרקמות כלפי חוץ משני הצדדים כדי לחשוף את כלי כסל ועצבים (ראה איור 1).
    הערה: העורק בין אבי העורקים מן קו האמצע ואת החלק התחתון של סניפים העורק נקרא עורק הכסל המשותף. זוהי הנקודה בה את ההזרקה מתרחשת.
  4. השתמש זוג אחד של מלקחיים בסדר ישר לפרוץ את רקמת חיבור (כמו קרום) בין כלי ואת העצב, קרוב יותר אל הכלי.
  5. Switch מלקחיים ישר בסדר מצד שמאל. תפוס זוג מלקחיים בסדר זוויתי באמצעות יד ימין. הכנס את מלקחי יד ימין לתוך באותה תנוחה שבה רקמות חיבור נשברו. ואז לתקוע את מלקחי יד ימין דרך, מתחת הכלי.
  6. במקביל, הכנס את המלקחיים ביד שמאל לתוך רקמות החיבור בצד השמאל של הכלי להנחות את מלקחי יד ימין עוברים.
  7. לאחר מלקחי יד ימין מקבלים מתחת הכלי, לנסות להפריד את הכלי מן ti שמסביבssue קצת יותר, ולאחר מכן לשמור אותם על גבי המלקחיים ביד ימין.
  8. שימוש במלקחיים ביד שמאל כדי לספק קצה תפר משי 4-0 המלקחיים הימניים, ולאחר מכן משוך את התפר בעדינות ובאיטיות הדרך מתחת הכלי. הערה: עכשיו הן כלי הוורידים ועורקים נפוצים הם הרימו על ידי התפר (ראה איור 2).

4. הזרקת טיפול לאחר ההזרקה

  1. להכין את התאים להזרקת מזרק אינסולין 31 G. השתמש 100 μl של השעית תא PBS לכל זריקה. הקפד פיפטה מעלה ומטה מספר פעמים כדי להפריד את התאים ולהימנע צבירה כך התאים המוזרקים לא להעמיס ולחסום את זרימת הדם.
  2. עם מלקחי זווית ביד השמאל, לשים את המלקחיים מתחת הכלי לאורך הדרכתו של התפר, ולאחר מכן לפתוח שתי הזרועות של המלקחיים, בעל הכלי שנערך בעדינות על המלקחיים.
    הערה: המרווח בין שתי הזרועות של המלקחיים יהיה iאתר njection.
  3. החזק את המחט 31 G עם 100 השעיות תא μl ביד ימין, עם שיפוע של המחט כלפי מעלה, מוכן להזרקה.
  4. הכנס את המחט לתוך לומן העורק (דם ייכנס קצה המחט). ואז לדחוף השעית תא לאט להזריק את התאים. השעית התא ידחוף את הדם האדום בתוך הכלי. נסה לא לשבור את הכלים או להדליף את השעית התא החוצה.
  5. כאשר הזריקה נגמרה, בעדינות למשוך בחזרה את המחט ולשמור החזקת הכלי עד על המלקחיים ביד שמאל כדי לעצור את הדימום. ואז להתרחק התפר.
  6. משוך כלפי חוץ את המלקחיים ביד שמאל, ומהר השתמש במקלון צמר גפן כדי ללחוץ על אזור החתך העורק כדי לעצור את הדימום.
    הערה: בדרך כלל 5 - 10 דק 'לחץ רצוף מספיק כדי לעצור את הדימום.
  7. כאשר הדימום מפסיק, להשתמש בדבק העור כדי לסגור את הקצוות העור של אזור הניתוח. תן תג אוזן, ולבדוק פליטת אור איתות ההתפלגות של תאים מוזרקים.
    הערה: זריקה מוצלחת תביא תמונה דומה איור 3.
    1. בדוק פליטת אור איתות על ידי הזרקה של 100 μl 15 מ"ג / מ"ל ​​luciferin PBS ב 75 מ"ג / ריכוז העכבר ק"ג באמצעות סינוס התוך-מסלולית.
      1. עבור הזרקה תוך-מסלולית, לשים את האצבעות על שני הצדדים של עין העכבר, להשתמש בלחץ כדי להפוך את כדור עין קופץ החוצה מעט ממסגרת העין, הכנס 28 מחטי G אינסולין במזרק בין כדור עין ואף, ואז לאט לאט לדחוף מזרק להזריק luciferin .
        הערה: במיקום הנכון, את המחט אמורה להיות מסוגל להגיע לעומק של 2 - 3 מ"מ לפני שפגע רקמה קשה (עצם).
      2. מניחים את העכבר לתוך מערכת הדמיה הדמיה כולה חיה vivo ב במשך 10 - 60 שניות בתוך 5 דקות (ראה איור 3).
        הערה: הליך פומבי הוא להשתיל גלולת אסטרדיול לחלק האחורי של חיות כדי לספק אסטרדיול נוסף. זה יאיץ את הצמיחה של תאי ER + סרטן (למשל, MCF-7תאים) 15.
  8. השאירו את העכבר על כרית חימום חמים עד שהוא מתעורר. לפקח על דימום, נפיחות, סימני בקיעה וכאב בתקופה שאחרי הניתוח. שים העכברים בחזרה לכלוב עם כיסוי כאבים (תוסף תזונה carprofin הציע) נתון לניהול כאב עד שלא סימנים של כאב. שימו לב וטיפול קרוב החיות במהלך 7 ימים לאחר הניתוח.

5. מעקב גדילה גרורתי

  1. Histomorphometry:
    1. קציר גידול נושא רקמות עצם, לתקן את העצמות 4% paraformaldehyde למשך 24 שעות, ולאחר מכן decalcify אותם pH 7.0 14% פתרון EDTA במשך 3 - 5 ימים, לייחד להם מקום פרפין הטבעה כפי שתואר לעיל 14.
    2. סעיף רקמות עצם להטביע-פרפין על עובי של 3 מיקרומטר ולבצע שיטה היסטולוגית רמת מכתים Hematoxylin / Eosin כפי שתואר לעיל 14.
  2. Immunohistochemisלְנַסוֹת:
    1. פרפין מוטבע נושא נושאות סרטן עצמות שקופיות אימונוהיסטוכימיה מכתים למטרות שונות כפי שתואר לעיל 14. בקצרה, immunostain תאים סרטניים MCF7 ידי נוגדנים אנטי GFP, ותאי osteogenic immunostain (טרום אוסטאובלסטים ו אוסטאובלסטים) על ידי נוגדנים נגד Osterix ו phosphatase אנטי אלקליין (ALP) נוגדנים, בהתאמה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

איור 1 מדגים את המיקום האנטומי ואת הקשר של עורק הכסל המשותף (אדום) ו וריד (כחול).

איור 2 מראה המיקום היחסי של כלי הכסל ועצבים תחת מיקרוסקופ לנתיחה. כמתואר בתרשים 2A, כלי ועצבים צודקים מתחת קיר הבטן והוא יכול להתגלות לאחר החתך בעור הוא עשה הצפק נדחף משם. וריד הכסל המשותף משמאל, והוא גדול יותר וכהה י...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אמנם רק עורק הכסל הוא היעד של הזרקת תאים סרטניים, אנו ממליצים על הפרדת שני וריד הכסל עורק מן הרקמות הסובבות, וכדי להרים אותם יחד כמו חבילה. הסיבה לכך היא כי הוורידים והעורקים בהרחבת קשר אחד עם השני, ועל קיר כלי הוורידים הוא דקים קל לשבור. לכן, עבור זריקה מוצלחת, זה חוסך זמן ומאמץ כדי להחזיק את שתי ספינות יחד, אם כי תאים סרטניים מוזרקים רק אל העורק. תפר משי 4-0 משמש כדי לסייע בתהליך זה כפי שמוצג באיור 2. התפר עשוי גם לסייע דימום להפסיק צריך זה להתרחש.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחקר במעבדת ג'אנג נתמך על ידי X. H.-F. CA151293 ה-NCI של Z., CA183878, הקרן לחקר סרטן השד, משרד ההגנה האמריקני DAMD W81XWH-13-1-0195, פרס טייס של CA149196-04, המכון הרפואי McNair ועל ידי משרד ההגנה האמריקאי DAMD W81XWH-13-1-0296.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<חזק>חומרים
DMEMHyCloneSH30022.01
FBSGibco16000
עט/סטרפטוקוקוס אמפאטריצין BLonza Biowhittaker17-745E
PBSLonza Biowhittaker17-516F
תמיסת טריפסין/EDTAHyCloneSH30042.01
45 μ מסננת תאי MVWR המעבדה הבינלאומית195-2545
מדיג'ל CPF עם קרפרופן פריט מבוקר מטיפול וטרינרי ב-BCMלטיפול בכאב
בופרנורפין פריט מבוקר מטיפול וטרינרי ב- BCMלטיפול בכאב
גלולת אסטרדיולמחקר חדשני של אמריקהSE-121
קטמין וקסילזיןפריט מבוקר מטיפול וטרינרי במשחה וטרינרית BCM
פריט מבוקר מטיפול וטרינרי ב- BCMהימנע מיובש בעיניים
מכונת גילוחאוסטר78005-050עבור עכברים פרוותיים
איזופרופיל אתנולACROS67-63-0
קרצוף כירורגי בטדיןפריט מבוקר מטיפול וטרינרי בלהבי אזמל BCM
#10טד פלה, בע"מ549-3CS-10ידית מרובה
מס' 3טד פלה, בע"מ541-31צריך להיות חיטוי
וילון כירורגי סטריליטכנולוגייתעירוי סאיPSS-SD1
מלקחיים ישרים מכשיר כירורגי RobozRS-5132צריך להיות חיטוי
מלקחיים עדינים ישריםכלי מדע עדינים11253-20צריך להיות חיטוי
מלקחיים עדינים קצוותכלי מדע עדינים11253-25צריך להיות חיטוי
4-0 תפר משי ויקרילג'ונסון & Johnson Health CareJ214H
31 G מזרקי אינסוליןBD328418מספר
Q-tips צמר גפן (סטרילי)VWR המעבדה הבינלאומית89031-272
דבק עורהנרי שיין בריאות בעלי חיים31477לסגירת עור באתר ניתוח
מוליך תג אוזןFine ScienceTools 24220-00
תגי אוזנייםFine Science Tools24220-50
D-luciferinGold BiotechnologyLUCKהימנע מאור והניח קרח
28 גרם מזרקי אינסוליןBD329410להזרקה תוך מסלולית
ParaformadehydeAlfa Aesar30525-89-4לקיבוע רקמות
EDTAOmniPur4050להסרת רקמות עצם
< strong>שםCompany>Catalog NumberComments
Equipment
Dissection מיקרוסקופLeicaLeica S6E סטריאו
IVIS Lumina II מערכת הדמיהראייה
מולקולרית מתקדמתשםחברהמספר קטלוגיתגובות
נוגדנים
נגד GFP (JL-8)Clontech632381
נוגדנים נגד ALPAbcamab108337
Anti-Osterix נוגדניםAbcamab22552

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kang, Y., et al. A multigenic program mediating breast cancer metastasis to bone. Cancer cell. 3 (6), 537-549 (2003).
  2. Lu, X., et al. VCAM-1 promotes osteolytic expansion of indolent bone micrometastasis of breast cancer by engaging alpha4beta1-positive osteoclast progenitors. Cancer cell. 20 (6), 701-714 (2011).
  3. Ell, B., Kang, Y. SnapShot: Bone Metastasis. Cell. 151 (3), 690-690 (2012).
  4. Kretschmann, K. L., Welm, A. L. Mouse models of breast cancer metastasis to bone. Cancer Metastasis Rev. 31 (3-4), 579-583 (2012).
  5. Lelekakis, M., et al. A novel orthotopic model of breast cancer metastasis to bone. Clin Exp Metastasis. 17 (2), 163-170 (1999).
  6. Rose, A. A., et al. Osteoactivin promotes breast cancer metastasis to bone. Mol Cancer Res. 5 (10), 1001-1014 (2007).
  7. Welm, A. L., et al. The macrophage-stimulating protein pathway promotes metastasis in a mouse model for breast cancer and predicts poor prognosis in humans. Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (18), 7570-7575 (2007).
  8. Li, X., et al. Loss of TGF-beta Responsiveness in Prostate Stromal Cells Alters Chemokine Levels and Facilitates the Development of Mixed Osteoblastic/Osteolytic Bone Lessions. Mol. Cancer. Res. 10 (4), 494-503 (2012).
  9. Gregory, L. S., Choi, W., Burke, L., Clements, J. A. Breast Cancer Cells Induce Osteolytic Bone Lesions In vivo through a Reduction in Osteoblast Activity in Mice. PLoS ON. 8 (9), e68103(2013).
  10. Waning, D. L., et al. Excess TGF-β mediates muscle weakness associated with bone metastases in mice. Nat Med. 21 (11), 1262-1271 (2015).
  11. Simmons, J. K., et al. Animal Models of Bone Metastasis. Vet Pathol. 52 (5), 827-841 (2015).
  12. Werbeck, J. L., et al. Tumor microenvironment regulates metastasis and metastasis genes of mouse MMTV-PymT mammary cancer cells in vivo. Vet Pathol. 51 (4), 868-881 (2014).
  13. Xiang, J., et al. CXCR4 Protein Epitope Mimetic Antagonist, POL5551, Disrupts Metastasis and Enhances Chemotherapy Effect in Triple Negative Breast Cancer. Mol Cancer Ther. 14 (11), 2473-2485 (2015).
  14. Wang, H., et al. The osteogenic niche promotes early-stage bone colonization of disseminated breast cancer cells. Cancer Cell. 27 (2), 193-210 (2015).
  15. Hoffmann, J., et al. Characterization of new estrogen receptor destabilizing compounds: effects on estrogen-sensitive and tamoxifen-resistant breast cancer. J Natl Cancer Inst. 96 (3), 210-218 (2004).
  16. Tannehill-Gregg, S. H., Levine, A. L., Nadella, M. V., Iguchi, H., Rosol, T. J. The effect of zoledronic acid and osteoprotegerin on growth of human lung cancer in the tibias of nude mice. Clin Exp Metastasis. 23 (1), 19-31 (2006).
  17. Slyfield, C. R., Tkachenko, E. V., Wilson, D. L., Hernandez, C. J. Three-Dimensional Dynamic Bone Histomorphometry. J Bone Miner Res. 27 (2), 486-495 (2012).
  18. Koba, W., Jelicks, L. A., Fine, E. J. MicroPET/SPECT/CT imaging of small animal models of disease. Am J Pathol. 182 (2), 319-324 (2013).
  19. Simmons, J. K., et al. Canine prostate cancer cell line (Probasco) produces osteoblastic metastases in vivo. Prostate. 74 (13), 1251-1265 (2014).
  20. Amend, S. R., et al. Thrombospondin-1 regulates bone homeostasis through effects on bone matrix integrity and nitric oxide signaling in osteoclasts. J Bone Miner Res. 30 (1), 106-115 (2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

H ERNA Seq

מאמרים קשורים