מאמר שיטה

Cytometric זרימה פשוט שיטה למדוד ספיגת הגלוקוז ואת ביטוי נשא גלוקוז עבור מונוציטים subpopulations ב דם מלא

16.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/54255

⸱

12 באוגוסט 2016

 ,  ,  ,  , 
1Centre for Biomedical Research, Macfarlane Burnet Institute for Medical Research and Public Health, 2Department of Infectious Diseases, Monash University, 3Department of Microbiology and Immunology, University of Melbourne, 4Department of Microbiology, The University of the West Indies, 5Division of Experimental Medicine, Department of Medicine, University of California, San Francisco, 6Department of Medicine, Monash University

במאמר זה

סיכום

מונוציטים הם מרכיבים אינטגרליים של מערכת החיסון המולדת האנושית המסתמכים על חילוף חומרים גליקוליטי כאשר הם מופעלים. אנו מתארים פרוטוקול זרימה ציטומטרית למדידת ביטוי טרנספורטר גלוקוז וספיגת גלוקוז על ידי סך כל המונוציטים ותת-אוכלוסיות המונוציטים בדם מלא טרי.

תקציר

מונוציטים הם תאי מולדת חיסון מסוגלים להיות מופעלים על ידי פתוגנים דלקת הקשורים למחלות דלקתיות כרוניות מסוימות. הפעלת מונוציטים גורמת פונקציות מפעילות ומעבר במקביל מ חמצוני מטבוליזם glycolytic המלווה ביטוי נשא גלוקוז מוגברת. מטבוליזם glycolytic מוגברת זו נצפתה גם עבור חסינות מאומן של מונוציטים, סוג של זיכרון אימונולוגי מולד. למרות פרוטוקולים במבחנה בבדיקת ביטוי גלוקוז טרנספורטר ספיגת הגלוקוז על ידי מונוציטים תוארו, אף אחד מהם לא נבדקו על ידי זרימת רב פרמטריים cytometry בדם כולו. אנו מתארים פרוטוקול התזרים cytometric רב-פרמטרים למדידת הספיגה אנלוגי גלוקוז ניאון 2-NBDG בדם כולו על ידי מונוציטים הכולל לבין (CD16 CD14 ++ -) הקלסי, ביניים (CD14 ++ CD16 +) ו הלא קלסי ( CD14 + CD16 ++) מונוציטיםתת-אוכלוסיות. שיטה זו יכולה לשמש כדי לבחון ביטוי נשא גלוקוז ספיגת הגלוקוז עבור מונוציטים הכולל תת-אוכלוסיות מונוציטים במהלך הומאוסטזיס ומחלות דלקתיות, וניתן לשנות בקלות לבחון ספיגת הגלוקוז עבור לויקוציטים אחרים תת-אוכלוסיות לויקוציטים בתוך הדם.

מבוא

המונוציטים מהווים מרכיב עיקרי של המערכת האנושית המולד החיסונית כי מגויס במהירות לאתרים של זיהום ודלקת 1. הפעלת מונוציטים הוא קריטי עבור הגבלת נזק אקוטי ידי פתוגנים מרכזי גם בפתוגנזה של מחלות כרוניות שונות, כולל טרשת עורקים 2, סרטן 3, ו- HIV 4,5.

המטבוליזם של מנוחה מונוציטים מופעל שונה באופן דרמטי, עם מונוציטים נח ניצול מטבוליזם חמצוני מונוציטים מופעל ניצול מטבוליזם glycolytic (כלומר, התסיסה של גלוקוז לקטט) 6. הפעלת מונוציטים גורם ביטוי של מובילי גלוקוז המאפשר ספיגת הגלוקוז מוגבר מטבוליזם glycolytic 7. טרנספורטר 1 גלוקוז מונוציטים (GLUT1) הוא טרנספורטר אחד כזה שהוגבר במהלך ההפעלה וביטויו הוכח להוביל לייצור של ציטוקינים פרו-דלקתיים נitro ו ברקמת השומן של עכברים שמנים 8. זיהום של שורת תאים monocytic ידי הרפס הקשור סרקומה קפוסי מוביל הגברת הביטוי התאי של GLUT1 9, והראינו לאחרונה כי במהלך זיהום כרוני HIV גידול באחוז מונוציטים להביע GLUT1 נוכחים במהלך ההדבקה שטופלו בטיפול תרופתי מטופל בשילוב 10. יחדיו, מחקרים אלה מראים כי ספיגת הגלוקוז וחילוף החומרים glycolytic ידי מונוציטים הם היבטים חשובים של מחלות דלקתיות רבות. לפיכך, שיטה פשוטה למדוד ביטוי GLUT1 מונוציטים ספיג הגלוקוז במהלך הומאוסטזיס ומחלות דלקתיות עשויות להועיל במגוון רחב של חוקרים.

מונוציטים האדם הם הטרוגניים, להיות מורכב משלושה תת ברורים שיכולים להיבדק על ידי ביטוי ההפרש של CD14 סמנים פני התא CD16 11,12. מונוציטים קלסי להביע רמה גבוהה של CD14 אך אינו מבטא CD16 (CD14 ++ CD16 -), מונוציטים ביניים להביע רמה גבוהה של CD14 ו ברמה בסיסית של CD16 (CD14 ++ CD16 +), ומונוציטים הלא קלאסית להביע רמה נמוכה של CD14 ורמה גבוהה של CD16 (CD14 + CD16 ++). מונוציטים מבטאי CD16 מכונים CD16 + מונוציטים, אשר לעומת CD16 - יש מונוציטים ביטוי גבוה של ציטוקינים דלקתיים ויכולת אנטיגנים נוכחי בצורה יעילה יותר 13,14. כ -10% מונוציטים להביע CD16 במהלך הומאוסטזיס עם אחוזים גבוהים שנצפו במהלך דלקת 15. תת-אוכלוסיות מונוציטים המשויכות מצבי מחלה מסוימים יכולות להיות סמנים ביולוגיים שימושיים להתקדמות מחלה ומחלות 16.

מטרתנו הייתה לזהות שיטה שיכולה למדוד ביטוי נשא גלוקוז ספיגת הגלוקוז על ידי מונוציטים האדם subpopulations מונוציטים בתנאים קרוב PHYתנאי siological ככל האפשר. מחקרים קודמים נמדד ביטוי נשא גלוקוז מונוציטים ספיגת הגלוקוז 17,18, אם כי שיטות אלה בחן מונוציטים מבודד שיכול שינו ביטוי חלבון לעומת מצבים פיזיולוגיים 19, ולא במחקר הקודם בחן subpopulations מונוציטים האדם. באמצעות זרימה רבת פרמטריים cytometry, אנו מתארים שיטה לבחון ביטוי נשא גלוקוז ספיג של אנלוגי גלוקוז ניאון 2-NBDG ידי מונוציטים הכוללים תת-אוכלוסיות מונוציטים (מבוסס על CD14 וביטוי CD16) בתוך דם unmanipulated כולו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הערה: החיים עם HIV ואיידס-נגוע בנושאים גויסו מיחידת למחלות זיהומיות אלפרד החולים במלבורן, VIC, אוסטרליה, ומן הקהילה המקומית, בהתאמה. הסכמה מדעת התקבלה כל המשתתפים, ואת המחקר אושר על ידי ועדת המחקר ואתיקת אלפרד החולה.

1. GLUT1 איתור שטח פני התא על תת-אוכלוסיות מונוציטים ו מונוציטים

  1. איסוף דם ב ציטראט ACD-B צינורות קרישה ולהתחיל בניסויים בתוך ארון בטיחות ביולוגית בתוך שעה 1 של האוסף.
  2. הוספת 100 μl של דם כדי צינורות פוליפרופילן. הוסף 2 מ"ל של 1x lysing פתרון (ראה לוח חומרים) כדי צינורות בעוד על הקרח, pipetting בעדינות לתערובת. דגירה במשך 15 דקות על קרח. צנטריפוגה ב 220 XG במשך 5 דקות.
  3. למזוג ולשטוף פעמיים על ידי הוספת כ 2-4 מ"ל של הפתרון לשטוף (BSA 0.5% ב 1x PBS) ו centrifuging ב 220 XG במשך 5 דקות.
  4. להשתמש בצינורטטי כדי להסיר כמה שיותר בזהירות של הפתרון לשטוף ככל האפשר. מקום צינורות על קרח מחדש להשעות ב 100 μl של פתרון לשטוף.
  5. כדי לזהות תת-אוכלוסיות מונוציטים ספציפיות להכתים תאים עם הנפח הבא של הנוגדנים ל -100 μl השעית תא מוכנים בשלב 1.4: 5 μl אנטי CD3-PE, 5 μl אנטי CD14-APC, 5 μl אנטי CD16-PECy7, 5 μl GLUT1 -FITC או IgG2b-FITC (שפופרת אלוטיפ).
  6. מניחים על קרח למשך 30 דקות בחושך. לשטוף 2 פעמים עם פתרון לשטוף. תקן עם 200-300 μl של פורמלדהיד 0.5% מתוצרת 1x PBS.
  7. לנתח על cytometer זרימה מסוגל לאתר 4 צבעים בתוך 24 שעות בתוך גל עירור ופליטה הבאים: FITC (488, 530), PE (488, 575), PECy7 (488, 780), APC (633, 660) 10.

2. ספיגת הגלוקוז על ידי מונוציטים

  1. פיפטה 90 μl של הדם שנאסף בשלב 1.1 צינורות פוליפרופילן. הוסף 10 μl של פתרון עובד 14.60 מיקרומטר 2-NBDG כדי90 μl של דם (הריכוז הסופי 1.46 מ"מ) קפיצי בעדינות לתערובת. זה קריטי כדי להגביל את החשיפה 2-NBDG לאור על ידי כיסוי צינורות עם רדיד אלומיניום.
  2. לדגור על 37 מעלות צלזיוס בחושך במשך 15-30 דקות ולאחר מכן מיד ומניחים על קרח. הוסף 4 מ"ל של 1x FACS lysing הפתרון צינורות בעוד על הקרח. צנטריפוגה ב 220 XG ב 4 ° צלזיוס למשך 5 דקות.
  3. שטפי פעם על ידי הוספת 4 מ"ל של פתרון לשטוף (0.5% BSA ב PBS 1x). צנטריפוגה ב 220 XG ב 4 ° צלזיוס למשך 5 דקות. למזוג ומניחים על קרח.
  4. כתם תאים עם נוגדנים: 5 μl אנטי CD3-PE, 5 μl אנטי CD14-APC ו -5 μl אנטי CD16-PECy7. מערבבים ומניחים על קרח למשך 30 דקות בחושך.
    הערה: במהלך תקופה זו לוודא את הזרימה cytometer היא מוכנה לניתוח מיידי. רוכשת תאים בתוך גל עירור ופליטה הבאים: 2-NBDG (488, 530), PE (488, 575), PECy7 (488, 780), APC (633, 660).
  5. הוסף 4 מ"ל של חיץ לשטוף קר קרח (BSA 0.5% ב 1x PBS) כדי צינורות.שטפי פעם על ידי צנטריפוגה ב 220 XG ב 4 ° צלזיוס למשך 5 דקות. למזוג ולהוסיף 200-300 μl של PBS הישן הקרח ולשמור על הקרח בחושך (מכוסה בנייר אלומיניום). לנתח על cytometer זרימה בתוך 10 דקות באמצעות עירור הגדרה אורך גל פליטה כמו בשלב 2.4.

3. קליטת נתונים וניתוח

הערה: ידע של זרימת cytometry וניתוח נתוני הנחה.

  1. שימוש cytometer זרימה מסוגל לבצע ניתוחי 4 צבעים לפחות, להגדיר פיצוי באמצעות דגימות בלא כתם בנפרד מוכתמות.
    הערה: מכתים יחיד באמצעות CD4 FITC שכותרתו CD14 יכול לשמש GLUT1 ופיצוי 2-NBDG.
  2. הגדרת תווית חלונות מתאימים לפני רכישת דגימות. צייר שער סביב האוכלוסייה מונוציטים, ולרכוש 100,000 ל -300,000 אירועים לדגימה בקצב בינוני. 50,000 אירועים לדגימת פיצוי מספיק.
    הערה: פיצוי עשוי להתנהל לפני לדגוםרכישה או תוכנת ניתוח תא בודדת, בעקבות הליכים סטנדרטיים.
  3. יצוא ולשמור נתונים לתוך מיקום מתאים. פתח את תוכנת ניתוח תא בודד כגון FlowJo או תוכנה לניתוח אחרים (משלימה איור 1) דגימות גרור ושחרר כמפורט (משלימה איור 2).
  4. לחץ לחיצה כפולה כדי לפתוח את הקובץ (משלימה איור 3). צייר עיגול לשער מונוציטים מבוסס על מאפייני פיזור קדימה בצד כפי שמוצג באיור 1A ו משלימים איור 4. לחץ לחיצה כפולה על האוכלוסייה מונוציטים. הקפד לצייר תיבה מסביב CD3 - האוכלוסייה (משלימה איור 4).
  5. לחץ לחיצה כפולה על CD3 - אוכלוסייה. כדי לבחון את תת-אוכלוסיות מונוציטים לבחור CD14-APC על ציר 'x', ו CD16-PECy7 על 'ציר y'-, ואת התווית בהתאם (משלימה איור 5).
  6. איפה אין מובחןאוכלוסיות חיוביות ושליליות, למדוד את הביטוי של GLUT1 או ספיגת 2-NBDG ב subpopulations מונוציטים ספציפי. קבע את עוצמות הקרינה הממוצעת (MFI) של GLUT1 ו -2-NBDG על ידי הפחתת אלוטיפ ולא הרקע 2-NBDG (משלימה איור 6).
  7. איפה אוכלוסיות מוגדרות קיימות עדיין, השתמש IgG2b-FITC להגדיר את השער, ולקבוע את התאים החיוביים האחוז (איור 3).
    הערה: השתמש בהליך זה כדי לנתח הכולל CD14 + מונוציטים. מאז ספיגת 2-NBDG הוא בדרך כלל בסימן שינוי הקרינה עוצמות הנתונים מיוצג על ידי מיטב MFI היסטוגרמות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

פיצוי חייב להתבצע עבור fluorochromes פרט למנוע זליגת קרינה. מונוציטים מועשרים לראשונה על ידי gating מבוסס על קדימה פיזור בצד. המגרשים שהוצגו הם נציגים של לפחות שישה ניסויים בלתי תלויים שנערכו על דם שלם שישה משתתפים או יותר כפי שדווח בעבר 10 איור 1A מציגה את gating הראשונית של מונוציטים ידי תא פיזור והדרה של תאי T על ידי gating בתוך CD3 -. האוכלוסייה. מונוציטים הם אז מגודרים עבור ביטוי CD14 לבד או בשילוב עם CD1...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הפרוטוקול המתואר כאן מפרט שיטה פשוטה לבחון ביטוי נשא גלוקוז ספיג אנלוגי גלוקוז ניאון על ידי תת-אוכלוסיות מונוציטים ו מונוציטים בדם כולו. לפי הערכה ספיגה 2-NBDG בדם כולו, טכניקה זו מאפשרת בתנאים דומים לאלה in vivo. מחקר קודם בחן 6-NBDG לספיגת מונוציטים מופרדים דם כולו על ידי צנטריפוגה צפיפות 17. עם זאת, מחקר זה לא בדק subpopulations מונוציטים ופרדה של מונוציטים מהדם כולו עלול לשנות ביטוי של מולקולות פני תא מסוימים 19. קליעים נותבים גלוקוז רדיואקטיבי ג...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

מחקר זה מומן על ידי המרכז האוסטרלי ל- HIV וצהבת מסוג וירולוגיה מחקר (ACH 2) ומענק התפתחותיים 2010 (CNIHR) מאוניברסיטת מרכז וושינגטון לאיידס מחקר (וכפר), תוכנית הממומנות על ידו תחת AI027757 מספר הפרסים אשר נתמך על ידי NIH מוסדות ומרכזים הבאים (NIAID, NCI, NIMH, NIDA, NICHD, NHLBI, NIA). CSP הוא הנמען של מענק 2 CNIHR ו ACH. SMC הוא הנמען של מועצת המחקר הלאומית לבריאות ורפואה של אוסטרליה (NHMRC) ומנהלת מחקר המלגה. המחברים בתודה להכיר בתרומת עבודה זו של תכנית תמיכת התשתית ויקטוריאני התפעולית המתקבלת במוסד ברנט. אנו מכירים את עזרתו של גזה Paukovic ואווה אורלובסקי-אוליבר ממתקן Core cytometry זרימה AMREP עבור זרימת cytometry הדרכה וייעוץ טכני. אנו מודים אנגוס מורגן לאימון התקשורת וארגון לצלם וידאו. תודתנולג'סי מאסון Jehad עבד-אלעזיז ק Alzahrani לסיוע במעבדה במהלך לצלם וידאו. אנו מודים המאמצים של ד"ר דוד Simar בבית הספר למדעי הרפואה, UNSW, אוסטרליה שהציעו ייעוץ מתודולוגי קריטי. CSP רוצה להודות www.nice-consultants.com להתייעצויות גרפיות.

מחברי תרומה:

CSP הגה את הפרויקט, שנועד וערך ניסויים, ניתוח ופרשנות נתונים, וכתב את כתב היד. JJA לפרש נתונים וכתב את כתב היד. TRB כתב את כתב היד. JMM לפרש נתונים, הציע הצעות רוחניות קריטיות, כותב ביקורת על כתב היד. SMC לפרש נתונים, הציע הצעות אינטלקטואליות ביקורתיות ביקורת על כתב היד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
שפופרת VACUETT 9 מ"ל ACD-B שפופרות נוגדות קרישהGreiner Bio-One GmbH455094
שפופרות פוליפרופילן סטריליות 5 מ"לBD Biosciences352063
אלבומין מסרום בקר (BSA)Sigma-AldrichA7906
תמיסת פורמלדהיד 16%Electron Microscopy Science15710
BD FACS תמיסת ליזינג (10x)BD Biosciences349202תמיסת ליזינג BD FACS מדוללת 1/10 עם מים נטולי יונים לריכוז עבודה (יש לאחסן עד שבוע בטמפרטורה של 4 מעלות; C)
anti-CD3-PEBD Biosciences555340
anti CD14-APCBD Biosciences555399
anti-CD16-PECy7BD Biosciences557744
anti-Glut1-FITCR & D מערכותFAB1418F
IgG2b-FITCמו"פ D SystemsIC0041F
2-NBDGLife technologiesN13195השעו 5 מ"ג של 2-NBDG לתוך 1 מ"ל מים נטולי יונים כדי ליצור תמיסת מלאי של 14.60 מ"מ (שמור עד 6 חודשים בטמפרטורה של 4 מעלות; ג). כדי להפוך את ריכוז 2-NBDG העובד, יש לדלל מלאי 1/100 עם 1x DPBS. מכסים בנייר כסף. (אחסן עד שבוע ב-4 מעלות; ג)
דולבקו s Phosphate Buffered Saline (1x)Life Technologies14190-144להכנת תמיסת כביסה, הוסף 0.5 גרם BSA לכל 100 מ"ל DPBS (אחסן עד שבועיים בטמפרטורה של 4 מעלות; ג)

מקורות

  1. Shi, C., Pamer, E. G. Monocyte recruitment during infection and inflammation. Nat Rev Immunol. 11, 762-774 (2011).
  2. Woollard, K. J., Geissmann, F. Monocytes in atherosclerosis: subsets and functions. Nat Rev Cardiol. 7, 77-86 (2010).
  3. Richards, D. M., Hettinger, J., Feuerer, M. Monocytes and macrophages in cancer: development and functions. Cancer Microenviron. 6, 179-191 (2013).
  4. Anzinger, J. J., Butterfield, T. R., Angelovich, T. A., Crowe, S. M., Palmer, C. S. Monocytes as regulators of inflammation and HIV-related comorbidities during cART. J Immunol Res. 2014, 569819(2014).
  5. Palmer, C., Cherry, C. L., Sada-Ovalle, I. Glucose Metabolism in T Cells and Monocytes: New Perspectives in HIV Pathogenesis. EBioMedicine. , (2016).
  6. Cheng, S. C., et al. mTOR- and HIF-1alpha-mediated aerobic glycolysis as metabolic basis for trained immunity. Science. 345, 1250684(2014).
  7. Maratou, E., et al. Glucose transporter expression on the plasma membrane of resting and activated white blood cells. Eur J Clin Invest. 37, 282-290 (2007).
  8. Freemerman, A. J., et al. Metabolic reprogramming of macrophages: glucose transporter 1 (GLUT1)-mediated glucose metabolism drives a proinflammatory phenotype. J Biol Chem. 289, 7884-7896 (2014).
  9. Gonnella, R., et al. Kaposi sarcoma associated herpesvirus (KSHV) induces AKT hyperphosphorylation, bortezomib-resistance and GLUT-1 plasma membrane exposure in THP-1 monocytic cell line. J Exp Clin Cancer Res. 32, 79(2013).
  10. Palmer, C. S., et al. Glucose transporter 1-expressing proinflammatory monocytes are elevated in combination antiretroviral therapy-treated and untreated HIV+ subjects. J Immunol. 193, 5595-5603 (2014).
  11. Wong, K. L., et al. Gene expression profiling reveals the defining features of the classical, intermediate, and nonclassical human monocyte subsets. Blood. 118, e16-e31 (2011).
  12. Ziegler-Heitbrock, L., et al. Nomenclature of monocytes and dendritic cells in blood. Blood. 116, e74-e80 (2010).
  13. Belge, K. U., et al. The proinflammatory CD14+CD16+DR++ monocytes are a major source of TNF. J Immunol. 168, 3536-3542 (2002).
  14. Frankenberger, M., Sternsdorf, T., Pechumer, H., Pforte, A., Ziegler-Heitbrock, H. W. Differential cytokine expression in human blood monocyte subpopulations: a polymerase chain reaction analysis. Blood. 87, 373-377 (1996).
  15. Ziegler-Heitbrock, L. The CD14+ CD16+ blood monocytes: their role in infection and inflammation. J Leukoc Biol. 81, 584-592 (2007).
  16. Ziegler-Heitbrock, L. Macrophages: Biology and Role in the Pathology of Diseases. , Springer. 3-36 (2014).
  17. Dimitriadis, G., et al. Evaluation of glucose transport and its regulation by insulin in human monocytes using flow cytometry. Cytometry A. 64, 27-33 (2005).
  18. Fu, Y., Maianu, L., Melbert, B. R., Garvey, W. T. Facilitative glucose transporter gene expression in human lymphocytes, monocytes, and macrophages: a role for GLUT isoforms 1, 3, and 5 in the immune response and foam cell formation. Blood Cells Mol Dis. 32, 182-190 (2004).
  19. Stibenz, D., Buhrer, C. Down-regulation of L-selectin surface expression by various leukocyte isolation procedures. Scand J Immunol. 39, 59-63 (1994).
  20. Ahmed, N., Kansara, M., Berridge, M. V. Acute regulation of glucose transport in a monocyte-macrophage cell line: Glut-3 affinity for glucose is enhanced during the respiratory burst. Biochem J. 327 (Pt 2), 369-375 (1997).
  21. Cutfield, W. S., Luk, W., Skinner, S. J., Robinson, E. M. Impaired insulin-mediated glucose uptake in monocytes of short children with intrauterine growth retardation). Pediatr Diabetes. 1, 186-192 (2000).
  22. Yoshioka, K., et al. A novel fluorescent derivative of glucose applicable to the assessment of glucose uptake activity of Escherichia coli. Biochim Biophys Acta. 1289, 5-9 (1996).
  23. Speizer, L., Haugland, R., Kutchai, H. Asymmetric transport of a fluorescent glucose analogue by human erythrocytes. Biochim Biophys Acta. 815, 75-84 (1985).
  24. Palmer, C. S., et al. Increased glucose metabolic activity is associated with CD4+ T-cell activation and depletion during chronic HIV infection. AIDS. 28, 297-309 (2014).
  25. Palmer, C. S., Ostrowski, M., Balderson, B., Christian, N., Crowe, S. M. Glucose metabolism regulates T cell activation, differentiation, and functions. Frontiers in immunology. 6, (2015).
  26. Palmer, C. S., et al. Regulators of glucose metabolism in CD4 and CD8 T cells. International reviews of immunology. , 1-12 (2015).
  27. Palmer, C. S., Crowe, S. M. How does monocyte metabolism impact inflammation and aging during chronic HIV infection? AIDS research and human retroviruses. 30, 335-336 (2014).
  28. McFadden, K., et al. Metabolic stress is a barrier to Epstein-Barr virus-mediated B-cell immortalization. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113, E782-E790 (2016).
  29. Gamelli, R. L., Liu, H., He, L. K., Hofmann, C. A. Augmentations of glucose uptake and glucose transporter-1 in macrophages following thermal injury and sepsis in mice. Journal of leukocyte biology. 59, 639-647 (1996).
  30. Yin, Y., et al. Glucose Oxidation Is Critical for CD4+ T Cell Activation in a Mouse Model of Systemic Lupus Erythematosus. Journal of immunology. , 80-90 (2016).
  31. Yang, Z., Matteson, E. L., Goronzy, J. J., Weyand, C. M. T-cell metabolism in autoimmune disease. Arthritis research & therapy. 17, 29(2015).
  32. Yin, Y., et al. Normalization of CD4+ T cell metabolism reverses lupus. Science translational medicine. 7, 274ra218(2015).
  33. Barbera Betancourt, A., et al. Inhibition of Phosphoinositide 3-Kinase p110delta Does Not Affect T Cell Driven Development of Type 1 Diabetes Despite Significant Effects on Cytokine Production. PloS one. 11, e0146516(2016).
  34. Barron, C. C., Bilan, P. J., Tsakiridis, T., Tsiani, E. Facilitative glucose transporters: Implications for cancer detection, prognosis and treatment. Metabolism: clinical and experimental. 65, 124-139 (2016).
  35. Hegedus, A., Kavanagh Williamson, M., Huthoff, H. HIV-1 pathogenicity and virion production are dependent on the metabolic phenotype of activated CD4+ T cells. Retrovirology. 11, 98(2014).
  36. Taylor, H. E., et al. Phospholipase D1 Couples CD4+ T Cell Activation to c-Myc-Dependent Deoxyribonucleotide Pool Expansion and HIV-1 Replication. PLoS Pathog. 11, e1004864(2015).
  37. Loisel-Meyer, S., et al. Glut1-mediated glucose transport regulates HIV infection. Proc Natl Acad Sci U S A. 109, 2549-2554 (2012).
  38. Palmer, C. S., et al. Emerging Role and Characterization of Immunometabolism: Relevance to HIV Pathogenesis, Serious Non-AIDS Events, and a Cure. J Immunol. 196 (11), 4437-4444 (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

2 NBDGGating CD14 CD16HIV

מאמרים קשורים