הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

שיפור כוח, כוח, יכולת שריר אירובי, סובלנות גלוקוז באמצעות אימון לטווח קצר כוח מתמשך בקרב אנשים קשישים

12.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/55518

⸱

5 ביולי 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Åstrand Laboratory of Work Physiology, The Swedish School of Sport and Health Sciences, GIH, 2Department of Neuroscience, Karolinska Institutet, 3Department of Physiology and Pharmacology, Karolinska Institutet

במאמר זה

סיכום

ההשפעה של אימון התנגדות לטווח קצר על קשישים נחקרה באמצעות שימוש בו זמנית של מספר שיטות. בהשוואה לקבוצת ביקורת, נמצאו שיפורים רבים, כולל על יכולת השריר האירובי, סובלנות גלוקוז, כוח, כוח ואיכות שרירים ( כלומר, חלבון המעורב בתא איתותים והרכב סיבי שריר).

תקציר

פרוטוקול זה מתאר את השימוש בו זמנית של טווח רחב של שיטות לבחון יכולת שריר אירובית, סובלנות גלוקוז, כוח, כוח אצל אנשים מבוגרים ביצוע אימון התנגדות לטווח קצר (RET). אימון פרוגרסיבי לפיקוח במשך שעה 1 שלוש פעמים בשבוע במשך 8 שבועות בוצע על ידי משתתפי RET (71 ± 1 שנים, טווח 65-80). בהשוואה לקבוצת ביקורת ללא הכשרה, הראה ה- RET שיפורים על האמצעים המשמשים להצביע על חוזק, כוח, סובלנות גלוקוז, וכמה פרמטרים של יכולת השריר האירובי. אימון כוח נערך בחדר כושר עם ציוד כושר רק. דינמומטר isokinetic עבור כוח extensor הברך מותר מדידה של כוח קונצנטריים, אקסצנטרי, סטטי, אשר גדל עבור קבוצת RET (8-12% שלאחר לעומת הבדיקה מראש). כוח (קצב התפתחות כוח, RFD) ב 0-30 ms הראשונית גם הראה עלייה בקבוצת RET (52%). בדיקת סובלנות עם גלוקוזמדדי גלוקוז בדם הראו שיפור רק בקבוצת ה- RET במונחים של ערכי גלוקוז בדם לאחר 2 שעות (14%) והאזור מתחת לעקומה (21%). גם פרופיל השומנים בדם השתפר (8%). מ דגימות ביופסיה שריר שהוכנו באמצעות היסטוכימיה, כמות הסיבים סוג IIa גדל, מגמה לקראת ירידה IIx בקבוצה RET שיקף שינוי פרופיל חמצוני יותר במונחים של הרכב סיבים. כתם מערבי (כדי לקבוע את תכולת החלבון הקשורה לסיגנלים לחלבון שריר) הראה עלייה של 69% ב- Akt ו- mTOR בקבוצת ה- RET; זה הראה גם עלייה של חלבונים המיטוכונדריה עבור II OXPHOS מורכב סינתז ציטראט (גם ~ 30%) והן עבור מורכבות IV (90%), רק בקבוצה RET. אנו מראים כי סוג זה של אימון התנגדות מתקדמת מציע שיפורים שונים ( למשל, כוח, כוח, יכולת אירובית, סובלנות גלוקוז, פרופיל פלסמה השומנים).

מבוא

הזדקנות קשורה לאובדן מסת שריר (סרקופניה), כוח ועוצמה. כוח מופחת, וככל הנראה אפילו חשוב יותר, כוח, תוצאות חוסר תנועה, סיכון מוגבר לפציעה, איכות חיים מופחתת. אימון ההתנגדות היא אסטרטגיה ידועה לנטרל סרקופניה והידרדרות בתפקוד השרירים. הערכה גסה של כוח השרירים ניתן לקבל מן העומס או מספר חזרות שהושגו. עם זאת, מחקר זה השיג מידע מפורט ומדויק יותר על תפקוד השרירים באמצעות דינמומטר isokinetic לאסוף מידע על מומנט במהלך התכווצות איזומטרי, קונצנטריים אקסצנטרי, כמו גם על קינטיקה של פיתוח כוח.

קיבולת אירובית, הן ברמת הגוף כולו (VO 2max ) ובשרירי השלד, מופחת אצל קשישים. הירידה בקצב הלב עם הגיל מסבירה חלק גדול מהירידה ב- VO 2max 1 , אך מופחתתיכולת חמצון קלי, קשור במידה רבה לפעילות גופנית מופחתת 2 , האם לתרום. תפקוד המיטוכונדריה פגום עשוי להיות מעורב גם בפיתוח של סרקופניה ועמידות לאינסולין 3 . יכולת השרירים האירובית הוערכה בביופסיות שרירים באמצעות ניתוחים ביוכימיים של תכולת האנזימים המיטוכונדריאליים ומרכיבי החלבון הנמצאים שניהם במטריצה ​​( כלומר סינתזה ציטראטית) והמיטוכונדריה הפנימית. בנוסף, טכניקות היסטוכימיות שימשו למדוד את ההשפעה של אימון התנגדות על מורפולוגיה שריר ( כלומר, הרכב סוג סיבים, סיבים חתך שטח, וצפיפות נימי). שיטה חלופית להעריך יכולת שריר אירובי יהיה להשתמש ספקטרוסקופיה תהודה מגנטית כדי למדוד את שיעור רזינתזה קריאטין פוספט לאחר מימוש דלדול 4 . שיטה זו מספקת הערכה של קיבולת vivo שריר אירוביY אבל לא יכול להפלות בין תפקוד המיטוכונדריאלי והפרעות במחזור הדם. יתר על כן, עלויות גבוהות של ציוד להגביל את השימוש בטכניקה זו ברוב המעבדות. יכולת אירובית (VO 2max ו צפיפות המיטוכונדריה) ניתן לשפר על ידי תרגיל סיבולת אצל אנשים צעירים וזקנים 5 , 6 . עם זאת, ההשפעה של אימון התנגדות על פרמטרים אלה נחקר פחות, במיוחד בנושאים קשישים, והתוצאות הן סותרות 7 , 8 , 9 , 10 .

סוכרת מסוג 2 היא מחלה נפוצה בקרב האוכלוסייה המבוגרת. חוסר פעילות גופנית והשמנת יתר הם גורמים מרכזיים הקשורים לסגנון חיים המסבירים את שכיחות מוגברת של סוכרת מסוג 2. תרגיל אירובי בעצימות נמוכה מומלץ לעיתים קרובות לנושאים עם סובלנות גלוקוז מופחתת. עם זאת, הוא אינולומד כיצד כוח אימונים קשישים משפיע על סובלנות גלוקוז / רגישות לאינסולין 11 , 12 . הדרך המדויקת ביותר למדוד את הרגישות לאינסולין היא להשתמש בטכניקת הסוכר של הגלוקוז, שבה רמת הגלוקוז בדם נשמרת קבועה באמצעות עירוי גלוקוז במהלך תנאי אינסולין מוגבר 13 . החסרונות בטכניקה זו הם שזה זמן רב פולשני (צנתור עורקי) ודורש מתקני מעבדה מיוחדים. במחקר זה, נעשה שימוש בבדיקת הסבולת של גלוקוז אוראלי, הנפוצה ביחידות הבריאות. שיטה זו מתאימה כאשר יש לחקור מספר נושאים במשך פרק זמן מוגבל.

הבדיקה ואת ציר הזמן של ההליך הניסוי ניתן לסכם כדלקמן. השתמש שלושה ימים נפרדים לבדיקה לפני ואחרי תקופה של שמונה שבועות, עם אותו הסדר לוחות זמנים זמן משוער (≥ 24 שעות בין כל יום, < חזקה> איור 1). ביום הבדיקה הראשון, יש למדוד את הנתונים האנתרופומטיים, כגון גובה, מסת גוף, מסת שומן נטולת שומן (FFM) והיקף רגל עליון ( כלומר 15 ס"מ מעל הפטלים הקדמיים במצב שכיבה רגוע); יכולת רכיבה על אופניים תת-מימית; ואת כוח שריר הברך, כמתואר בשלבים 4 ו 5. קח ביופסיה שריר מן הירך ביום הבדיקה השני. לתיאורים נוספים, ראה שלב 6.1. בדיקת סובלנות גלוקוז אוראלי (OGTT) ביום הבדיקה האחרון. לתיאורים נוספים, ראה שלב 7.1. בקשו מכל המשתתפים להימנע מפעילות גופנית נמרצת למשך 24 שעות ולמהירות לילה לפני כל יום בדיקה. עם זאת, לבקש מהם להימנע פעילות גופנית מאומצת במשך 48 שעות לפני יום הבדיקה OGTT. שאל אותם לעקוב אחר הפעילות הגופנית הרגילה שלהם הרגלי דיאטה. שים לב כי לפני ואחרי התערבות, הן דיווח עצמי של קבוצות מזון הכנסה וסוג מזונות היו ללא שינוי.

Figimg "src =" / files / ftp_upload / 55518 / 55518fig1.jpg "/>
איור 1: פרוטוקול הניסוי. תרשים סכמטי. העיתוי בין שלוש בדיקות קדם-פוסטיות היה דומה לכל נושא והיה לפחות 24 שעות. פרטים נוספים מופיעים בטקסט. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

מחקר זה ביקש לחקור את ההשפעה של אימון התנגדות לטווח קצר אצל קשישים על יכולת חמצון שריר סובלנות גלוקוז. המטרה השנייה הייתה לבחון את ההשפעה על כוח, כוח, שיפורים איכותיים שרירים ( כלומר, חלבונים המעורבים איתות תא הרכב סיבי שריר סוג).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

ועדת האתיקה האזורית בשטוקהולם, שבדיה, אישרה את עיצוב החקירה.

1. חומר

  1. לגייס נשים וגברים בריאים יחסית 65-80 שנה שיש להם ערכי BMI בין 20 ל 30 ק"ג · מ -2 . אקראי אותם לשתי קבוצות. יש לוודא כי לאנשים בשתי הקבוצות יש רמות פעילות גופנית נמוכות יחסית ( כלומר, פעילות גופנית יומיומית מתונה וללא אימון גופני קבוע).
  2. לא לכלול משתמשים חוסמי בטא ואלה עם מחלת עורקים כליליים ובעיות נוירולוגיות או מפרקים חמורות.
  3. שאל את הנבדקים על הסכמתם בכתב לאחר שהודיע ​​להם על אי נוחות וסיכונים אפשריים במבחן ובאימונים.
  4. לאזן את ההתנגדות אימון (RET) ושליטה ללא הכשרה (CON) קבוצות במונחים של גיל, מין, BMI. שאל קבוצה אחת לבצע RET תחת מאמן במשך שעה 1 שלוש פעמים בשבוע במשך שמונה שבועות; הקבוצה האחרת תשמש כמתווךLs (CON).

2. בדיקה והדרכה

הערה: שמונה התרגילים הם תרגילי אימוני כוח סטנדרטיים: לחיצה ימנית על הרגל, מחנק בטן בישיבה, לחץ על חזה, יושבים לאחור, יושבים כתף הכתפיים, יושבים חתירה, יושבים רגל הרחבה (הרחבת הברך), ו תלתל רגל נוטה (פלקסיה הברך) ; ראה איור 8 בסעיף תוצאות נציג.

  1. במהלך האימון הראשון, להעריך את הכוח המקסימלי בחזרה מקסימלית אחת (1 RM) עבור כל תרגיל אימון.
    הערה: מודל RM 1 נפוץ ומוגדר כעומס שבו הנושא יכול להרים או לדחוף את ההתנגדות רק פעם אחת, אך לא פעמיים.
    1. לפני תחילת, לשאול את המשתתף לבצע קצר להתחמם (עם כמה ניסויים ראשוניים בעומסים במשקל נמוך מאוד) של התרגיל נבדק. לאחר מכן להגדיל את העומס עד רק מתחת ערך 1 RM סביר 1 (לרוב את המקסימום של 3-4 lo גדלמודעות). רשום את העומס המרבי שהנושא יכול לבצע רק פעם אחת (= 1 RM).
    2. מדוד 1 RM ב שמונה אימוני כוח רגיל (ראה איור 8 בסעיף נציג תוצאות). שאל את הנושאים לנוח לפחות 2-3 דקות בין כל התרגיל שנבדק.
      הערה: ציוד אימון כוח שימש כל האימונים, כולל בדיקות של כל אימון.
  2. שאל את כל קבוצת RET לבצע 1 h של אימון כוח בפיקוח שלוש פעמים בשבוע במשך שמונה שבועות. בקשו מהמשתתפים לבצע, לאחר החימום, את שמונה התרגילים הסטנדרטיים הנ"ל. הם צריכים לחזור על התרגיל 12 פעמים בכל סט ולבצע שלוש קבוצות של כל תרגיל. אפשר מנוחה במשך 1 דקות בין כל סט ו 2-3 דקות בין כל התרגיל.
    1. שאל את הנבדקים לבצע כל תרגיל מהר ככל האפשר במהלך שלב קונצנטריים ( כלומר, שלב קיצור שרירים) ולאט לאט במהלךשלב אקסצנטרי ( כלומר, שלב התארכות השרירים).
      הערה: נושאים יכולים לעשות את התרגילים בכל סדר. עם זאת, לבקש מהם להתחיל ולסיים עם תרגיל הרגל וגם לנסות לבצע את שמונה התרגילים בסדר המוצג. השתמש כוח אימון ציוד לכל שמונה תרגילים.
    2. במהלך כל אימון, לשאול את המשתתפים לבצע שלוש קבוצות ב 75-80% של 1 RM עבור כל תרגיל. הגדל את העומס על ידי 5% בערך הפגישה לאחר כאשר משתתף יכול לעשות 12 חזרות בכל שלוש קבוצות של תרגיל.

3. מבחן אופני סובמקסמי

הערה: בצע את מבחן רכיבה על אופניים subaximal ביום הבדיקה 1 (ראה מבוא ואת איור 1 ).

  1. בצע בדיקת ergometer במחזור, כולל שתי רמות subaximal, כל 4 דקות 14 , 15 . הגדר את קצב העבודה הראשון להיות נמוך (30 W) והשני ב 60-120 W, ללא הפסקה בין עומסים על ergometer המחזור.
    הערה: העומס הראשון הוא זהה עבור כל הנושאים, אבל הרמה השנייה והאחרונה subaximal צריך להיות כ 65-85% של קצב הלב המרבי עבור כל נושא. שני העומסים צריכים להיות זהים לפני ואחרי תקופת ההתערבות של 8 שבועות של אימון.
    1. לבסס את רמת העומס השני בגובה על בדיקות המוכר נעשה לפני הניסויים על ידי שואל איך פעיל פיזית האדם הוא על ידי בעל הנושא בתחילה מחזור במשך זמן קצר; מנהיג הבדיקה ירכיב דעה על סמך קצב הלב של הנושא לגבי מה עומס subaximal הסופי מתאים.
    2. הקלט את קצב הלב היציב הממוצע (HR) באמצעות צג קצב הלב דרך חגורת החזה ברגע האחרון על שיעורי העבודה הנמוכים והנמוכים, על ידי לקיחת ממוצע של HR הנצפה בשעה 3:15, 3:30, 3:45 , ו 4:00 דקות בכל שיעור עבודה.
    3. השתמש במכשיר ergo-spirometric כדי לבדוק את ההרכב של גז (O 2 ו CO 2 ) באוויר פג ועליו השראה. רשום את יחס חילוף הנשימה (RER, כלומר CO 2 / O 2 ) וכמת את ערכי RER הממוצעים במהלך הרגע האחרון (מארבע מדידות בכל 15 שניות) בעומס קצב העבודה.

4. הברך כוח Extensor: סטטי, אקסצנטרי, ו Concentric שיא מומנט ושיעור התפתחות כוח

הערה: בצע מדידות כוח הברך ביום הבדיקה 1 (ראה מבוא ותרשים 1 ).

  1. לפני ההקלטות, לשאול את הנושא לבצע חימום על ידי רכיבה על 8-10 דקות על ergometer מחזור ברמה subaximal (כלומר, כ 65-85% מקצב הלב המרבי).
  2. שאל את הנושא לשבת על הספסל של דינמומטר isokinetic. תקן את הגזע של הנושא עם רצועות על הכתפיים והירכיים. הכנס את שקית הנושא אל מוט הדינמומטר עם שתי רצועות: אחת מתחת לברך ואחת רק abovהקרסול. יישר את ציר הברך עם מרכז הסיבוב של פיר הדינמומטר.
  3. כאשר הנושא מאובטח, להעריך את כוח הברך מרבי מרבי כמו מומנט שיא, עם הנושא יושב הדינמוטר isokinetic. בתחילה לאפשר לנושא לבצע מספר ניסויים להכרה עם ציוד כוח הברך (דינמומטר isokinetic).
  4. בקשו מהאינדיבידואל לבצע ארבע תוספות ברך אקסצנטריות ואקסטצנטריות מרצון (לסירוגין), עם רגל ימין במהירות קבועה של זווית של 30 מעלות / שניה. הגדר את טווח התנועה בין 90 ° ל -15 ° (רגל ישרה = 0 °).
    1. במשימה אקסצנטרית, לשאול את הנושא כדי לעמוד בפני פיר דינמומטר עם מאמץ מקסימלי לאורך כל התנועה מ 15 ° ל 90 ° זווית הברך. במשימה קונצנטריים, לשאול את הנושא ללחוץ על הרגל התחתונה של מוט דינמומטר ב הברך הרחבה, ככל האפשר לאורך כל טווח תנועה.
  5. אפשר מנוחה של 4 דקות לאחר ההקלטות הדינאמיות. לאחר מכן, להעריך את סטנדרטי מרבי מרצון התכווצות מרצון (MVC) ארבע פעמים ב 65 ° זווית הברך. בכל משפט סטטי, שאלו את הנבדקים, יושבים באותה דינמומטר, לבעוט מהר וקשה ככל שהם יכולים נגד פיר דינמומטר, אשר כעת הוא קבוע (ב 65 °) ולא ניתן להעביר.
  6. עבור אותות מומנט (כוח), להמיר את אותות מומנט אנלוגי דיגיטלי באמצעות תיבת ממיר אנלוגי לדיגיטלי מחובר הדינמוטר isokinetic.
    הערה: הממיר ממיר אוטומטית את האותות האנלוגיים מהדינומטר לאותות דיגיטליים, אשר לאחר מכן מיוצאים אוטומטית למחשב שבו נאספים הנתונים.
    1. הגדר את תדר הדגימה ב 5 kHz בתוכנית ניתוח התוכנה של המחשב. אחסן את האותות הדיגיטליים במחשב לצורך ניתוח חוזק עתידי עם תוכנית ניתוח התוכנה.
  7. בניתוח שלאחר מכן, להשתמשהערך הגבוה ביותר המתקבל מארבע ניסויים עבור כל נושא במידות אקסצנטריות, קונצנטריות וסטטיות. בתוכנה, לחץ על הערך הגבוה ביותר של ארבעת הניסויים ורשום את ערך הכוח שמוצג על מסך המחשב.
    1. רשום את מומנט השיא הגבוה ביותר באקסצנטרי וברישומים הקונצנטריים עבור כל נושא וערך החוזק הגבוה ביותר מבין ארבעת הניסויים הסטטיים.
      הערה: בדיקת דינמומטר Isokinetic של כוח extensor הברך בתנוחת ישיבה יש אמינות תקפות תקינה 16 , 17 .
  8. למדוד את קצב כוח (מומנט) פיתוח (RFD) במהלך 0-30 ms ו 0-200 ms הערך הגבוה ביותר שנמצאו בין הניסויים הסטטיים. קבע את הערך של אפס ברמה של 7.5 ננומטר עבור תחילת ההתכווצות עבור כוח extensor הברך (זמן: 0 ms) 18 , 19 . להזיז את הסמן (בתוכנה עבור השרירניתוח כוח) לערך "7.5 ננומטר" על y- קנה מידה כדי לקבל את המיקום עבור 0 ms.
    1. עבור הערכה מראש הבדיקה, להגדיר את הסמן על הערך 30-ms (לאחר הפעם 0 ms). רשום את הערך המציג את העלאה ב Nm ב 30 ms ( כלומר, הגידול ננומטר מ 7.5 ננומטר = 0 אלפיות השנייה). בצע את אותו הליך עבור הערך שלאחר הבדיקה.
    2. לחשב את הגידול באחוזים עבור הערך לאחר הבדיקה Nm (מונה) לעומת הערך לפני הבדיקה Nm (מכנה) על פני תקופה של 0-30 ms. לכן, להציג את העלאת RFD באחוזים מן הבדיקה מראש כדי שלאחר הבדיקה. לעשות את אותם ניתוחים עבור מרווח הזמן של 0-200 ms.

5. שריר ביופסיה

הערה: לבצע ביופסיה בשריר ביום הבדיקה 2 (ראה מבוא איור 1 ).

  1. קח ביופסיה שריר מן החלק האמצעי של שריר הירך.
    1. לפני הביופסיה, להזריק 1-2 מ"ל של הרדמה מקומית תת עורית לתוך fascia. לאחר כמה דקות, לעשות חתך עם אזמל קטן דרך העור ואת fascia, בערך 1/3 של המרחק מן הפיקה אל עמוד השדרה העליון איליאק מעולה. חלץ על 100-150 מ"ג של רקמת שריר באמצעות conchotome.
  2. דגימות להקפיא עבור היסטוכימיה באיזופנטן מקורר לנקודת הקיפאון שלה בחנקן נוזלי ולאחסן אותו ב -80 ° C. חנות מדגם של 30-50 מ"ג של רקמת שריר.
  3. במהירות להקפיא את דגימות לניתוח חלבון בחנקן נוזלי ולאחסן אותם -80 מעלות צלזיוס. חנות מדגם של 30-50 מ"ג של רקמת שריר.

6. OGTT

הערה: בצע OGTT (מבחן סובלנות גלוקלית אוראלית) ביום הבדיקה 3 (ראה מבוא ואת איור 1 ). הזמן בין התרגיל לבין OGTT חייב להיות מעל 48 שעות ו צריך להיות דומה בין מראש ואחרי- בדיקות. A OGTT אוראלי 2-h משמש כדי לחקור אם דגימות דם תכופות במהלך תקופה זו להראות רמות נורמלי או מוגבר, המציין סוכרת או תנאים טרום.

  1. בצע את הבדיקה OGTT בבוקר על נושאים אשר צמו בן לילה ולא עשו שום תרגיל מאומצת ביום הבדיקה או יום קודם לכן.
  2. קחו דגימות דם (4 מ"ל) ממשתתפי סובין באמצעות צינורית ורידי ב -15 דקות לפני ובדיוק לפני צריכת הגלוקוז, ואחריו 15, 30, 60, 90 ו- 120 דקות לאחר בליעת הגלוקוז 75 גרם של גלוקוז ב 250 גרם / ליטר פתרון).
  3. צנטריפוגה דגימות דם ב XG 1500 ו 4 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות ולאחסן את פלזמה ב -20 מעלות צלזיוס לניתוח בעתיד. השתמש בדגימות כדי לבצע בדיקות רמת גלוקוז סטנדרטית (שלב 7).
  4. עבור גלוקוז, אינסולין, c-peptide, לחשב את השטח מתחת לעקומה (AUC) על ידי קביעת הזמן אינטגרל של גלוקוז מעל רמות גלוקוז הבסיס. השתמש בתוצאות OGTTלחישוב הרגישות לאינסולין עבור כל הגוף בשיטת Matsuda 21 , בהתאם למשוואה: 10 000 * √ [(גלוקוזה בסיסית * בסיס אינסולין) * (גלוקוז אומר * אינסולין אומר ].

7. ניתוח דם מדגם

  1. לכמת את ריכוז הגלוקוז של פלזמה ורידי עם מנתח אוטומטי. הגדר את רמת הסבולת של גלוקוז לקוי בערכי גלוקוז בדם> 7.8 mmol / L לאחר 2 OGTT 2 שעות.
  2. השתמש ערכות ELISA 22 לבצע ניתוחים פלזמה של אינסולין c-peptide. השתמש הקורא צלחת. שים את הצלחות ELISA הן אינסולין c- פפטיד בקורא צלחת (כל אחד בהזדמנות נפרדת).
    הערה: קורא הצלחת מודד את כמות האינסולין ואת כמות c- פפטיד על ידי מדידת דגימות על צלחת ב absorbances מסוימים. ליפידים דם TG, HDL, apolipoprotein A1, ו apolipoprotein B נותחו עם שיטות סטנדרטיות בבית החולים האוניברסיטאי קרולינסקה, שטוקהולם, שוודיה.

8. ניתוח של דגימות שרירים

  1. Immunoblotting
    1. ראשית, להקפיא יבש את דגימת שריר lyophilizer בלחץ מתחת 10 -1 mbar במשך 12 שעות. לנתח את זה כך שהוא נקי של דם ורקמת חיבור באמצעות מחט ו מלקחיים תחת מיקרוסקופ אור. אחסן אותו ב -80 ° C.
      הערה: כמות מתאימה של שריר היא בין 1 ל 5 מ"ג של משקל יבש, אבל פרוטוקול יכול להיות מותאם פחות מ 1 מ"ג, כל הדרך סיבים בודדים. בשל כמות נמוכה של רקמת שריר נוכח ביופסיה אחת, ערכים של משתתף RET לא היו בשימוש immunoblotting.
    2. Homogenize את דגימות שריר עם מחבט מיני חוצץ בקירור קר (80 μL / מ"ג) המורכב 2 mM 4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonic חומצה (HEPES), 1 mM ethylenediaminetetraacetic חומצה (EDTA), 5 מ"מ אתילן גליקול ביס (Β-aminoethyl אתר) -N, N, N, N-tetraacetחומצה IC (EGTA), 10 מ"מ MgCl 2 , 50 מ"מ גליקרופוספט, 1% TritonX-100, 1 mM Na 3 VO 4 , 2 dithiothreitol מ"מ, 20 מיקרוגרם / מ"ל ​​leupeptin, 50 מיקרוגרם / mL aprotinin, מעכב phosphatase 1% קוקטייל, ו 40 מיקרוגרם / μL PMSF (פלואוריד phenylmethylsulfonyl).
      1. מניחים סקופ של 0.5 מ"מ חרוזי תחמוצת זירקוניום בצינור אחד עם השריר. הוסף חיץ ו homogenize עבור 2 x 1 דקות על מהירות שלב 7-8 (כאן, המקסימום הוא 10) ו 4 ° C.
    3. צנטריפוגה homogenate במשך 10 דקות ב 10,000 x גרם. מעבירים את supernatant הנותרים צינורות חדשים ולזרוק את גלולה המכילה את החלבונים המבניים.
    4. Spectrophotometrically לקבוע את ריכוז החלבון supernatant עם ערכת זמין מסחרית באמצעות קורא צלחת ב 660 ננומטר 23 .
      1. לאחר מכן לדלל את הדגימות עם 2x חיץ מדגם Laemmli ו חיץ homogenizing (1: 1) לריכוז חלבון סופי של 1.5 מיקרוגרם /# 181; L. מחממים אותם 95 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות כדי להכחיש את החלבונים. אחסן את דגימות מדולל ב -20 מעלות צלזיוס לפני הניתוח.
    5. עבור ג'ל אלקטרופורזה הילידים- polyacrylamide (PAGE), לטעון 30 מיקרוגרם של חלבון מכל מדגם לתוך 18-היטב precast ג'ל שיפוע (4-20% acrylamide) ולבצע אלקטרופורזה ב 300 V במשך 30 דקות על הקרח.
    6. לאזן את הג'ל במאגר העברת (25 מ"מ בסיס טריס, 192 מ"מ גליצין, מתנול 10%) במשך 30 דקות ב 4 ° C. העברת חלבונים polyvinylidene ממברנות פלואוריד עם 0.2 מיקרומטר גודל הנקבוביות ב זרם קבוע של 300 mA במשך 3 שעות ב 4 ° C.
    7. כדי לאשר טעינה שווה והעברה, הכתם את הממברנות עם כתם חלבון סה"כ 24 . עבור כל חלבון היעד, לטעון את כל הדגימות מכל נושא על אותו ג'ל ולהפעיל את כל הג'לים באותו זמן.
    8. לחסום את הממברנה במשך שעה 1 בטמפרטורת החדר ב-טריס שנאגרו מלוחים (20 מ"מ טריס בסיס, 192 מ"מ NaCl, כפות, pH 7.6) המכיל5% חלב ללא שומן.
    9. דגירה של הממברנות במשך הלילה עם נוגדנים ראשוניים (ראה את רשימת החומרים) מדולל ב TBS המכיל 2.5% חלב ללא שומן, בתוספת 0.1% Tween-20 (TBS-TM).
    10. לאחר הדגירה נוגדן העיקרי, לשטוף את הממברנות (2 x 1 דקות פלוס 3 x 5 דקות) עם TBS-TM ו דגירה עם נוגדנים משני (ראה את רשימת החומרים) מצומדות עם peroxidase חזרת עבור 1 שעה בטמפרטורת החדר. לשטוף שוב עם TBS-TM (2 x 1 דקות ו 3 x 10 דקות) ושוב הנושא אותם ארבעה שוטף 5 דקות נוספות עם TBS.
    11. החל 6-12 מ"ל של המצע chemiluminescent לממברנה במשך 5 דקות. מניחים את הממברנה בין שני יריעות פלסטיק שקופות. מניחים את הקרומים מול מצלמת CCD חסימת האור החיצוני. קח חשיפות סדרתי באמצעות מסנן מצלמה chemiluminescent.
      1. השתמש בתוכנה כדי לרכוש 10 חשיפות במשך 2 דקות, או עד שהאותות רוויים. השתמש בהגדרה סטנדרטית, הן עבור הגדרות המסנן האופטיO לרכוש chemiluminescence, כמו גם עבור הגדרות העדשה.
    12. השתמש בחשיפה הגבוהה ביותר שאינה מובילה לרוויה וסמן את קווי המתאר של הלהקה. לכמת את להקות כמו אינטנסיביות x מ"מ 2 באמצעות אותה תוכנה. הפחת את רעש הרקע מעוצמת הלהקה. להציג את התוצאות ביחס לכל חלבון הכתם ולבטא את זה כמו שינוי באחוזים לעומת הבסיס.
  2. היסטוכימיה
    הערה: טכניקת ההיסטוכימיה להלן מבוססת על שיטות המתוארות בפרסום מוקדם יותר 25 .
    1. עבור היסטוכימיה, לחתוך סעיפים חתך סדרתי (10 מיקרומטר) ב -20 מעלות צלזיוס באמצעות cryostat. הר חתכים על זכוכית שקופיות מאוחסן קובט זכוכית ואוויר לייבש את פרוסות ביופסיה בטמפרטורת החדר.
    2. הכן פתרונות חיץ עבור כל רמת pH עבור הדגירה מראש ב pH 4.3, 4.6, ו 10.3 עבור מכתים ATPase 26 . כדי לדמיין נימי דם, staבחתכים באמצעות שיטת אמילאז-PAS 27 .
    3. לכייל את ה- pH מטר על ידי שפכים פתרונות כיול לתוך כוסות כיול שכותרתו. לחץ על הלחצן המתאים כדי לבחור את ה- pH מהתפריט הראשי.
      1. שוטפים את החללית עם מים deionized ומניחים את החללית בכוס הכיול הראשון. ודא כי אין בועות אוויר בקרום. מדוד את פתרון הכיול הראשון ולאחר מכן הצג את פתרון הכיול הבא (התצוגה תבקש את הפתרון הבא).
      2. שוטפים את החללית במים דאיוניים ולאחר מכן מניחים אותה בכוס הכיול השני. ודא כי אין בועות אוויר בקרום. מדוד פתרון כיול שני והמשך לפתרון הכיול הבא.
      3. יש לשטוף את החללית עם מים deionized ומניחים אותו כוס כיול השלישי. ודא שאין בועות אוויר בקרום. מדוד את פתרון הכיול השלישי.
        הערה: כאשר הכיול הואטוב, התצוגה תציג בקצרה, "3 Buffer אישור" ולאחר מכן לחזור לתפריט הראשי.
    4. השתמש במאגרים כדלקמן עבור מכתים ATPase.
      1. כדי להכין פתרון ב pH 10.3, השתמש בשני פתרונות שונים: (א) 4.506 גרם של גליצין, 4.8 גרם של CaCl 2 , 3.51 גרם של NaCl, ו 600 מ"ל של DH 2 O ו (B) 2.176 גרם של NaOH ו 540 מ"ל של dH 2 O. לאחסן את הפתרונות בחדר קר או מקרר. השתמש בהם בתוך חודש.
      2. כדי להכין פתרונות ב pH 4.3 ו 4.6, לבצע "preincubation חומצה." הכן את החומצה לפרינקובציה באמצעות: 6.47 גרם של אצטט Na, 3.7 גרם של KCl, ו 500 מ"ל של DH 2 O. לאחר מכן, להכין 1% CaCl 2 פתרון על ידי המסת 2.5 גרם של אותו 250 מ"ל של DH 2 O. היכונו 2 תמיסת CoCl 2 על ידי המסת 5 גרם של אותו 250 מ"ל של DH 2 O.
      3. אחסן את הפתרונות הללו והשתמש בהם כאמור. לבסוף, להכין 0.2% אמוניום גופרתי על ידיערבוב 800 μL של 20% (NH 4 ) 2 S לתוך 40 מ"ל של DH 2 O. הכן את זה טרי.
    5. הכן פתרונות בערכי pH מסוימים באופן הבא. לאחר כיול של מטר pH, להסיר את cuvettes וסידן וקובלט כלורידים מן המקרר ולאפשר להם להתחמם לטמפרטורת החדר לפני מכתים.
      1. עבור pH 10.3 , להוסיף בסביבות 25 מ"ל של פתרון A כדי קטן (כ 70 מ"ל) כוס זכוכית. מדוד את ה- pH. שמור על הוספת הפתרון B עד שה pH הנדרש של 10.37 מגיע. אם מכתים כהה מדי, להגדיל את ה- pH. אם הוא בהיר מדי, להפחית את ה- pH.
      2. עבור pH 4.6 , להוסיף סביב 25 מ"ל של "preincubation חומצה" על כוס זכוכית קטנה. מדוד את ה- pH. להפחית את ה- pH באמצעות חומצה אצטית 5 M. אם התמונה של הכתם כהה מדי, נסה להאיר עם pH מוגברת. אם זה בהיר מדי, להחשיך עם ירידה pH. אם מכתים לא עוזר, נסה אחר pH: 4.8 instEad של 4.6.
      3. עבור pH 4.3 , לעשות את אותו הדבר עבור 4.6, אבל להוסיף חומצה אצטית יותר. להקטין את ה- pH אם הכתם הוא בהיר מדי, ולהגדיל את ה- pH אם זה כהה מדי עבור הסיבים להיות מוגדר.
      4. הכן פתרון ATP כדלקמן. לשקול 0.017 גרם של ATP לכל קובט (10 מ"ל), כך 0.051 גרם לכל 3 cuvettes או 0.068 גרם עבור 4 cuvettes. קח 30 מ"ל (עבור 3 cuvettes, 10 מ"ל / קובט) של פתרון ב pH 10.3 (שימוש בקנה מידה גליל צילינדר) והכניסו אותו לתוך כוס זכוכית עם ATP שקל.
        1. מערבבים היטב ומודדים את ה- pH. להפחית את ה- pH באמצעות HCl מרוכז עד ה- pH מגיע בדיוק 9.40.
      5. עבור הדגירה בערכי pH שונים, בצע את הפעולות הבאות. מקום 10.3 פתרון לתוך קובט אחד דגירה אותו באמבט מים ב 37 מעלות צלזיוס למשך 9 דקות. פתרון 4.3 מקום לתוך קובט אחר דגירה אותו בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות. מקום 4.6 פתרון לתוך קובט האחרון דגירה ב RT במשך 1 דקות.
      6. בעקבות ה- pH המועדףהליך הדגירה, להחיל את התוכן של כל קובט כדלקמן. לשטוף 15 פעמים עם DH 2 O. הוסף פתרון ATP (0.170 גרם של ATP / 100 מ"ל של H 2 O) למדגם ביופסיה. דגירה באמבט מים ב 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות. לשטוף 15 פעמים עם dH 2 O.
      7. הוסף CaCl 2 פתרון (1 גרם של CaCl 2/100 מ"ל של H 2 O) למדגם ביופסיה ב cuvettes. דגירה ב RT במשך 3 דקות. לשטוף 15 פעמים עם dH 2 O. הוסף פתרון CoCl 2 (2 גרם של COCl 2/100 מ"ל של H 2 O) למדגם ביופסיה ב cuvettes. דגירה ב RT במשך 3 דקות. לשטוף 15 פעמים עם dH 2 O.
      8. שים את זה (NH 4 ) 2 S פתרון במשך 30 שניות לשטוף במהירות 15 פעמים מתחת למכסה המנוע קטר. דבק את הביופסיה פרוסות על גבי זכוכית שקופית. כדי למנוע בועות, לסחוט את הביופסיות, אבל לא קשה מדי.
    6. בחר אזור אחד של חתך רוחב ללא חפצים או חתכים אורך של הסיבים. ניתוח תחת liGHT מיקרוסקופ באמצעות תוכנה.
    7. הערכת שטח חתך (CSA), נימיות, סיווג סוג סיבים ( כלומר, סוג I, IIA, או IIX) באמצעות ניתוח תמונה במחשב מממוצע של לפחות 150-200 סיבים לכל ביופסיה. מתוך תמונה מיקרוסקופית של סיבי שריר בחתכים, יש לוודא כי לשלושת סוגי סיבי השריר ( כלומר, סוג I, IIA ו- IIX) יש גוונים שונים של לבן לאפור לשחור, בהתאם לצביעת ה- pH ( כלומר, 4.34, 4.65 ו -10.37).
    8. התחל על ידי סימון כמה סיבי סוג אני. לאחר מכן, התוכנית באופן אוטומטי לרשום את סוג השני, אני סיבים. ודא שכל הסיבים מסוג I מסומנים כהלכה. כדי לסמן סיב מסוים, לחץ על "וקטור" כפתור. השתמש בסמן כדי למדוד את האזור עבור כל סיבי שריר שנבחרו בנפרד.
    9. לאחר ניתוח של סיבים מסוג I, להמשיך באותו הליך עבור סוג IIA ו סוג IIX. הממוצע SEM ± עבור כל סוג של סיבי שריר ( כלומר, סוג אני, IIA ו- IIX) יש לחשב לגבי כמות הסיבים ו- CSA עבור קבוצות ה- RET ו- CON.
      הערה: אזור החתך (CSA), נימים וסיווג של סוג סיבים ( כלומר, סוג I, IIA ו- IIx) הוערכו מממוצע של 163 ± 9 סיבים לכל ביופסיה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

חוֹמֶר

במחקר, 21 נשים וגברים בריאים יחסית, בני 65-80 עם ערכי BMI בין 20 ל -30 ק"ג · m -2 השתתפו, חולקו באקראי לשתי קבוצות. אצל שני הקבוצות היו רמות פעילות גופנית נמוכות יחסית ( כלומר, פעילות גופנית מתונה ברמה יומיומית וללא אימון גופני קבוע). קבוצה אחת (n = 12, 6 נשים ו -6 גברים) ביצעה RET תחת מאמן במשך 3 שעות שלוש פעמים בשבוע ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

במחקר זה, מספר טכניקות שימשו כדי לחקור את ההשפעות של אימון התנגדות מתקדמת לטווח קצר על תפקוד השרירים / מורפולוגיה של אנשים קשישים, יכולת אירובית וסובלנות לגלוקוז. הממצא העיקרי היה, כי בהשוואה לקבוצת ביקורת, שיפורים רבים התרחשו יכולת השריר האירובי, סובלנות גלוקוז, כוח, כוח, איכות השרירים ( כלומר, חלבון מעורב בתא איתות הרכב סיבי שריר). עלייה הייתה, למשל, עבור: סטטית, אקסצנטרית, קונצנטריים מקסימלית כוח הברך הארכה (8-12%); עומסי אימון (19-72%), קצב מקסימלי של התפתחות כוח (RFD...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

תודות

המחברים מודים לאנדרי נינקרק, דניס פיירון, וסבסטיאן סקולד לפיקוח על ההדרכות ומספר מבחנים; לנושאים המשתתפים; כדי טים קרוספילד עבור תיקון שפה; ולתמיכה הכלכלית של בית הספר השוודי למדעי ספורט ובריאות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<כתם מערבי>חזק
פירס 660 ננומטר ערכת בדיקת חלבוןתרמו מדעי, רוקפורד, אילינוי, ארה"ב22662
SuperSignal West Femto מצע רגישות מקסימלית Thermo Scientific34096
קוקטייל מעכב פרוטאז עצור (100x)Thermo Scientific78429
Restore PLUS Western Blot Stripping BufferThermo Scientific46430
ערכת כתמי חלבון הפיכה לפירס לממברנות PVDFThermo Scientific24585
10 st - 4– 20% ג'ל Criterion TGX, 18 בארות, 30 ומיקרו; מעבדותL Bio-Rad, ריצ'מונד, קליפורניה, ארה"ב567-1094
קרום PVDF Immun-Blot Bio-Rad162-0177
Precision Plus חלבון תקני צבע כפול Bio-Rad161-0374
2x Laemmli מאגר דגימהBio-Rad161-0737
10x Tris/GlycineBio-Rad161-0771
2-MercaptoethanolBio-Rad161-0710
Tween 20Bio-RadP1379-250ML
ניתוח להקה עם כמות גרסה אחת 4.6.3.softwareBio-Rad
1% מעכב פוספטאז קוקטיילסיגמא-אולדריץ', סנט לואיס, מיזורי, ארה
<נוגדנים חזקים>
mTOR (1:1,000)איתות תאים, דנברס, מסצ'וסטס, ארה"ב2983
Akt (1:1,000)איתות תאים, דנברס9272
משני נגד ארנב ואנטי עכבר HRP מקושר (1:10,000)איתות תאים, דנברס
ציטראט סינתאז (CS) (1:1,000)Gene tex, סן אנטוניו, קליפורניה, ארה"ב
OXPHOS (1:1,000)Abcam, קיימברידג', בריטניה
ציוד חזק> - ניתוח דגימות שריר
Bullet Blender 1.5 להומוגניזציהשל Next Advance, ניו יורק, ארה"ב
קורא צלחותTecan infinite F200 pro, Mä nnedorf, שוויץ
היסטוכימיה
Mayer hematoxylinHistoLab, Vä stra Frö lunda, שבדיה 1820
שמן אדום oסיגמא-אולדריץ', סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב00625-25y
NaClסיגמא-אולדריץ'793566-2.5 ק"ג
קובלט כלורידסיגמא-אולדריץ'60818-50 גרם
עמילאזסיגמא-אולדריץ'A6255-25MG
ATPסיגמא-אולדריץ'A2383-5G
גליציןVWR-chemicals / VWR-international, Spå nga, שוודיה101196X
סידן כלוריVWR-chemicals / VWR-international22328.262
איזו-פנטןVWR-chemicals / VWR-international24872.298
Etanol 96%VWR-chemicals / VWR-international20905.296
NaOHMERCK, סטוקהולם, שוודיה1.06498.1000
Na acetateMERCK1.06268.1000
KClMERCK1.04936.1000
אמוניום גופרתיMERCKU1507042828
חומצה אצטית 100%MERCK1.00063.2511
Schiffs& מגיבMERCK1.09033.0500
חומצה תקופתיתMERCK1.00524.0025
כלורופורםMERCK1.02445.1000
pH-meter LANGEHACH LANGE GMBH, דיסלדורף, גרמניה
מיקרוסקופ אוראולימפוס BH-2, אולימפוס, טוקיו, יפן
Cryostat  Leica CM1950Leica Microsystems, Wetzlar, גרמניה
Leica Software Leica Qwin V3Leica Microsystems
Gel Doc 2000 - Bio-Rad, הגדרת מצלמהBio-Rad Laboratories AB, Solna, Sweden 
תוכנת Quantift One - 4.6 (גרסה 4.6.3; Bio Rad)Bio-Rad Laboratories AB, Solna, שבדיה 
<חזק>בדיקת סבילות לגלוקוס דרך הפה, OGTT
Glukos APL 75 gAPL, שטוקהולם, שוודיה323,188
מנתח אוטומטי Biosen 5140EKF Diagnostics, Barleben, גרמניה
אינסולין ופפטיד C בערכת פלזמה ELISAMercodia AB, Uppsala שוודיה10-1132-01, 10-1134-01
צלחת קוראTecan אינסופי F200 pro, Mä nnedorf, שוויץ
<חזק>ציוד נוסף
מדדים של מסה נטולת שומןFFM-Tanita T5896, טניטה, טוקיו, יפן
ציוד אימוני כוח לכל תרגילי האימוןCybex International Inc., Medway, מסצ'וסטס, ארה"ב 
ארגומטר מחזור ארגומטר מונרק 893E, תרגילי מונרק, ורברג, שבדיה 
מד דופק RS800, PolarPolar Electro OY, קמפלה, פינלנד
Oxycin-Pro - מכשיר ארגו-ספירומטרי אוטומטיErich Jaeger GmbH, Hoechberg, גרמניה
דינמומטר איזוקינטי, Isomed 2000, חוזק שרירי הברךD& R Ferstl GmbH, Henau, גרמניה
מערכת רכישת נתונים CED 1401 ותוכנת SignalCambridge Electronic Design, קיימברידג', בריטניה
תוכנה לניתוח כוח שרירים, Spike 2, גרסה 7Signal Hound, מרכז לוס אנג'לס, וושינגטון, ארה"ב
תוכנת סטטיסטיקה לניתוחים סטטיסטייםStatistica, Stat soft. inc, טולסה, אוקלהומה, ארה"ב
<ציוד ביופסיית שרירים חזק>
Weil Blakesley conchotomeWisex, Mö lndal, שבדיה
הרדמה מקומית קרבוקאין, 20 מ"ל, 20 מ"ג/מ"ל; אסטרה זנקה, Sö dertä lje, שוודיה169,367
סכין גילוח בטיחות נוצות להב כירורגיCO, LTD, אוסקה, יפן 
"ב <11048030

מקורות

  1. Carrick-Ranson, G., et al. The effect of age-related differences in body size and composition on cardiovascular determinants of VO2max. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 68 (5), 608-616 (2013).
  2. Peterson, C. M., Johannsen, D. L., Ravussin, E. Skeletal muscle mitochondria and aging: a review. J. Aging. 2012, 194821(2012).
  3. Russell, A. P., Foletta, V. C., Snow, R. J., Wadley, G. D. Skeletal muscle mitochondria: a major player in exercise, health and disease. Biochim. Biophys. Acta. 1840 (4), 1276-1284 (2014).
  4. Conley, K. E., Jubrias, S. A., Esselman, P. C. Oxidative capacity and ageing in human muscle. J. Physiol. 526 (Pt 1), 203-210 (2000).
  5. Holloszy, J. O. Adaptation of skeletal muscle to endurance exercise. Med. Sci. Sports. 7 (3), 155-164 (1975).
  6. Menshikova, E. V., Ritov, V. B., Fairfull, L., Ferrell, R. E., Kelley, D. E., Goodpaster, B. H. Effects of exercise on mitochondrial content and function in aging human skeletal muscle. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 61 (6), 534-540 (2006).
  7. Balakrishnan, V. S., et al. Resistance training increases muscle mitochondrial biogenesis in patients with chronic kidney disease. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 5 (6), 996-1002 (2010).
  8. Ferrara, C. M., Goldberg, A. P., Ortmeyer, H. K., Ryan, A. S. Effects of aerobic and resistive exercise training on glucose disposal and skeletal muscle metabolism in older men. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 61 (5), 480-487 (2006).
  9. Frontera, W. R., Meredith, C. N., O'Reilly, K. P., Evans, W. J. Strength training and determinants of VO2max in older men. J. Appl. Physiol. (1985). 68 (1), 329-333 (1990).
  10. Toth, M. J., Miller, M. S., Ward, K. A., Ades, P. A. Skeletal muscle mitochondrial density, gene expression, and enzyme activities in human heart failure: minimal effects of the disease and resistance training. J. Appl. Physiol. (1985). 112 (11), 1864-1874 (2012).
  11. Zachwieja, J. J., Toffolo, G., Cobelli, C., Bier, D. M., Yarasheski, K. E. Resistance exercise and growth hormone administration in older men: effects on insulin sensitivity and secretion during a stable-label intravenous glucose tolerance test. Metabolism. 45 (2), 254-260 (1996).
  12. Davidson, L. E., et al. Effects of exercise modality on insulin resistance and functional limitation in older adults: a randomized controlled trial. Arch. Intern. Med. 169 (2), 122-131 (2009).
  13. DeFronzo, R. A., Tobin, J. D., Andres, R. Glucose clamp technique: a method for quantifying insulin secretion and resistance. Am. J. Physiol. 237 (3), E214-E223 (1979).
  14. Åstrand, P. O., Ryhming, I. A nomogram for calculation of aerobic capacity (physical fitness) from pulse rate during sub-maximal work. J. Appl. Physiol. 7 (2), 218-221 (1954).
  15. Björkman, F., Ekblom-Bak, E., Ekblom, Ö, Ekblom, B. Validity of the revised Ekblom Bak cycle ergometer test in adults. Eur. J. Appl. Physiol. 116 (9), 1627-1638 (2016).
  16. Seger, J. H., Westing, S. H., Hanson, M., Karlson, E., Ekblom, B. A new dynamometer measuring eccentric and eccentric muscle strength in accelerated, decelerated and isokinetic movements: validity and reproducibility. Eur. J. Appl. Physiol. 57 (5), 526-530 (1988).
  17. Westing, S. H., Seger, J. Y., Karlson, E., Ekblom, B. Eccentric and concentric torque-velocity characteristics of the quadriceps femoris in man. Eur. J. Appl. Physiol. 58 (1-2), 100-104 (1988).
  18. Aagaard, P., Simonsen, E. B., Andersen, J. L., Magnusson, P., Dyhre-Poulsen, P. Increased rate of force development and neural drive of human skeletal muscle following resistance training. J. Appl. Physiol. 93 (4), 1318-1326 (2002).
  19. Andersen, L. L., Aagaard, P. Influence of maximal muscle strength and intrinsic muscle contractile properties on contractile rate of force development. Eur. J. Appl. Physiol. 96 (1), 46-52 (2006).
  20. Henriksson, K. G. "Semi-open" muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure. Acta Neurol. Scand. 59 (6), 317-323 (1979).
  21. Matsuda, M., DeFronzo, R. A. Insulin sensitivity indices obtained from oral glucose tolerance testing: comparison with the euglycemic insulin clamp. Diabetes Care. 22 (9), 1462-1470 (1999).
  22. American Diabetes, Association. Diagnosis and classification of diabetes mellitus. Diabetes Care. 28, Suppl 1. S37-S42 (2005).
  23. Moberg, M., Apró, W., Ekblom, B., van Hall, G., Holmberg, H. C., Blomstrand, E. Activation of mTORC1 by leucine is potentiated by branched-chain amino acids and even more so by essential amino acids following resistance exercise. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 310 (11), C874-C884 (2016).
  24. Antharavally, B. S., Carter, B., Bell, P. A., Krishna Mallia,, A, A high-affinity reversible protein stain for Western blots. Anal. Biochem. 329 (2), 276-280 (2004).
  25. Brooke, M. H., Kaiser KK, Muscle fiber types: how many and what kind? Arch. Neurol. 23 (4), 369-379 (1970).
  26. Brooke, M. H., Kaiser, K. K. Three "myosin adenosine triphosphatase" systems: the nature of their pH lability and sulfhydryl dependence. J. Histochem. Cytochem. 18 (9), 670-672 (1970).
  27. Andersen, P. Capillary density in skeletal muscle of man. Acta Physiol. Scand. 95 (2), 203-205 (1975).
  28. Frank, P., Andersson, E., Pontén, M., Ekblom, B., Ekblom, M., Sahlin, K. Strength training improves muscle aerobic capacity and glucose tolerance in elderly. Scand. J. Med. Sci. Sports. 26 (7), 764-773 (2016).
  29. Blomstrand, E., Celsing, F., Fridén, J., Ekblom, B. How to calculate human muscle fibre areas in biopsy samples--methodological considerations. Acta Physiol. Scand. 122 (4), 545-551 (1984).
  30. Cuthbertson, D., et al. Anabolic signaling deficits underlie amino acid resistance of wasting, aging muscle. FASEB J. 19 (3), 422-424 (2005).
  31. Vincent, K. R., Braith, R. W., Feldman, R. A., Kallas, H. E., Lowenthal, D. T. Improved cardiorespiratory endurance following 6 months of resistance exercise in elderly men and women. Arch. Intern. Med. 162 (6), 673-678 (2002).
  32. Cadore, E. L., et al. Effects of strength, endurance, and concurrent training on aerobic power and dynamic neuromuscular economy in elderly men. J. Strength Cond. Res. 25 (3), 758-766 (2011).
  33. Jubrias, S. A., Esselman, P. C., Price, L. B., Cress, M. E., Conley, K. E. Large energetic adaptations of elderly muscle to resistance and endurance training. J. Appl. Physiol. (1985). 90 (5), 1663-1670 (1985).
  34. Benton, C. R., Wright, D. C., Bonen, A. PGC-1alpha-mediated regulation of gene expression and metabolism: implications for nutrition and exercise prescriptions. Appl. Physiol. Nutr. Metab. 33 (5), 843-862 (2008).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

Western BlotAkt mTOR
שיפור כוח, כוח, יכולת שריר אירובי, סובלנות גלוקוז באמצעות אימון לטווח קצר כוח מתמשך בקרב אנשים קשישים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.