הפעלנו גירוי מגנטי טרנס-גולגולתי חוזר ונשנה (rTMS) על ההמיספרה החד-צדדית של מוח החולדה, על ידי הנחת סליל 25 מ"מ דמות 8 1 ס"מ לרוחב הקודקוד על הקו הדו-אוזני וזווית הסליל ב-45 מעלות. מערכת קירור מים פנימית שימשה ל-rTMS במשך יותר מ-20 דקות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הפעלנו גירוי מגנטי טרנס-גולגולתי חוזר ונשנה (rTMS) על ההמיספרה החד-צדדית של מוח החולדה, על ידי הנחת סליל 25 מ"מ דמות 8 1 ס"מ לרוחב הקודקוד על הקו הדו-אוזני וזווית הסליל ב-45 מעלות. מערכת קירור מים פנימית שימשה ל-rTMS במשך יותר מ-20 דקות.
מודלים קודמים של מכרסמים של גירוי מגנטי טרנס-גולגולתי חוזר (rTMS) אימצו גירוי מוחי שלם במקום rTMS חצי כדורי חד-צדדי, בניגוד לפרוטוקולים המשמשים לנבדקים אנושיים. אנו מדווחים על יישום מוצלח של rTMS בהמיספרה החד-צדדית של מוח חולדה. ה-rTMS הועבר עם פרוטוקול גירוי בתדר נמוך (1 הרץ), בתדר גבוה (20 הרץ) או דמה לצד אחד של המוח באמצעות סליל קטן של 25 מ"מ דמות 8. מיקמנו את מרכז הסליל 1 ס"מ לרוחב הקודקוד על הקו הדו-אוזני וזווית הסליל 45 מעלות לקרקע כדי למזער את ההשפעה הישירה הפוטנציאלית של rTMS על קליפת המוח הנגדית. השתמשנו גם במערכת קירור מים פנימית כדי לאפשר גירוי מגנטי חוזר ונשנה במשך יותר מ-20 דקות, אפילו בתדר גירוי של 20 הרץ. עלייה בשעתוק של גנים מוקדמים מיידיים (Arc, Junb ו-Egr2) הייתה גדולה יותר לאחר rTMS מאשר לאחר גירוי דמה. לאחר 5 ימים רצופים של 20 דקות של 1-Hz rTMS, ביטוי bdnf mRNA היה גבוה משמעותית בקליפת המוח המגורה מאשר בצד הנגדי. המודל המוצג כאן יבהיר את המנגנונים המולקולריים של rTMS על ידי מתן אפשרות לניתוח ההבדל הבין-המיספרי בהשפעתו.
גירוי מגנטי transcranial חוזרים (rTMS), כלי גירוי מוחי פולשני neuromodulation, יושם לטיפול במצבים שונים כגון כאב מרכזי 1,2, דיכאון 3, מיגרנה 4, ואף שבץ 5-7. המשתנה במהירות זרם חשמלי דרך סלילים על הראש גורם שדה חשמלי על קליפת המוח לבין הפעלה עצבית כתוצאה. הרגישות של קליפת המוח יכולה להיות מווסתת על ידי rTMS, אשר יכול להימשך יותר מ -30 דקות לאחר הגירוי הוא הופסק.
מנגנונים מוצעים של rTMS לאחר והתוצאה כוללים הגברה לטווח ארוך / דיכאון דמוי אפקט 8, משמרת חולפת באיזון יוני 9, ומטבוליות משנה 10. בנוסף, די לצרו et al. מראה כי גירוי לסירוגין פרץ-תטא משפיע על תשומות סינפטיים המעוררות כדי פירמידה נוירונים בדרכים, הן מגורההאונה הנגדית 11.
מגבלות משמעותיות, אולם מנעו חוקרים מתרגום ראיות על ספסל למצבים קליניים. ראשית, במחקרים בבעלי חיים קודמים, rTMS שימש גירוי המוח כולו 12. גירוי המוח כולו הוא שונה לגמרי מן הפרוטוקולים המשמשים במחקרים בבני אדם 9. הבעיה השנייה קשורה עם משך הגירוי. זהו לפחות חלקית המיוחס העובדה מערכת קירור יעיל לא היה זמין עבור סלילי קטן בעבר.
בשנים האחרונות, מאמרי זרע פורסמו מציעים דרכים להתגבר על קשיים אלה בניסוי rTMS על מוח החיה הקטן. על ידי מודלים של בעלי חיים אלה, התגלה כי המוח עכברוש מראה גם שינויים רגישות קליפת המוח דומה כמו האדם בתגובה rTMS בתדירות נמוכה 13. יתרה מכך, מנגנונים תאיים ומולקולריים של rTMS יותר ויותר being נחקר באמצעות מודלים של בעלי חיים של rTMS. דוגמה לכך היא כי סוג מובחן של interneuron מעכב ידוע להיות רגיש ביותר לגירוי פרץ תטא לסירוגין 14. במודלים של מכרסמים של rTMS, ובכך, להציע הזדמנויות חדשות עבור חקר שאלות הרבה-טענותיו את הבסיס המולקולרי של שינויים מושרים rTMS. אם במודלים של בעלי חיים קטנים של rTMS ניתן להשתמש במעבדות יותר, הוא עשוי להאיץ באופן משמעותי לחזק את המחקר בתחום זה.
כעת אנו מתארים כיצד ליישם rTMS בחצי הכדור החד-הצדדי של מוח עכברוש, רחבה של העבודה הקודמת 15. גירוי-induced שינויים הוערכו באמצעות טומוגרפיית פליטת מיקרו-פוזיטרונים (PET) ו microarrays mRNA ללמוד שינויים המושרה rTMS בקליפת המוח מגורה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל הנהלים השימוש בבעלי חיים היו נבדקה ואושרה על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש בבית החולים האוניברסיטאי הלאומי בסיאול.
1. התקנה ניסיונית
2. חוזרים Transcranial Magnetic Stimulation
3. טומוגרפיית פליטת פוזיטרונים Micro
4. mRNA Microarray
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חמש עשר 8 שבועות גבר בן חולדות Sprague-Dawley שמשו לניתוח אמין בין-rater נפרד של נחישות MT. באמצעות מישוש של התכווצויות שרירים, במערכת MTS הושג בכל החולדות כפי שנמדד 33.00 ± 4.21% תפוקה מקסימלי ממריץ (% MSO) ו 33.93 ± 0.88% MSO, בהתאמה, על ידי שני חוקרים עצמאיים. הטיה בלנד-אלטמן היה -0.93, ואת גבולות 95% של הסכם היו -9.13 עד 7.26%.
בניסוי מיקרו-PET...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המטרה העיקרית של מחקר זה הייתה להציג במודל חיה של rTMS חד-צדדית. למרות גירוי חד-צדדי הוא אחד המאפיינים הבסיסיים ביותר של מחקר rTMS האדם, מחקרים רבים לא אמצו אותה חיות קטנות. עם זאת, רוטנברג ואחות '. 15 רשם חברי פרלמנט אירופאי נגדיים עם גירוי של MT 100% באמצעות סליל דמות -8 בקוטר אונה מחוץ 20 מ"מ, ואילו גירוי עם 112.5% ו 133.3% MT פיק ipsilateral וכן חברי פרלמנט אירופיים נגדיים. זה יכול להיות בגלל השדה החשמלי המושרה הגדול יכול להשפיע על האונה הנגד...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי מענק קרן המחקר של קוריאה במימון ממשלת קוריאה (KRF-2008-313-E00458). המחברים מודים לג'ין-ג'ו לי על הסיוע הטכני.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| שמיכה הומותרמית עם בדיקה רקטלית | מכשיר הרווארד | 507222F | |
| איזופלורן (פוראן סול.) | Choongwae | ||
| Propofol (Provive Inj. 1% 20 מ"ל) | Claris Lifesciences | ||
| ממריץ מגנטי חוזר (Magstim Rapid2) | Magstim Company Ltd | ||
| 25 מ"מ דמות של 8 סליל | Magstim Company Ltd | 1165-00 | |
| PET-CT | GE Healthcare | ||
| QIAzol מגיב | ליזיסQiagen | (פטנט ארה"ב מס' 5,346,994) | |
| RNeasy רקמת שומן מיני ערכת | Qiagen | 74804 | |
| RNeasy מיני ספין עמודים | Qiagen | (מחצלת מס' 1011708) | |
| Agilent 2100 Bioanalyzer | Agilent Technologies | ||
| אמביון Illumina ערכת הגברת RNA | אמביון | ||
| Nanodrop ספקטרופוטומטר | NanoDrop | ND-1000 | |
| Illumina RatRef-12 ביטוי BeadChip | Illumina, Inc. | ||
| אמרשם פלואורולינק סטרפטווידין-Cy3 | GE מדעי בריאות ביו-מדעיים |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.