מחקר זה מתאר את ההליכים כירורגית וטכניקות ניסיוני לביצוע cystometry ער בעכבר נע בחופשיות. בנוסף, הוא מספק ראיות ניסוייות לתמוך אופטימיזציה וסטנדרטיזציה.
Method Article
* These authors contributed equally
מחקר זה מתאר את ההליכים כירורגית וטכניקות ניסיוני לביצוע cystometry ער בעכבר נע בחופשיות. בנוסף, הוא מספק ראיות ניסוייות לתמוך אופטימיזציה וסטנדרטיזציה.
ערעור מילוי cystometry שימש במשך זמן רב כדי להעריך את תפקוד שלפוחית השתן בעכברים נעים באופן חופשי, עם זאת, השיטות הספציפיות בשימוש, להשתנות בין מעבדות. מטרת מחקר זה הייתה לתאר את הפרוצדורה המיקרו-כירורגית המשמשת להשתלת צינור תוך-עיני ואת הטכניקה הניסויית להקלטת לחץ שלפוחית השתן בשתן ער, נע בחופשיות. בנוסף, נתונים ניסיוניים מוצג כדי להראות כיצד ניתוח, כמו גם סוג צינור וגודל, להשפיע על תפקוד מערכת השתן התחתונה ורגישות ההקלטה. ההשפעה של קוטר צינור על הקלטת הלחץ הוערכה צינורות פוליאתילן ו פוליאוריטן עם קוטר פנימי שונים. לאחר מכן, הצינור הטוב ביותר הביצועים משני החומרים היה מושתל כירורגי לתוך הכיפה של שלפוחית השתן של C57BL זכר / 6 עכברים. שתים-עשרה שעות, תדר ההלבשה בן לילה נרשמה אצל בעלי חיים בריאים, שלמים ובעלי חיים, 2, 3, 5 ו- 7 ימים לאחר הניתוח. בשעה הקציר, שלפוחית השתן wהחוקרים העריכו סימני נפיחות באמצעות תצפית גסה ועובדו לאחר מכן לניתוח פתולוגי. ההיקף הגדול ביותר של נפיחות בשלפוחית השתן נצפתה ביום 2 ו -3, אשר מתואמים עם נתוני הימנעות התנהגותית, המראים תפקוד שלפוחית השתן פגום. ביום 5, היסטולוגיה של שלפוחית השתן ואת תדירות הידרדרות מנורמל. בהתבסס על הספרות והראיות שסופקו על ידי המחקרים שלנו, אנו מציעים את הצעדים הבאים עבור הקלטה vivo של הלחץ intravesical נפח נפח בוטל בערה ער: 1) לבצע את הניתוח באמצעות מיקרוסקופ הפעלה וכלים microsurgical, 2) השתמש פוליאתילן -10 צינורות כדי למזער את התנועה חפצים, 3) ביצוע cystometry ביום שלאחר הניתוח 5, כאשר נפיחות בשלפוחית השתן.
מילוי cystometry (FC) היא שיטת אבחון הכרוכה הצבת קטטר לתוך שלפוחית השתן כדי להקליט לחץ במהלך מילוי שלפוחית השתן. הציג לראשונה בשנת 1927 כשיטת אבחון קלינית כדי להעריך את תפקוד מערכת השתן התחתונה, הוא נשאר בשימוש נרחב. 1 ביישומי מחקר, FC יכול לשמש כדי לבדוק את תפקוד שלפוחית השתן במודלים של בעלי חיים בריאים וחולים ולחקור את ההשפעות של סוכני התרופות. מודלים בעלי חיים מכרסמים משמשים בדרך כלל כדי לחקור את תפקוד מערכת השתן התחתונה. 2 בקבוצה זו של יונקים, FC פותחה לראשונה לשימוש חולדות. 3 כאן, המתודולוגיה להשתיל צינור לתוך שלפוחית השתן ולבצע FC תוארה היטב בשימוש על ידי חוקרים רבים עם רמה מקובלת של reproducibility. 4 הזמינות של זנים מהונדס לזרום החוצה להפוך עכברים מינים חשובים עבור תחומי מחקר רבים,כולל השדה של דלקת בתפקוד השתן התחתונה. המתודולוגיה המשמשת לביצוע cystometry העכבר משתנה במידה ניכרת בין מעבדות, מה שהופך את זה קשה להשוות את התוצאות. 5
בהשוואה למודלים של vivo לשעבר , FC משמר אנטומיה של דרכי השתן התחתונות, ומאפשר להעריך את הפונקציה המתואמת בין שלפוחית השתן לשקע שלה במהלך שלבי האחסון וההפרדה של מחזור המיתרים. מחקרים קודמים מראים כי רבים, הרדמה נפוץ לדכא התכווצות micturition. סוכנים כי לשמר את שלפוחית השתן חלקה התכווצות שרירים (urethane, α-chloralose, קטמין ו xylazine), המאפשר החיה כדי micturate, עדיין להפחית באופן משמעותי את יכולת תפקוד שלפוחית השתן ו לדכא את הנוירוטרנסמינציה. 6 , 7 , 8 , 9 למרות טכנית יותר מאתגר, FC ביצע awAke ambulating בעלי חיים משמר את שלמות פונקציונלית של רפלקס micurition.
תפקוד מערכת השתן התחתונה מושפע מגורמים רבים, כולל נפיחות שלפוחית השתן לאחר הניתוח, מתח בשל כאב ואי נוחות, והשפעות סביבתיות. באמצעות טכניקה כירורגית הממזער נזק לרקמות במהלך השתלת צינור ושיטות הקלטה להפחית את התנועה צינור, ובמקביל לאפשר את החיה אמבולט בחופשיות, חיוניים להשגת הקלטות מדויקות לשחזור.
אם ביצע כראוי, in vivo FC בבעלי חיים נעים באופן חופשי יכול לספק נתונים המשפיעים באופן אמין על תפקוד שלפוחית השתן. 10 FC בבעלי חיים נעים באופן חופשי יכול לספק נתונים על הפרמטרים הבאים; לחץ בזאלי או בסיסי: לחץ מינימלי בין שתי תמונות. לחץ בין שתי צורות. לחץ סף: לחץ intravesical immלפני ההמנון. לחץ מקסימלי: לחץ מרבי בשלפוחית השתן במהלך מחזור micurition. פעילות ספונטנית (או לחץ בין תנודות מתמשך): לחץ intermicturition מינוס לחץ בסיסי. התכווצויות שאינן מבוטלות: עלייה בלחץ תוך-תוךתי במהלך שלב המילוי, שאינה קשורה לשחרור הנוזל. שלפוחית השתן: יכולת שלפוחית השתן מחולקת בלחץ הסף מינוס לחץ בסיסי. תדר Micturition: מספר התצלומים ליחידת זמן. מרווח intermicturition: תקופה בין שני לחצים הרקה מקסימלית. יכולת שלפוחית השתן: נפח חד פעמי מחולק במספר התצלומים. תיאור מפורט של פרמטרים אלה וטרמינולוגיה מתוקננת פורסם בעבר. 11
FC יכול להתבצע באמצעות שיטת עירוי מתמשך או יחיד עירוי intravesical. רציפות cystometry מאפשר הקלטה של מחזורי micurition מרובים ובחירת נתונים נציג מבוססעל שחזור. הדיוק שלה במדידת יכולת שלפוחית השתן מוגבל בשל נפח שיורית לא ידוע. בנוסף, זה מאתגר לאסוף כרכים קטנים מבטל (אשר מבוסס על זן ומין להשתנות בין 30 ו 184 μL) בעכברים ambulating בחופשיות. שימוש בשיטה זו כדי להקליט נפח נמנע הוא פחות מדויק לעומת הכנה הרדים, אבל זה עדיף בכך שהוא ימנע את ההשפעות המדכאות של הרדמה על תפקוד שלפוחית השתן. סיסטומטריה מחזור יחיד צריך לשמש כדי להעריך את יכולת השלפוחית. בשיטה זו, שלפוחית השתן מתרוקן על ידי שאיפה לפני אינפוזיה ויכולת מחושב כפונקציה של קצב עירוי כפול הזמן ללחץ מקסימלי.
למרות הטכניקה של ביצוע cystometry במכרסמים קטנים פורסמה, הוא תיאר את הניתוח שבוצעה חולדה והמליץ cystometry העכבר צריך להתבצע תחת הרדמה urethane. 10 מטרתה של תקשורת זו היא לאO לתאר את שתי הטכניקות microsurgical המשמש להשתיל צינור intravesical לתוך הכיפה של שלפוחית השתן ואת הגדרת הניסוי המשמש להקליט תפקוד מערכת השתן התחתונה, in vivo , במהלך מילוי שלפוחית השתן רצוף ומילוט בעכבר נע בחופשיות ערים. בנוסף, בוצעו ניסויים כדי לענות על אורך הצינור, הקוטר והחומר, כמו גם המתודולוגיה לביצוע ב- vivo FC, משפיעים על ההקלטה. פרוטוקול ניסיוני זה מסכם את הטכניקות שפורסמו בעבר ומציע מספר שינויים המבוססים על תוצאות הניסוי.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
בעלי החיים שוכנו במכון לטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת ורמונט על פי הנחיות מוסדיות. כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו על פי המכון הלאומי לבריאות מדריך לטיפול ושימוש של חיות מעבדה.
1. Intravesical Tube להשתלה
2. התעוררות ציסטהOmetry הקלטה
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
לא היה הבדל משמעותי בין חומרי הצינור וקטרים בעקביות של עליית לחץ ונופל בתוך המערכת במהלך חסימת הצינור. שלפוחית השתן קיר נפיחות שלאחר השתלת צינור intravesical היה משמעותי הן פוליאתילן (PE) ו פוליאוריטן (PU) חומרים. ביום 2, התפתחה התנפחות חמורה. הוא הכיל חצי חתך של שלפוחית השתן, והוביל לחסימת הלומן. ביום 5, הבצקת נפתרה לחלוטין, משאיר את האזורים subucosal שחדר עם תאים דלקתיים אשר פלשו חלקית את השרירים. ביום 7, חדירת דלקת הופחת באופן משמעותי את ה...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
חומר אופטימלי וגודל של צינור intraveical
כדי לקבוע את השפעת צינור קוטר יש על הקלטות לחץ, בדקנו צינורות microfluidic שונים; PE50 (מזהה 0.58 מ"מ), פוליאוריטן PU027 (0.4 מ"מ מזהה), PE25 (0.46 מ"מ ID), ו PE10 (0.28 מ"מ מזהה). עבור כל צינור, לחץ נרשמה עם משאבת אינפוזיה פועל 1 מ"ל / שעה, תוך זז במהירות את הצינור אנכית מ 0 עד 30 ס"מ. בתחילה ניסויים vivo ניסו להשתמש צינורות PE50, אך לא הצליחו ב...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
למחברים אין מה לחשוף.
מחקר זה מומן על ידי המחלקה לכירורגיה באוניברסיטת ורמונט, המועצה הדנית למחקר עצמאי ועל ידי בית החולים האוניברסיטאי אודנסה.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| פוליאתילן (PE) 10 צינורות | Instech | BTPE-10 | מתאים למחברים/תקעים 30G |
| פוליאתילן (PE) 50 צינורות | Instech | BTPE-50 | מתאים למחברים/תקעים 22G |
| 22 G מסתובב נירוסטה חד ערוץ | Instech | 375/22 | |
| קפיץ הארכת שירות מפלדת פחמן גבוהה (9/64 אינץ' OD) | Grainger | 1NAH1 | מגן על צינורות PE50 - חתוך לאורך |
| מחבר 22 G | Instech | SP22/12 | |
| Yutaoz Professional Hot Melt דבק דבק אקדח | Yutaoz | השתמש בהגדרת טמפרטורה נמוכה (100 & deg; ג) - כל אקדח דבק נמס חם עם טווח טמפרטורות מתכוונן יעבוד | |
| Surebonder DT-2010 מקל דבק לכל מטרה | Surebonder | כל דבק חם לכל מטרה יעבוד | |
| Dumont #5 מיקרו-מלקחיים מעוקלים | מכשירי דיוק עולמיים | 500232 | |
| Dumont #7 מיקרו-מלקחיים מעוקלים | מכשירי דיוק עולמיים | 14188 | |
| מספריים מיני חיתוך - ישר | World Precision Instruments | 503240 | |
| מיקרו מלקחיים נגד יתושים (12.5 ס"מ) | World Precision Instruments | 500451 | |
| מספריים לניתוח- ישר | World Precision Instruments | 14393 | |
| מחזיק מחט Castroviejo | Precision Instruments | 503258 | |
| Isoflurane, USP | Phoenix | 2%, קצב זרימה של 1 ליטר לדקה | |
| בופרנורפין | 0.05 מ"ג/ק"ג | ||
| 0.9% השקיית נתרן כלורי, USP | בקסטר | ||
| 6-0 מונופילמנט שחור אתילון, תפר שאינו נספג | עניבת שלפוחית השתן | אתיקון | |
| 6-0 סגול ויקריל קלוע, תפר נספג | Ethicon | Muscle, ריצה | |
| 6-0 מונופילמנט כחול פרולן, תפר לא נספג | Ethicon | תפר עור, מזרן אנכי, קבור מופרע | |
| KD Legato 210 משאבת עירוי/נסיגה | KD Scientific | 1.5 מ"ל/שעה | |
| מתמר לחץ חד פעמי | Digitimer | NL108T2 | |
| מגבר לחץ | Digitimer | NL108A | |
| Power1401-3 ממשק רכישת נתונים | Digitimer | ||
| Spike2 | קיימברידג' עיצוב אלקטרוני מוגבל | תוכנת הקלטת לחץ למחשב | |
| Leica MZ6 מיקרוסקופ ניתוח כירורגי (3.2 - 20X) | הגדלה | של Leica Microsystems |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission