הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

חקירות על קומפלקס Ga (III) של EOB-DTPA ו שלה

9.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/54334

⸱

17 באוגוסט 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

במאמר זה

סיכום

הליך הבידוד של EOB-DTPA ואת complexation הבא עם Ga הטבעי (III) ו -68 Ga מוצגת במסמך זה, כמו גם ניתוח מעמיק של כל התרכובות והחקירות יעילות תיוג, היציבות במבחנה ומי octanol / n- מקדם חלוקה של מתחם רדיואקטיבי.

תקציר

אנו להדגים שיטה לבידוד של EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-טריס (carboxymethyl) -4- (ethoxybenzyl) חומצה -undecanedioic) מ שלה אלוקים (III) מורכבים ופרוטוקולים הכנת שאינם רדיואקטיביים, כלומר, טבעי Ga (III) כמו גם רדיואקטיבי 68 Ga מורכב הרומן שלה. ליגנד כמו גם Ga (III) מורכבים התאפיינו תהודה מגנטית גרעינית (NMR) ספקטרוסקופיה, ספקטרומטריית מסה ניתוח יסודי. 68 Ga הושג על ידי שיטה elution תקן מגנרטור Ga 68 Ge / 68. ניסויים להעריך את היעילות 68 Ga-תיוג של EOB-DTPA ב- pH 3.8-4.0 בוצעו. טכניקות ניתוח הוקמה רדיו TLC (כרומטוגרפיה בשכבה דקה) ו HPLC רדיו (כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים) שימשו כדי לקבוע את טוהר radiochemical של נותב. כתוצאה החקירה הראשונה של 68 Ga קליעים נותבים 'lipophilicity הפצת octanol / מים n-מקדם n של 68 Ga מינים נוכחים פתרון pH 7.4 נקבע על פי שיטת חילוץ. מדידות יציבות במבחנה של נותב באמצעי תקשורת השונה ב- pH הפיזיולוגי בוצעו, חושף תעריפים שונים של ריקבון.

מבוא

חומצת Gadoxetic, שם נפוצה למתחם ה (III) של ליגנד EOB-DTPA 1, היא חומר ניגוד תדיר הדמיה בתהודה מגנטית כיס (MRI). 2,3 בשל הספיגה הספציפית שלה על ידי hepatocytes הכבד אחוז הגבוה של הפרשת כיס הוא מאפשר הלוקליזציה של נגעי מוקדים וגידולים בכבדים. 2-5 עם זאת, הגבלות מסוימות של טכניקת MRI (למשל, רעילות של חומר הניגוד, תחולה מוגבלת בחולים עם שתלים קלסטרופוביה או מתכת) קוראים לשים כלי אבחון אלטרנטיביים .

טומוגרפיה פוזיטרונים (PET) היא שיטת הדמיה מולקולרית, שבה כמות קטנה של חומר רדיואקטיבי (נותב) מנוהלת, שעליו ההפצה שלה בגוף נרשמה על ידי סורק PET. PET 6 הוא שיטה דינמית המאפשרת גבוה במרחב ובזמן הרזולוציה של תמונות כמו גם כימות של תוצאות, מבלילהתמודד עם תופעות הלוואי של חומר ניגוד MRI. ערך אינפורמטיבי של מידע מטבולית המתקבל ניתן להגדיל עוד יותר על ידי שילוב עם נתונים אנטומיים המתקבלים בשיטות הדמיה נוספות, כמו רוב מושגת בדרך כלל על ידי הדמיה היברידית עם טומוגרפיה ממוחשבת (CT) ב סורקי PET / CT.

המבנה הכימי של נותב מתאים PET חייב לכלול איזוטופ רדיואקטיבי המשמש פולט פוזיטרון. יש פוזיטרונים תוחלת חיים קצרה מאז הם כמעט מייד להשמיד עם אלקטרונים של הפגזים האטומים של רקמה הסובבת. על ידי השמדת שני פוטונים גמא 511 keV עם בכיוון ההפוך של התנועה נפלטים, הנרשמות על ידי סורק PET. 7,8 כדי לגבש נותב, nuclides PET עשוי להיות מחויב קוולנטית מולקולה, כפי שנהוג ב 2-deoxy- 2- [18 F] fluoroglucose (FDG), נותב PET בצורה המקיפה ביותר בשימוש. 7 עם זאת, נוקליד עלול גם ליצור קשרים קואורדינטיבית כדי הליגנדים אחד או כמה (למשל, [68 Ga] 9,10 -DOTATOC) או להיות מיושם גם מלחים אורגניים מומסים (למשל, [18 F] נתרן פלואוריד 11). בסך הכל, את המבנה של נותב קריטי, מאחר שהוא קובע את ההתנהגות biodistribution, מטבוליזם והפרשה שלה.

נוקליד PET מתאים צריך לשלב מאפיינים נוחים כמו אנרגית פוזיטרונים נוחה וזמין כמו גם זמן מחצית חיים נאותים לחקירה המיועדת. נוקליד 68 Ga נעשה כוח חיוני בתחום PET בשני העשורים האחרונים. 12,13 זאת בעיקר בשל זמינותו באמצעות מערכת גנרטור, אשר מאפשרת תיוג באתר באופן עצמאי מהסביבות של הציקלוטרון. בשנת גנרטור, האמא נוקליד 68 Ge נספג על עמודה שממנה נוקליד הבת 68 Ga הוא eluted ובהמשך שכותרתו אל chelator מתאים. 6,14 מאז 68 נוקליד Ga קיים בתור trivalקטיון ent בדיוק כמו אלוקים (III) 10,13, chelating EOB-DTPA עם 68 Ga במקום תניב קומפלקס עם אותו מטען שלילי הכולל כחומצה gadoxetic. בהתאם לכך, 68 כי נותבה Ga יכולה להשתלב סגוליות כבדות מאפיין דומות עם התאמותיו הדמית PET. למרות חומצת gadoxetic נרכשה ו מנוהלת כמו מלח disodium, בהקשר הבא נתייחס אליו כאל אלוקים [EOB-DTPA] וכדי במתחם שאינו רדיואקטיבי Ga (III) כמו Ga [EOB-DTPA], או 68 Ga [ EOB-DTPA] במקרה של רכיב רדיואקטיבי למען הנוחות.

כדי להעריך את התאמתם כמו קליעים נותבים עבור PET, מתחמי מתכת רדיואקטיבית צריכים להיבדק בהרחבה במבחנה, in vivo או ניסויי vivo לשעבר ראשון. כדי לקבוע את התאמתו של בעיה רפואית בהתאמה, מאפיינים נותבו שונים כמו התנהגות biodistribution ופרופיל סיקול, יציבות, סגולי איברי תא או tissuדואר ספיגת צריך להיחקר. בשל האופי שלהם לא פולשנית, קביעות במבחנה מבוצעות לרוב לפני ניסויי in vivo. זה להניח שגילויי DTPA ונגזרותיו הם ההתאמה מוגבלת chelators עבור 68 Ga בשל קומפלקסים אלה חסר אדישות קינטית, וכתוצאה מכך ריקבון מהיר וזהובה כאשר מנוהל in vivo. 14-20 זו נגרמת בעיקר על ידי apo- transferrin מתנהג כמו מתחרה עבור 68 Ga בפלסמה. אף על פי כן, חקרנו נותב חדש זו בדבר היישום האפשרי שלה בתחום הדמית כיס, שבו מידע אבחון עשוי להינתן בתוך דקות לאחר הזרקה 3,4,21-23, ובכך לא בהכרח הדורשים יציבות נותב לטווח ארוך. לשם כך אנחנו מבודדים EOB-DTPA מחומצה gadoxetic ובתחילה ביצע את complexation עם Ga טבעי (III), אשר קיים כפי תערובת של שני איזוטופים יציבים, 69 Ga ו -71 Ga. המתחם ובכך השיג שמש כסטנדרט שאינו רדיואקטיביים עבור קלאציה הבא של 68 Ga. השתמשנו הוקם שיטות ובמקביל הערכנו התאמתו לקביעת יעילות 68 Galabeling של EOB-DTPA ולחקור את lipophilicity של נותב החדש 68 Ga ויציבותה מדיה שונה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכנת EOB-DTPA ואת Ga [EOB-DTPA]

זהירות: יש להתייעץ כל גיליונות נתוני בטיחות חומרים רלוונטיים (MSDS) של ממיסים אורגניים בשימוש, חומצות alkalines לפני השימוש. ביצוע כל הצעדים במנדף ולהשתמש בציוד מגן אישי (משקפי מגן, כפפות, חלוק מעבדה).

  1. בידוד של EOB-DTPA מחומצה gadoxetic
    1. שים 3 מ"ל של 0.25 M פתרון בזריקות חומצה gadoxetic לתוך בקבוק. הוספת 500 מ"ג (5.6 מילימול) של חומצה אוקסלית לפתרון הזז.
    2. לאחר ערבוב במשך שעה 1, לסנן את ההשעיה דרך frit באמצעות לחץ מופחת. שטפו את שלוש פעמים שאריות עם 3 מ"ל מים, בהתאמה.
    3. מערבב את filtrates המימי ולצייד את הפתרון עם אלקטרודת pH. להוסיף 12 M חומצה הידרוכלורית אל התסנין עד pH הוא כ -0.1.
    4. הסר את הממס vacuo להניב שאריות צבע. אחסן תחת גז אינרטי.
    5. שטפו את השאריות ביסודיות (לפחות שלושהפעמים) עם אתיל אצטט להסיר את עודף חומצה אוקסלית. יבש את שאריות האור בריק.
    6. Redissolve שאריות 2 מ"ל מים בטמפרטורת החדר ולאחר מכן לקרר את פתרון באמבט קרח. מבלי להסיר את באמבט הקרח, להוסיף 0.5 dropwise פתרון סודיום הידרוקסיד מימייה M עד להיווצרות הוא ציין מוצק ודביק חסר צבע.
    7. הסר את המים על ידי decantation. שטפו את פי שני מוצק עם 1 מ"ל של מים קרים. ייבש את מוצק vacuo להניב שבר המוצר הראשון.
    8. לבודד חלק המוצר השני מן שברים בשילוב של מים יצק באמצעות כרומטוגרפיה בעמודה (סיליקה, מתנול / מים 4/1). 24 הסר את הממס האור בריק.
    9. אם כן השיג את מוצק אינו לבן טהור, redissolve זה ב 1 מ"ל של מים, מוסיפים 10 מ"ל של אתנול ולאחר מכן 10 מ"ל של אתר diethyl כדי לזרז את המוצר. סינון דרך frit באמצעות לחץ מופחת ויבש vacuo.
    10. לְשַׁלֵבהן שברים מוצקים של EOB-DTPA ולבצע ספקטרוסקופיות תמ"ג, 25 ספקטרומטריה 26 ובסיסי 27 ניתוחים.
  2. סינתזה של Ga [EOB-DTPA]
    זהירות: חנות מוצק Ga (III) כלוריד תחת אווירה יבש אינרטי, מאז במגע עם אוויר, לחות או ריקבון גריז מתרחש, וכתוצאה מכך אדי מאכל היווצרות של זיהומים צהוב, חום או שחור.
    1. כן פתרון 0.11 M מניות על ידי המסת 1.94 גרם (11.0 mmol) של Ga (III) הכלוריד 100 מ"ל מים. לדלל 1 מ"ל של 25% פתרון אמוניה מימית עם 4 מ"ל מים.
    2. ממיסים 80 מ"ג (0.15 מילימול) של EOB-DTPA בבקבוק 10 מ"ל מים. ואם צריך מחממים הממס להשיג פירוק מוחלט.
    3. להוסיף 1.4 מ"ל (0.15 מילימול) של הפתרון כלוריד המניות Ga (III). לצייד את הבקבוק עם בוחש ו-אלקטרודה pH. הוסף dropwise פתרון אמוניה מימית מדוללת עד ה- pH של התמיסה הוא כ 4.1. מערבבים ב roטמפרטורת om למשך 30 דקות.
    4. הסר את הממס האור בריק. מניח את השאריות בבקבוק, מצויד stillhead עם צוואר בצד מרכזי ומקביל. לצייד את הצוואר המרכזי באצבע קירור ואת הצוואר בצד עם לשקע משאבת ואקום
    5. מחמם את השאריות בלחץ מופחת (125 ° C, 0.6 mbar). מעת לעת להסיר אמוניום כלוריד מעודנת (נראה כמו ציפוי לבן של משטח הזכוכית) מאצבע הקירור ועדיין הראש, כמו גם מן החלקים העליונים של הבקבוק עם מטלית רטובה מעט. משך התהליך עד אין היווצרות גלויה של סובלימציה חדש.
    6. כדי להסיר עקבות סופיות של אמוניום כלוריד לשטוף את השאריות שלוש פעמים עם 0.5 מיליליטר של מתנול חם, בהתאמה. יבש את שאריות צבע האור בריק. בצע ספקטרוסקופיות תמ"ג, 25 26 ספקטרומטריה ובסיסית 27 ניתוחים.

2. נוהל סימון כללי

זהירות: כל לשעברperiments כולל קשר ישיר או עקיף עם חומרים רדיואקטיביים חייבת להתבצע על ידי אדם מיומן בלבד. אנא להשתמש בציוד מיגון מתאים. איסוף כל פסולת רדיואקטיבית בנפרד ולאחסן ולהיפטר בהתאם לתקנות תקפות.

  1. Elution של הגנרטור
    הערה: 40 MCI 68 Ge / 68 Ga גנרטור עם נוקליד אמא כפותות תחמוצת על סיליקה dodecyl-3,4,5-trihydroxybenzoate היה בשימוש. Elution וטיהור יכול להתבצע באופן ידני או, כפי שהיה במקרה בהליך זה, כתהליך אוטומטי משולב באמצעות משאבת peristaltic ויחידת מנפק.
    1. הכינו פתרונות של 5.5 M, 1.0 M ו- 0.05 חומצה הידרוכלורית M. כן פתרון של 5.0 M נתרן כלורי המכיל 25 μl של 5.5 חומצה הידרוכלורית M לכל מיליליטר. הכן פתרון חיץ של pH 4.6 ידי שילוב 4.1 נתרן אצטט גרם, 1 מ"ל HCl (30%) ו -2.5 חומצה אצטית קרחונית מ"ל דילול תערובת עם מים 50 מ"ל.
    2. preCondition PS-H + מחסנית ידי שטיפתו לאט עם 1 מ"ל של 1.0 M חומצה הידרוכלורית ובהמשך 5 מ"ל מים.
    3. Elute בעמודה סיליקה של הגנרטור עם 4 מ"ל 0.05 M HCl. 12 טען את 68 Ga eluate על מחסנית PS-H +.
    4. רוקן את המחסנית עם 5 מ"ל של מים ולאחר מכן לייבש אותו עם 5 מ"ל של אוויר. Elute 68 Ga ממחסנית עם 1 מ"ל 5.0 M פתרון נתרן כלורי acidified. 28
  2. תיוג של EOB-DTPA עם 68 Ga
    1. ממיסים 1 מ"ג (1.9 μmol) של EOB-DTPA ב 1 מ"ל מים. מפתרון זה לקחת 100 μl (0.19 μmol) לדלל אותם עם 9.9 מ"ל מים כדי להכין 19 מיקרומטר (10 מיקרוגרם / מ"ל) פתרון המניות של EOB-DTPA.
    2. הסר 50 μl (שווה 22-29 MBq) של תמיסה המכילה 68 Ga ולשים לתוך בקבוקון. הוסף 50 μl (0.5 מיקרוגרם) של פתרון המניות 19 מ"מ של EOB-DTPA ו -300 μl of חיץ להעלות את ה- pH ל 4.0. Shake בקצרה דגירה הפתרון בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות. הסרת aliquot של 1-5 μl ולשים HPLC או ניתוח TLC.
    3. ביצוע ניתוח HPLC רדיו על היפוך פאזות (RP) טור C18 29 השתמש בשלב הנייד הבא:. א '- מים / חומצת trifluoroacetic (99.9% / 0.1%), ב' - אצטוניטריל / חומצת trifluoroacetic (99.9% / 0.1%), שיפוע : 06 דק '80% A → A 0% (0.5 מ"ל / דקה), 610 0% דק (0.5 mL / min).
    4. קבע את עוצמות השיא של אותות הרדיו HPLC כאזור תחת עקומה. חישוב התשואה תיוג כמו טוהר radiochemical (RCP) של נותב כדלקמן:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (א Ga Ga + A-EOB-DTPA) ∙ 100%
      Ga-EOB-DTPA: שטח מתחת עקומה של 68 Ga [EOB-DTPA]
      Ga: שטח מתחת עקומה של חינם 68 Ga

יעילות תיוג 3.

  1. בצע את הליכי תיוג כמו לתארד בסעיף 2. השתמש מגוון עקבי של התחלת פעילות של 68 Ga eluate, למשל, 22-29 MBq (40-140 μl, תלוי את הרעננות של eluate).
  2. להוסיף את הכמות הנדרשת של פתרון חיץ כדי להתאים את ה- pH ל 3.8-4.0 (40-190 μl, תלוי בנפח של 68 Ga eluate). להוסיף את הכמות הנדרשת של פתרון המניות ליגנד (10-70 μl של פתרון 19 מ"מ).
  3. מוסיפים את הסכומים הדרושים של מים כדי להתאים את ההיקף הכולל של כל בדיקה תיוג ל -1.75 מ"ל. מערבבים היטב ולתת המדגם לעמוד במשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. ביצוע ניתוח HPLC כמתואר בסעיף 2 לקבוע את תשואת התיוג.
  4. בצע את הליכי תיוג עם כמויות של ליגנד בין 0.1 מיקרוגרם ו -0.7 מיקרוגרם בצעדים של 0.1 מיקרוגרם. בצע ניסויים triplicates עבור כל ריכוז ליגנד. חישוב התשואה הממוצעת וסטיית תקן.

4. במבחנה יציבות

  1. p הכלליrocedure והכנות
    1. ממיסים טבלית בופר פוספט (PBS) ב 200 מ"ל של מים ללא יונים להכין פתרון מניות PBS עם ריכוז פוספט של 10 מ"מ.
    2. בצע תיוג של 22-29 MBq 68 Ga עם 0.5 μl של פתרון המניות EOB-DTPA, כמפורט בסעיף 2. בהתאם לנפח של 68 eluate Ga, להתאים את כמות חיץ, כמתואר בסעיף 3. משוך דגימות של פתרון תיוג המכיל 6-12 MBq של נותב לבצע מדידות יציבות.
    3. ביצוע ניתוח רדיו TLC על צלחות אלומיניום מצופות ג'ל סיליקה 80 מ"מ באמצעות 0.1 נתרן ציטרט מימית M כמו eluent ולנתח את הצלחות עם סורק רדיואקטיביות TLC. 30 קביעת העוצמות של אותות TLC כאזור תחת עקומה. חשב את RCP של נותב כדלקמן:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (א Ga-חינם + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-קולואידים) ∙ 100%
      Ga-EOB-DTהרש"פ: שטח מתחת עקומה של 68 Ga [EOB-DTPA]
      Ga-חינם: שטח מתחת עקומה של חינם 68 Ga
      Ga-colloidal: שטח מתחת עקומה של קולואידים 68 Ga
    4. חישוב RCP t / RCP 0 עבור כל נקודת זמן. מגרש את RCP הסטנדרטי ובכך לעומת פרש שעות מאז דק 'נקודת מצא t = 0.
      T RCP = RCP של 68 Ga [EOB-DTPA] בזמן t נקודת זמן.
      RCP 0 = RCP של 68 Ga [EOB-DTPA] בזמן t = 0 דקות.
  2. יציבות בופר פוספט (א)
    1. עד 65 μl של פתרון תיוג להוסיף 150 μl של פתרון המניות PBS ו 60 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) להעלות את ה- pH ל 7.4. מערבבים היטב.
    2. הסרת aliquot של 1-5 μl לבצע ניתוח TLC ( "נקודת מוצא"). מיד לאחסן הפתרון באינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס ולהסיר aliquots לבצע ניתוח TLC ב לייצגative מועדים לפי שעון מעל 3 שעות.
  3. יציבות כלפי עודף של apo -transferrin PBS (B)
    1. 120 μl של פתרון תיוג להוסיף 50 μl של פתרון המניות PBS ו 430 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) להעלות את ה- pH ל 7.4. הוסף 40 μl של פתרון של apo -transferrin (25 מ"ג / מ"ל). מערבבים היטב.
    2. הסרת aliquot של 1-5 μl לבצע ניתוח TLC ( "נקודת מוצא"). מיד לאחסן הפתרון באינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס ולהסיר aliquots לבצע ניתוח TLC בנקודות נציג זמן מעל 3 שעות.
  4. יציבות בסרום אדם (C)
    1. 500 μl של נסיוב אדם להוסיף 25 μl של פתרון תיוג ו -45 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) להעלות את ה- pH ל 7.4. מערבבים היטב.
    2. הסרת aliquot של 1-5 μl לבצע ניתוח TLC ( "נקודת מוצא"). מיד לאחסן הפתרון בתוך incuבטור ב 37 מעלות צלזיוס ולהסיר aliquots לבצע ניתוח TLC בנקודות נציג זמן מעל 3 שעות.

קביעת 5. מקדם הפצת LogD

  1. בצע את הליכי תיוג כמפורט בסעיף 2. 50 μl של פתרון תיוג להוסיף 20 μl של פתרון המניות PBS ו -170 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) כדי להעלות את ה- pH ל 7.4.
  2. למשוך עד 200 μl מאותו פתרון והכניס אותו לתוך פלסטיק V-בקבוקון. הוסף 200 μl של octanol n-. סגור את בקבוקון מערבולת למשך 2 דקות. ואז צנטריפוגות מדגם ב 1,600 XG במשך 5 דקות.
  3. הסר triplicates של 40 μl משלב n -octanol ואת השלב מהימי כל ולשים אותם בתוך בקבוקוני V נפרדים. היזהר שלא לערבב את השכבות.
  4. למדוד את הפעילות של כל דגימה בתוך דלפק היטב גמא למשך 30 שניות. עבור כל דגימה מייד לחזור על המדידה פעמים ממנו לחשב את t Ᾱ הפעילות הממוצע בספירה לדקה (CPM). יש לרשום את t כך זכו Ᾱ, W1, Ᾱ t, t W2 ו Ᾱ, W3 (פעילויות בדגימות מימית) ו Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (פעילויות octanol n-) יחד עם בהתאמה זמן נקודת t נחישותם.
  5. הגדר את נקודת הזמן של המדידה של המדגם האחרון כמו t 0. לקבוע ולפרט Δt בדקות ידי חישוב Δt = tt 0. בצע תיקון ריקבון של t Ᾱ, לפי הנוסחה הבאה:
    Ᾱ 0 = t Ᾱ · 2 (Δt / 68 דק ').
  6. חישוב Ᾱ 0, W כממוצע של Ᾱ 0, W1, 0 Ᾱ, W2 ו Ᾱ 0, W3 וכן Ᾱ 0, O כממוצע של Ᾱ 0, O1, 0 Ᾱ, O2 ו Ᾱ 0, O3. חישוב logD לפי הנוסחה הבאה:
    logD = יומן [(Ᾱ 0, O · 40 מיקרוגרם) / (Ᾱ 0, W · 33 מיקרוגרם)].
  7. בצעו את הניסוי כולו ב triplicates ולחשב את ממוצע logD יחד עם סטיית התקן שלה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ליגנד EOB-DTPA ואת Ga שאינו רדיואקטיבי (III) מורכבים נותחו באמצעות 1 H ו- 13 C {1} H ספקטרוסקופיה NMR, ספקטרומטריית מסה ניתוח יסודי. התוצאות המפורטות בטבלה 1 ו מתואר איורים 1-6 לאמת את הטוהר של חומרים.

Elution של הגנרטור 68 Ge / 68 Ga הניבו פתרונות של ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

EOB-DTPA נגיש באמצעות סינתזה רבה שלב 33 אבל יכול באותה מידה להיות מבודד חומר ניגוד זמין המכיל חומצת gadoxetic. לשם כך, יון המרכזי אלוקים (III) ניתן זירז עם עודף של חומצה אוקסלית. לאחר הסרת ה (III) אוקסלט וחומצה אוקסלית ליגנד יכול להיות מבודד על ידי משקעים במים קרים ב- pH 1.5. עם זאת, על מנת לשפר את התשואות עמודה כרומטוגרפיה של תסנין יכול להתבצע במקום או כהליך מעקב. אחת מהשיטות מניב ליגנד טהור אנליטית ב סך התשואות של 70% (איורים 1-3, טבלה 1).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

למחברים אין אישורים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
פרימוביסטבאייר-0.25 מ'
גליום (III) כלורידסיגמא-אולדריץ' ושות'
450898 מים (דה-יונים)-ציוד להסרת יוניזציה של מי ברז על ידי Auma-Tec GmbH
חומצה הידרוכלורית 12 MVWR20252.29
נתרן הידרוקסידPolskie Odczynniki Chemiczne S.A.
חומצה אוקסליתSigma-Aldrich Co.75688
אתיל אצטטBrenntag GmbH10010447
סיליקה ג'לMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0.063-0.2  מ"מ
TLC סיליקה ג'ל 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
מתנולVWR20903.55
אתנולBrenntag GmbH10018366
eiethyletherVWR23807.468מאוחסן מעל צלחות KOH
תמיסת אמוניה (25%)VWR1133.1
אלקטרודה pHVWR662-1657
יחידת ערבוב וחימוםHeidolph505-20000-00
משאבתIlmvac GmbH322002
ספקטרומטר NMR בעיצוב
Bruker Coorporation-UltraShield 400
ספקטרומטר מסהThermo Fisher Scientific Inc.-
מנתח יסודותHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVectorEA 3000 CHNS
מים מדווטים D2Oeuriso-topD21499.90% D
<חזק>חומר/ציוד הנדרש להליכי תיוג
68Ge/68Ga מחוללאיזוטופ ITG טכנולוגיות איזוטופ מערכתGmbH A150
Scintomics GmbH-Variosystem
חומצה הידרוכלורית 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
מים (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
נתרן כלורי (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
נתרן אצטט (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
חומצה אצטית קרחונית (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
נתרן ציטראט דיהידראטVEB Laborchemie Apolda10782>98.5%
PS-H+ מחסנית (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.T2036
PBS מאגר (טבליות)סיגמא-אולדריץ' ושות'79382
סרום אנושיסיגמא-אולדריץ' ושות'H4522מצלוחיות פלזמה AB זכר אנושי
, עמודים, etc.מותאם אישית
אלקטרודת pHKnick Elektronische Messgerä te GmbH & Co. KG765-Set
משאבה בינארית (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
גלאי UV Vis (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
גלאי רדיואקטיבי (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP עמודהטכנולוגיות כרומטוגרפיה מתקדמות בע"מACE-1110-1503/A100528
בקבוקוני זכוכית HPLCGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
בקבוקוני פלסטיק של פיפטהאפנדורף
Sarstedt AG & Co.6542.007
בקבוקוני פלסטיקGreiner Bio-One International GmbH717201
activimeterMED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH-Isomed2010
פינצטהחממה בעיצוב
Heraeus Instruments GmbHמערבולת מערבולת 51008815
צנטריפוגהHeraeus Instruments GmbH75003360
מונה באר גמא MEDNuklear-Medizintechnik Dresden GmbH-Isomed2100
מים לכרומטוגרפיהMerck KGaA1.15333.2500
אצטוניטריל לכרומטוגרפיהMerck KGaA1.00030.2500
חומצה טריפלואורואצטיתסיגמא-אולדריץ'91707
של סורק רדיואקטיביות TLCIsotopenmessgerä te GmbHB00003875מצויד בגלאי פלסטיק בטא
810925429מותאם אישית משאבה ומתקן Garching עיצוב מותאם אישית Fisons-Whirlimixer בדיקת קרניים

מקורות

  1. Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
  2. Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln. Radiologe. 44, 1185(2004).
  3. Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. Primovist, Eovist - what to expect. J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).
  4. Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
  5. Leonhardt, M., et al. Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters. Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).
  6. Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease. J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).
  7. Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. Molecular Imaging with PET. Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).
  8. Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. Radiometals for Combined Imaging and Therapy. Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).
  9. Henze, M., et al. PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas. J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).
  10. Hofmann, M., et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).
  11. Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. Fluorine-18: a new isotope for bone scanning. J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).
  12. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium Radiopharmaceutical Chemistry. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).
  13. Rösch, F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).
  14. Liu, S. The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals. Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).
  15. Haubner, R., et al. Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).
  16. Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function. Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).
  17. Chauhan, K., et al. 68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging. Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).
  18. Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators. Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).
  19. Clevette, D. J., Orvig, C. Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium. Polyhedron. 9, 151-161 (1990).
  20. Prinsen, K., et al. Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography. Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).
  21. Vogl, T. J., et al. Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA. Radiology. 200, 59-67 (1996).
  22. Reimer, P., et al. Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence. Radiology. , 177-183 (1996).
  23. Ba-Ssalamah, A., et al. MRT der Leber. Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).
  24. Scott, R. P. W. Journal of Chromatography Library. 22A, Elsevier Scientific Publishing Co. A137-A160 (1983).
  25. Reichenbaecher, M., Popp, J. Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , 1st, B. G. Teubner Verlag. Wiesbaden. (2007).
  26. Gross, J. H. Mass Spectrometry: A Textbook. , Springer. (2004).
  27. Ma, T. S., Rittner, R. C. Modern Organic Elemental Analysis. , Marcel Dekker, Inc. (1979).
  28. Mueller, D., et al. Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity. Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).
  29. Roberts, T. R. Radio-column chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).
  30. Roberts, T. R. Radio-thin-layer chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).
  31. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium radiopharmaceutical chemistry. Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).
  32. Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates. EJNMMI Res. 2, 13(2012).
  33. Schmitt-Willich, H., et al. Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).
  34. 68Ga generator for positron emission tomography. , DE102010037964B3 (2012).
  35. Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates? ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).
  36. Baur, B., et al. Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep. Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).
  37. Boros, E., et al. RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga. Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).
  38. Beck, W. S. Hematology. , 5th, MIT press. Cambridge, Massachusetts. (1998).
  39. Patel, V., Morrissey, J. Practical and Professional Clinical Skills. , 1, Oxford University Press Inc. New York. (2001).
  40. Bartke, A., Constanti, A. Basic Endocrinology. , 1, CRC Press. (1998).
  41. Bernstein, L. R. Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium. Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).
  42. Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. 67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components. Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).
  43. Dumont, R. A., et al. Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856. J. Nucl. Med. 52, 1498(2011).
  44. Pohle, K., et al. 68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process. Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).
  45. Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3. Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

סומן גליום-68קומפלקס EOB-DTPAסימון רדיואקטיביאנליזה באמצעות Radio HPLCאנליזה באמצעות Radio TLCמקדם חלוקהיציבות במבחנה (In Vitro)בידוד ליגנדטוהר רדיוכימי
חקירות על קומפלקס Ga (III) של EOB-DTPA ו שלה
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.