הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

יעילות אנטי סרטנית של טיפול פוטודינמי עם ריאות חלקיקים סרטן ממוקד

8.3K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/54865

⸱

1 בדצמבר 2016

 ,  , 
1Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Seoul National University Bundang Hospital, 2College of Pharmacy, Kangwon National University, 3Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Seoul National University College of Medicine

במאמר זה

סיכום

טיפול פוטודינמי (PDT) הוא בחירה חלופית לטיפול בסרטן ריאות. כדי להגביר את ההשפעה הטיפולית של PDT, פותחו ננו-חלקיקים ממוקדי סרטן ריאות בשילוב עם כימותרפיה. הן במבחנה והן ב-vivo הוערכו יעילות אנטי-סרטנית של PDT עם ננו-חלקיקים מוכנים.

תקציר

טיפול פוטודינמי (PDT) הוא שיטה לא פולשנית ולא כירורגית המייצגת בחירה חלופית אטרקטיבית לטיפול בסרטן הריאות. רגישים לאור מצטברים באופן סלקטיבי ברקמת הגידול ומובילים למוות של תאי הגידול בנוכחות חמצן ואורך הגל המתאים של האור.

כדי להגביר את ההשפעה הטיפולית של PDT, פיתחנו ננו-חלקיקים ממוקדי סרטן ריאות עם רגישות לאור ואנטי-סרטן. יושמו גם מיקוד פסיבי מבוסס אפקט חדירות ושימור משופר (EPR) וגם מיקוד אקטיבי מבוסס אינטראקציה של חומצה היאלורונית-CD44. CD44 הוא קולטן חומצה היאלורונית ידוע המוצג לעתים קרובות כסמן ביולוגי לסרטן ריאות של תאים לא קטנים.

בנוסף, שילוב של PDT וכימותרפיה אומץ במחקר הנוכחי. רעיון שילוב זה עשוי להגביר את ההשפעות הטיפוליות נגד סרטן ולהפחית תגובות שליליות.

בחרנו בהיפוקרלין B (HB) כרגיש לאור במחקר זה. דווח כי HB גורם ליעילות אנטי-סרטנית גבוהה יותר של PDT בהשוואה לנגזרות המטופורפירין1. פקליטקסל נבחרה כתרופה האנטי-סרטנית מכיוון שהיא הוכחה כטיפול פוטנציאלי לסרטן ריאות2.

היעילות האנטי-גידולית של תמיסת רגישות לאור (HB), ננו-חלקיקי חומצה היאלורונית-סרמיד עטופים בפוטו-רגישות לאור (HB-NPs), וננו-חלקיקי חומצה היאלורונית-סרמיד עטופים בחומר רגיש לאור ואנטי-סרטן (פקליטקסל) (HB-P-NPs) לאחר PDT הושוו הן במבחנה והן ב-vivo. הוערכו הפוטוטוקסיות במבחנה בתאי A549 (אדנוקרצינומה של ריאות אנושיות) והיעילות האנטי-גידולית in vivo בעכברים נושאי גידול A549.

קבוצת הטיפול ב-HB-P-NP הראתה את ההשפעה האנטי-סרטנית היעילה ביותר לאחר PDT. לסיכום, ה-HB-P-NPs שהוכנו במחקר הנוכחי מייצגים מערכת אספקת רגישות לאור פוטנציאלית וחדשנית בטיפול בסרטן ריאות עם PDT.

מבוא

טיפול פוטודינמי (PDT) מורכב משלושה גורמים עיקריים: רגישים לאור, אור וחמצן. PDT מדווח כטיפול מבטיח לסוגי סרטן שונים3. כאשר הרגישים לאור ניתנים לחולה הסרטן, הם מצטברים באופן סלקטיבי ברקמות הגידול. כאשר מפעילים את אורך הגל הנכון של האור, החמצן הסינגלט התגובתי ביותר ורדיקלים חופשיים אחרים מובילים לנזק לתאי הגידול4.

סרטן ריאות הוצג כאחד היישומים הראשונים ל-PDT בתחילת שנות ה-805. PDT מספק מספר יתרונות בטיפול בסרטן הריאות. מכיוון ש-PDT הוא טיפול לא פולשני ולא כירורגי, זוהי בחירה חלופית אטרקטיבית עבור המטופלים בהם כריתה כירורגית אינה מתאימה.

היו אתגרים רבים להגביר את יעילות מיקוד הסרטן של הרגישים לאור. הגדלת הצטברות רגישות לאור באתרי סרטן והפחתת הצטברות ברקמות תקינות הן מטרות זהות למחקרים המיועדים לסרטן. מגוון מערכות העברת תרופות ממוקדות, כגון פולימרים, ליפוזומים וננו-חלקיקים מאומצים כנשאי רגישות לאור6-8. במחקרים הקודמים שלנו, ננו-חלקיקים הגדילו ביעילות את יכולות מיקוד הסרטן של הרגישים לאור9,10. ננו-חלקיקים הם נשאים אידיאליים המכוונים לסרטן מכיוון שיש להם יכולות מיקוד פסיביות ואקטיביות כאחד. כלי הגידול הדולפים מספקים הזדמנות לנשאים בגודל ננו להצטבר בקלות בגידולים, מה שידוע כאפקט החדירות והשימור המשופר (EPR)11,12. האינטראקציה בין הננו-חלקיקים לקולטנים הספציפיים בתאי הסרטן מאפשרת מיקוד סרטני פעיל. במחקר זה, הכנו ננו-חלקיקים מבוססי חומצה היאלורונית לאינטראקציה עם CD44, קולטן החומצה ההיאלורונית העיקרי המתבטא יתר על המידה בתאי סרטן ריאות13.

כדי למקסם את היעילות האנטי-סרטנית, שילוב של PDT וכימותרפיה אומץ במחקר הנוכחי. תפיסת שילוב זו עשויה לאפשר אפקט טיפולי מוגבר. יתר על כן, מינונים מופחתים הן של הרגישות לאור והן של התרופה האנטי-סרטנית יכולים להפחית את תופעות הלוואי. בחרנו בהיפוקרלין B (HB) כרגיש לאור במחקר הנוכחי. HB מבודד מפטריית המרפא הסינית Hypocrella bambuase. שאנג ועמיתיו דיווחו כי ל-PDT מבוסס HB יש יעילות אנטי-סרטנית גבוהה יותר בהשוואה ל-PDT1 מבוסס נגזרת המטופורפירין. פקליטקסל נבחרה כתרופה האנטי-סרטנית מכיוון שהיא הוכחה כטיפול פוטנציאלי לסוגי סרטן שונים, כולל סרטן ריאות2.

כאן, השווינו את היעילות האנטי-סרטנית של תמיסת רגישות לאור (היפוקלין B, HB), ננו-חלקיקי חומצה היאלורונית-סרמיד עטופים ברגישות לאור (HB-NPs), וננו-חלקיקי חומצה היאלורונית-סרמיד עטופים בחומר רגיש לאור ואנטי סרטן (פקליטקסל) (HB-P-NPs) לאחר PDT. הוערכו הפוטוטוקסיות במבחנה בתאי A549 (אדנוקרצינומה של ריאות אנושיות) והיעילות האנטי-גידולית in vivo בעכברים נושאי גידול A549.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הערה: כל הפרוטוקולים מחקר בבעלי חיים אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת שימוש של האוניברסיטה הלאומית בסיאול Bundang החולים (BA1308-134 / 072-01).

1. סינתזה של חומצה היאלורונית-Ceramide (הארנבת)

  1. Solubilize 12.21 מילימול של חומצה היאלורונית (HA) oligomer ו 9.77 מילימול של אַרְבַּע- הידרוקסיד n -butylammonium (TBA) ב 60 מ"ל מים מזוקקים פעמיים (DDW). מערבבים למשך 30 דקות.
  2. כדי לסנתז והמקשר DS-Y30, לפזר 8.59 מילימול של ceramide DS-Y30 ו 9.45 מילימול של triethylamine ב 25 מ"ל של tetrahydrofuran (THF). מערבבים עם 8.59 מילימול של כלוריד 4-chloromethylbenzoyl ב THF. מערבבים במשך 6 שעות ב 60 מעלות צלזיוס.
  3. ממיסים את 8.10 מסונתז מילימול של HA-TBA ו 0.41 מילימול של מקשר DS-Y30 בתערובת של THF ו אצטוניטריל (4: 1, V / V). מערבבים במשך 5 שעות ב 40 מעלות צלזיוס.
  4. סור זיהומים על ידי סינון עם סוכן מסנן, ולחסל את הממס האורגני על ידי אידוי ואקום. לטהר את המוצר באמצעות קרום דיאליזה (משקל מולקולרי חתוך: 3.5 KDA) ו Lyophilize.

2. הכנת החלקיקים

  1. ממיסים 1 מ"ג של HB ו 1 מ"ג של פקליטקסל ב 0.5 מ"ל של sulfoxide דימתיל (DMSO) ומערבלים עם 0.5 מ"ל של DDW ידי מערבולת ללישת למשך 5 דקות. לאחר מכן, solubilize hace באותה תערובת ידי ערבוב מערבולת במשך 5 דקות נוספות.
  2. על מנת לפסול את, החום ממס על 70 מעלות צלזיוס למשך 4 שעות תחת זרם עדין של גז חנקן.
  3. Resuspend הסרט מורכב הארנבת, HB, ו- paclitaxel עם 1 מ"ל של DDW. מסנן עם מזרק מסנן (0.45 מיקרומטר גודל נקבובי) כדי להסיר תרופות unencapsulated.

3. במבחנה phototoxicity

  1. ספיגה של חלקיקים בשורות תאי סרטן הריאות
    1. כן המכילים בינוני RPMI-1640 10% (V / V) בסרום שור עוברי 1% (w / v) פניצילין, סטרפטומיצין.
    2. A549 זרע תאי צלחות תרבית תאי 24 גם בצפיפות של 1 × 10 5 תאים / טובה (triplicates עבור כלקְבוּצָה). דגירה של 24 שעות ב 37 ° C באווירת אוויר 2 ו -95% 5% humidified CO.
    3. לאחר מצורף התא, להסיר את בינוני לשטוף את התאים על ידי הוספת 1 מ"ל של תמיסת מלח שנאגרו פוספט (PBS).
    4. ממיסים את חלקיקים ב PBS לריכוז סופי של HB 2 מיקרומטר / מ"ל. לאחר מכן, דגירה התאים עם 1 מ"ל של PBS, NPS ריק, HB-NPS, או HB-P-צירופים בכל טוב עבור 4 שעות בחושך.
    5. הסר את כל הפתרון לשטוף את התאים על ידי הוספת 1 מ"ל של קר PBS. חזור על שלב הכביסה פעם נוספת. הוסף בינוני תרבות טרי.
  2. assay כדאיות התא
    1. מניח את צלחת תרבית תאים תחת סיבי PDT (עם 1 סנטימטר של מרחק סיבי PDT אל הבאר). יש להרכיב משקפיים בטיחות לייזר ולהאיר את התאים עם לייזר PDT (630 ננומטר, 400 mW / cm 2) בחושך במשך פרקי זמן שונים: 0, 5, 10, 20, 30, ו -40 שניות (0, 2, 4 , 8, 12, ו -16 J / cm 2). לאחר מכן, דגירה התאים למשך 24 שעות בחושך.
    2. לשאוב בינוני לשטוף את התאים על ידי הוספת 1 מ"ל של קר PBS. חזור על שלב הכביסה פעם נוספת.
    3. הוסף 10 μl של פתרון מדידה cytotoxicity היטב כל אחד. דגירה בחושך במשך שעה 2.
    4. מדוד את הספיגה ב 450 ננומטר באמצעות קורא microplate.
  3. ניתוח מיקרוסקופי
    1. מניח את צלחת תרבית תאים תחת סיבי PDT (עם 1 סנטימטר של מרחק סיבי PDT אל הבאר). יש להרכיב משקפיים בטיחות לייזר ולהאיר את התאים עם לייזר PDT (630 ננומטר, 400 mW / cm 2) בחושך במשך 0, 20, או 40 שניות (0, 8, או 16 J / cm 2). לאחר מכן, דגירה התאים למשך 24 שעות בחושך.
    2. לשאוב בינוני לשטוף את התאים על ידי הוספת 1 מ"ל של קר PBS. חזור על שלב הכביסה פעם נוספת.
    3. הוסף 50 μl של Annexin V-FITC ו -50 μl של 4 ', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, 1.5 מיקרוגרם / מ"ל). נער בעדינות את הצלחת דגירה אותו במשך 15 דקות בטמפרטורת החדר בחושך.
      הערה: השתמש Annexin V-FITC מתוך הערכת מיקרוסקופ פלואורסצנטי.
    4. שוטפים את התאים על ידי הוספת 1 מ"ל של קר PBS. חזור על שלב הכביסה פעם נוספת. שמור את התאים ב PBS הטרי. זהה את תאים אפופטוטיים באמצעות מיקרוסקופ אור בהגדלה 100X.
  4. מיון תא הקרינה מופעל (FACS) ניתוח
    1. מניח את צלחת תרבית תאים תחת סיבי PDT (עם 1 סנטימטר של מרחק סיבי PDT אל הבאר). יש להרכיב משקפיים בטיחות לייזר ולהאיר את התאים עם לייזר PDT (630 ננומטר, 400 mW / cm 2) עבור 0, 20, או 40 שניות (0, 8, או 16 J / cm 2). לאחר מכן, דגירה התאים למשך 24 שעות בחושך.
    2. לשאוב בינוני לשטוף את התאים על ידי הוספת 1 מ"ל של קר PBS. חזור על שלב הכביסה פעם נוספת.
    3. Resuspend התאים 1 מ"ל של 1 × חיץ מחייב (לדלל 1 חלק למאגר מחייב 10x; 0.1 מ 'Hepes / NaOH (pH 7.4), 1.4 M NaCl, ו -25 מ"מ CaCl 2 עד 9 חלקים מים מזוקקים) ולהעביר 100 μl של הפתרון מדגם ל -5 מ"לצינור תרבות.
    4. הוסף 5 μl של Annexin V-FITC ו -5 μl של יודיד propidium (PI). בעדינות מערבולת הצינור דגירה במשך 15 דקות בטמפרטורת החדר (RT) בחושך. להוסיף 400 μl של 1 × חיץ מחייב.
      הערה: השתמש Annexin V-FITC ו PI מתוך הערכה מיקרוסקופ פלואורסצנטי.
    5. זהה את תאים אפופטוטיים באמצעות FACS 14. קווי לייזר עירור של FITC-V PI ו Annexin הם 488 ננומטר ו 635 ננומטר, בהתאמה. מדוד את פליטת הקרינה של PI ו Annexin V-FITC ב 610 ± 20 ננומטר ו 660 ± 20 ננומטר, בהתאמה. אוסף את התאים הנרכשים על cytometer הזרימה ל -10,000 אירועים.

4. יעילות נגד סרטן בשנת vivo בעכברים נושאי גידולים

  1. במודל עכבר ריאות נגרמת סרטן
    1. הכן 1 × 10 6 תאים A549 ב 0.1 מ"ל בינוני RPMI-1640; לשמור אותו בקרח.
    2. להרדים את העכברים עם זריקה ip של xylazine ותערובת של tiletamine ו zolazepam (1: 2, 1 מ"ל /ק"ג). אשר הרדמה תקינה על ידי צובט קפל קטן בעדינות של עור עכבר. השתמש במשחת וטרינר על העיניים כדי למנוע יובש לאחר הרדמה.
      הערה: אם אין תנועה הוא ציין, החיה הוא הרדים מספיק כדי להתחיל את הניסויים.
    3. להזריק את התאים מתחת לעור בירכיים שנשארו עכברי גבר עירום BALB / C (6 - בן 7 שבועות, 20 - 22 גרם).
    4. שמור התבוננות העכברים עד שהם מתחילים לנוע בכלוב.
      הערה: אל תשאיר חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal. אל תחזרו בעל חיים אשר עבר ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים עד שהוא התאושש לחלוטין. שמור על העכברים בתנאים הפתוגן ללא ספציפיים (SPF).
    5. מדוד את גודל הגידול עם מחוגה מדי יום. חשב את נפח הגידול (3 מ"מ) כמו (אורך × רוחב 2) / 2. כאשר גודל הגידול ומגיע לכ 200 מ"מ 3 בנפח, להתחיל בניסוי.
  2. מחקר יעיל נגד הסרטן
    1. אקראי לחלק העכברים ל -4 קבוצות (n = 10 לכל קבוצה).
    2. להרדים את העכברים עם זריקה ip של xylazine ותערובת של tiletamine ו zolazepam (1: 2, 1 מ"ל / ק"ג). אשר הרדמה תקינה על ידי צובט קפל קטן בעדינות של עור עכבר. השתמש במשחת וטרינר על העיניים כדי למנוע יובש לאחר הרדמה.
      הערה: אם אין תנועה הוא ציין, החיה הוא הרדים מספיק כדי להתחיל את הניסויים.
    3. ממיסים את חלקיקים ב PBS לריכוז סופי של HB 2 מ"ג / מ"ל. להזריק PBS, חינם HB, HB-NPS, או HB-P-צירופים דרך וריד הזנב (2 מ"ג / ק"ג כמו HB) פעמיים בימים 0 ו -7.
    4. שמור התבוננות העכברים עד שהם מתחילים לנוע בכלוב.
      הערה: אל תשאיר חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal. אל תחזרו בעל חיים אשר עבר ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים עד מלאהתאושש. שמור הכלובים כהים ובתנאי SPF ספציפיים.
    5. 24 שעות לאחר כל זריקה, להרדים את העכברים עם זריקה ip של xylazine ותערובת של tiletamine ו zolazepam (1: 2, 1 מ"ל / ק"ג). אשר הרדמה תקינה על ידי צובט קפל קטן בעדינות של עור עכבר. השתמש במשחת וטרינר על העיניים כדי למנוע יובש לאחר הרדמה.
      הערה: אם אין תנועה הוא ציין, החיה הוא הרדים מספיק כדי להתחיל את הניסויים.
    6. מניח את אתר גידול תחת סיבי PDT (עם 1 סנטימטר של מרחק סיבי PDT אל הגידול). יש להרכיב משקפי בטיחות ליזר, לכבות את המתג, ולהאיר את הגידול עם ליזר PDT (630 ננומטר, 400 mW / cm 2) תמורת 500 שניות (200 J / cm 2) פעמים בימים 1 ו -8.
    7. שמור התבוננות העכברים עד שהם מתחילים לנוע בכלוב. אל תשאירו חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal. אל תחזור חיה יש undergonניתוח ה לחברה של בעלי חיים אחרים עד התאושש לחלוטין.
    8. שמור הכלובים בתנאי SPF. לשמור על הכלובים בחושך במשך 24 שעות לאחר הטיפול בלייזר.
    9. מבחינה ויזואלית לפקח על נפח הגידול והשינויים באתר הגידול מדי יום. מדוד את גודל גידול עם מחוגה, ולחשב את הנפח כמו (אורך × רוחב 2) / 2 (3 מ"מ). צלמו תמונות של אתרי הגידול מדי יום כדי לבדוק אם קיימים שינויים משטח הגידול לאחר PDT.
    10. ביום 16, להקריב חמישה עכברים בכל קבוצה על ידי הרדמת מסוף באמצעות isoflurane.
    11. עם מלקחיים ומספריים, לחתוך את העור החיצוני ולחשוף הגידולים 15. בזהירות למסוק אותם. תקן אותם 10% פורמלין, להטביע אותם פרפין, להכתים אותם עם hematoxylin ו eosin (H & E) עבור ניתוח היסטולוגית 16.
    12. לאחר 45 ימים של ניטור, להקריב את העכברים הנותרים על ידי הרדמת מסוף באמצעות isoflurane.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הכנו הוא HB-NPS ו HB-P-צירופים עם הטכניקות שהוזכרו לעיל. בקטרים ​​הממוצעים של HB-NPS ו HB-P-צירופים היו 220.9 ± 3.2 ננומטר בכ- 211.9 ± 1.6 ננומטר, בהתאמה.

הכדאיות התא של תאים A549 לאחר 4 שעות של דגירה עם PBS, NPS ריק, HB-NPS, ו HB-P-צירופים ואחריו הקרנת אור (0 עד 16 J / cm 2) מוצג באיור 1. בלי אור, בקבוצת הטיפול HB-NP לא...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

השלב הקריטי ביותר במחקר זה הוא בחירת תנאי הליזר הנכון: גל, כוח, זמן הקרנה. אורך הגל הנכון של אור מתאים והחומר המבוקש הוא הכרחי עבור PDT. השתמשנו לייזר 630 ננומטר כי היה מתאים ב hypocrellin מתח היציאה היה גורם חשוב נוסף, אשר נקבע על 400 mW / cm 2 מבוסס על מחקרים טייס רבים. סמכויות פלט העולה על 400 mW / cm 2 פגום התאים או על פני העור של החיות בשל ההקרנה עצמו, בעוד כוחות הפלט שלהלן 400 mW / cm 2 היו חלשים מכדי הראה כל השפעה טיפולית. בפעמי ההקרנה המתאי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי שום מענק. 14-2014-017 מהקרן למחקר SNUBH.

המחברים חייבים תודה ג'יי פטריק Barron, פרופ 'אמריטוס, האוניברסיטה הרפואית טוקיו ופרופסור נספח החולים Bundang האוניברסיטה הלאומית בסיאול לעריכה בהתנדבות שלו של כתב היד הזה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
חומצה היאלורונית אוליגוביולנד ושות', בע"מ_
DS-Y30 (סרמיד 3B; בעיקר N-oleoyl-phytosphingosine)Doosan Biotech Co., Ltd._
adipic acid dihydrazideSigma AldrichA0638
N-(3-dimethylaminopropyl)-N′ -ethylcarbodiimideSigma Aldrich39391
4-(כלורמתיל)בנזואיל כלורידסיגמא אולדריץ'270784
Tween 80Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.T0546
Sartorius Stedim Biotech GmbH1776215 מ"מ, RC, PP, 0.45 ומיקרו; m
triethylamineSigma AldrichT0886
צינורות Mini-GeBAflexGene Bio-Application Ltd.D070-12-100
PaclitaxelTaihua Corporations_
RPMI-1640Gibco Life Technologies, Inc.11875
פניצילין– סטרפטומיציןGibco Life Technologies, Inc.15070
סרום בקר עובריGibco Life Technologies, Inc.
Celite (חומר מסנן)Sigma Aldrich6858ראה שלב 1.4
מסנן מזרק 16140071

מקורות

  1. Shang, L., Zhou, N., Gu, Y., Liu, F., Zeng, J. Comparative study on killing effect of esophageal cancer cell line between hypocrellin B-photodynamic therapy and hematoporphyrin derivative-photodynamic therapy. Chin J Cancer Prev Treat. 12, 1139-1142 (2005).
  2. Huisman, C., et al. Paclitaxel triggers cell death primarily via caspase-independent routes in the non-small cell lung cancer cell line NCI-H460. Clin Cancer Res. 8 (2), 596-606 (2002).
  3. Dolmans, D. E., Fukumura, D., Jain, R. K. Photodynamic therapy for cancer. Nat Rev Cancer. 3 (5), 380-387 (2003).
  4. Pass, H. I. Photodynamic therapy in oncology: mechanisms and clinical use. J Natl Cancer Inst. 85 (6), 443-456 (1993).
  5. Sutedja, T. G., Postmus, P. E. Photodynamic therapy in lung cancer. A review . J. Photochem. Photobiol. 36 (2), 199-204 (1996).
  6. Peng, C. L., Shieh, M. J., Tsai, M. H., Chang, C. C., Lai, P. S. Self-assembled star-shaped chlorin-core poly(epsilon-caprolactone)-poly(ethylene glycol) diblock copolymer micelles for dual chemo-photodynamic therapies. Biomaterials. 29 (26), 3599-3608 (2008).
  7. Chen, B., Pogue, B. W., Hasan, T. Liposomal delivery of photosensitising agents. Expert Opin Drug Deliv. 2 (3), 477-487 (2005).
  8. Lee, S. J., et al. Comparative study of photosensitizer loaded and conjugated glycol chitosan nanoparticles for cancer therapy. J Control Release. 152 (1), 21-29 (2011).
  9. Chang, J. E., et al. Anticancer efficacy of photodynamic therapy with hematoporphyrin-modified, doxorubicin-loaded nanoparticles in liver cancer. J. Photochem. Photobiol. 140, 49-56 (2014).
  10. Chang, J. E., Cho, H. J., Yi, E., Kim, D. D., Jheon, S. Hypocrellin B and paclitaxel-encapsulated hyaluronic acid-ceramide nanoparticles for targeted photodynamic therapy in lung cancer. J. Photochem. Photobiol. 158, 113-121 (2016).
  11. Wang, A. Z., Langer, R., Farokhzad, O. C. Nanoparticle delivery of cancer drugs. Annu. Rev. Med. 63, 185-198 (2012).
  12. Matsumura, Y., Maeda, H. A new concept for macromolecular therapeutics in cancer chemotherapy: mechanism of tumoritropic accumulation of proteins and the antitumor agent smancs. Cancer Res. 46 (12 Pt 1), 6387-6392 (1986).
  13. Penno, M. B., et al. Expression of CD44 in human lung tumors. Cancer Res. 54 (5), 1381-1387 (1994).
  14. Wilkins, R., Kutzner, B., Truong, M., Sanchez-Dardon, J., McLean, J. Analysis of radiation-induced apoptosis in human lymphocytes: Flow cytometry using Annexin V and propidium iodide versus the neutral comet assay. Cytometry. 48 (1), 14-19 (2002).
  15. Bannas, P., et al. Validation of nanobody and antibody based in vivo tumor xenograft NIRF-imaging experiments in mice using ex vivo flow cytometry and microscopy. J Vis Exp. (98), e52462(2015).
  16. Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections. Cold Spring Harbor Protocols. (5), (2008).
  17. Lam, S. Photodynamic therapy of lung cancer. Semin Oncol. 21 (6 Suppl 15), 15-19 (1994).
  18. Simone, C. B. 2nd, et al. Photodynamic therapy for the treatment of non-small cell lung cancer. J Thorac Dis. 4 (1), 63-75 (2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

CD44BA549In VitroIn Vivo
יעילות אנטי סרטנית של טיפול פוטודינמי עם ריאות חלקיקים סרטן ממוקד
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.