$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
הצהרת אתיקה: הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת מיסיסיפי אישרה את כל טכניקות הלכידה, הטיפול והסימון תחת הפרוטוקולים 04-068, 07-036, 10-033 ו-13-034.
1. הקמת אתרי לכידה, שיתוק והובלה של צבי לבן זנב
- זהה נכסים ציבוריים ופרטיים הרשומים בתוכנית הסיוע לניהול צבאים22 והקים ≥29 אתרי לכידה בשלושה אזורי מקור במיסיסיפי, ארה"ב.
- זהה מספר מיקומי לכידה בכל אזור מקור כדי להבטיח שטווח השונות הגנטית הקיימת באוכלוסייה האזורית נלכד.
- הערה: כאן, אזורי המקור כללו את הדלתא, המהווה כמעט 17% מכלל שטח הקרקע במיסיסיפי, ארה"ב, ונחשב לאזור קרקע איכותי עם חקלאות כמחלקה <העיקרית לשימוש בקרקע = "xref">23,24. כל חיות המחקר נלכדו מאזור זה בתפוצה של O. v. virginianus25. אזורים אחרים כללו את אזור הלס הדק (לס דק עליון ותחתון ביחד), המהווה כמעט 14% מכלל שטח היבשה במיסיסיפי, ארה"ב ונחשב לאזור קרקע באיכות בינונית. חקלאות היא גם שימוש קרקע עיקרי באזור הלס הדק, אם כי לא נפוץ כמו במחלקה דלתא<סאפ="xref">23,24. כל חיות המחקר נלכדו מאזור זה בתפוצה של O. v. virginianus21. לבסוף, אזור הקרקע של מישור החוף התחתון (LCP) כולל כמעט 22% ממיסיסיפי ומסווג כאזור קרקע באיכות נמוכה. שימושי הקרקע העיקריים ב-LCP הם ייצור עצי אורן ורעיית בעלי חיים23,24. ה-LCP חופף גם את ההתפלגות הגיאוגרפית של O. v. osceola; ארבע מתוך שש אוכלוסיות המקור היו בטווח של 21 ק"מ מהתפלגות זו25. תת-מין זה תואר כקטן יותר מ-O. v. virginianus26.

איור 1: אוכלוסיות מקור. אזורים פיזיוגרפיים שבהם נתפסו סכרים בהריון ועופות במיסיסיפי, ארה"ב. נתון זה שונה מ-reference31. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
- בחר אתרי לכידה פוטנציאליים העומדים בקריטריונים הבאים; מאפייני בית גידול התורמים לתנועת צבאים, קרבה לכבישי גישה ותפוצה ברחבי אזור המחקר.
הערה: אתרי לכידה חייבים לאפשר הסתרה של טכנאי הלכידה.
- אתרי פיתיון עם כ-10 ק"ג תירס קלוף כדי לפתות צבאים לבקר ולהעריך את השימוש על סמך צריכת פיתיון וצבאים שצולמו על ידי מצלמות רגישות לתנועה. עברו לאתרים חלופיים אם צבאים לא ישתתפו באתרים עם פיתיון תוך 5-7 ימים.
- במהלך אירועי לכידה, שב ב"עמידה" נסתרת.
- עמדו במרחק של כ-20 מ' במורד הרוח מערימת הפיתיון, תוך התחשבות בכיוון הרוח השורר, כך שצבאים המתקרבים לפיתיון יוכלו פחות להריח את טכנאי הלכידה.
הערה: מעמדים מוגבהים עדיפים מאוד, ונדרשות רתמות בטיחות. ישנן מספר וריאציות של דוכנים עם מגוון מקורות מסחריים והשימוש משתנה לפי העדפה אישית. לדוגמה, מעמד נעילה יכלול ישיבה עם סולם לגישה המחוברת לעץ עם רצועות. עמדות טיפוס ניידות יכולות להינשא על ידי טכנאי הלכידה ומאפשרות ניידות מוגברת מכיוון שהטכנאי יכול לבחור עץ ספציפי ברגע שהוא מגיע לאתר הלכידה. עמדות טיפוס ניידות מוגבלות לשימוש בעצים ישרים ללא ענפים בגובה הנבחר.
- השתמש באקדח חצים יחד עם חץ רדיו-טלמטריה בנפח 3 סמ"ק כדי לספק תערובת של טלטאמין HCl (4.4 מ"ג/ק"ג) וקסילזין HCl (2.2 מ"ג/ק"ג).
- תזמן את מאמצי הלכידה כך שיתאימו למחזור הפעילות הקרפוסקולרי הטיפוסי של deer27. התחל כל ניסיון לכידה 2-3 שעות לפני השקיעה.
- המשך ללכוד אירועים במשך 2-3 שעות לאחר השקיעה באמצעות משקפי ראיית לילה ולייזר נקודה אדומה למיקום צילום אם צבאים לא נלכדים בשעות היום.
- צלם צבאים כשהם רחבים ונייחים.
הערה: הרבע האחורי של הצבי הוא המטרה מכיוון שיש לו רקמת שריר משמעותית והוא ממוקם הרחק מהלב והריאות.
- המתן כ-15 דקות עד שחיות מטרה חצופות (עופרים בני שישה חודשים משני המינים או נקבות בוגרות בהריון) יהפכו למשותקות לחלוטין לפני שתאתרו אותן עם ציוד רדיו-טלמטריה כיווני.
- ודא שאנשים מורדמים על ידי בדיקת רפלקסים בעיניים (מצמוץ). לאחר מכן מרחו משחת עיניים על העיניים ועל צבי כיסוי עיניים כדי להפחית את הלחץ.
הערה: אובדן ויסות חום הוא תוצאה של קיבוע.
- השתמשו במדחום רקטלי כדי להעריך את טמפרטורת הגוף לאחר ההתאוששות. חממו צבאים עם שמיכות מחוממות אם טמפרטורת החיה נמוכה מ-37.7 מעלות צלזיוס. קררו צבי עם שקיות קרח אם הטמפרטורה של החיה היא מעל 40.0 מעלות צלזיוס.
- הנח צבאים בעמדת ירכתיים על אלונקה בסגנון צבאי והובל צבאים ממקום הלכידה לקרוואן סגור.
- לאחר הכנסת הצבי לקרוואן, הפוך את ההשפעות של קסילזין HCl עם 0.125 מ"ג/ק"ג יוהימבין HCl28.
- הובלת כל הצבאים שנתפסו למתקן השבי הרצוי (למשל, יחידת הצבאים לזכר ראסטי דוקינס באוניברסיטת מיסיסיפי; יחידת הצבאים של MSU) ולשמור אותם מופרדים לפי אזור המקור.
2. מתקנים בשבי ושיטות גידול כלליות של חיות מחקר
הערה: יחידת הצבאים של MSU מחולקת לחמישה מכלאות של 0.4 עד 0.8 דונם.
- כסו כל צד של כל עט בבד צל כדי לשמש כמחסום חזותי ופיזי בין העטים. בד צל מסייע בהפחתת פציעות ומספק צל בחודשי הקיץ.
- הנח 1-2 תריסי קופסה מוגבהים בקצה אחד של כל עט כדי להקל על אירועי חץ במהלך איסוף הנתונים.
- הניחו שני מזינים בסגנון שוקת בקצוות נפרדים של כל מכלאה כדי להפחית את התחרות על מזון בין צבאים. ספק גם שוקת מים בכל עט.
- ספק לצבאים תזונה איכותית (20% כדורי צבי חלבון גולמי) ad libitum.
הערה: כאן, מספוא זמין נוסף בתוך מכלאות כלול (Trifolium spp) ופסקו (Festuca spp) יחד עם עשבים ועשבים מתנדבים.
- אם קיים, שמור על מספוא זמין בתוך מכלאות באמצעות תערובת של קוטלי עשבים כדי לשלוט בעשבים ועשבים רחבי עלים באמצעות שיעורי תערובת הנמצאים בתוויות המתאימות.
הערה: סביר להניח שיהיה צורך במתקנים מחוץ לקמפוס כדי לאכלס גברים בני ≥5.5 חודשים. מתקנים אלה כללו שני מכלאות של 0.7 דונם בכל אחד משלושה נכסים עם שיטות גידול דומות ליחידת הצבאים של MSU.

<מחלקה חזקה="xfig">איור 2: מיקומי מתקנים בשבי. אזור המחקר שבו היו ממוקמים מתקני לוויין ויחידת הצבאים של אוניברסיטת מיסיסיפי (MSU). אזורים מוצלים מצביעים על אוקטיבה (A), נוקסובי (B), אטאלה (C), סקוט (D) וקופיה (E), מחוזות מיסיסיפי, ארצות הברית. נתון זה שונה מ-reference34. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
3. בקרת טפילים ומחלות
- עקוב אחר חיות מחקר לאיתור טפילי תולעים עגולות (Strongyloides spp) באמצעות ציפה צואתית עם טפילים הנמדדים כביצים לגרם (EPG).
- אם קיים ברמות גבוהות, ספק הדברת טפילים על ידי מתן תולעת כדורית (החומר הפעיל פנבנדזול) בקצב של כ-0.77 ק"ג תולעת כדורית לכל 22.7 ק"ג מזון במהלך חודש מאי.
- אם רמות הטפילים נשארות גבוהות לאחר הטיפול הראשוני, יש להשתמש בטיפול איברמקטין (5 מ"ג/מ"ל)29, מעורבב בקצב של 2 מ"ל/0.45 ק"ג ולתת לבעלי חיים בשיעור של 0.45 ק"ג מזון מטופל לכל 45.4 ק"ג מסת בעלי חיים.
הערה: מחלה דימומית אפיזוטית היא לפעמים מחלה ויראלית קטלנית המועברת על ידי גמד נושך (Culicoides spp) במהלך חודשי הקיץ והסתיו. אם קיים, טפל במתקן המחקר בקוטל חרקים (5% קוטל חרקים בנפח נמוך במיוחד) 2-3 פעמים בשבוע בין ה-1 ביולי ל-1 באוקטובר כדי להפחית את שכיחות הווקטורים בקרב חיות מחקר. רססו את קוטל החרקים הזה בתוך כל מכלאה וסביב היקף המתקן כ-90 דקות לפני השקיעה הרשמית באמצעות ערפל. שיטות מועדפות להדברת טפילים ומחלות הן ייחודיות לכל מתקן בשבי. יש להתייעץ עם וטרינרים במהלך כל מחקר חיות בר בשבי כדי להבטיח את בריאותם ובטיחותם של בעלי החיים.
4. איסוף נתונים

איור 3: איסוף נתונים של עופרים שזה עתה נולדו. מדידת אורך כף הרגל האחורית של עופר שזה עתה נולד ביחידת הצבאים לזכר ראסטי דוקינס באוניברסיטת מיסיסיפי סטייט במחוז אוקטיבהה, מיסיסיפי, ארה"ב. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
- חפש במתקן השבי מדי יום עופרים בעונת הלידה.
- סמנו באופן ייחודי עופות שזה עתה נולדו עם תגי אוזניים מפלסטיק בינוני באמצעות תיוג אוזניים עם אנטיביוטיקה המונחת על הקצה הגברי של התג כדי למנוע זיהום פוטנציאלי. הנח תג אוזן סביב מרכז אוזנו של העופר.
- מדוד את מסת הגוף (הקרובה ביותר ל-0.01 ק"ג) עם משקל תלייה דיגיטלי ומדוד את אורך כף הרגל האחורית ואת אורך הגוף הכולל (המ"מ הקרוב ביותר).
- אספו דגימות שיער ושלחו אותן לאתר מרוחק למשימת הורות (ראו טבלת החומרים).
הערה: הקצאת ההורות נעשתה באמצעות DNA המבוסס על מסד נתונים קנייני ולא סטטיסטי של שפת שאילתות מובנית מותאמת אישית. בהשוואת האללים הזוגיים, אתר הקצאת ההורות המרוחקת הקצה הורות כאשר הם לא כללו את כל האב וסכר אחד מלבד אחד בהתבסס על אלל משותף מכל הורה בכל הלוקוסים שנבדקו (B. G. Cassidy, תקשורת אישית). שיטה זו של הקצאת הורות שימשה גם במחקר קודם שנערך על צבי לבן-זנב בשבי30,31.
- יש לתת 2 סמ"ק של טוקסואיד Clostridium perfringens מסוגים C ו-D ונוגדי רעלן Clostridium perfringens מסוגים C ו-D באופן תת עורי ולתת 0.3 סמ"ק/ק"ג של איברמקטין בפרופילן גליקול (בית הספר הווטרינרי של אוניברסיטת מיסיסיפי, מיסיסיפי, ארה"ב) דרך הפה לכל עופר.
- שיתוק כימי של זכרים בוגרים (בני ≥1.5 שנים) במהלך אוקטובר ונובמבר לצורך איסוף נתונים.
- לשתק בוגרים כלואים באמצעות אותו שילוב של טלטאמין HCl וקסילזין HCl המשמש ללכידת חיות בר (שלב 1.4).
- במהלך אירועי הרגעה, לכו עם הטכנאי שירוץ לקצה העט שבו נמצאים התריסים המוגבהים. דאג לטכנאי יחיד בכל אחד משני התריסים.
- בקש מהאדם שהוביל את הטכנאי לעיוור לחזור לקצה הנגדי של העט.
הערה: צבאים מתרחקים מהטכנאים הללו ומתמקמים מול התריסים שבהם הטכנאים נמצאים בעמדה לצלם יריות אתיות על כל צבי.
- צלם צבאים כשהם רחבים ונייחים (סעיף 1.4).
- המתן כ-15 דקות עד שבעלי חיים חצים ישותקו לחלוטין לפני שתתקרבו אליו.
- ודא שאנשים מורדמים על ידי בדיקת רפלקסים בעיניים (מצמוץ). מרחו משחת עיניים על העיניים ועל צבי כיסוי עיניים כדי להפחית מתח.
- לאחר שהחצים מצליחים להרגיע צבי בודד, עקוב אחר שיעורי החיוניות של הצבי.
- השתמשו במדחום רקטלי כדי להעריך את טמפרטורת הגוף לאחר ההתאוששות. חממו צבאים עם שמיכות מחוממות אם טמפרטורת החיה נמוכה מ-37.7 מעלות צלזיוס. קררו צבי עם שקיות קרח אם הטמפרטורה של החיה היא מעל 40.0 מעלות צלזיוס.
- העמיסו את הצבי על אלונקה בסגנון צבאי, והובילו אותו באמצעות רכב משימה לאזור איסוף נתונים שנקבע מראש.
- לאחר ההובלה, רשום את אותן מדידות מורפומטריות שתועדו בלידה (שלב 4.1).
- מדוד את מסת הגוף (הקרובה ביותר ל-0.01 ק"ג) עם משקל תלייה דיגיטלי ומדוד את אורך כף הרגל האחורית ואת אורך הגוף הכולל (המ"מ הקרוב ביותר).
הערה: איילים בודדים מגיבים בצורה שונה לשילוב התרופות המשמשות במהלך אירועי הרגעה, לכן יש לתת כ-0.1-0.3 סמ"ק של תערובת הטלטמין HCl והקסילזין HCl (תלוי במסת הגוף של צבי בודד) אם אדם יוצא מהרדמה לפני השלמת איסוף הנתונים.
- לתת כמויות מתאימות לגודל של אנטיביוטיקה, איברמקטין, חיסון קלוסטידריאלי וחיסון לפטוספירוזיס לכל הצבאים לאחר העברתם לאזור איסוף הנתונים (ראה סעיפים 1 ו-3).
- בצע שלוש מדידות קרניים מזכרים בוגרים באמצעות סרט מדידה לקרניים בזמן שהחיה מורדמת.
- מדוד את ההתפשטות הפנימית (המרחק הרחב ביותר בין הקורות הראשיות), היקף הבסיס (הקוטר הקטן ביותר הממוקם בין הקוצים לשיניים G1), ואורך הקרן הראשית (המרחק מבסיס הקרניים לקצה הקורה הראשית) של הקרניים לפני הסרת הקרניים.
- הסר קרניים כ -3 ס"מ מעל הקוצים באמצעות מסור גומלין. אין להסיר קרניים פחות מ -3 ס"מ.

איור 4: איסוף נתונים של זכרים בוגרים. הסרת קרניים באמצעות מסור גומלין מאייל לבן זנב זכר בוגר בשבי. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
- לאחר איסוף כל הנתונים מהאדם המורדם, הכניסו את הצבי לדיר המתאים ותנו 0.125 מ"ג/ק"ג יוהימבין HCl28 או 4.0 מ"ג/ק"ג טולזולין HCl32 כדי להפוך את ההשפעות של קסילזין HCl. עקוב אחר אנשים כדי לוודא שהם נשארים בתנוחת חזה עד שהם יוצאים מהסדציה והם ערניים לחלוטין.
הערה: אם מתרחשים סיבוכים ויש להמית בעלי חיים, אז המתת חסד על ידי נקע מוחי באמצעות מהמם בריח וניתוק וריד הצוואר הם אמצעים אתיים לשיגור החיה.
- הביאו את הקרניים לאזור ייעודי כדי לסיים למדוד את גודל הקרניים.
- מדוד כל שיניים בודדות הבולטות מהקרן הראשית (G1, G2, G3 וכו') ונקודות חריגות נוספות בעזרת חוט.
הערה: נקודות שאין להן מקבילה תואמת על הקורה הראשית הנגדית או שאינן עולות בקנה אחד עם ההגדרה של קבוצת קרניים טיפוסית מוגדרות על ידי Boone and Crockett Club33.
- עטפו את החוט סביב המקום שבו השיניים מצטלבות עם הקורה הראשית וסמנו את הנקודה הזו לעיון.
- מדדו מנקודת התייחסות זו לקצה השן וחזרו על הפעולה עבור כל שיניים.
- אסוף את מדידות ההיקף הנותרות על ידי זיהוי הנקודה הקטנה ביותר בין השיניים G1 ו-G2 (היקף H2), השיניים G2 ו-G3 (היקף H3) והשיניים G3 ו-G4 אם קיימות (היקף H4).
- אם ה-G4 אינו קיים, מדוד את המרחק בין נקודת האמצע של ה-G3 לקצה האלומה הראשית ומדוד את היקף ה-H4 בנקודת האמצע.
- מדוד פחות מארבעה היקפים כאשר הקרניים מכילות פחות משלושה שיניים.
הערה: למשלample, אלומה ראשית עם שתי נקודות אופייניות כוללת רק שלוש מדידות היקף. אנשים יכולים להשתמש בהנחיות אחרות (Safari Club International) לחישוב גודל הקרניים; עם זאת, יש להשתמש בשיטות עקביות עבור כל בעל חיים לצורך השוואה תקפה.
- לאחר ביצוע כל המדידות, חשב ציון קרניים דומה לציון ברוטו הלא טיפוסי של בון וקרוקט33.
- שקלו את הקרניים ל-0.1 גרם הקרוב ביותר באמצעות משקל דיגיטלי מדעי והקצו מסת קרניים קריטית מינימלית של 1 גרם לבעלי חיים בשנה הראשונה עם קרניים קצרות מ-3 ס"מ.
- שיתוק כימי של צעירים כלואים בגיל 5.5 חודשים בערך באותן שיטות למבוגרים (סעיף 4.2) וסמן צעירים עם תג אוזן גדול מפלסטיק (שלב 4.1.1).
- השתמש באותם שיעורי תערובת תרופות כדי לשתק בוגרים בשבי המשמשים לשיתוק איילי בר (סעיף 1).
- אסוף את אותן מידות שנאספו בלידה (שלב 4.1.2) ובצע את אותן תרופות מונעות כמו מבוגרים (סעיף 4.2).
הערה: לאחר איסוף כל הנתונים, העבירו כל זכר צעיר למתקן הלוויין שהוקצה לו באופן אקראי באמצעות נגרר.
5. יצירת צאצאים מהדור הראשון והשני
- סווג עופרים וצאצאים בני שישה חודשים שנולדו במתקן השבי מאמהות שנלכדו בטבע כפרטים מהדור הראשון.
- במהלך עונת הרבייה, הניחו שני זכרים עם 7-16 נקבות ליחס מין רבייה ממוצע של זכר אחד לשמונה נקבות.
הערה: בחר זכרים מקננים ממתקני לוויין על סמך המראה הפיזי, מכיוון שהזכרים הבריאים ביותר (הקרניים הגדולות ביותר וגודל הגוף) נוטים לשרת את הנקבות במשך כל עונת הרבייה מבלי לסבול מפציעה עקב האופי האגרסיבי של הזכרים במהלך עונת הרבייה.
- אפשר לצבאים להתרבות רק עם פרטים אחרים מאותו אזור מקור (למשל, זכרי דלתא מגדלים נקבות דלתא, זכרי לס דק מגדלים נקבות לס דק, וזכרי LCP מגדלים זכרי LCP).
- סווג צבאים שנולדו על ידי הורים מהדור הראשון כצאצאים מהדור השני. לגדל את הפרטים הללו בשבי מלידה ולהאכיל את אותה תזונה איכותית כמו הוריהם.
הערה: נקבות עשויות להוליד צאצאים מספר שנים, אך בדרך כלל עם אבות שונים בכל שנה. אסוף את אותם נתונים על צאצאי הדור השני שנאספו על אנשים מהדור הראשון ונלכדו בטבע.