הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

עצב-מקמץ חסימת אמצע שופכה (Nemo) ב הנקבה קטנה מכרסם

9.3K צפיות

DOI:

10.3791/55288

25 באפריל 2017

במאמר זה

סיכום

מודלים מסורתיים של חסימת מוצא השלפוחית ​​חלקית במכרסמים טומן בחובו התמותה של בעלי חיים. פציעת denervation לנתיחה סביב צוואר השופכה ושלפוחית ​​שתן הפרוקסימלי היא גם דאגה גדולה. פיתחנו ומוערכת מודל חסימה באמצע השופכה בטוח ואמין, הימנעות החסרונות של המודל המסורתי.

תקציר

שקע חסימת שלפוחית ​​חלקית (pBOO) יש שכיחות גבוהה, גורמת ניטל חולה משמעותי, ועלויות בריאות עצומות. מודל החיה הנפוץ ביותר לחקור שיפוץ שלפוחית ​​שתן ב pBOO הם מכרסמים נשיים עוברים חסימה חלקית על השופכה הפרוקסימלי. השתנות מידת החסימה והתמותה חייה הן סוגיות מרכזיות עם חסימה הפרוקסימלי. יתר על כן, לנתח סביב צוואר שופכה ושלפוחית ​​שתן הפרוקסימלי מסכן עצבוב שלפוחית ​​שתן.

פיתחנו מודל עצב-חוסך חסימת אמצע השופכה (Nemo) עבור pBOO הימנעות החסרונות של המודל המסורתי. ניגשנו השופכה פשוט נחותה תִצמוֹדֶת הערווה, ולכן אין ההכרח עבור פיום וכן לנתיחה בתחום זה; גם, הסוגר של השופכה תילומית נותר מיותם. ביצענו את נמו בחולדות נקבות ספראג-Dawley (12 חסימות, 6 חיות דמה) וכן הנקבה C57 / עכברים BL6 (20 חסימתהים, 18 חיות דמה). לאחר שבועיים, החוקרים העריכו תפקוד שלפוחית ​​השתן, המוני שלפוחית ​​השתן, ואת מסת הגוף.

לא היו לנו mortalities בקרב חולדות נקבות obstructed- או דמה מופעל; כמתואר עבור הפרוקסימלי pBOO-השיטה המסורתית, קשרנו את תפר סביב השופכה הפרוקסימלית ו להציב באופן זמני מוט מתכת 0.9 מ"מ. נמו שהגדילה 85% במסת שלפוחית ​​השתן לאחר שבועיים, נפח שתן שיורית הממוצע היה 0.4 מ"ל בחולדות חסום חלקית ואילו רק 0.03 מ"ל בחיות בלוף. בעכברים, בדקנו 3 גדלים של קנולות כי הנחנו לאורך השופכה כאשר קשירת התפר. מצאנו כי באמצעות צינורית 27-מד הביא בחלופיותה חיה 50%; הצבת צינורית 25-המד לא הניבה את התגובה הרצויה מונית שלפוחית ​​הגדלה; ניצול צינורית 26-מד הניב תוצאות חיוביות עם תמותה בבעלי חיים מינימאלית (1/8) עדיין עלייה של פי 2 משמעותית במסת שלפוחית ​​שתן.

מבוא

יש לשקע חסימת שלפוחית חלקית (pBOO) שכיחות גבוהה והוא יכול לגרום בעיות בתפקוד השלפוחית חמורה 1; הספקטרום נע בין מומים מולדים כגון שסתומים השופכה האחורית או היפוספדיאס, מעל מגבלות השופכה רכשה היפרפלזיה שפירה של הערמונית. האחרון להשפיע על יותר מ 30% של שישים שנה גברים מבוגרים 2. ניטל חולה גדול ועלויות בריאות עצומות הקשורים pBOO להצדיק את מאמץ מחקר רב מכניס שיפוץ שלפוחית לומד בתגובת התנגדות יצוא מוגבר 3. מ 2006 עד 2015, מעל 220 PubMed באינדקס המאמרים שפורסמו בנוגע להשפעת pBOO על שלפוחית ​​השתן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

פרוטוקול הניסוי הבא אושר על ידי ועדת הטיפול בבעלי החיים של המוסד.

1. נם בחולדות נקבות

  1. הכנה
    1. מניחים הנקבה ספראג-Dawley במשקל סביב 200 גרם בהרדמה isoflurane 3%, לשקול את החיה, ואת לגלח ולחטא את האזור prepubic 3 פעמים באמצעות שיחים כירורגית יוד.
    2. על כרית חימום, גפיים אחוריים קלטת וזנב למטה לצנתר שלפוחית ​​עם angiocatheter ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

עצב-מקמץ חסימה אמצע השופכה (Nemo) בחולדות נקבות

תמותה

בצענו חסימת שופכת אמצע על פני 40 חולדות נקבות עד כה לא הייתה תמותה.

המ.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

התמותה של בעלי חיים היא אחת הדאגות הגדולות של המודל המסורתי של pBOO על השופכה הפרוקסימלי, ב 15% או יותר בדוחות רבים 10, 11, 13. נמו נראה שיש תמותה מינימלית כאשר מיושם חולדות נקבות. מחסימה חוזרת הפרוקסימלי בעכברים היא טכנית יותר מאתגר מאשר חולדות וכך גם מועדים יותר לסיבוכים. באמצעות צינורית 26-מד כמציין מיקום עבור אמצע שופכת הגישה שלנו, היו לנו תמותה של בעלי חיים מינ.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

העבודה מומנה על ידי מענק תפעולי של CHIR (DJB).

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
חולדה נקבה צ'ארלס-ריבר קנדהספראג דולי ראט (Crl:SD); קוד זן: 400כ-200 גרם
וופורייזר איזופלורןבנסון תעשיות רפואיות בע"מTEC III איזופלורן; קוד מוצר: 53-T3ISO 
איזופלורןפרזניוס קאבי, איזופלורן לבריאות בעלי חיים; קוד מוצר: CP0406V2  בקבוק 250 מ"ל
אזמל חד פעמיטד פלה, בע"מ#15 אזמלי נירוסטה סטריליים; מספר קטלוגי 549-9-15S
מלקחיים מיקרוסקופייםטד פלה, בע"ממלקחיים למיקרוסקופיה של Aesculap, Finepoint, 115 מ"מ; מספר מוצר 5443
מלקחיים של AdsonTed Pella, Inc.מלקחיים לדיסקציה של Aesculap Adson, מעוקלים, 120 מ"מ; מספר מוצר 5002-9
מספריים כירורגיים מעוקליםTed Pella, Inc.מספריים כירורגיים, מעוקלים, S/S, 105 מ"מ; מספר קטלוגי 1376
מוט מתכת אינוקס 0.9 מ"מgoodfellow.comנירוסטה - AISI 316L קוטר חוט: 0.9 מ"מ; קוד הזמנה 911-684-65
ווי עור - מתוצרת עצמית מפלדת אינוקסgoodfellow.comנירוסטה - AISI 316L קוטר חוט: 0.9 מ"מ; קוד הזמנה 911-684-65
4-0 תפר משיesutures.com4-0 גדיל שחור Sofsilk 98 אינץ'; מספר מוצר LS640
5-0 תפר Vicryesutures.com5-0 Vicryl לא צבוע 27 אינץ' RB-1 מתחדד; מספר מוצר J213H
מחזיק מחטMedsupplier.comמחזיק מחט Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner - 5 1/2 אינץ'; קוד מוצר: מק"ט: NEE4484-8-40TC
מק"ט: NEE4484-8-40TC
מק"ט: NEE4484-8-40TC 
Temgesic (Buprenorphine)אספקה וטרינרית ראשונהBuprenex 0.3MG/ml inj amps; פריט #075701
מזרק 1 מ"ל עם מחט 27 גרםפישר סיינטיפיקBD  מזרק טוברקולין, BD 309623
20 גרם אנגיוקטפישר סיינטיפיקאנדווין סיינטיפיק  אנגיוקט 20 GA; מס' קטלוגי
NC9561906 דיאטת התאוששותclearh2oDietGel 31M; 72-08-5022
C57Bl/6 עכברים נקבותצ'ארלס-ריבר קנדהC57BL/6 עכבר (C57BL/6NCrI); קוד זן: 027כ-18 גרם
24 גרם אנגיוקטפישר סיינטיפיקחנה פרמצבטיקה אספקה ושות', בע"מ IV צאנט אנגיוקט 24GX3/4IN; מס' קטלוגי
5-0 Ethibondesutures.com5-0 Ethibond ירוק 30 אינץ' RB-1 מתחדד; מספר מוצר X550H
26 G מחט מזרקSigma-AldrichBD Precisionglide, מד 26; z192392
תמיסת מלח רגילהבקסטר0.9% הזרקת נתרן כלורי, USP, 100 מ"ל מיני שקית; קוד מוצר 2B0043
NC9814340

מקורות

  1. Andersson, K. E. Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects. Urology. 62 (5), 3-10 (2003).
  2. Boyle, P., et al. The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study. BJU Int. 92 (4)....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

חסימה חלקית של מוצא השלפוחיתמודל מכרסמות נקבותעצבוב של מוצא השלפוחיתהשתלת קנולה לשופכהעלייה במסת השלפוחיתנפח שתן שיוריחולדות Sprague-Dawleyעכברי C57BL/6טכניקה כירורגית