מאמר שיטה

היכרות הדרכת Clicker בתור העשרה קוגניטיבית עבור עכברי מעבדה

12.9K צפיות

DOI:

10.3791/55415

6 במרץ 2017

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

פיתוח אסטרטגיות עידון חדשות לעכברי מעבדה הוא משימה מאתגרת התורמת להגשמת עקרון 3R. פרוטוקול זה מציג אימון קליקר כתוכנית העשרה קוגניטיבית לעכברי מעבדה.

תקציר

הקמת אסטרטגיות עידון חדשות במדעי חיות המעבדה היא מטרה מרכזית במילוי הדרישות של הוראה 2010/63/EU. מחקרים קודמים קבעו השפעה עמוקה של פרוטוקולי טיפול עדין על רווחתם של עכברי מעבדה. על ידי הכנסת אימון קליקר להחזקת עכברים, לא רק שאנו מקדמים טיפול ידידותי בעכברים, אלא גם מאפשרים להם לחוות העשרה קוגניטיבית. אימון קליקר הוא סוג של אימון חיזוק חיובי באמצעות מחזק משני מותנה, צליל ה"קליק" של קליקר, המשמש כגשר זמן בין ההתנהגות המחוזקת לתגמול המתקרב. היישום היעיל של פרוטוקול אימון הקליקר עם קבוצה של 12 עכברים מולדים BALB/c מכל מין הוכח כלא מסובך. העכברים למדו די מהר כאשר אותגרו עם משימות של פרוטוקול אימון קליקר, וכמעט כל העכברים המאומנים התגברו על האתגרים שניתנו להם (100% מהעכברים הנקבות ו-83% מהעכברים הזכרים). מחקר זה זיהה כי אימון קליקר לעכברים נמצא בקורלציה חזקה עם פחד מופחת בעכברים במהלך אינטראקציות בין אדם לעכברים, כפי שמוצג על ידי התנהגויות מופחתות הקשורות לחרדה (למשל, עשיית צרכים, קולות ומתן שתן) ופחות התנהגויות דמויות דיכאון (למשל, ציפה). על ידי פיתוח פרוטוקול אמין שניתן לשלב בקלות בשגרת היומיום של החזקת עכברי מעבדה, ניתן לשפר באופן משמעותי את חווית החיים של רווחת העכברים.

מבוא

פיתוח אסטרטגיות עידון חדשים עבור עכברי מעבדה הוא משימה מאתגרת שתורמת ההגשמה של 3Rs (החלפה, הפחתה, ועידון) של מדע מעבדת חית 1. שיפורים בתחום חידוד נוסף יכול לתרום לרווחתם של מיליוני בעלי חיים המשמשים למטרות ניסויים. לכן, מחקר אינטנסיבי נדרש בתחום. זוהי גם מטרה מוגדרת בהנחיה 2010/63 של האיחוד האירופי. הדירקטיבה 2010/63 / איחוד אירופאי מציין כי ניסיון החיים של חיות מעבדה צריך להיות משופר וכי "מפעליים יכונן תוכניות הרגלה והכשרה מתאימות לבעלי החיים, נהלים אורך הפרויקט" (סעיף 3.7) 2.

חיות מעבדה יכולות לחוות הרבה מצבים מלחיצים בזמן שהם מוחזקים וגדלו לניסויים. בדרך כלל, את האינטראקציה בין העבודהעכברי atory ואת האחראים מוגבלים למדי. לכן, יחסי אמון לא יכולים להתפתח. זה יכול לעורר חרדה מוגברת ומתח כתגובת טיפול, אשר יש השלכות שליליות על ההתנהגות והפיסיולוגיה, ולכן, את הרווחת, של בעלי החיים 3, 4, 5, 6. יתר על כן, בצע נהלי מעבדה שיגרתי כמו טיפול כללי, איפוק, ודם או דגימת רקמות יכולה לגרום לתגובות של מצוקה נפשית, אשר יכול להיבדק על ידי מדידת פרמטרים שונים, כגון הורמוני לחץ או התנהגות 7, 8. הוכח כי תוכניות טיפול יכולות להקטין את החרדה ביעילות כלפי החוקר במכרסמי מעבדה 9, 10, 11. תוכניות טיפול ולכן יכול לשפר את החיות "תנאים יכולים לתרום באופן משמעותי למען בעלי חי 5.

מטרת מחקר זה היא להציג את אימון חיזוקים חיוביים עבור עכברים כתוכנית טיפול ספציפי. אימון חיזוקים חיוביים היא צורה של התניה אופרנטית שנותן החוקר אמצעי לעצב התנהגות בעלי חיים. כאשר החיה מבצעת התנהגות רצויה, הוא ואחריו גירוי חיובי (כאן, פרסי מזון). הכוונה היא כי בעל החיים המקשר את הפרס על התנהגות בהתאמה. אימון Clicker הוא סוג של אימון חיזוקים חיובי באמצעות חיזוק משני מותנה, "לחץ" קול קליקר, הוכח לחזק התנהגות ספציפית 12.

באופן ספציפי יותר, את הצליל לחץ משמש "גשר זמן" בין ההתנהגות ואת הפרס הקרוב 13. המאמן לוחץ בדיוק כאשר החיה מבצעת את הרצויהתנהגות, ללא עת לעכב 14, ולאחר מכן מציגה את גמול מזון. זה מחזק את ההתנהגות המתוגמלת, שתועלה עם בתדירות גבוהה יותר. אימון Clicker נעשה שימוש נרחב עם חיות מחמד ואת עשה את דרכה לתוך מדע בחיות מעבדה, שם יושם בהצלחה עם פרימטים לא אנושיים 13, 15, 16. כמו עכברים ללמוד די מהר כאשר קרא תיגר עם פרדיגמות התניה אופרנטית, כניסתה של חיזוק השני לא צריך למתוח יתר על המדה היכולות הקוגניטיביות שלהם 5, 17, 18, 19.

על ידי החדרת אימון קליקר על ניהול עכברים, אנו מאפשרים עכברים לחוות העשרת קוגניטיבית. העיצוב של העשרה קוגניטיבית חייב לאפשר העכברים להשתמש במיומנויות הקוגניטיביות שלהם כדי solvבעיות דואר ולהשיג שליטה על הסביבה שלהם 20, 21. מספר מחקרים עם מינים שונים להוכיח את ההשפעה החיובית של העשרה קוגניטיבית על רווחתם של בעלי חיים בשבי 22, 23, 24. שיפור היכולת של בעלי החיים כדי להתמודד עם אתגרים סביבתיים בהצלחה תורמת שלהם לרווחתה 25, 26.

בנוסף, אם החיות לחוות רמות נמוכות של מתח במהלך חייהם, הם נוטים פחות לפתח אסטרטגיות התמודדות מזיקות כאשר התעמתו עם גורמי דחק המתרחשים במחקר ביו. לפיכך, יישום עקבי של העשרת קוגניטיבי יכול לתרום המגון של 'פנוטיפים נושאים. זה יתרום עיקרון 3R של הפחתה, כפי שהוא יכול להפחית את מספר המקצועות הנדרשים27 כדי לעמוד בדרישות סטטיסטיות.

על ידי פיתוח פרוטוקול אמין כי ניתן לשלב בקלות לתוך שגרת היומיום של שמירה על עכברי מעבדה, אנו יכולים לשפר את חוויית החיים שלהם באופן משמעותי רווחה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

משפט ואתיקה: הטיפול של עכברים ואת הפרוצדורות בוצעו בהתאם אירופאי, לאומי, והנחיות מוסדיות לטיפול בבעלי חיים.

הערה: הפרוטוקול כולל חמישה ימים של התערבויות (שתי עד שישי), עם הפסקות בסופי השבוע (שבת וראשון). הפרוטוקול ניתן להתאים בקלות לענות על הצרכים הספציפיים.

1. קביעה זכה מתאים בתור חיזוק שנית

הערה: השתמש פרסי מזון, כגון מזון באריזת ואקום או מזון לבעלי חיים העומד בסטנדרטי בטיחות מזון. לדוגמא, סוגים שונים של אגוזים, שוקולד, סוכריות גומי, או פרות יבשים מתאימים.

  1. הכנס צלחת פטרי קטנה עם תגמולי מזון שונים (חתיכות של 0.5 סנטימטר 3) לתוך הכלוב הביתה (איור 1).
  2. לאחר 10 דקות, לבדוק שאריות.
  3. אם כל הפירות נאכלים אחרי 10 דקות, לקצר את טווח הזמן עד העדפה ניתנת לאמידה.
  4. בימים 4 ו -5 (למשל, Thursday ושישי), להוסיף כמויות קטנות של גמול ( "הזוכה") העדיף את הכלוב הביתה כדי להקים העמדת פנים של כל העכברים בכלוב כדי לתגמל.
  5. אם העכברים אינם מורגלים למנהרות עכבר, להוסיף מנהרה לכלוב (לפחות 2 ימים לפני תחילת האימון, למשל, במהלך סוף השבוע).
  6. חזור על שלבים 1.2 - 1.4 על 3 ימים רצופים (למשל, שני עד רביעי).

אימון Clicker 2.

  1. תכשירים כל אימון
    הערה: בכל פעם עכבר צריכה להיות הרים בפרוטוקול זה, הרם אותה באופן רגוע ועדין. שים יד תחת בעכבר כדי להרים אותו. במהלך בפעמים הראשונות, העכברים יכולים להיות נסערים, אבל תהליך ההרגלה יסתיים לאחר מספר ימים. אם שלב זה יוצר קשיים, כדאי להתייחס פרוטוקול "חופן על היד הפתוחה" 28.
    1. הכינו כלוב עם חומר מצעים.
    2. transfer הכלוב של העכבר שאומן מקום שקט.
    3. הכן את השכר יש טיימר ושילוב מקל קליקר / היעד המוכן.
      הערה: אם העכברים הם מורגלים כדי טיפול וכבר יש מערכת יחסים של אמון עם הנסיין, העכברים יכולים להיות מוזנים באופן ידני. אחרת, לצרף את המבצע על מקל או מלקחיים בצורה כזאת כי העכברים יכולים לשמור מרחק מן הנסיין.
    4. הסר את כל האובייקטים מן הכלוב הביתה, המשמש כיום כאזור אימונים (למשל, בתי עכבר, חומרי בנייה-קן, וכו '.).
    5. מעביר את חבריו כלוב לכלוב מוכן.
  2. חוקים כלליים החלים על כל האימונים
    הערה: הכללים הכלליים הבאים חלים עבור כל הפעילויות ולא יוזכרו שוב ברחבי הפרוטוקול.
    1. לאמן כל עכבר למשך 5 דקות. חלופי בין אימוני 30-s ותקופות 15-s הפסקה.
    2. בואו העכבר לכרסם על הגמול כבר לא משני. לאחר מכן, לקחת את המקל (עם פרס) מחוץ לכלוב.
    3. הפעל את התבנית של המתגמלת הבאה:
      1 - 10 הופעות של התנהגות: לתגמל בכל פעם.
      11 - 21 ביצועים של התנהגות: לתגמל בכל פעם שנייה.
      מ -22 ביצועים של התנהגות על: לתגמל בכל פעם שלישית.
    4. לאחר 4 דקות של אימון, ההופעה הבאה של ההתנהגות הרצויה מקבלת חיזוק פרס זכייה. אפשר העכבר כדי לכרסם את פרס מזון שלוש פעמים יותר מאשר לפני.
  3. הדרכה מושב יום 1: "מחבר בין החיזוק משני עם גמול המזון"
    1. כיוונתי את הטיימר ל -5 דקות, לחץ להתחיל, ולהוסיף מנהרת העכבר אל הכלוב הביתה.
      הערה: נצל את thigmotaxis המולד של עכברים ומניחה המנהרה ליד קיר (איור 2). עבור כמה הפגישות הראשונות, זה ישפר את ההסתברות של העכבר נכנס למנהרה.
    2. המתן עד העכבר בודק את המנהרה. ברגע mousדואר נכנס למנהרה, לחץ ולהציג את הפרס בסוף המנהרה.
    3. בואו להאכיל את העכבר על הפרס בעת שישב המנהרה.
    4. לחץ ברציפות במשך 15 שניות בזמן שהעכבר יושב המנהרה.
    5. ברגע העכבר עוזב המנהרה, חזור לשלב 3.2.
  4. ימי אימון 2 - 5: "ריצה דרך מנהרה"
    1. כיוונתי את הטיימר ל -5 דקות, לחץ להתחיל, ולהוסיף מנהרת העכבר אל הכלוב הביתה.
    2. ברגע העכבר נכנס למנהרה, לחץ ולהציג את הפרס בסוף המנהרה.
    3. כל עוד העכבר נמצא במנהרה, לחץ ומיד להציג את הפרס באותו אופן.
    4. חזור על פעולה זו עבור 30 s הבאים, ולאחר מכן להשהות למשך 15 שניות כדי לקחת המנהרה מחוץ לכלוב.
    5. מוסיף את המנהרה שוב ולחץ מייד כאשר העכבר חוזר המנהרה.
    6. להציג את הפרס בסוף המנהרה.
    7. אפשר העכבר כדי לכרסם עד 1 s.
    8. קחו את הפרס.
    9. ברגע מתחיל העכבר מלשוב אל המנהרה על ידי עצמו, להציג את הפרס מול בקצה המנהרה (איור 3).
  5. הדרכת מושב שבוע 2: "בעקבות מקל יעד"
    1. כיוונתי את הטיימר ל -5 דקות, לחץ להתחיל, ומניח את העולם בסוף מקל היעד בכלוב.
    2. ברגע העכבר מגלה עניין הגלובוס, לחץ ולהציג את הפרס לצד הגלובוס (איורים 4 ו -5).
    3. Reward העכבר רק אחרי שהוא נוגע גלובוס עם האף שלה.
    4. כאשר סמן העכבר מצא קשר בין הפעולה שבוצעה על הפרס, לשנות את המיקום של כדור הארץ במהלך האימון עצמו (איור 6).
    5. חכה בעכבר כדי לענות על האתגר האחרון הזה.
    6. מניחים את העולם בכלוב.
    7. זמן קצר לפני העכבר נוגע הגלובוס, לאט ובזהירות לשנות את המיקום של כדור הארץ על ידי 1 ס"מ.
    8. לחץ ולתגמל אם העכבר חצה את המרחק ונוגע הגלובוס.
    9. חזור על הליך זה עד שהעכבר כדלקמן באופן מהימן.
    10. לאט להאריך את מרחק העכבר צריך לחצות.
  6. הדרכת מושב שבוע 3: "בעקבות מקל היעד אל כף ידו של הנסיין"
    1. מניחים יד אחת בכלוב הכשרה תוך כדי לחיצה על שילוב מקל קליקר / היעד ואת הפרס בעזרת היד השנייה.
    2. כיוונתי את הטיימר ל -5 דקות, לחץ להתחיל, ומניח את העולם בסוף מקל היעד הבא אל היד.
    3. ברגע העכבר מגלה עניין הגלובוס, לחץ ולהציג את הפרס לצד הגלובוס.
    4. ברגע העכבר באתגר זה, להזיז את צעדי הגלובוס כמה קרוב היד.
    5. מניחים את העולם על כף היד. לחץ ולתגמל בזמן שהעכבר יושב על כף היד (איור 7).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הראשון וגם אחד הצעדים החשובים ביותר היה קביעת גמול מזון מתאים. לכן, העכברים הוצעו סוגים שונים של אגוזים, פתרון סוכר, ריבה, וסוגים שונים של שוקולד בצלחת פטרי (איור 1). מניסיוננו, העכברים הראו העדפה ברורה עבור שוקולד לבן. לפיכך, השתמשנו שוקולד לבן עבור כל התהליכים הכשרה נוספים.

ההכשרה בפועל יושמה עם קבוצה של 12 עכברים BALB / c טבעי ש...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

היישום האפקטיבי של פרוטוקול אימון קליקר עם קבוצה של 12 עכברי BALB / c המולדים של כל מין התברר מסובך. מחקרים קודמים אשרו את היעילות של אימון קליקר עם כמה מינים, ואנחנו מורחבים זה לעכברים. כמו עכברים הם יונקים שפותחה הנמוך ביותר בקרב חיות מעבדה, היכולות שלהם הם זלזלו לעתים קרובות. לכן, ההיבט המפתיע ביותר של הנתונים הוא כי הצלחת אימון יכולה להיות מושגת כמעט עם כל עכברים.

שלב קריטי אחת בתוך פרוטוקול זהו העיתוי של החי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי המרכז לחקר בעלי חיים תרגומיים של המרכז הרפואי האוניברסיטאי של אוניברסיטת יוהנס גוטנברג במיינץ. המחברים אסירי תודה לתומאס ווקר על תמיכתו הטכנית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מכסה לדיור פתוחTecniplastGM500LID117
SealSAfe Plus למעלה לדיור פתוחTecniplastGM500400SU
סוג II ארוך, כלובים עליונים מסנניםTecniplastGM500PFSPC
Aspen מצעי חומר מעבדה & Vet Service GmbHH0234-300העשרה סביבתית
עכבר פוליקרבונט אדוםTecniplast ACRE011העשרה סביבתית
ניירות טישוTork, SCA מוצרי היגיינה GmbH290179העשרה סביבתית
מזון - ssniff M-H ExtrudatssniffV1126-000ad libitum
Target Stick עם ClickerTrixie2282
צינור PVC (מנהרות) חברת Thyssen KruppRTPVCU04003005
שוקולד לבן / קרםלא משנה, עדיפה איכות אורגנית
מלקחייםFineScienceToolsלמשל 11150-10או כל כלי אחר לקיבוע פריזמה שוקולד
גרסה 6.0 עבור Windows תוכנת
בית שוקולד לבן GraphPad

מקורות

  1. Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. , Methuen and Co., Ltd. 25-27 (1959).
  2. European Commission. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. Official Journal of the European Union. , (2010).
  3. Balcombe, J. P., Barnard, N. D., Sandusky, C. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary topics in laboratory animal science / American Association for Laboratory Animal Science. 43 (6), 42-51 (2004).
  4. Meijer, M. K., Sommer, R., Spruijt, B. M., van Zutphen, L. F. M., Baumans, V. Influence of environmental enrichment and handling on the acute stress response in individually housed mice. Laboratory animals. 41 (2), 161-173 (2007).
  5. Gouveia, K., Hurst, J. L. Reducing mouse anxiety during handling: effect of experience with handling tunnels. PloS one. 8 (6), e66401(2013).
  6. Meaney, M. J., Diorio, J., et al. Early environmental regulation of forebrain glucocorticoid receptor gene expression: implications for adrenocortical responses to stress. Developmental neuroscience. 18 (1-2), 49-72 (1996).
  7. Gärtner, K., Büttner, D., Döhler, K., Friedel, R., Lindena, J., Trautschold, I. Stress response of rats to handling and experimental procedures. Laboratory animals. 14 (3), 267-274 (1980).
  8. Izumi, J., Hayashi-kuwabara, Y. U., Yoshinaga, K., Tanaka, Y., Ikeda, Y. Evidence for a Depressive-like State Induced by Repeated Saline Injections in Fischer 344 Rats. Nature. 57 (4), 883-888 (1997).
  9. Fridgeirsdottir, G. A., Hillered, L., Clausen, F. Escalated handling of young C57BL/6 mice results in altered Morris water maze performance. Upsala journal of medical sciences. 119 (1), 1-9 (2014).
  10. Heredia, L., Torrente, M., Domingo, J. L., Colomina, M. T. Individual housing and handling procedures modify anxiety levels of Tg2576 mice assessed in the zero maze test. Physiology and Behavior. 107 (2), 187-191 (2012).
  11. Maurer, B. M., Döring, D., Scheipl, F., Küchenhoff, H., Erhard, M. H. Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans. Applied Animal Behaviour Science. 114 (3-4), 554-571 (2008).
  12. Skinner, B. F. How to Teach Animals. Scientific American. 185, 26-29 (1951).
  13. Bailey, R. E., Gillaspy, J. A. Operant psychology goes to the fair: Marian and Keller Breland in the popular press, 1947-1966. The Behavior Analyst. 28 (2), 143-159 (2005).
  14. McGreevy, P. D., Boakes, R. A. Carrots and sticks: principles of animal training. , Cambridge University Press. (2007).
  15. Gillis, T. E., Janes, A. C., Kaufman, M. J. Positive reinforcement training in squirrel monkeys using clicker training. American journal of primatology. 74 (8), 712-720 (2012).
  16. Schapiro, S. J., Bloomsmith, M. A., Laule, G. E. Positive reinforcement training as a technique to alter nonhuman primate behavior: quantitative assessments of effectiveness. Journal of applied animal welfare science: JAAWS. 6 (3), 175-187 (2003).
  17. Martin, L., Iceberg, E. Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning. Journal of visualized experiments : JoVE. (102), e53009(2015).
  18. Sclafani, A., Ackroff, K. Operant licking for intragastric sugar infusions: Differential reinforcing actions of glucose, sucrose and fructose in mice. Physiology and Behavior. , 115-124 (2016).
  19. Bathellier, B., Tee, S. P., Hrovat, C., Rumpel, S. A multiplicative reinforcement learning model capturing learning dynamics and interindividual variability in mice. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (49), 19950-19955 (2013).
  20. Clark, F. E. Can cognitive challenge enhance the psychological well-being of large-brained mammals in zoos? [unpublished doctoral thesis]. , Royal Veterinary College and Institute of Zoology. London, UK. (1999).
  21. Shettleworth, S. J., et al. Cognition, evolution, and behavior. , Oxford University Press. Oxford, UK. (2010).
  22. Hagen, K., Broom, D. M. Emotional reactions to learning in cattle. Applied Animal Behaviour Science. 85 (3-4), 203-213 (2004).
  23. Ernst, K., Puppe, B., Schön, P., Manteuffel, G. A complex automatic feeding system for pigs aimed to induce successful behavioural coping by cognitive adaptation. Applied Animal Behaviour Science. 91, 205-281 (2005).
  24. Puppe, B., Ernst, K., Schn, P. C., Manteuffel, G. Cognitive enrichment affects behavioural reactivity in domestic pigs. Applied Animal Behaviour Science. 105 (1-3), 75-86 (2007).
  25. Zebunke, M., Puppe, B., Langbein, J. Effects of cognitive enrichment on behavioural and physiological reactions of pigs. Physiology and Behavior. 118, 70-79 (2013).
  26. Manteuffel, G., Langbein, J., Puppe, B. Increasing farm animal welfare by positively motivated instrumental behaviour. Applied Animal Behaviour Science. 118 (3-4), 191-198 (2009).
  27. Bayne, K., Würbel, H. The impact of environmental enrichment on the outcome variability and scientific validity of laboratory animal studies. Science Direct. 33 (1), 273-280 (2014).
  28. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nature Methods. 7 (10), 825-826 (2010).
  29. Crawley, J. N. What's Wrong With My Mouse?. , (2007).
  30. Loos, M., Koopmans, B., et al. Within-strain variation in behavior differs consistently between common inbred strains of mice. Mammalian genome : official journal of the International Mammalian Genome Society. 26 (7-8), 348-354 (2015).
  31. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of visualized experiments : JoVE. (96), e1-e6 (2015).
  32. Can, A., Dao, D. T., Arad, M., Terrillion, C. E., Piantadosi, S. C., Gould, T. D. The Mouse Forced Swim Test. Journal of Visualized Experiments. , 4-8 (2011).
  33. Clayton, L. A., Tynes, V. V. Keeping the Exotic Pet Mentally Healthy. Veterinary Clinics of North America: Exotic Animal Practice. 18 (2), 187-195 (2015).
  34. Ward, S. J., Melfi, V. The implications of husbandry training on zoo animal response rates. Applied Animal Behaviour Science. 147 (1-2), 179-185 (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Refinement

מאמרים קשורים