פאנל של סמנים ביולוגיים הכוללת חלבונים מרובים עשויים לספק רגישות וספציפיות גבוהה יותר מאשר סמן בודד באבחון של מחלות מורכבות כגון סרטן1,2. וזמינותו מקושרים-אנזים immunosorbent (אליסה) כבר הטכנולוגיה תקן זהב בשימוש במעבדות קליניות בהשגת גבול של זיהוי-pg/mL נמוכה בפלסמה, אבל לתחום יעד אחד לכל assay3,4,5. מיקרו-מערכים נוגדן פותחו עבור אדיב אלפי מבחני ולמחקר שנערך במקביל7,86,שקופיות מיקרוסקופ יחיד. עם זאת, היכולת multiplexing של שיטה זו הוא מוגבל על ידי מונחה ריאגנט אשיג, הנובע היישום של תערובת של דבס, הוא הופך להיות יותר בעייתי עם מספר גדל והולך של מטרות9,10 , 11. פלה ואח. הצהירו כי פגיעות וכתוצאה מכך assay כריך מולטיפלקס מושפעת 4N(N-1) כאשר N הוא מספר מטרות12.
כדי להמתיק אשיג ב נוגדן מיקרו-מערכים, נוגדן colocalization microarray (ACM) פותחה במעבדה שלנו כריך מולטיפלקס assay12. לכידת נוגדנים (מוניות) הם הבחינו על מצע עם תצפיתן microarray. לאחר חסימת דגימות מוחלים על פני השטח, ואז ודבס בודדים הם הבחינו על המקומות זהה עם קומפלקס אנטיגן המונית. אפשרות לפתור כל התרחישים אשיג בין נוגדנים אנטיגנים עם ACM, מגבלות של זיהוי-pg/mL הושגו. עם זאת, פרוטוקול assay דורש הכנה של הבחינה של דבס במהלך הניסויים באמצעות שהמשגיח microarray באתר עם דיוק גבוהה לצורך היישור, וזה זמן רב ויקר, הגבלת יישום נרחב של טכנולוגיה זו ב- מעבדות אחרות. ACM כף-יד, בשם צ'יפ snap פותחה עבור cross-reactivity חינם, ללא שהמשגיח מגה-פלקס כריך immunoassays13,14,15. מוניות, דבס נצפה מראש על גבי של assay ושקופית העברה בהתאמה בתבנית microarray, מאוחסנים. במהלך וזמינותו, השקופיות מאוחזרות, microarray של דבס מועברים באופן קולקטיבי על גבי השקופית assay מאת פשוט מצלם את האסימונים שני ביחד. מנגנון הצמדה משמש להעברת ריאגנט אמין. ניטרוצלולוזה מצופה שקופיות עם קיבולת איגוד נוגדן גדולה יחסית שימשו כמו assay השקופיות כדי לספוג את טיפות נוזל, ובכך להקל על העברת ריאגנט, עם זאת, השקופיות יקרים יותר שקופיות זכוכית רגילה, microarray סורקים תואם עם מגלשות שאינם שקופים נדרשים עבור רכישת אות.
בעבודה זאת, נדגים את הפרוטוקול של ביצוע של ראגנטים מולטיפלקס כריך עם שבב snap. מנגנון הצמדה הרומן פותחה עבור העברת ריאגנט יותר נוח ואמין microarray-כדי-microarray. חשוב לציין, כאן הקמנו שיטת ההעברה מגיב על גבי זכוכית רגילה שקופיות עם השבב snap. 1024 כתמים בהצלחה להעביר, מיושרים על זכוכית, הרחבה משמעותית את השימוש בטכנולוגיה זו במעבדות רוב.