אזור פני השטח הפנימי של הריאות (ISA) הוא קריטריון קריטי להערכת מורפולוגיה ריאות ופיזיולוגיה במחלות ריאה ו-התחדשות שנגרם על ידי פציעה. אנו מתארים כאן שיטה סטנדרטית שיכולה למזער את הטיה המדידה עבור השב"כ הן ריאות pneumonectomy ריאות מודלים השתלת עכבר פרוטה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
שיטה מתוקננת למדידת שטח הפנים של הריאות הפנימיות באמצעות דלקת ריאות של עכבר והשתלת תותב
במאמר זה
סיכום
תקציר
מורפולוגיה ריאתית, פיזיולוגיה ותפקודי נשימה משתנים במצבים פיזיולוגיים ופתולוגיים כאחד. שטח פנים פנימי של ריאה (ISA), המייצג את יכולת חילופי הגזים של הריאה, הוא קריטריון קריטי להערכת תפקוד הנשימה. עם זאת, הטיית הצופה יכולה להשפיע באופן משמעותי על הערכים הנמדדים עבור פרמטרים מורפולוגיים של הריאות. הפרוטוקול שאנו מתארים כאן ממזער שינויים במהלך מדידות של שני פרמטרים מורפולוגיים המשמשים לחישוב ISA: נפח ריאה פנימי (ILV) ויירוט ליניארי ממוצע (MLI). באמצעות ISA כפרמטר מורפומטרי ותפקודי לקביעת התוצאה של התחדשות המכתשית הן במודלים של כריתת ריאות (PNX) והן במודלים של השתלת תותבת, מצאנו כי ה-ISA המוגבר בעקבות טיפול ב-PNX נחסם באופן משמעותי על ידי השתלת תותבת לתוך חלל בית החזה1. היכולת לכמת במדויק ISA צפויה לא רק לשפר את האמינות והשחזור של מחקרי תפקודי ריאות במודלים של התחדשות המכתשית הנגרמת על ידי פציעה, אלא גם לקדם תגליות מכניסטיות של מחלות ריאה מרובות.
מבוא
הפונקציה הבסיסית של הריאה היא החלפת חמצן דו תחמוצת הפחמן בין כלי הדם לבין האווירה. מחלות ריאות כגון bronchopulmonary dysplasia (BPD), מחלת ריאות חסימתית כרונית (COPD) ודלקות בדרכי הנשימה חריפות, גורמות לירידת ערך 2 . חוקרים שחקרו מחלת ריאה פיתחו מספר שיטות כמותיות להערכת שינויים מורפולוגיים בריאות, כולל MLI, ILV, מספר יחידות חילופי גז, השב"כ, תאימות רקמות ריאה 2 , 3 . מחקרים חלוציים על ידי Weibel et al. 4 ו Duguid et al. 5 יחד נקבע כי ISA יכול לשמש כמדד ישיר של קיבולת גז ריאות החלי....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הנהלים המשמשים בפרוטוקול זה בוצעו בהתאם להמלצות הקווים המנחים לטיפול ושימוש בחיות מעבדה של המכון הלאומי למדעי הביולוגיה בבייג'ינג. 8 שבועות בן CD-1 עכברים זכר שוכנו מתקן פתוגן ללא תשלום (SPF) חינם עד הניסויים נערכו. ניתוחים בוצעו באמצעות עכברים מורדמים לחלוטין ( כלומר , ללא תגובות קמצוץ הבוהן). לאחר הניתוח, עכברים נשמרו בחדר חם ולח, עם מספיק מזון ומים מתוקים. עכברים הוקרב באמצעות מנת יתר של הרדמה נמסר על ידי הזרקה intraperitoneal.
1. עכבר PNX כירורגיה
- להר....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
ביצענו כאן ניסוי עם PNX שטופלו הקבוצה השתלת תותבת (Prosthesis-implanted) קבוצה. קבוצות אלה זהות לקבוצות ששימשו במחקר שפורסם בעבר מקבוצת המחקר 14 שלנו.
PENX העכבר ואת פרוצדזה ההשתלה נהלים מוצגים באיור 2 . 8 שבועות בן CD-1 עכברים זכרים משמשים עבור ניתוחים עבור כימות. בקבוצת PNX שטופלה והקבוצ.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
בפרוטוקול זה, אנו מספקים תיאורים מפורטים על המדידה של פרמטרים ריאתיים לאחר העכבר השמאלי PNX ריאות השתלת תותבת. השב"כ נחשב כיום כמדד מרכזי להערכת תפקוד הנשימה במחלות ריאות רבות ובשיקום התחדשות השחלות המושרה. עם זאת, אף על פי שקהילת המחקר הריאתי מסכימה על תועלתה של הרשות כמדד שימושי, נכון להיום, לא היה משקל רב למדידה של מדידת ILV ו- MLI, שני הפרמטרים המשמשים לחישוב השב"כ. ברור, כמו בכל מדידה, חשוב לנסות להשיג נתונים משוחדת. מטרת הליבה של מאמץ המחקר הנוכחי היא להקים פרוטוקו.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
המחברים מבקשים להודות המכון הלאומי למדעי הביולוגיה, בייג 'ין על הסיוע. עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של בייג'ינג (מס 'Z17110200040000).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| ערכת צריבה בעלות נמוכה | כלי מדע עדינים | 18010-00 | |
| מספריים Noyes | כלי מדע עדינים | 15012-12 | |
| מלקחיים דפוס סטנדרטי | כלי מדע עדינים | 11000-12 | |
| מחזיקי מחטים מיקרו Castroviejo | כלי מדע עדינים | 12060-01 | |
| קליפסים לכלי | כלי מדע עדינים | 18374-44 | |
| I. V. Cannula-20 מד | Jinhuan מוצר רפואי ושות', בע"מ. | 29P0601 | |
| תפר כירורגי | Jinhuan מוצר רפואי ושות', בע"מ. | F602 | |
| Penn-Century, Inc | דגם MIP | ||
| לרינגוסקופ בעלי חיים קטנים | Penn-Century, Inc | דגם LS-2-M | |
| TOPO מאוורר בעלי חיים קטנים | קנט סיינטיפיק | RSP1006-05L | |
| כרית תרמית | ציוד סטיוארט | SBH130D | |
| מלח נתרן פנטוברביטל | סיגמא | P3761 | |
| מלח נתרן הפרין | סיגמא | H3393 | |
| תמיסת המטוקסילין | סיגמא | GHS132 | |
| תמיסת אאוזין Y, סיגמא אלכוהולית | HT110116 | ||
| 10 מ"ל פיפטה | תרמו סיינטיפיק | 170356 | |
| פרפורמלדהיד | סיגמא | P6148 | |
| O.C.T תרכובת | רקמה-טק | 4583 | |
| מכונת חיתוך | Leica | CM1950 | |
| תבניות בסיס חד פעמיות | Fisher HealthCare | 22-363-553 | |
| 18 מחט מד | Becton Dickinson | 305199 | |
| Povidone יוד | פישר סיינטיפיק | 19-027132 | |
| 70% אתנול | Fisher Scientific | BP82011 | |
| ערכות עירוי ליחיד להשתמש | Weigao | SFDA 2012 3661704 | |
| פוספט חוצץ | מלח Gibco | 10010023 | |
| קלטות | 3M סקוטש | 8915 | |
| כרית כותנה | Vinda | Dr.P | |
| סיליקון תותבת | מותאם אישית בהתאמה | ||
| מיקרוסקופ Brightfield | אולימפוס | VS120 | |
| כלי סרגל | Adobe פוטושופ |
מקורות
- Liu, Z., et al. MAPK-Mediated YAP Activation Controls Mechanical-Tension-Induced Pulmonary Alveolar Regeneration. Cell Rep. 16 (7), 1810-1819 (2016).
- Thurlbeck, W. M. Internal surface area and other measurements in emphysema. Thorax. 22
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
