מאמר שיטה

פרוטוקול מעקב וידאו מסך ההרתעה Chemistries עבור דבורים דבש

6.3K צפיות

DOI:

10.3791/55603

12 ביוני 2017

במאמר זה

סיכום

אובדן מושבות דבש הדבש מהווה אתגר לשירותי האבקה של היבול. ההמלצות הנוכחיות להגנה על המאבקים מחייבות גישה חלופית למזעור המגע של דבורי דבש לחומרי הדברה מזיקים באמצעות chemistries דוחה. כאן, אנו מספקים שיטות מפורטות עבור פרוטוקול מעקב חזותי כדי ההרתעה המסך עבור דבורים.

תקציר

דבורת הדבש האירופית, אפיס מליפרה ל ' , היא מאבקה חשובה מבחינה כלכלית וחקלאית שמייצרת מיליארדי דולרים בשנה. מספר דבש מושבות הדבש כבר בירידה בארצות הברית ובמדינות רבות באירופה מאז 1947. מספר גורמים לשחק תפקיד זה ירידה, כולל חשיפה מכוונת של דבורים דבש לחומרי הדברה. פיתוח שיטות ושיטות חדשות מוצדקות להפחתת החשיפה לחומרי הדברה למאובנים אלו. גישה אחת היא השימוש של chemistries דוחה כי להרתיע דבורי דבש לאחרונה טיפול בחומרי הדברה. כאן, אנו מתארים פרוטוקול להבחין ההרתעה של דבורי דבש חשופים chemistries דוחה לבחור. דבורים דבורים דבש נאספים ומרעב בן לילה באינקובטור 15 שעות לפני הבדיקה. דבשי דבש בודדים ממוקמים לתוך צלחות פטרי שיש להם קוביית סוכר-אגרוזה (טיפול בשליטה) או קוביית סוכר- agarose- מתחם (טיפול דוחה)לאמצע המנה. צלחת פטרי משמש בזירה כי הוא ממוקם תחת מצלמה בתיבה אור כדי להקליט את הפעילות דבורה דבש הדבש באמצעות תוכנת מעקב וידאו. סך של 8 טיפולים ו 8 דוחה נותחו במשך 10 דקות עם כל טיפול היה כפולות עם דבש דבש חדש. כאן אנו מדגימים כי דבורי הדבש נרתעות מקוביות הסוכר-אגרוס עם טיפול מורכב ואילו דבורי הדבש נמשכות לקוביות הסוכר-אגרוס ללא תרכובת נוספת.

מבוא

דבש הדבש האירופי, Apis melliferaL. , הוא חרק כלכלי חשוב חקלאי המספק שירותי האבקה מוערכים ביותר מ 200 מיליארד דולר ברחבי העולם 1 . בארצות הברית ובאירופה, מספר מושבות הדבש של הדבש הולך ופוחת. ארצות הברית איבדה CA. 60% של מושבות דבורים מנוהלות מנוהל מ 1947-2008 בעוד אירופה איבדה CA. 27% מ 1961-2007 2 , 3 . ישנם מספר גורמים שעשויים להיות אחראים למספר גדל של הפסדי המושבה, כולל אך לא רק, טפילים טפיל, זיהומים פתוגן, שיטות דבורים, ושימוש בחומרי הדברה 2 - 4 .

דבש עשוי להיות חשוף חומרי הדברה דרך שני מסלולים עיקריים. חשיפה לחומרי הדברה מחוץ לכוורת יכולה להתרחש כאשר אנשים מחפשים מזון באים במגע עם יבוליםרוססו בכימיקלים להגנה מפני מזיקים. חשיפה לחומרי הדברה בתוך הכוורת יכולה להתרחש כאשר כוורנים משתמשים בכימיקלים כדי לשלוט במזיקים ובפתוגנים, כגון קרדית, חיידקים ומיקרוספורדיה. שאריות חומרי הדברה זוהו בדגימות שעווה, אבקה ודבש דבש מ -24 מכונים בארצות הברית ובקנדה 5 , 6 . ההשפעות של מגע חומרי הדברה לדבורים דבש כוללים רעילות חריפה, כמו גם השפעות קטלניות כגון שיתוק, דיסאוריינטציה, ושינויים התנהגותיים ובריאותיים 1 , 7 . כמו החקלאות המודרנית מחייבת שימוש בחומרי הדברה כדי לשמור על התשואות היבול גבוהה, כימיקלים אלה ימשיכו להיות הסתמך על בעתיד 2 . על מנת להגן טוב יותר על דבורי הדבש מפני חשיפות חומרי הדברה, יש צורך בפיתוח פרוטוקולים ותקנות חדשים.גישה אפשרית אחת להגנה היא שימוש בדוחים כדי להפחית את החשיפה של דבורי דבש לחומרי הדברה בזמן חיפוש מזון.

הדברה חרקים (IRs) שימשו בדרך כלל כאמצעי הגנה אישיים נגד נגיפי מחלת הפרקים 8 . הנפוץ ביותר והמוצלחת IR, שפותחה לפני יותר מ -60 שנה, הוא DEET 8 , 9 . זה נחשב תקן הזהב עבור בדיקות דוחה חרקים והוא משמש על ידי ארגון הבריאות העולמי הסוכנות להגנת הסביבה כביקורת חיובית עבור הרומן דוחה בדיקות 10 . בנוסף, DEET נמצא לפזר דבורי דבש מאיום המושבה שלהם 11 . התכונות הנוכחיות הקשורות IRs אישיים כוללים: (1) השפעה מתמשכת נגד מספר רחב של פרוקי רגליים; (2) שאינו מגרה למשתמש כאשר הוא מוחל על העור או על הבגדים; (3) חסר ריח אוריח נעים; (4) אין השפעה על בגדים; (5) לא מראה שמנוני כאשר מוחל על העור לעמוד בפני הזעה, כביסה, וניגוב על ידי המשתמש; (6) אין השפעה על פלסטיק נפוץ; ו (7) יציב מבחינה כימית ובמחיר סביר לשימוש נרחב 12 . דוחה המשמש דבורים דבש רק צריך כמה תכונות אלה כגון השפעות מתמשכות, לא מעצבן על המוליכים, ריח חסר ריח או נעים, יציב מבחינה כימית ובמחיר סביר לשימוש נרחב, ולא רעילים דבורים דבש. עם זאת, לפני בחינת תכונות אלה לעומק, יש צורך בשיטת סינון תרכובות לדחיית / הרתעה באופן תפוקה גבוהה. כאן, אנו מתארים פרוטוקול assay במעבדה כדי המסך compounds עבור ההרתעה של דבורים דבש, צעד חשוב בקביעת repellency. הפרוטוקול הבא שונה ממחקר קודם המתאר שיטת מעקב ויזואלי כדי להעריך את ההשפעות sublethal של חומרי הדברה על דבורים דבש 13 . HoweVer, פרוטוקול זה שונה בכך שהוא נועד למדוד את ההשפעות של repellents המועמד שעלול להרתיע דבורים דבש מן הדברה מטופלים יבולים. אין פרוטוקולים מומלץ עבור בדיקות מעבדה של ההרתעה כימית דבורים דבש, ובכך, פרוטוקול זה מספק גישה פשוטה המסך תרכובות כאלה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכן קוביות סוכר agarose

  1. לשקול את 8 גרם של סוכר ומכניסים לתוך בקבוק 50 מ"ל Erlenmeyer.
  2. ממלאים את בקבוק Erlenmeyer עם 20 מ"ל של מים מיונן. ממיסים את הסוכר על ידי swirling את הבקבוק.
  3. לשקול 170 מ"ג של agarose ולהוסיף אותו לפתרון הסוכר.
  4. מחממים את פתרון הסוכר agarose במיקרוגל גבוה עבור 25 s. ממיסים את agarose לתוך פתרון הסוכר.
  5. אפשר את הבקבוק ואת פתרון סוכר agarose להתקרר.
    הערה: הבקבוק צריך להיות מגניב למגע, אבל לא מאפשרים את הפתרון כדי לחזק.
    1. כדי להכין קוביית סוכר agarose לטיפול בשליטה, יוצקים את הפתרון למחצה סוכר- agarose סוכר לתוך עובש סירה שוקל.
      הערה: במשקל סירה עובש יש את הממדים 1.5 x 1.5 x 0.3 ס"מ 3 .
    2. כדי להכין קוביית סוכר- agarose המתחם לטיפול דוחה, להוסיף את הכמות הרצויה של המתחם לפתרון חצי מקורר ( למשל , 1% DEET באגר-agarose פתרון (v / v)). מערבולת את הבקבוק לערבב את המתחם ולאחר מכן לשפוך את הפתרון לתוך עובש סירה שוקל.
      הערה: שמונה תבניות שליטה ושמונה תבניות בדיקה יהיה מוכן בשלב זה. תבניות בקרה אינן מכילות דוחה.
  6. מגניב את קוביות סוכר agarose בתבניות במקרר 5-10 דקות. הסר את קוביות סוכר agarose מוצק מן שקילה סירות עובש ומכניסים אותם לתוך מיכל פלסטיק עם מגבת נייר לחה.
  7. מניחים את המיכלים למקרר לאחסון. קוביות סוכר agarose יש להשתמש תוך 7 ימים של הכנה.

2. תכנות תוכנת מעקב וידאו והתקנה ניסיונית

  1. תחת הגדרות ניסוי בסרגל Explorer אקספלורר (בתוכנת המעקב, ראה טבלת חומרים), הממוקם בצד שמאל של המסך, ודא כי המצלמה הנכונה נבחרה וכי הקלטת וידאו מרוכז על זירות צלחת פטרי.
    1. אם הקלטת הווידאו צריכה להיות מרוכזת, להיכנס להגדרות של המצלמה תחת בקרות AOI ובחר את מרכז X ואמצע Y אפשרויות.
  2. תחת הגדרות ניסוי, שנה את מספר הזירות ל -16. תחת תכונות מעקב, בחר באפשרות איתור נקודות מרכזיות.
  3. בחר הגדרות ארנה כדי להגדיר את הזירה הרצוי assay.
    1. מניחים את 16 צלחות פטרי בדפוס 4 x 4 על גבי תיבת אור, ממוקם מתחת למצלמה ( איור 1 ).
      הערה: כלים אלה משמשים ליצירת זירה הקלטה ריקים.

figure-protocol-1
איור 1: הסדר צלחת פטרי על תיבת האור. צלחות פטרי מסודרות בבלוק בגודל 4 x 4 מעל תיבת האור. סידור זה מספק זיהוי קל של טיפולי הבקרה והדוחה עבור vפרוטוקול מעקב אחר. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

  1. ב ארנה הגדרות, להשתמש בלחצן רקע לתפוס, הממוקם על לוח בצד ימין, כדי לצלם תמונה של 16 צלחות פטרי. זה ישמש את התבנית כדי להגדיר את הזירה.
  2. בחר "צור אליפסה" מסרגל הכלים בחלק העליון של המסך הגדרות ארנה וליצור עיגול התואם את הקוטר של אחד צלחות פטרי בתמונה תפס. מניחים את סמן ארנה 1 לתוך המעגל ( איור 2 ).

figure-protocol-2
איור 2: צילום מסך של הגדרות הזיהוי של תוכנת המעקב החזותי. תצפית של פסים אלכסוניים בתוך המעגל מספק אישור של אזור איתור במעגל. א אזור 1 סמן מסופק עבור כל ריבוע ומגדיר את אזור היעד עבור כל צלחת פטרי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

  1. בחר "אזור קבוצה 1" הממוקם תחת Arena 1 בחלונית הכלי בצד ימין. בחר "צור מלבן" מסרגל הכלים בחלק העליון של המסך. צור ריבוע בגודל 30 x 30 פיקסלים באמצעות אותו ולאחר מכן הצב אותו במרכז המעגל שנוצר בשלב הקודם. בחר "הוסף אזור" מסרגל הכלים העליון ולאחר מכן לחץ באמצע הריבוע. הזז את סמן אזור 1 כך שהוא בכיכר.
    הערה: הכיכר שנוצרה היא אזור הזנה ואין זו דרישה שאזור ההזנה יהיה בדיוק באותו גודל כפי שרשום כל עוד הוא גדול מעט מקוביית הסוכר.

Les / ftp_upload / 55603 / 55603fig3.jpg "/>
איור 3: צילום מסך של הגדרות ארנה שהושלמו. הגדרות הזירה שהושלמו צריכות להיראות כמו בדוגמה זו. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

  1. בחר "ארנה 1" בחלונית כלי בצד ימין ולאחר מכן לחץ על זירה מלאה משוכפל. מהתפריט הנפתח בחר "All Arenas" ולאחר מכן לחץ על אישור. להעביר את setups זירה כפולות על מנות פטרי הנותרים בתמונה חטף (איור 3).
    1. בחר "Arena 1" ולאחר מכן בחר "כיול קנה מידה" על סרגל הכלים העליון. צייר את קו כיול על פני קוטר של ארנה 1 צלחת פטרי. לשנות את המדידה בקוטר ל 9 ס"מ (קוטר של צלחות פטרי בשימוש). בחר "אימות הגדרות ארנה" בחלונית הכלי בצד ימין.
  2. בחר "הגדרות איתור "בשורת הבקרה בצד שמאל.
  3. בחר "הגדרות זיהוי 1" ולאחר מכן בחר "גריי קנה מידה" בתפריט הנפתח הממוקם בצד ימין תיבת הכלים. תחת זיהוי, להגדיר את טווח כך שהוא 0 עד 83 ( איור 4 א ).
  4. לחץ לחיצה ימנית על "הגדרות איתור" ולעשות הגדרה חדשה בשם "הגדרות זיהוי 2". ודא כי "גריי אפור" עדיין נבחר, אך לא לשנות את הפרמטרים האחרים.
    הערה: יהיו עיגולים גדולים צהוב בחלון הווידאו מעל הזירות. זה יסייע בהסדרת מנות פטרי לתפקידים הנכונים לפני ההקלטה ( איור 4 ב ).

figure-protocol-3
איור 4: צילום מסך של הגדרות הזיהוי 1 ו- 2. ( א ) מראה כיצד תיראה הזירה עם קנה המידה האפור שתוקן עבורדבש דבש נושא בצלחת פטרי. ( ב ) מציג את אזור הזירה זיהוי כך המיקום של מנות פטרי ניתן לעשות בין הניסויים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

  1. בחר "רשימת ניסיון" בסייר ניסיוני ולחץ על "הוסף משתנה" בסרגל הכלים העליון. שם המשתנה המוגדר על ידי המשתמש כ"טיפול ". בחר בסרגל הנפתח "ערכים מוגדרים מראש" בעמודת הטיפול המוגדרת על ידי המשתמש והוסף C (control) ו- T (טיפול) כערכים מוגדרים מראש. בחר בלחצן 'הוסף ניסיונות' הממוקם בסרגל הכלים העליון. הוסף שני ניסויים, ולאחר מכן עבור כל זירה לבחור אם היא זירת שליטה (C) או זירת הטיפול (T) ( איור 5 ).

figure-protocol-4
FiGure 5: תמונת מסך של רשימת המשפטים. תיוג הזירות נכון הוא חשוב כאן כמו התוכנית משתמשת במידע כאן כדי להפריד את הנתונים כדי לנתח את זה סטטיסטית. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

  1. בחר "פרופיל נתונים" בחלונית 'ניסוי Explorer'. בעמודה השמאלית, בחר "טיפול" הממוקם תחת הכותרת "משתנים עצמאיים המוגדרים על ידי המשתמש". פעולה זו תוסיף תיבת "מסנן" לאזור עם תרשים הזרימה. בחר "C" בתיבה המוקפצת ולאחר מכן למקם את המסנן החדש שנוצר בין תיבת "התחל" ו "תוצאה 1" התיבה. החצים תרשים זרימה צריך להתאים כך שהם נקודת מתוך תיבת ההתחלה למסנן ולבסוף לתוצאה 1.
    1. חזור על שלב 2.12, אולם הפעם בחר "T" עבור המסנן ולאחר מכן בחר"תוצאה" בקטע "אלמנטים משותפים". העבר את הקופסאות שנוצרו לאחרונה לאזור תרשים זרימה וחבר את הקופסאות לחצים ( איור 6 ).

figure-protocol-5
איור 6: צילום מסך של פרופיל נתונים. זה מראה כיצד תרשים זרימה צריך להיות מוגדר כדי לקבל את ההפרדה המתאימה בניתוח סטטיסטי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

  1. שמור את הקובץ.

3. איסוף דבש דבש אנשים

  1. ללבוש בגדים מגן לבחור כוורת לאסוף דבורים דבש (בעיקר foragers).
  2. הסר את הכיסוי החיצוני והפנימי של הכוורת. השתמש בכלי כוורת כדי לבחור מסגרת מתוך גוף הכוורת העליון שאינו מכיל צנרת.בעדינות להרים את המסגרת מתוך תיבת כוורת.
  3. בדוק את המסגרת של הדבורה המלכה דבש. אם היא לא שם, לטאטא את הדבורים דבש מן המסגרת לתוך מיכל להובלה. לאסוף מספיק אנשים כדי להיות מסוגל להפעיל שני ניסויים מלאים עבור כל מתחם להיבדק (16 אנשים מנוצלים לכל משפט עם שולטת).
    הערה: אנשים שנאספו צריך להיות בעיקר foragers; עם זאת, עשויים להיות אנשים אחרים בגילאי כגון דבורים אחות הכלולים באוסף.
  4. לרשום את הזמן שבו דבורים הדבש הוסרו. מעבירים אותם לתוך 9 ס"מ x 7 ס"מ x 9 ס"מ תיבת פלסטיק המכילים חורים האוויר ומכניסים אותם לתוך חממה ב 32 ° C ו 70% לחות יחסית.
  5. להרעיב את דבורי הדבש במשך 15 שעות.
    הערה: זה בדרך כלל עובד הכי טוב אם דבורים הדבש נאספים הערב לפני שנבדקו.

4. ביצוע Visual Assay מעקב

  1. הפעל את תוכנית המעקב החזותי ופתח את השמירהD קובץ ניסיוני שנוצר עבור assay זה.
  2. בחר "הגדרות זיהוי 2".
  3. מניחים קוביות סוכר agarose סוכר למרכזי 8 של 16 צלחות פטרי. חזור על תהליך זה עם קוביות סוכר-agarose מתחם (הרתעה) קוביות 8 הנותרים מנות.
  4. השתמש מלקחיים כדי להסיר דבש אחד דבש מהקופסה פלסטיק ומניחים אותו לאחד הכלים פטרי שליטה.
  5. חזור על שלב 4.4 עבור 15 מנות פטרי הנותרים.
  6. מניחים את כל הכלים על תיבת האור וממקמים אותם כך אזור הזירה זיהוי (המוצג על מסך המחשב בעת הגדרת הגדרה 2 נבחר) להתאים לכל אחד זירות צלחת פטרי. להאיר את תיבת האור מלמטה על ידי מערך של נורות LED מוגדר הספקטרום האדום. הקיפו את כל התיבה ואת המצלמה עם סדין פלסטיק שחור לחסל את האור החיצוני ולהפחית צללים בתוך הזירות.
  7. לאחר צלחות פטרי הוגדרו, ודא "זיהוי הגדרות 1" הוא- הגדרה שנבחרה.
    הערה: בשלב זה תוכנת מעקב ויזואלי צריך להיות להרים רק את דבש הדבש בתוך זירות צלחת פטרי.
  8. בחר באפשרות "רכישה" מתוך סייר הניסוי. לחץ על הלחצן "התחל ניסיון" הירוק הממוקם בתיבה בקרת רכש מוקפץ בצד ימין כדי להתחיל להקליט.
  9. הפעל את assay במשך 10 דקות ולאחר מכן לחץ על כפתור "עצור משפט" האדום על בקרת רכישה pop up כדי לעצור את ההקלטה.
  10. הסר את האנשים מן הצלחות פטרי ומכניסים אותם לתוך מיכל נפרד, כך שהם לא נבדקו פעמיים.
  11. חזור על שלבים 4.4-4.10 עבור המשפט השני על אותו מתחם.
    הערה: שיטה זו יכולה להיות שונה כדי להגדיל את מספר הדבש דבש לכל טיפול לפי הצורך על ידי המשתמש.
  12. בחר בסטטיסטיקה בסייר הניסוי ולאחר מכן לחץ על חשב.
  13. לייצא את הנתונים לתוכנות מנהל נתונים ולאחר מכן לנתח את הנתונים עבור משמעות באמצעות באמצעות אחד wAy ניתוח של שונות עם הבדיקה של Tukey שלאחר הבדיקה, ו unaired T- מבחן באמצעות תוכנה מועדפת סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

פרוטוקול מעקב ויזואלי פותח כדי להקליט את כמות הזמן הדבורים הדבש בילה באזור היעד עם סוכר או agarose (טיפול שליטה) או סוכר agarose- מתחם קוביה (טיפול הרתעה). הזמן המוקלט נותח באמצעות תוכנה סטטיסטית ואת הזמן הממוצע בילה ± שגיאת תקן באזור היעד הוא דיווח כגרף עמודות. DEET, תקן הזהב עבור דוחה חרקים / בדיקות ההרתעה, שימש פרוטוקול זה כביקורת חיובית. דבורי הדבש שסופקו עם קוביית סוכר-אגרוס (שליטה שלילית) בילו 343 ± 26 שניות באזור המטרה ואילו דבורי הדבש שסופק...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

זה פרוטוקול מעקב ויזואלי מספק גישה פשוטה המסך ההרתעה כימית עבור דבורים דבש באופן מהיר וקל יחסית. אין פרוטוקולים מומלצים לבדיקות מעבדה של הרתעה כימית לדבורים. מחקרים קודמים בחצי-שדה ובדקו מחקרי דבש של דבש 14 , 15 ; אולם הפרוטוקולים המתוארים הם זמן רב, עבודה אינטנסיבי, ודורשים משאבים נוספים במתקן מחוץ למעבדה הכללית. פרוטוקול זה תוכנן כהערכה מוקדמת של ההרתעה הכימית לפני בדיקה חצי - מלאה או שדה מלא של תרכובות כאלה עם דבש דבורי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

ברצוננו להודות לד"ר תומאס קוהר על השימוש בתוכנות מעקב ויזואליות. אנו מודים ג'יימס וילסון וסקוט אוניל על העזרה הטכנית שלהם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
בקבוק 50 מ"ל ארלנמאיירKimax26500-50המשמש להכנת קוביות הסוכר/אגרוז
סוכרקרוגרכל מוצר דומה יספיק
דה-יוניםשנרכשו בבית
AgaroseApex20-102המשמש להכנת קוביות הסוכר/אגרוז
עובש לקוביות אגרוז (סירת שקילה)כל תבנית שתספק לחוקר קוביית סוכר/אגרוז בגודל 1.5 ס"מ x 1.5 ס"מ x 0.3 ס"מ תספיק
לתוכנת מעקב חזותיEthoVision XTNoldus
633 ננומטר נוריותCyronHTP904Eאורות אלה הוצבו בקופסת אור בנויה כדי להאיר את הזירות מלמטה. הקופסה הייתה מבנה עץ פשוט עם כיסוי פלסטיק חלבי/זכוכית פרספקס שאיפשר לאור להתפזר כלפי מעלה ללא כל סנוור.
מחשב נייד או מחשבאישי DellInspiron One 2305הכרחי לתוכנת מעקב וידאו. כל מכשיר מחשב המסוגל להפעיל תוכנת מעקב חזותית יספיק
דבורה שמירה על ביגוד מגןDadant & Sons IncV0126כל מכסה מנוע וז'קט מגן יספיקו
כוורתDadant & Sons IncM00757המשמש לפתיחת כוורת דבורי דבש
מיכל לדבוריכל מיכל המתאים לדיור ואחסון דבורי דבש יספיק
מלקחיים במשקל נוצה קצה צרBioquip4748המשמש לבחירת דבורי דבש בודדות
9 ס"מ (קוטר) צלחת פטריפישר סיינטיפיק זירת S01778שימשה להכיל דבורי דבש בודדות במהלך מעקב וידאו
מכשיר הקלטה (מצלמה)BasleracA-1300-60gmכל מכשיר שיכול להקליט את הנושא בצורה ברורה ולהעביר את הקובץ למחשב יספיק
GraphPadPrism Graphpadכל חבילת תוכנה סטטיסטית תספיק
מים כלי דבש

מקורות

  1. Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissière, B. E. Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline. Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).
  2. van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and the factors that may affect them. J Invertebr Pathol. 103, Suppl 1. S80-S95 (2010).
  3. Aizen, M. A., Harder, L. D. The Global Stock of Domesticated Honey Bees Is Growing Slower Than Agricultural Demand for Pollination. Current Biol. 19 (11), 915-918 (2009).
  4. Smith, K. M., Loh, E. H., Rostal, M. K., Zambrana-torrelio, C. M., Mendiola, L., Daszak, P. Pathogens, Pests, and Economics Drivers of Honey Bee Colony Declines and Losses. Ecohealth. 10, 434-445 (2014).
  5. Mullin, C. A., Frazier, M., et al. High Levels of Miticides and Agrochemicals in North American Apiaries: Implications for Honey Bee Health. PLoS ONE. 5 (3), (2010).
  6. Li, Y., Kelley, R. A., Anderson, T. D., Lydy, M. J. Development and comparison of two multi-residue methods for the analysis of select pesticides in honey bees, pollen, and wax by gas chromatography - quadrupole mass spectrometry. Talanta. 140, 81-87 (2015).
  7. Kakumanu, M. L., Reeves, A. M., Anderson, T. D., Rodrigues, R. R., Williams, M. A., Williams, M. A. Honey Bee Gut Microbiome Is Altered by In-Hive Pesticide Exposures. Front Microbiol. 7, 1-11 (2016).
  8. Katz, T. M., Miller, J. H., Hebert, A. A. Insect repellents: Historical perspectives and new developments. J Am Acad Dermatol. 58 (5), 865-871 (2008).
  9. Dickens, J. C., Bohbot, J. D. Mini review: Mode of action of mosquito repellents. Pestic Biochem Phys. 106 (3), 149-155 (2013).
  10. Lawrence, K. L., Achee, N. L., Bernier, U. R., Mundal, K. D., Benante, J. P. Field Evaluations of Topical Arthropod Repellents in North, Central, and South America. J Med Entomol. 51 (5), 980-988 (2014).
  11. Collins, A. M., Rubink, W. L., Cuadriello Aguilar,, I, J., Hellmich Ii,, L, R. Use of insect repellents for dispersing defending honey bees (Hymenoptera Apidae). J Econ Entomol. 89 (3), 608-613 (1996).
  12. Brown, M., Hebert, A. A. Insect repellents: An overview. J Am Acad Dermatol. 36 (2), 243-249 (1997).
  13. Teeters, B. S., Johnson, R. M., Ellis, M. D., Siegfried, B. D. Using video-tracking to assess sublethal effects of pesticides on honey bees (Apis mellifera L.). Environ Toxicol Chem. 31 (6), 1349-1354 (2012).
  14. Vallet, A., Cassier, P., Lensky, Y. Ontogeny of the fine structure of the honeybee (Apis mellifera L.) workers and the pheromonal activity of 2-heptanone. J Insect Physiol. 37 (11), 789-804 (1991).
  15. Free, J. B., Ja Pickett,, Ferguson, aW., Simpkins, J. R., Smith, M. C. Repelling foraging honeybees with alarm pheromones. J Agr Sci. 105 (2), 255(1985).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים