שני הפוטונים סידן הדמיה של דנדריטים עצביים במוח פרוסות

Olivier Camiré; Lisa Topolnik

doi:10.3791/56776

הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

שני הפוטונים סידן הדמיה של דנדריטים עצביים במוח פרוסות

11.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/56776

⸱

15 במרץ 2018

Olivier Camiré¹^,² , Lisa Topolnik¹^,²

¹CHU de Québec-Université Laval Research Center, Université Laval, ²Department of Biochemistry, Microbiology and Bioinformatics, Université Laval

במאמר זה

סיכום

אנו מציגים שיטת שילוב תאים כל תיקון-קלאמפ הקלטות והדמיה שני הפוטונים להקליט את Ca^{2 +} שנחשולי דנדריטים עצביים במוח חריפה פרוסות.

תקציר

הדמיית סידן (Ca^{2 +}) הוא כלי רב עוצמה כדי לחקור את הדינמיקה ייתכן של אותות תאיים^{2 +} Ca בדנדריטים עצביים. Ca^{2 +}תנודות יכול להתרחש באמצעות מגוון רחב של הממברנה, מנגנונים תאיים, לשחק תפקיד מכריע של אינדוקציה של פלסטיות סינפטית, ויסות דעתנית דנדריטים. מכאן, היכולת להקליט סוגים שונים של Ca^{2 +}אותות בענפים דנדריטים הוא יקר עבור קבוצות לומדים איך דנדריטים לשלב מידע. כניסתו של מיקרוסקופ שני הפוטונים עשה מחקרים כאלה קל יותר באופן משמעותי על ידי פתרון הבעיות כדי הדמיה ברקמה חיה, כגון פיזור אור, נזקי. יתר על כן, באמצעות שילוב של שיטות אלקטרופיזיולוגיות קונבנציונאלי עם שני הפוטונים Ca^{2 +} הדמיה, זה אפשרי לחקור המקומי Ca^{2 +}תנודות דנדריטים עצביים במקביל עם הקלטות של פעילות סינפטית סומה. כאן, אנו נתאר כיצד להשתמש בשיטה זו כדי ללמוד את הדינמיקה של רשות מקומית^{2 +} תופעות מעבר (חתולים) בדנדריטים של GABAergic interneurons מעכבות. השיטה ניתן להחיל גם ללמוד דנדריטים Ca^{2 +} איתות סוגים עצביים במוח חריפה פרוסות.

מבוא

התרומה של נוירון לפעילות הרשת נקבעת במידה רבה על ידי באופי הדינמי של הקלט סינפטית שהיא מקבלת. באופן מסורתי, השיטה הדומיננטית של אפיון פעילות סינפטיים בנוירונים הסתמך על תיקון שלם-תא הסומטית-קלאמפ הקלטות של זרמי postsynaptic עורר על ידי גירוי חשמלי של אקסונים של המעבר. עם זאת, הפעילות היחידה של הסינפסות ממוקם הציר הקרוב הוא דיווח בכנות במקרה הזה¹. בנוסף, כדי להעריך את המנגנונים הספציפיים סינפסה, שימשו הקלטות זוגות נוירונים ומן דנדריטים במיקום ספציפי למטרה הסינפסות עניין ולפי המנגנון של אינטגרציה דנדריטים, בהתאמה. פריצת דרך בתחום הפיזיולוגיה סינפטית הושג באמצעות נישואים של טכניקות אופטי אלקטרופיזיולוגיות. סריקת מיקרוסקופ (2PLSM) בשילוב עם Ca^....