שיפור כוח, כוח, יכולת שריר אירובי, סובלנות גלוקוז באמצעות אימון לטווח קצר כוח מתמשך בקרב אנשים קשישים

הזדקנות קשורה לאובדן מסת שריר (סרקופניה), כוח ועוצמה. כוח מופחת, וככל הנראה אפילו חשוב יותר, כוח, תוצאות חוסר תנועה, סיכון מוגבר לפציעה, איכות חיים מופחתת. אימון ההתנגדות היא אסטרטגיה ידועה לנטרל סרקופניה והידרדרות בתפקוד השרירים. הערכה גסה של כוח השרירים ניתן לקבל מן העומס או מספר חזרות שהושגו. עם זאת, מחקר זה השיג מידע מפורט ומדויק יותר על תפקוד השרירים באמצעות דינמומטר isokinetic לאסוף מידע על מומנט במהלך התכווצות איזומטרי, קונצנטריים אקסצנטרי, כמו גם על קינטיקה של פיתוח כוח.

קיבולת אירובית, הן ברמת הגוף כולו (VO _2max ) _{ובשרירי} השלד, מופחת אצל קשישים. הירידה בקצב הלב עם הגיל מסבירה חלק גדול מהירידה ב- VO _2max ¹ , אך מופחתתיכולת חמצון קלי, קשור במידה רבה לפעילות גופנית מופחתת ² , האם לתרום. תפקוד המיטוכונדריה פגום עשוי להיות מעורב גם בפיתוח של סרקופניה ועמידות לאינסולין ³ . יכולת השרירים האירובית הוערכה בביופסיות שרירים באמצעות ניתוחים ביוכימיים של תכולת האנזימים המיטוכונדריאליים ומרכיבי החלבון הנמצאים שניהם במטריצה ​​( כלומר סינתזה ציטראטית) והמיטוכונדריה הפנימית. בנוסף, טכניקות היסטוכימיות שימשו למדוד את ההשפעה של אימון התנגדות על מורפולוגיה שריר ( כלומר, הרכב סוג סיבים, סיבים חתך שטח, וצפיפות נימי). שיטה חלופית להעריך יכולת שריר אירובי יהיה להשתמש ספקטרוסקופיה תהודה מגנטית כדי למדוד את שיעור רזינתזה קריאטין פוספט לאחר מימוש דלדול ⁴ . שיטה זו מספקת הערכה של קיבולת vivo שריר אירוביY אבל לא יכול להפלות בין תפקוד המיטוכונדריאלי והפרעות במחזור הדם. יתר על כן, עלויות גבוהות של ציוד להגביל את השימוש בטכניקה זו ברוב המעבדות. יכולת אירובית (VO _2max ו צפיפות המיטוכונדריה) ניתן לשפר על ידי תרגיל סיבולת אצל אנשים צעירים וזקנים ^{5 , 6} . עם זאת, ההשפעה של אימון התנגדות על פרמטרים אלה נחקר פחות, במיוחד בנושאים קשישים, והתוצאות הן סותרות ^{7 , 8 , 9 , 10} .

סוכרת מסוג 2 היא מחלה נפוצה בקרב האוכלוסייה המבוגרת. חוסר פעילות גופנית והשמנת יתר הם גורמים מרכזיים הקשורים לסגנון חיים המסבירים את שכיחות מוגברת של סוכרת מסוג 2. תרגיל אירובי בעצימות נמוכה מומלץ לעיתים קרובות לנושאים עם סובלנות גלוקוז מופחתת. עם זאת, הוא אינולומד כיצד כוח אימונים קשישים משפיע על סובלנות גלוקוז / רגישות לאינסולין ^{11 , 12} . הדרך המדויקת ביותר למדוד את הרגישות לאינסולין היא להשתמש בטכניקת הסוכר של הגלוקוז, שבה רמת הגלוקוז בדם נשמרת קבועה באמצעות עירוי גלוקוז במהלך תנאי אינסולין מוגבר ¹³ . החסרונות בטכניקה זו הם שזה זמן רב פולשני (צנתור עורקי) ודורש מתקני מעבדה מיוחדים. במחקר זה, נעשה שימוש בבדיקת הסבולת של גלוקוז אוראלי, הנפוצה ביחידות הבריאות. שיטה זו מתאימה כאשר יש לחקור מספר נושאים במשך פרק זמן מוגבל.

הבדיקה ואת ציר הזמן של ההליך הניסוי ניתן לסכם כדלקמן. השתמש שלושה ימים נפרדים לבדיקה לפני ואחרי תקופה של שמונה שבועות, עם אותו הסדר לוחות זמנים זמן משוער (≥ 24 שעות בין כל יום, < חזקה> איור 1). ביום הבדיקה הראשון, יש למדוד את הנתונים האנתרופומטיים, כגון גובה, מסת גוף, מסת שומן נטולת שומן (FFM) והיקף רגל עליון ( כלומר 15 ס"מ מעל הפטלים הקדמיים במצב שכיבה רגוע); יכולת רכיבה על אופניים תת-מימית; ואת כוח שריר הברך, כמתואר בשלבים 4 ו 5. קח ביופסיה שריר מן הירך ביום הבדיקה השני. לתיאורים נוספים, ראה שלב 6.1. בדיקת סובלנות גלוקוז אוראלי (OGTT) ביום הבדיקה האחרון. לתיאורים נוספים, ראה שלב 7.1. בקשו מכל המשתתפים להימנע מפעילות גופנית נמרצת למשך 24 שעות ולמהירות לילה לפני כל יום בדיקה. עם זאת, לבקש מהם להימנע פעילות גופנית מאומצת במשך 48 שעות לפני יום הבדיקה OGTT. שאל אותם לעקוב אחר הפעילות הגופנית הרגילה שלהם הרגלי דיאטה. שים לב כי לפני ואחרי התערבות, הן דיווח עצמי של קבוצות מזון הכנסה וסוג מזונות היו ללא שינוי.

Figimg "src =" / files / ftp_upload / 55518 / 55518fig1.jpg "/>
איור 1: פרוטוקול הניסוי. תרשים סכמטי. העיתוי בין שלוש בדיקות קדם-פוסטיות היה דומה לכל נושא והיה לפחות 24 שעות. פרטים נוספים מופיעים בטקסט. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. ²⁸ אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

מחקר זה ביקש לחקור את ההשפעה של אימון התנגדות לטווח קצר אצל קשישים על יכולת חמצון שריר סובלנות גלוקוז. המטרה השנייה הייתה לבחון את ההשפעה על כוח, כוח, שיפורים איכותיים שרירים ( כלומר, חלבונים המעורבים איתות תא הרכב סיבי שריר סוג).

ועדת האתיקה האזורית בשטוקהולם, שבדיה, אישרה את עיצוב החקירה.

1. חומר

1. לגייס נשים וגברים בריאים יחסית 65-80 שנה שיש להם ערכי BMI בין 20 ל 30 ק"ג · מ ^-2 . אקראי אותם לשתי קבוצות. יש לוודא כי לאנשים בשתי הקבוצות יש רמות פעילות גופנית נמוכות יחסית ( כלומר, פעילות גופנית יומיומית מתונה וללא אימון גופני קבוע).
2. לא לכלול משתמשים חוסמי בטא ואלה עם מחלת עורקים כליליים ובעיות נוירולוגיות או מפרקים חמורות.
3. שאל את הנבדקים על הסכמתם בכתב לאחר שהודיע ​​להם על אי נוחות וסיכונים אפשריים במבחן ובאימונים.
4. לאזן את ההתנגדות אימון (RET) ושליטה ללא הכשרה (CON) קבוצות במונחים של גיל, מין, BMI. שאל קבוצה אחת לבצע RET תחת מאמן במשך שעה 1 שלוש פעמים בשבוע במשך שמונה שבועות; הקבוצה האחרת תשמש כמתווךLs (CON).

2. בדיקה והדרכה

הערה: שמונה התרגילים הם תרגילי אימוני כוח סטנדרטיים: לחיצה ימנית על הרגל, מחנק בטן בישיבה, לחץ על חזה, יושבים לאחור, יושבים כתף הכתפיים, יושבים חתירה, יושבים רגל הרחבה (הרחבת הברך), ו תלתל רגל נוטה (פלקסיה הברך) ; ראה איור 8 בסעיף תוצאות נציג.

1. במהלך האימון הראשון, להעריך את הכוח המקסימלי בחזרה מקסימלית אחת (1 RM) עבור כל תרגיל אימון.
   הערה: מודל RM 1 נפוץ ומוגדר כעומס שבו הנושא יכול להרים או לדחוף את ההתנגדות רק פעם אחת, אך לא פעמיים.
   1. לפני תחילת, לשאול את המשתתף לבצע קצר להתחמם (עם כמה ניסויים ראשוניים בעומסים במשקל נמוך מאוד) של התרגיל נבדק. לאחר מכן להגדיל את העומס עד רק מתחת ערך 1 RM סביר 1 (לרוב את המקסימום של 3-4 lo גדלמודעות). רשום את העומס המרבי שהנושא יכול לבצע רק פעם אחת (= 1 RM).
   2. מדוד 1 RM ב שמונה אימוני כוח רגיל (ראה איור 8 בסעיף נציג תוצאות). שאל את הנושאים לנוח לפחות 2-3 דקות בין כל התרגיל שנבדק.
      הערה: ציוד אימון כוח שימש כל האימונים, כולל בדיקות של כל אימון.
2. שאל את כל קבוצת RET לבצע 1 h של אימון כוח בפיקוח שלוש פעמים בשבוע במשך שמונה שבועות. בקשו מהמשתתפים לבצע, לאחר החימום, את שמונה התרגילים הסטנדרטיים הנ"ל. הם צריכים לחזור על התרגיל 12 פעמים בכל סט ולבצע שלוש קבוצות של כל תרגיל. אפשר מנוחה במשך 1 דקות בין כל סט ו 2-3 דקות בין כל התרגיל.
   1. שאל את הנבדקים לבצע כל תרגיל מהר ככל האפשר במהלך שלב קונצנטריים ( כלומר, שלב קיצור שרירים) ולאט לאט במהלךשלב אקסצנטרי ( כלומר, שלב התארכות השרירים).
      הערה: נושאים יכולים לעשות את התרגילים בכל סדר. עם זאת, לבקש מהם להתחיל ולסיים עם תרגיל הרגל וגם לנסות לבצע את שמונה התרגילים בסדר המוצג. השתמש כוח אימון ציוד לכל שמונה תרגילים.
   2. במהלך כל אימון, לשאול את המשתתפים לבצע שלוש קבוצות ב 75-80% של 1 RM עבור כל תרגיל. הגדל את העומס על ידי 5% בערך הפגישה לאחר כאשר משתתף יכול לעשות 12 חזרות בכל שלוש קבוצות של תרגיל.

3. מבחן אופני סובמקסמי

הערה: בצע את מבחן רכיבה על אופניים subaximal ביום הבדיקה 1 (ראה מבוא ואת איור 1 ).

1. בצע בדיקת ergometer במחזור, כולל שתי רמות subaximal, כל 4 דקות ^{14 , 15} . הגדר את קצב העבודה הראשון להיות נמוך (30 W) והשני ב 60-120 W, ללא הפסקה בין עומסים על ergometer המחזור.
   הערה: העומס הראשון הוא זהה עבור כל הנושאים, אבל הרמה השנייה והאחרונה subaximal צריך להיות כ 65-85% של קצב הלב המרבי עבור כל נושא. שני העומסים צריכים להיות זהים לפני ואחרי תקופת ההתערבות של 8 שבועות של אימון.
   1. לבסס את רמת העומס השני בגובה על בדיקות המוכר נעשה לפני הניסויים על ידי שואל איך פעיל פיזית האדם הוא על ידי בעל הנושא בתחילה מחזור במשך זמן קצר; מנהיג הבדיקה ירכיב דעה על סמך קצב הלב של הנושא לגבי מה עומס subaximal הסופי מתאים.
   2. הקלט את קצב הלב היציב הממוצע (HR) באמצעות צג קצב הלב דרך חגורת החזה ברגע האחרון על שיעורי העבודה הנמוכים והנמוכים, על ידי לקיחת ממוצע של HR הנצפה בשעה 3:15, 3:30, 3:45 , ו 4:00 דקות בכל שיעור עבודה.
   3. השתמש במכשיר ergo-spirometric כדי לבדוק את ההרכב של גז (O ₂ ו CO ₂ כלומר CO ₂ / O ₂ ) וכמת את ערכי RER הממוצעים במהלך הרגע האחרון (מארבע מדידות בכל 15 שניות) בעומס קצב העבודה.

4. הברך כוח Extensor: סטטי, אקסצנטרי, ו Concentric שיא מומנט ושיעור התפתחות כוח

הערה: בצע מדידות כוח הברך ביום הבדיקה 1 (ראה מבוא ותרשים 1 ).

1. לפני ההקלטות, לשאול את הנושא לבצע חימום על ידי רכיבה על 8-10 דקות על ergometer מחזור ברמה subaximal (כלומר, כ 65-85% מקצב הלב המרבי).
2. שאל את הנושא לשבת על הספסל של דינמומטר isokinetic. תקן את הגזע של הנושא עם רצועות על הכתפיים והירכיים. הכנס את שקית הנושא אל מוט הדינמומטר עם שתי רצועות: אחת מתחת לברך ואחת רק abovהקרסול. יישר את ציר הברך עם מרכז הסיבוב של פיר הדינמומטר.
3. כאשר הנושא מאובטח, להעריך את כוח הברך מרבי מרבי כמו מומנט שיא, עם הנושא יושב הדינמוטר isokinetic. בתחילה לאפשר לנושא לבצע מספר ניסויים להכרה עם ציוד כוח הברך (דינמומטר isokinetic).
4. בקשו מהאינדיבידואל לבצע ארבע תוספות ברך אקסצנטריות ואקסטצנטריות מרצון (לסירוגין), עם רגל ימין במהירות קבועה של זווית של 30 מעלות / שניה. הגדר את טווח התנועה בין 90 ° ל -15 ° (רגל ישרה = 0 °).
   1. במשימה אקסצנטרית, לשאול את הנושא כדי לעמוד בפני פיר דינמומטר עם מאמץ מקסימלי לאורך כל התנועה מ 15 ° ל 90 ° זווית הברך. במשימה קונצנטריים, לשאול את הנושא ללחוץ על הרגל התחתונה של מוט דינמומטר ב הברך הרחבה, ככל האפשר לאורך כל טווח תנועה.
5. אפשר מנוחה של 4 דקות לאחר ההקלטות הדינאמיות. לאחר מכן, להעריך את סטנדרטי מרבי מרצון התכווצות מרצון (MVC) ארבע פעמים ב 65 ° זווית הברך. בכל משפט סטטי, שאלו את הנבדקים, יושבים באותה דינמומטר, לבעוט מהר וקשה ככל שהם יכולים נגד פיר דינמומטר, אשר כעת הוא קבוע (ב 65 °) ולא ניתן להעביר.
6. עבור אותות מומנט (כוח), להמיר את אותות מומנט אנלוגי דיגיטלי באמצעות תיבת ממיר אנלוגי לדיגיטלי מחובר הדינמוטר isokinetic.
   הערה: הממיר ממיר אוטומטית את האותות האנלוגיים מהדינומטר לאותות דיגיטליים, אשר לאחר מכן מיוצאים אוטומטית למחשב שבו נאספים הנתונים.
   1. הגדר את תדר הדגימה ב 5 kHz בתוכנית ניתוח התוכנה של המחשב. אחסן את האותות הדיגיטליים במחשב לצורך ניתוח חוזק עתידי עם תוכנית ניתוח התוכנה.
7. בניתוח שלאחר מכן, להשתמשהערך הגבוה ביותר המתקבל מארבע ניסויים עבור כל נושא במידות אקסצנטריות, קונצנטריות וסטטיות. בתוכנה, לחץ על הערך הגבוה ביותר של ארבעת הניסויים ורשום את ערך הכוח שמוצג על מסך המחשב.
   1. רשום את מומנט השיא הגבוה ביותר באקסצנטרי וברישומים הקונצנטריים עבור כל נושא וערך החוזק הגבוה ביותר מבין ארבעת הניסויים הסטטיים.
      הערה: בדיקת דינמומטר Isokinetic של כוח extensor הברך בתנוחת ישיבה יש אמינות תקפות תקינה ^{16 , 17} .
8. למדוד את קצב כוח (מומנט) פיתוח (RFD) במהלך 0-30 ms ו 0-200 ms הערך הגבוה ביותר שנמצאו בין הניסויים הסטטיים. קבע את הערך של אפס ברמה של 7.5 ננומטר עבור תחילת ההתכווצות עבור כוח extensor הברך (זמן: 0 ms) ^{18 , 19} . להזיז את הסמן (בתוכנה עבור השרירניתוח כוח) לערך "7.5 ננומטר" על y- קנה מידה כדי לקבל את המיקום עבור 0 ms.
   1. עבור הערכה מראש הבדיקה, להגדיר את הסמן על הערך 30-ms (לאחר הפעם 0 ms). רשום את הערך המציג את העלאה ב Nm ב 30 ms ( כלומר, הגידול ננומטר מ 7.5 ננומטר = 0 אלפיות השנייה). בצע את אותו הליך עבור הערך שלאחר הבדיקה.
   2. לחשב את הגידול באחוזים עבור הערך לאחר הבדיקה Nm (מונה) לעומת הערך לפני הבדיקה Nm (מכנה) על פני תקופה של 0-30 ms. לכן, להציג את העלאת RFD באחוזים מן הבדיקה מראש כדי שלאחר הבדיקה. לעשות את אותם ניתוחים עבור מרווח הזמן של 0-200 ms.

5. שריר ביופסיה

הערה: לבצע ביופסיה בשריר ביום הבדיקה 2 (ראה מבוא איור 1 ).

1. קח ביופסיה שריר מן החלק האמצעי של שריר הירך.
   1. לפני הביופסיה, להזריק 1-2 מ"ל של הרדמה מקומית תת עורית לתוך fascia. לאחר כמה דקות, לעשות חתך עם אזמל קטן דרך העור ואת fascia, בערך 1/3 של המרחק מן הפיקה אל עמוד השדרה העליון איליאק מעולה. חלץ על 100-150 מ"ג של רקמת שריר באמצעות conchotome.
2. דגימות להקפיא עבור היסטוכימיה באיזופנטן מקורר לנקודת הקיפאון שלה בחנקן נוזלי ולאחסן אותו ב -80 ° C. חנות מדגם של 30-50 מ"ג של רקמת שריר.
3. במהירות להקפיא את דגימות לניתוח חלבון בחנקן נוזלי ולאחסן אותם -80 מעלות צלזיוס. חנות מדגם של 30-50 מ"ג של רקמת שריר.

6. OGTT

הערה: בצע OGTT (מבחן סובלנות גלוקלית אוראלית) ביום הבדיקה 3 (ראה מבוא ואת איור 1 ). הזמן בין התרגיל לבין OGTT חייב להיות מעל 48 שעות ו צריך להיות דומה בין מראש ואחרי- בדיקות. A OGTT אוראלי 2-h משמש כדי לחקור אם דגימות דם תכופות במהלך תקופה זו להראות רמות נורמלי או מוגבר, המציין סוכרת או תנאים טרום.

1. בצע את הבדיקה OGTT בבוקר על נושאים אשר צמו בן לילה ולא עשו שום תרגיל מאומצת ביום הבדיקה או יום קודם לכן.
2. קחו דגימות דם (4 מ"ל) ממשתתפי סובין באמצעות צינורית ורידי ב -15 דקות לפני ובדיוק לפני צריכת הגלוקוז, ואחריו 15, 30, 60, 90 ו- 120 דקות לאחר בליעת הגלוקוז 75 גרם של גלוקוז ב 250 גרם / ליטר פתרון).
3. צנטריפוגה דגימות דם ב XG 1500 ו 4 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות ולאחסן את פלזמה ב -20 מעלות צלזיוס לניתוח בעתיד. השתמש בדגימות כדי לבצע בדיקות רמת גלוקוז סטנדרטית (שלב 7).
4. עבור גלוקוז, אינסולין, c-peptide, לחשב את השטח מתחת לעקומה (AUC) על ידי קביעת הזמן אינטגרל של גלוקוז מעל רמות גלוקוז הבסיס. השתמש בתוצאות OGTTלחישוב הרגישות לאינסולין עבור כל הגוף בשיטת Matsuda ²¹ , בהתאם למשוואה: 10 000 * √ [(גלוקוזה _בסיסית * _בסיס אינסולין) * (גלוקוז _אומר * אינסולין _אומר ].

7. ניתוח דם מדגם

1. לכמת את ריכוז הגלוקוז של פלזמה ורידי עם מנתח אוטומטי. הגדר את רמת הסבולת של גלוקוז לקוי בערכי גלוקוז בדם> 7.8 mmol / L לאחר 2 OGTT 2 שעות.
2. השתמש ערכות ELISA ²² לבצע ניתוחים פלזמה של אינסולין c-peptide. השתמש הקורא צלחת. שים את הצלחות ELISA הן אינסולין c- פפטיד בקורא צלחת (כל אחד בהזדמנות נפרדת).
   הערה: קורא הצלחת מודד את כמות האינסולין ואת כמות c- פפטיד על ידי מדידת דגימות על צלחת ב absorbances מסוימים. ליפידים דם TG, HDL, apolipoprotein A1, ו apolipoprotein B נותחו עם שיטות סטנדרטיות בבית החולים האוניברסיטאי קרולינסקה, שטוקהולם, שוודיה.

8. ניתוח של דגימות שרירים

1. Immunoblotting
   1. ראשית, להקפיא יבש את דגימת שריר lyophilizer בלחץ מתחת 10 ^-1 mbar במשך 12 שעות. לנתח את זה כך שהוא נקי של דם ורקמת חיבור באמצעות מחט ו מלקחיים תחת מיקרוסקופ אור. אחסן אותו ב -80 ° C.
      הערה: כמות מתאימה של שריר היא בין 1 ל 5 מ"ג של משקל יבש, אבל פרוטוקול יכול להיות מותאם פחות מ 1 מ"ג, כל הדרך סיבים בודדים. בשל כמות נמוכה של רקמת שריר נוכח ביופסיה אחת, ערכים של משתתף RET לא היו בשימוש immunoblotting.
   2. Homogenize את דגימות שריר עם מחבט מיני חוצץ בקירור קר (80 μL / מ"ג) המורכב 2 mM 4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonic חומצה (HEPES), 1 mM ethylenediaminetetraacetic חומצה (EDTA), 5 מ"מ אתילן גליקול ביס (Β-aminoethyl אתר) -N, N, N, N-tetraacetחומצה IC (EGTA), 10 מ"מ MgCl ₂ , 50 מ"מ גליקרופוספט, 1% TritonX-100, 1 mM Na ₃ VO ₄ , 2 dithiothreitol מ"מ, 20 מיקרוגרם / מ"ל ​​leupeptin, 50 מיקרוגרם / mL aprotinin, מעכב phosphatase 1% קוקטייל, ו 40 מיקרוגרם / μL PMSF (פלואוריד phenylmethylsulfonyl).
      1. מניחים סקופ של 0.5 מ"מ חרוזי תחמוצת זירקוניום בצינור אחד עם השריר. הוסף חיץ ו homogenize עבור 2 x 1 דקות על מהירות שלב 7-8 (כאן, המקסימום הוא 10) ו 4 ° C.
   3. צנטריפוגה homogenate במשך 10 דקות ב 10,000 x גרם. מעבירים את supernatant הנותרים צינורות חדשים ולזרוק את גלולה המכילה את החלבונים המבניים.
   4. Spectrophotometrically לקבוע את ריכוז החלבון supernatant עם ערכת זמין מסחרית באמצעות קורא צלחת ב 660 ננומטר ²³ .
      1. לאחר מכן לדלל את הדגימות עם 2x חיץ מדגם Laemmli ו חיץ homogenizing (1: 1) לריכוז חלבון סופי של 1.5 מיקרוגרם /# 181; L. מחממים אותם 95 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות כדי להכחיש את החלבונים. אחסן את דגימות מדולל ב -20 מעלות צלזיוס לפני הניתוח.
   5. עבור ג'ל אלקטרופורזה הילידים- polyacrylamide (PAGE), לטעון 30 מיקרוגרם של חלבון מכל מדגם לתוך 18-היטב precast ג'ל שיפוע (4-20% acrylamide) ולבצע אלקטרופורזה ב 300 V במשך 30 דקות על הקרח.
   6. לאזן את הג'ל במאגר העברת (25 מ"מ בסיס טריס, 192 מ"מ גליצין, מתנול 10%) במשך 30 דקות ב 4 ° C. העברת חלבונים polyvinylidene ממברנות פלואוריד עם 0.2 מיקרומטר גודל הנקבוביות ב זרם קבוע של 300 mA במשך 3 שעות ב 4 ° C.
   7. כדי לאשר טעינה שווה והעברה, הכתם את הממברנות עם כתם חלבון סה"כ ²⁴ . עבור כל חלבון היעד, לטעון את כל הדגימות מכל נושא על אותו ג'ל ולהפעיל את כל הג'לים באותו זמן.
   8. לחסום את הממברנה במשך שעה 1 בטמפרטורת החדר ב-טריס שנאגרו מלוחים (20 מ"מ טריס בסיס, 192 מ"מ NaCl, כפות, pH 7.6) המכיל5% חלב ללא שומן.
   9. דגירה של הממברנות במשך הלילה עם נוגדנים ראשוניים (ראה את רשימת החומרים) מדולל ב TBS המכיל 2.5% חלב ללא שומן, בתוספת 0.1% Tween-20 (TBS-TM).
   10. לאחר הדגירה נוגדן העיקרי, לשטוף את הממברנות (2 x 1 דקות פלוס 3 x 5 דקות) עם TBS-TM ו דגירה עם נוגדנים משני (ראה את רשימת החומרים) מצומדות עם peroxidase חזרת עבור 1 שעה בטמפרטורת החדר. לשטוף שוב עם TBS-TM (2 x 1 דקות ו 3 x 10 דקות) ושוב הנושא אותם ארבעה שוטף 5 דקות נוספות עם TBS.
   11. החל 6-12 מ"ל של המצע chemiluminescent לממברנה במשך 5 דקות. מניחים את הממברנה בין שני יריעות פלסטיק שקופות. מניחים את הקרומים מול מצלמת CCD חסימת האור החיצוני. קח חשיפות סדרתי באמצעות מסנן מצלמה chemiluminescent.
       1. השתמש בתוכנה כדי לרכוש 10 חשיפות במשך 2 דקות, או עד שהאותות רוויים. השתמש בהגדרה סטנדרטית, הן עבור הגדרות המסנן האופטיO לרכוש chemiluminescence, כמו גם עבור הגדרות העדשה.
   12. השתמש בחשיפה הגבוהה ביותר שאינה מובילה לרוויה וסמן את קווי המתאר של הלהקה. לכמת את להקות כמו אינטנסיביות x מ"מ ² באמצעות אותה תוכנה. הפחת את רעש הרקע מעוצמת הלהקה. להציג את התוצאות ביחס לכל חלבון הכתם ולבטא את זה כמו שינוי באחוזים לעומת הבסיס.
2. היסטוכימיה
   הערה: טכניקת ההיסטוכימיה להלן מבוססת על שיטות המתוארות בפרסום מוקדם יותר ²⁵ .
   1. עבור היסטוכימיה, לחתוך סעיפים חתך סדרתי (10 מיקרומטר) ב -20 מעלות צלזיוס באמצעות cryostat. הר חתכים על זכוכית שקופיות מאוחסן קובט זכוכית ואוויר לייבש את פרוסות ביופסיה בטמפרטורת החדר.
   2. הכן פתרונות חיץ עבור כל רמת pH עבור הדגירה מראש ב pH 4.3, 4.6, ו 10.3 עבור מכתים ATPase ²⁶ . כדי לדמיין נימי דם, staבחתכים באמצעות שיטת אמילאז-PAS ²⁷ .
   3. לכייל את ה- pH מטר על ידי שפכים פתרונות כיול לתוך כוסות כיול שכותרתו. לחץ על הלחצן המתאים כדי לבחור את ה- pH מהתפריט הראשי.
      1. שוטפים את החללית עם מים deionized ומניחים את החללית בכוס הכיול הראשון. ודא כי אין בועות אוויר בקרום. מדוד את פתרון הכיול הראשון ולאחר מכן הצג את פתרון הכיול הבא (התצוגה תבקש את הפתרון הבא).
      2. שוטפים את החללית במים דאיוניים ולאחר מכן מניחים אותה בכוס הכיול השני. ודא כי אין בועות אוויר בקרום. מדוד פתרון כיול שני והמשך לפתרון הכיול הבא.
      3. יש לשטוף את החללית עם מים deionized ומניחים אותו כוס כיול השלישי. ודא שאין בועות אוויר בקרום. מדוד את פתרון הכיול השלישי.
         הערה: כאשר הכיול הואטוב, התצוגה תציג בקצרה, "3 Buffer אישור" ולאחר מכן לחזור לתפריט הראשי.
   4. השתמש במאגרים כדלקמן עבור מכתים ATPase.
      1. כדי להכין פתרון ב pH 10.3, השתמש בשני פתרונות שונים: (א) 4.506 גרם של גליצין, 4.8 גרם של CaCl ₂ , 3.51 גרם של NaCl, ו 600 מ"ל של DH ₂ O ו (B) 2.176 גרם של NaOH ו 540 מ"ל של dH ₂ O. לאחסן את הפתרונות בחדר קר או מקרר. השתמש בהם בתוך חודש.
      2. כדי להכין פתרונות ב pH 4.3 ו 4.6, לבצע "preincubation חומצה." הכן את החומצה לפרינקובציה באמצעות: 6.47 גרם של אצטט Na, 3.7 גרם של KCl, ו 500 מ"ל של DH ₂ O. לאחר מכן, להכין 1% CaCl ₂ פתרון על ידי המסת 2.5 גרם של אותו 250 מ"ל של DH ₂ O. היכונו 2 תמיסת CoCl _{2 על} ידי המסת 5 גרם של אותו 250 מ"ל של DH ₂ O.
      3. אחסן את הפתרונות הללו והשתמש בהם כאמור. לבסוף, להכין 0.2% אמוניום גופרתי על ידיערבוב 800 μL של 20% (NH ₄ ) ₂ S לתוך 40 מ"ל של DH ₂ O. הכן את זה טרי.
   5. הכן פתרונות בערכי pH מסוימים באופן הבא. לאחר כיול של מטר pH, להסיר את cuvettes וסידן וקובלט כלורידים מן המקרר ולאפשר להם להתחמם לטמפרטורת החדר לפני מכתים.
      1. עבור pH 10.3 , להוסיף בסביבות 25 מ"ל של פתרון A כדי קטן (כ 70 מ"ל) כוס זכוכית. מדוד את ה- pH. שמור על הוספת הפתרון B עד שה pH הנדרש של 10.37 מגיע. אם מכתים כהה מדי, להגדיל את ה- pH. אם הוא בהיר מדי, להפחית את ה- pH.
      2. עבור pH 4.6 , להוסיף סביב 25 מ"ל של "preincubation חומצה" על כוס זכוכית קטנה. מדוד את ה- pH. להפחית את ה- pH באמצעות חומצה אצטית 5 M. אם התמונה של הכתם כהה מדי, נסה להאיר עם pH מוגברת. אם זה בהיר מדי, להחשיך עם ירידה pH. אם מכתים לא עוזר, נסה אחר pH: 4.8 instEad של 4.6.
      3. עבור pH 4.3 , לעשות את אותו הדבר עבור 4.6, אבל להוסיף חומצה אצטית יותר. להקטין את ה- pH אם הכתם הוא בהיר מדי, ולהגדיל את ה- pH אם זה כהה מדי עבור הסיבים להיות מוגדר.
      4. הכן פתרון ATP כדלקמן. לשקול 0.017 גרם של ATP לכל קובט (10 מ"ל), כך 0.051 גרם לכל 3 cuvettes או 0.068 גרם עבור 4 cuvettes. קח 30 מ"ל (עבור 3 cuvettes, 10 מ"ל / קובט) של פתרון ב pH 10.3 (שימוש בקנה מידה גליל צילינדר) והכניסו אותו לתוך כוס זכוכית עם ATP שקל.
         1. מערבבים היטב ומודדים את ה- pH. להפחית את ה- pH באמצעות HCl מרוכז עד ה- pH מגיע בדיוק 9.40.
      5. עבור הדגירה בערכי pH שונים, בצע את הפעולות הבאות. מקום 10.3 פתרון לתוך קובט אחד דגירה אותו באמבט מים ב 37 מעלות צלזיוס למשך 9 דקות. פתרון 4.3 מקום לתוך קובט אחר דגירה אותו בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות. מקום 4.6 פתרון לתוך קובט האחרון דגירה ב RT במשך 1 דקות.
      6. בעקבות ה- pH המועדףהליך הדגירה, להחיל את התוכן של כל קובט כדלקמן. לשטוף 15 פעמים עם DH ₂ O. הוסף פתרון ATP (0.170 גרם של ATP / 100 מ"ל של H ₂ O) למדגם ביופסיה. דגירה באמבט מים ב 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות. לשטוף 15 פעמים עם dH ₂ O.
      7. הוסף CaCl ₂ פתרון (1 גרם של CaCl 2/100 מ"ל של H ₂ O) למדגם ביופסיה ב cuvettes. דגירה ב RT במשך 3 דקות. לשטוף 15 פעמים עם dH ₂ O. הוסף פתרון CoCl ₂ (2 גרם של COCl 2/100 מ"ל של H ₂ O) למדגם ביופסיה ב cuvettes. דגירה ב RT במשך 3 דקות. לשטוף 15 פעמים עם dH ₂ O.
      8. שים את זה (NH ₄ ) ₂ S פתרון במשך 30 שניות לשטוף במהירות 15 פעמים מתחת למכסה המנוע קטר. דבק את הביופסיה פרוסות על גבי זכוכית שקופית. כדי למנוע בועות, לסחוט את הביופסיות, אבל לא קשה מדי.
   6. בחר אזור אחד של חתך רוחב ללא חפצים או חתכים אורך של הסיבים. ניתוח תחת liGHT מיקרוסקופ באמצעות תוכנה.
   7. הערכת שטח חתך (CSA), נימיות, סיווג סוג סיבים ( כלומר, סוג I, IIA, או IIX) באמצעות ניתוח תמונה במחשב מממוצע של לפחות 150-200 סיבים לכל ביופסיה. מתוך תמונה מיקרוסקופית של סיבי שריר בחתכים, יש לוודא כי לשלושת סוגי סיבי השריר ( כלומר, סוג I, IIA ו- IIX) יש גוונים שונים של לבן לאפור לשחור, בהתאם לצביעת ה- pH ( כלומר, 4.34, 4.65 ו -10.37).
   8. התחל על ידי סימון כמה סיבי סוג אני. לאחר מכן, התוכנית באופן אוטומטי לרשום את סוג השני, אני סיבים. ודא שכל הסיבים מסוג I מסומנים כהלכה. כדי לסמן סיב מסוים, לחץ על "וקטור" כפתור. השתמש בסמן כדי למדוד את האזור עבור כל סיבי שריר שנבחרו בנפרד.
   9. לאחר ניתוח של סיבים מסוג I, להמשיך באותו הליך עבור סוג IIA ו סוג IIX. הממוצע SEM ± עבור כל סוג של סיבי שריר ( כלומר, סוג אני, IIA ו- IIX) יש לחשב לגבי כמות הסיבים ו- CSA עבור קבוצות ה- RET ו- CON.
      הערה: אזור החתך (CSA), נימים וסיווג של סוג סיבים ( כלומר, סוג I, IIA ו- IIx) הוערכו מממוצע של 163 ± 9 סיבים לכל ביופסיה.

חוֹמֶר

במחקר, 21 נשים וגברים בריאים יחסית, בני 65-80 עם ערכי BMI בין 20 ל -30 ק"ג · m -2 השתתפו, חולקו באקראי לשתי קבוצות. אצל שני הקבוצות היו רמות פעילות גופנית נמוכות יחסית ( כלומר, פעילות גופנית מתונה ברמה יומיומית וללא אימון גופני קבוע). קבוצה אחת (n = 12, 6 נשים ו -6 גברים) ביצעה RET תחת מאמן במשך 3 שעות שלוש פעמים בשבוע במשך שמונה שבועות, והשנייה שימשה כקבוצת ביקורת (n = 10, 5 נשים ו- 5 גברים). קבוצות ה- RET ו- CON היו מאוזנות מבחינת גיל, מין ו- BMI ( טבלה 1 ). נושאים נוספים גויסו לקבוצת ה- RET כדי לפצות על נשירה; יותר היו צפויים בקבוצה RET מעל קבוצת CON.

</ Td>	RET (n = 12)	CON (n = 9)
	מִרֹאשׁ	הודעה	מִרֹאשׁ	הודעה
גיל (שנים)	71.4 ± 1.1	72.0 ± 1.4
BMI	24.6 ± 0.8	24.9 ± 0.8	23.2 ± 0.8	23.2 ± 0.8
משקל (ק"ג)	70.4 ± 2.9	71.1 ± 2.8	67.4 ± 3.9	67.6 ± 3.9
FFM (kg)	51.0 ± 2.3	52.4 ± 2.1 2.1	47.6 ± 4.1	48.6 ± 4.3
ירך חתך הםA (cm²)	188.9 ± 9	200 ± 8 *** †	155 ± 12	154 ± 11
פיבר שטח חתך (cm²)	הקלד	5452 ± 393	5567 ± 362	4889 ± 323	4807 ± 354
Type II	4230 ± 610 #	4484 ± 434 #	4114 ± 535 #	3971 ± 494 #
הקלד Iix	3678 ± 634 #	3554 ± 552 #	3392 ± 889 #	2913 ± 427 #

טבלה 1: מאפייני המשתתפים. RET, אימון התעמלות; CON, שליטה; BMI, מסת הגוףלְשֶׁעָבַר; FFM, מסה נטולת שומן. הערכים הם מתוך 12 (RET) ו 9 (CON) נושאים, למעט סיבים חתך אזור (RET, n = 10, CON, n = 7), והם מוצגים כמו הממוצע ± SEM. **, p <0.01 לעומת טרום; ***, p <0.001 לעומת מראש; †, p <0.05 לעומת הודעה קון; †††, p <0.001 לעומת הודעה קון; #, P <0.05 לעומת type I. טבלה זו שונתה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28

משתמשים חוסמי בטא ואלו עם מחלת עורקים כליליים ובעיות נוירולוגיות או משותפות חמורות לא נכללו. בתחילת המחקר, מספר נבדקים היו: לחץ דם גבוה (2 בכל קבוצה); דיכאון (1 בכל קבוצה); ותרופות עבור דיסליפידמיה (2 ב- RET ו- 1 ב- CON), hypothyreosis (1 ב- RET), שלב מוקדם של מחלת פרקינסון (RET). תרופות נלקח באופן אקראי עבור אסטמה (1 ב RET) ו בעיות ראומטיות (1 ב CON). לאדם אחד היה קוצב לב R (CON).

נושא אחד RET קטע את האימון לאחר 6 שבועות עקב כאבי גב אבל עדיין נכלל במחקר. נושא אחד ראשוני נכלל בשל בעיות בברך במהלך הבדיקה מראש של כוח. אלו עם אסתמה וקוצב הלב לא נכללו במבחן המעגל.

הנבדקים נתנו את הסכמתם בכתב, לאחר שנודע להם על אי-נוחות וסיכונים אפשריים במבחן ובאימונים.

הנתונים מוצגים כאמצעים ± SEM. ההבדלים בין RET ו- CON נבדקו עבור מובהקות סטטיסטית עם ANOVA חוזרות ונשנות דו-כיווניות תוך שימוש בתוכנית סטטיסטית. כאשר נמצאו השפעות עיקריות משמעותיות או אינטראקציות, נמצאו הבדלים עם ניתוח פוסט-הוק (פישר LSD). משמעות סטטיסטית התקבלה ב <p <0.05.

<p class="jove_content" fo:keep-together.within-החוקרים הראו, בהשוואה לקבוצת ה- CON, שיפור במדדים שנלקחו בכוח, כוח, סובלנות גלוקוז ומספר פרמטרים של יכולת השריר האירובי. באמצעות דינמומטר isokinetic עבור כוח extensor הברך מותר מדידה של כוח קונצנטריים, אקסצנטרי, סטטית (אשר כל עלייה של 8-12% עבור RET פוסט לעומת הבדיקה מראש, איור 2 א ). הדינמומטר הראה גם את קצב התפתחות הכוח (RFD), עם עלייה של 52% (ב 0-30 ms הראשונית) עבור קבוצת RET ( איור 2 ב ). בקבוצת ה- CON, נצפתה חוזקה קונצנטארית במהלך תקופת ההתערבות. עומס האימון עבור RET השתפר ב-19-72% עבור תרגילי האימונים שבוצעו.

איור 2: תוצאות מדידת כוח. השפעת ההתנגדות לשעבר(RET) או תקופת בקרה (CON) על ( A ) סטטי (STAT), אקסצנטרי (ECC), מומנט קונצנטרי (CONC) ו- ( B ) של התפתחות כוח (RFD) במהלך 0-30 ms ו- 0- 200 ms של הברך סטטית. הערכים הם מתוך 12 (RET) ו 9 (CON) נושאים מוצגים כשינוי באחוזים יחסית לערכים הבסיסיים (ממוצע ± SEM). *, P <0.05 לעומת מראש; **, p <0.01 לעומת טרום; ***, p <0.001 לעומת טרום. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

מן הדגימות ביופסיה שריר, histochemistry עולה כי כמות הסיבים סוג IIa גדל, והיה מגמה לירידה IIx עבור קבוצת RET. לפיכך, הקבוצה RET הראו שינוי אפרופיל חמצון יותר במונחים של הרכב סיבים ( איור 3 ). שים לב כי חתכים אמינים לא ניתן לקבל ביופסיות של ארבעה נושאים (שניים מכל קבוצה), ואת התוצאות של נושאים אלה לא נכללו.

איור 3: סיבים השריר סוג הרכב תוצאות. ההשפעה של אימון התעמלות התנגדות ( A , RET) או תקופת שליטה ( B , CON). הערכים הם מתוך 10 (RET) ו -7 (CON) נושאים מוצגים כמו הממוצע ± SEM. (*), P = 0.068 לעומת טרום; **, p <0.01 לעומת טרום; †, p <0.05 לעומת הודעה קון. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 בבקשהCk כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

יתר על כן, מנתח כתם המערבי לקביעת תוכן חלבון הקשורים איתות של סינתזת חלבון שריר הראו עלייה של 69% הן Akt ו- mTOR (יעד היונקים של rapamycin) בקרב קבוצת RET ( איור 4 א ו איור 5 ). ניתוחי כתמים מערביים הוכיחו גם, בין חלבונים המיטוכונדריה, עלייה של כ -30% הן עבור OXPHOS II מורכב סינתז ציטראז, ו של 90% עבור IV המורכב בקבוצה RET ( איור 4 ב ו איור 5 ). הנוגדנים העיקריים שנבדקו היו mTOR, Akt ו- OXPHOS. נגד ארנבת או אנטי עכבר HRP שימש נוגדן משני. להקות חלבון עבור OXPHOS מורכבים אני לא היו גלויים בבירור, נתונים אלה היו מושלכים.

<img alt="איור 4" class="xfigimg" src = "/ files / ftp_upload / 55518 / 55518fig4.jpg" />
איור 4: תוצאות חלבון השריר. ההשפעה של אימון אימוני התנגדות (RET) או תקופת בקרה (CON) על שינויים בתכולת השריר של חלבונים Akt ו- mTOR ( A ) וחלבונים המיטוכונדריה ( B ). Akt, חלבון קינאז B; MTOR, יעד יונקים של rapamycin; CS, סינתזה ציטראז. ערכים הם אמצעים ± SEM מ 11 (RET) ו 9 (CON) נושאים. *, P <0.05; **, p <0.01; ***, p <0.001 לעומת הבסיס. †, p <0.05; ††, p <0.01; †††, p <0.001 לעומת ההודעה. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

<img alt="איור 5" class="xfigimg" src = "/ / Files / ftp_upload / 55518 / 55518fig5.jpg" />
איור 5: תמונות כתמים מערביים. חלבון שריר נמדד לפני ואחרי שמונה שבועות של התערבות. תמונות נציג מנושא אחד בקבוצות RET ו- CON, בהתאמה. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

רק קבוצת ה- RET הראתה יכולת אירובית מוגברת במבחן המעגל (לאחר בדיקה מוקדמת). בעוצמה subaximal הגבוהה ביותר, קצב הלב (HR) הראה מגמה חזקה לרדת ב RET ועלייה בקבוצת CON ( איור 6 א ). בנוסף, RER (יחס חליפין נשימתי = CO 2 / O 2 ) הופחת באופן משמעותי עבור קבוצת ה- RET בלבד ( Lass = "xfig"> איור 6 ב).

איור 6: נתוני הנשימה. תרגילי התעמלות לאחר ואחרי אימון (RET) או תקופת שליטה (CON). ( A ) HR, קצב לב ( B ) RER, יחס החלפת הנשימה במהלך נמוך (30 W) ו גבוהה (60-120 W) עוצמת רכיבה על אופניים במצב יציב. הערכים הם מתוך 11 (RET) ו 8 (CON) נושאים (שני נושאים הוצאו בשל אסטמה ושימוש קוצב לב) ומוצגים כמו הממוצע ± SEM. (*) P = 0.056 (RET) ו- p = 0.068 (CON) לעומת טרום; * P <0.05 לעומת טרום. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

<p clas התוצאות של קבוצת RET ממבחן הסוכר בדם הראו שיפור ברמת הגלוקוז בדם, הן בערכי הדם לאחר 2 שעות (14%) והן עבור השטח מתחת ל - 2% (1). (21%, איור 7 א ).

איור 7: גלוקוז פלזמה במהלך OGTT. הבדיקה בוצעה לפני ()) ולאחר אימון (○) תרגיל התנגדות (RET, A ) או תקופת שליטה (CON, B ). AUC גלוקוז , מתחת לעיקול של גלוקוז פלזמה. הערכים הם מתוך 12 (RET) ו 9 (CON) נושאים מוצגים כמו הממוצע (גלוקוז פלזמה) ו ממוצע ± SEM (AUC גלוקוז) . * P <0.05 לעומת טרום. נתון זה שונה מ- Frank et al. Scand. י. Sci. ספורט . 2016: 26, 764-73. 28 Rce.jove.com/files/ftp_upload/55518/55518fig7large.jpg "target =" _ blank "> לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

פרופיל השומנים בדם השתפר בקבוצת ה- RET, עם ירידה ב- apolipoprotein B (8%). עבור CON, נמצאה עלייה (10%). יתר על כן, המסה ללא שומן (FFM) עלה ב -3% ואת שטח חתך הירך (CSA) על ידי 7% עבור קבוצת RET ( טבלה 1 ). השיפורים שהוערכו לאחר תקופה קצרה של אימון כוח פרוגרסיבי בתפקוד המיטוכונדריה, יכולת אירובית, סובלנות גלוקוז, חוזק שרירים וכוח הם השפעות בריאותיות רצויות ביותר באוכלוסייה מבוגרת.

שמונה אימונים כוח כוח מוצגים באיור 8 . כל משימה אימון נערך 12 פעמים בכל אחת משלוש קבוצות בכל אימון 3 פעמים בשבוע במשך שמונה שבועות.

<p class = "jove_content" עבור: keep-together.within-page = "1">
איור 8: שמונה תרגילי האימונים. התרגילים בוצעו ב 75-80% של 1 RM, 12 פעמים / סט, עם שלושה סטים / תרגיל אימון אימון. התרגילים היו: "לחץ על רגל" ו "בטן בטן" ( A ), "לחץ החזה" ו "הרחבות גב" ( B ), "כתף" ו "ישיבה חתירה" ( C ), ו "הרחבות רגל" תלתלי רגל "( ד ' ). טווח תנועות בתנועות אימון כוח מוצגים כאן. ב מחנק הבטן יושב, את המטען צריך להיות מועבר מן המיקום זקוף 60 מעלות קדימה הגמגום. בתא המטען האחורי, הגזע, ממצב ישיבה כמעט זקוף, מועבר לאחור למצב אופקיים של תא המטען. הן את התרגילים היושבים, לחיצות רגל הרגל extensioNs, בוצעו החל ברגליים 90 ° של כיפוף הברך וכלה רק לפני הרגליים היו מזויפים (ליד 0 ° בברכיים). תלתלי רגליים (במצב נוטה), שם נעשה מ הרגליים כמעט מיושר עד כ 100 מעלות של כיפוף הברך. שני התרגילים היושבים, לחץ החזה וכתף הכתפיים, בוצעו מהכופף במרפק של 90 ° עד שהזרועות היו מיושרות (קרוב ל -0 °). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.