מערכת קומפקטית המבוססת על דיודות פולוקוסטיות (PLD-PAT) המבוססת על דיודות פולס-קומפקטיות עבור הדמיה מהירה במוח בחיות קטנות מופגנת.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מערכת קומפקטית המבוססת על דיודות פולוקוסטיות (PLD-PAT) המבוססת על דיודות פולס-קומפקטיות עבור הדמיה מהירה במוח בחיות קטנות מופגנת.
ב vivo הדמיה חיה קטנה יש תפקיד חשוב לשחק מחקרים פרה קליניים. Photacoustic טומוגרפיה (PAT) הוא המתעוררים הדגמה היברידית מודליזציה אשר מראה פוטנציאל גדול עבור יישומים פרה קליניים והן קליניים. קונבנציונאלי אופטיים פרמטרית מתנד מבוססי PAT (OPO-PAT) מערכות הם מגושם ויקר ולא יכול לספק הדמיה במהירות גבוהה. לאחרונה, דיודות לייזר פועמות (PLD) הוכחו בהצלחה כמקור עירור חלופי ל- PAT. פולס לייזר דיודה PAT (PLD-PAT) הוכח בהצלחה עבור הדמיה במהירות גבוהה על רוחות רפאים photacoustic ורקמות ביולוגיות. עבודה זו מספקת פרוטוקול ניסיוני visualized עבור הדמיה מוח vivo באמצעות PLD-PAT. הפרוטוקול כולל את תצורת מערכת PLD-PAT קומפקטית ואת התיאור שלה, הכנה לבעלי חיים הדמיה מוחית, הליך ניסיוני טיפוסי עבור הדמיה דו קוטבית חתך דו מימדי המוח. מערכת PLD-PAT היא קומפקטית עלות efFective והוא יכול לספק במהירות גבוהה, באיכות גבוהה הדמיה. תמונות המוח שנאספו in vivo במהירויות סריקה שונות מוצגים.
Photocoustic טומוגרפיה (PAT) הוא מודול הדמיה היברידית כי יש יישומים רבים בשני מחקרים קליניים ופרה קליניים 1 , 2 , 3 , 4 , 5 . ב PAT, פולסים לייזר nanosecond להקרין רקמה ביולוגית. הקליטה של אור האירוע על ידי chromophores רקמות מוביל לעלייה הטמפרטורה המקומית, אשר לאחר מכן מניב גלי הלחץ הנפלטת בצורה של גלי קול. גלאי אולטרסאונד אוספת את האותות הפוטאקוסטיים במיקומים שונים סביב המדגם. האותות הפוטאקוסטיים (PA) משוחזרים באמצעות אלגוריתמים שונים (כגון אלגוריתם עיכוב וסכום) כדי ליצור את התמונה הפוטאקוסטית.
זה מודול הדמיה היברידית מציעה ברזולוציה גבוהה, הדמיה עמוקה של רקמות וקליטה אופטי גבוהה 7 ,Class = "xref"> 8. לאחרונה, עומק הדמיה של ~ 12 ס"מ הושג ברקמת חזה עוף בעזרת אורך גל ארוך יותר (~ 1,064 ננומטר) וסוכן ניגוד אקסוגני שנקרא phosphorus phthalocyanine. זה רגישות עומק הוא הרבה יותר גבוה מאשר רגישות עומק של שיטות אופטיות אחרות, כגון מיקרוסקופ פלואורסצנטי confocal, מיקרוסקופ פלואורסצנטי שני פוטון, 10 טומוגרפיה קוהרנטיות אופטית, 11 וכו ' באמצעות גל אחד או יותר, PAT יכול להדגים שינויים מבניים ותפקודיים באיברים . עבור מחלות רבות של בני אדם, מודלים בעלי חיים קטנים היו מבוססים היטב 12 , 13 , 14 , 15 . עבור הדמיה של בעלי חיים קטנים, כמה מודלים הוכיחו. מתוך כל אלה גישות, הדמיה הרשות הפלשתינית זכה תשומת לב די מהר בשל היתרונות שהוזכרו לעיל. הרשות הפלסטיניתT הראו את הפוטנציאל שלה הדמיה כלי הדם ברקמות ואיברים ( כלומר, הלב, הריאות, הכבד, העיניים, הטחול, המוח, העור, חוט השדרה, הכליות, וכו ' ) של בעלי חיים קטנים 4 , 16 , 17 , 18 . PAT היא שיטה מבוססת היטב עבור הדמיה מוחית קטנה במוח. גלי PA מיוצרים בשל ספיגת האור על ידי chromophores, כך מרובה אורך גל PAT מאפשר מיפוי של ריכוז המוגלובין הכולל (HbT) ורוויון החמצן (SO 2 ) 19 , 20 , 21 , 22 . המוח הדמיה neurovascular הושג בעזרת סוכני בניגוד אקסוגני 12 , 23 , 24 . שיטת PA יכולה לעזור לתת הבנה טובה יותר של בריאות המוח על ידימתן מידע ברמה המולקולרית והגנטית.
עבור הדמיה חיה קטנה, ND: YAG / לייזרים OPO נמצאים בשימוש נרחב מקורות PAT עירור. לייזרים אלה מספקים ~ 5 ns ליד פולסים אינפרא אדום עם אנרגיה (~ 100 mJ בחלון פלט OPO) ב ~ 10-Hz שיעור חזרות 25 . מערכת ה- PA המצוידת בלייזרים מסוג זה היא יקרה וגדולה ומאפשרת הדמיה במהירות נמוכה עם מתחי אולטראסאונד חד-רכיביים (UST) בשל שיעור החזרה הנמוך של מקור הלייזר. A טיפוסית רכישת קו זמן במערכות PA כזה הוא ~ 5 דקות לכל חתך 25 . מערכת הדמיה עם זמן מדידה ארוך כזה אינה אידיאלית להדמיה של בעלי חיים קטנים, מכיוון שקשה לשלוט על הפרמטרים הפיזיולוגיים עבור הדמיה של הגוף כולו, הדמיה פונקציונלית של זמן, וכו '. על ידי אימוץ מספר רב של אלמנטים בודדים מסוג UST, מערך מבוססי USTs, או לייזר חזרות שיעור גבוה, ניתן להגדיל את מהירות הדמיה של הרשותמערכות. שימוש רק אחד UST אלמנט אחד לאסוף את כל האותות PA סביב המדגם יגביל את מהירות הדמיה של המערכת. מספר רב של אלמנטים בודדים מסודרים בגיאומטריה מעגלית או חצי עגולה מודגמים בטכניקות הדמיה מהירות, רגישות. USTs 26 , כגון מערכים ליניאריים, חצי עגולים, מעגליים, ונפחיים, שימשו בהצלחה עבור הדמיה בזמן אמת 1 . אלה מבוססי מערך USTs יגדיל את מהירות הדמיה ולהפחית את רגישות המדידה, אבל הם יקרים. עם זאת, מהירות הדמיה של מערכות PA המשתמשות במערך מבוסס USTs עדיין מוגבל על ידי שיעור החזרה של הלייזר.
טכנולוגיית Pulsed-Laser התקדמה כדי ליצור דיודות לייזר חוזרות בעלות חוזק גבוה (PLD). 7,000 מסגרות / s B- סריקה photacoustic הדמיה הודגם עם PLDs באמצעות אולטרסאונד קליני פלטפורמה 27 . אלה PLDs יכול לשפר את מהירות הדמיה של הE מערכת PAT, אפילו עם אלמנט בודד UST עגול סריקה הגיאומטריה. USTs חד-רכיביים הם פחות יקרים ורגישים מאוד, בניגוד ל- USTs מבוססי מערך. במהלך העשור האחרון, מחקר קטן דווח על שימוש של PLDs שיעור החזרה גבוה כמקור עירור הדמיה הרשות. סיבים מבוססי אינפרא אדום PLD הוכח עבור הדמיה PA של רפאים 28 . ב vivo הדמיה של כלי דם בעומק ~ 1 מ"מ מתחת לעור האדם הוכח באמצעות אנרגיה נמוכה PLDs 29 . PLD מבוסס אופטי רזולוציה מיקרוסקופ photacoustic (ORPAM) דווח. באמצעות PLDs, ~ 1.5 ס"מ הדמיה עמוקה בקצב מסגרת של 0.43 הרץ הודגם 30 . לאחרונה, מערכת PLD-PAT דווח כי סיפקה תמונות קצר כמו ~ 3 s ו ~ ~ 2 ס"מ עומק הדמיה ברקמות ביולוגיות 25 , 31 . מחקר זה הוכיח כי עלות נמוכה, מערכת קומפקטית יכולה לספק גבוהה quaתמונות, אפילו במהירויות גבוהות. ניתן להשתמש במערכת PLD-PAT עבור הדמיה פוטו-אקוסטית גבוהה, הדמיה של כלי דם מופרעים, הדמיה משותפת של אצבע, הדמיה של רקמה בעובי 2 ס"מ, הדמיה מוחית קטנה, וכו ' . אורך הגל היחיד דופק פולסים אנרגיה נמוכה מ PLD להגביל את היישום שלה רב הדמיה ספקטרלית עמוק הדמיה. ניסויים בוצעו על בעלי חיים קטנים באמצעות אותה PLD-PAT המערכת המשמשת יישומים פרה קליניים. מטרת עבודה זו היא לספק את ההדגמה ניסיוני visualized של מערכת PLD-PAT עבור in vivo 2D חתך המוח הדמיה של בעלי חיים קטנים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו על פי ההנחיות והתקנות שאושרו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת שימוש של אוניברסיטת נניאנג טכנולוגית, סינגפור (פרוטוקול בעלי חיים מספר ARF-SBS / NIE-A0263).
1. תיאור המערכת
2. הכנת בעלי חיים הדמיה מוח עכברוש
הערה: מערכת PLD-PAT שתוארה לעיל הודגם הדמיה מוח קטן בעלי חיים. עבור ניסויים אלה, חולדות נקבה בריא (ראה טבלה של חומרים ) שימשו.
3. ב ויוו עכברוש המוח הדמיה

איור 1: שרטוטים של מערכת PLD-PAT. ( א ) סכמטי של PLD-PAT. PLD: דיודת פולסים לייזר, CSP: circuצלחת סריקה, AM: מכונת הרדמה, M: מנוע, MPU: יחידת גלגלת המנוע, LDU: יחידת נהיגה לייזר, PRU: יחידת פולסר / מקלט, UST: מתמר אולטרסאונד, WT: מיכל מים, PF: סרט פולימרי, ו- DAQ: כרטיס רכישת נתונים. ( ב ) סכמטי של מיכל המים, מבט עליון (1) ו חתך להציג (2) ב vivo קטן הדמיה מוחית הדמיה. A: מטרי בורג, B: לוחית אקרילית חדה, C: סיליקון "O" טבעת, D: 100 מיקרומטר עבה, כיסוי פוליאתיל שקוף. הטנק היה חור בקוטר 9 ס"מ בתחתית שלו היה אטום עם קרום אולטרסוני ואופטי שקוף, 100 מיקרומטר עבה פוליאתילן קרום. ( ג ) סכמטי של תאורה של פעימות לייזר מן PLD ו- A- שורות, אוסף של 5 שניות זמן סריקה רציפה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
את in vivo המוח הדמיה תוצאות המדגימות את היכולות של המתואר PLD-PAT המערכת הם showcased בסעיף זה. כדי להדגים את יכולות הדמיה במהירות גבוהה של מערכת PLD-PAT, הדמיה מוחית של vivo של שני חולדות בריאים שונים בוצעה. איור 2 מציג את תמונות המוח של חולדה נקבה (93 גרם) במהירויות סריקה שונות. איור 2a ו- b להראות את התמונות של המוח חולדה לפני ואחרי הסרת הקרקפת על אזור המוח. PAT הדמיה...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
עבודה זו מציגה פרוטוקול לביצוע הדמיה מוח vivo על חולדות באמצעות מערכת PLD-PAT. הפרוטוקול כולל תיאור מפורט של מערכת הדמיה ויישור שלה, כמו גם איור של הדמיה מוחית על חולדות. מערכות ה- PAT הקיימות מבוססות OPO הן יקרות וגדולות ויכולות לספק תמונה אחת חתךית בטווח של 5-10 דקות. מערכת PLD-PAT היא קומפקטית, ניידת ועלות נמוכה ויכולה לספק תמונות באיכות טובה ב -3 שניות. הביצועים של המערכת נלמדו בעבר ברוחות רפאים ובהשוואה למערכת PAT קונבנציונלית 25 . כאן, אותו P...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין אינטרסים כלכליים רלוונטיים בכתב היד ואין שום ניגודי אינטרסים פוטנציאליים אחרים שיש לגלותם.
המחקר נתמך על ידי מענק רובד 2 ממומן על ידי משרד החינוך בסינגפור (ARC2 / 15: M4020238) ואת המועצה הלאומית למחקר רפואי של משרד הבריאות של סינגפור (NMRC / OFIRG / 0005/2016: M4062012). המחברים מבקשים להודות למר צ'או וואי הונג בובי על העזרה בחנות המכונה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| דיודת לייזר פועמת | קוונטל, צרפת | QD-Q1910-SA-TEC | זהו מקור לייזר העירור עם מפרט 803 ננומטר, 1.4 mJ לכל דופק, דופק 136 ns, מקסימום 7 קילו-הרץ, מידות: 11.0 x 6.0 x 3.6 ס"מ, משקל: ~ 150 גרם |
| מנוע צעד עם תיבת הילוכים | LIN Engineering (דינמיקת סרוו) | מנוע: CO-5718-01P, תיבת הילוכים: DPL64/1, I = 10 עבור NEMA 23; ספק כוח PW100-48 | כדי להזיז את מחזיק הגלאי בגיאומטריה מעגלית. מומנט: 2.08 ננומטר, אינרציית רוטור: 2.6 ק"ג-סמ"ר |
| פולסר/מקלט אולטראסוני | אולימפוס | 5072PR | כדי לקבל, לסנן ולהגביר את אות ה-PA מ-UST. רוחב הפס שלו הוא 35 מגה-הרץ, והרווח הוא ± 59 דציבלים. |
| מתמר אולטרסאונד | Olympus | V306-SU-NK-CF1.9IN/Q4200069 | חיישנים קוליים המשמשים לזיהוי פוטו-אקוסטי. תדר מרכזי 2.25 מגה-הרץ, 0.5 אינץ', פוקוס גלילי 1.9 אינץ' |
| PCIe DAQ (רכישת נתונים) כרטיס | GaGe | CSE4227 / A6000610 / B0E00610 | 12 סיביות, 100 אלפיות השנייה לשנייה, 2 ערוצים, 1 זיכרון על הלוח 1 Gs, ממשק PCIe x16 |
| חולדות | In Vivos Pte Ltd, סינגפור | NTac: SD, Sprague Dawley / SD | נקבה, משקל 100 & plusmn; |
| מיכל מים אקרילי 10 גרם | סדנת NTU | בהתאמה אישית | היא מכילה את המים המשמשים כמדיום צימוד אקוסטי בין המוח לגלאי |
| סורק עגול | סדנת NTU | בהתאמה אישית | עשוי מאלומינום |
| מכונת הרדמה רפואית | פלוס pte בע"מ | מכונת הרדמה ללא נשימה עם רכז חמצן. | מספק חמצן ואיזופלורן לבעלי חיים |
| דופק אוקסימטר נייד | מדטרוניק | PM10N עם חיישן וטרינרי | עוקב אחר אוקסימטריית הדופק של החיה |
| ג'ל אולטרסאונד | פרוגרס/פארקר ג'ל אקוואסוני | PA-GEL-CLEA-5000 | ג'ל אולטרסאונד שקוף |
| תוכנת זיהוי נתונים | National Instruments Corporation, אוסטין, טקסס, ארה"ב) | NI LabVIEW 2015 SP1 | תוכנה מבוססת LabVIEW פותחה במעבדתנו לשליטה במנוע הצעד ורכישת סינגנלים PA מהגלאי |
| תוכנת עיבוד נתונים | Matlab (Mathworks, Natick, MA, ארה"ב) | Matlab R2012b | קוד Matlab לשחזור תמונות PA פותח במעבדתנו |
| בקר טמפרטורה | LaridTech, MO, ארה"ב | MTTC1410 | זה ישלוט כל הזמן בטמפרטורה של PLD |
| ספק כוח 12 וולט | וולטקראפט | PPS-11810 | לאספקת מתח הפעלה עבור ספק כוח משתנה PLD |
| BASETech | BT-153 | כדי לשנות את הספק פלט הלייזר | |
| מחולל פונקציה | Funktionsgenerator | FG250D | כדי לשנות את קצב החזרה של ה-PLD. זה יספק אות TTL כדי לסנכרן את ה-DAQ עם עירור הלייזר. |
| מפיץ בעלי חיים | In Vivos Pte Ltd, סינגפור | מפיץ בעלי חיים המספק בעלי חיים קטנים למטרות מחקר. | |
| מחזיק בעלי חיים | סדנת NTU | בהתאמה אישית | משמש להחזקת החיה על בטנה |
| מסכת נשימה | סדנת NTU | בהתאמה אישית | משמש יחד עם מחזיק בעל חיים לאספקת תערובת הרדמה לבעל החיים |
| נתרן פנטוברביטל | Valabarb | משמש להמתת חסד של החיה לאחר התפוגה. | |
| מפזר אופטי | Thorlabs | DG10-1500 | משמש להפיכת קרן הלייזר להומוגנית |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.