השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
* These authors contributed equally
השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.
הדגם עכברוש של השתלת כבד orthotopic (OLT) חיוני למחקר השתלות. זה מודל בעלי חיים מאוד מתוחכמים ודורש עקומת למידה תלולה. המבוא של הטכניקה השרוול על השקה של וריד שער הכבד (PV), infrahepatic הנבוב העליון (IHVC) פישטה משמעותית בניתוח השתלה אצל חולדות. עם זאת, בשל הקיר הקדמי קצר של הנמענים suprahepatic הנבוב העליון (SHVC), הטכניקה השרוול הוא קשה מאוד לשימוש מחדש של SHVC. רוב החוקרים בתחום זה עדיין להשתמש בטכניקה היד-תפר SHVC שיקום, מה שהופך אותו השלב צוואר בקבוק בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. הטכניקה השקה מגנטי (קרי, magnamosis) היא שיטת חיבור שתי ספינות באמצעות הכוח אטרקטיביים בין שני מגנטים. מחקר שנערך שלנו הראו כי הטכניקה השקה מגנטי עדיפה טכניקת היד-תפר SHVC שחזור בחולדות. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים. במודל זה, השחזור של PV, IHVC בוצע על ידי טכניקה סטנדרטית קאף, בזמן השחזור של המרה (BD) בוצע על ידי טכניקה סטנט. Arterialization מחדש הכבד לא בוצעה. הטכניקה השקה מגנטי עשוי שחזור SHVC הרבה יותר קל וקיצור משמעותי השלב anphepatic. אחרי עקומת למידה סבירה, אפילו חוקרים ללא מיומנויות השתלה מתקדמות יכול לייצר תוצאות לשחזור ואמין באמצעות מודל זה עכברוש של OLT.
הדגם עכברוש של השתלת כבד orthotopic (OLT) חיוני עבור השתלה מחקר1,2. העכברוש הראשון OLT תוארה על ידי Lee. et al. ב 19733. במודל זה, כל כלי שוחזרו על ידי טכניקת היד-תפר. הטכניקה ' היד-תפר דורש מיומנויות השתלה מתקדמות, אשר מגביל משמעותית את הניצול. מאז, למגוון שינויים בפרוטוקול המקורי של עכברוש OLT דווחו. ביניהם, הטכניקה השרוול על השקה של וריד שער הכבד (PV), infrahepatic vena cava (IHVC) שדווחו על-ידי קמהדע. et al. ב-1979 נחשב על שיפור משמעותי מודל זה, כמו זה לפשט באופן משמעותי את ההליכים שחזור4 . עם זאת, בשל הקיר הקדמי קצר של הנמענים suprahepatic הנבוב העליון (SHVC), הטכניקה השרוול הוא קשה מאוד לשימוש מחדש של SHVC. רוב החוקרים בתחום זה עדיין להשתמש בטכניקה היד-תפר SHVC שיקום, מה שהופך אותו השלב צוואר בקבוק ב עכברוש OLT5,6,7.
הטכניקה השקה מגנטי (קרי, magnamosis) היא שיטת חיבור שתי ספינות או מבנים צינורי אחרים באמצעות הכוח אטרקטיביים בין שני מגנטים8,9,10,11. הכוח המגנטי בהדרגה דוחס, remodels הרקמה לתוך12,השקה חזק, sutureless13. השקה דחיסה זה הוכח כיעיל בני14,15. עיצבנו זוג טבעות מגנטי במיוחד עבור ההשקה של SHVC אצל חולדות. מחקר שנערך שלנו הראו כי הטכניקה השקה מגנטי עדיפה טכניקת היד-תפר שיקום SHVC חולדה OLT16. מטרת מאמר זה היא לספק פרוטוקול מפורט, צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הפרוטוקול בוצע בהתאם להנחיות על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה, אושרה על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים בניסויים של שיאן אוניברסיטת ג'יאוטונג של, שיאן, מחוז שאאנשי, סין.
הערה: אף הליכים לפי פרוטוקול זה בוצעה תחת מיקרוסקופ כירורגי.
1. הכנה לפני הניתוח
2. התורם המבצע
3. להשתיל הכנה
הערה: כל הפרוצדורות להכנת השתלת כבד מתבצעות בתוך אמבט מלוחים קרים ב 4 º C.
4. הנמען מבצע
הערה: הסכימה של ההשתלה שתל בחולדה הנמען מוצג באיור5.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
לאחר כ 10 ניסיונות, הטכניקה השקה מגנטי עבור שחזור SHVC היה mastered בהצלחה ע י חוקר שהיה לו שום הכשרה השתלה מוקדמת. השחזור של SHVC לקח פחות מ 2 דקות. השלב anhepatic של החולדות הנמען היה כ- 10 דקות. אין פקקת, דימום או angiostegnosis נצפתה ב 1, 5 ו 30 ימים לאחר פגיעה reperfusion באתר anastomotic SHVC. Cavography vena נחות בוצעה ב 2 שבועות לאחר ההשתלה. כפי שמוצג באיור 6, הטבעות מגנטי היו שלמים, זרימת הדם היה פטנט דרך ההשקה SHVC. שיעור ההישרדות שלאחר ההשתלה היה 9...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
רבים קליני מתקדם השתלת כבד ניתן לייחס מחקרים שנעשו בבעלי חיים. עכברוש OLT הוא מודל נפוץ ומקובל גם במחקר של שימור איברים, השתלת אימונולוגיה, פיזיולוגיה, פתולוגיה. עם זאת, היא גם הליך מורכב מאוד, דורש מיומנות השתלה מתקדמות. למרות שיפורים רבים בהליך של עכברוש OLT, והחיבור SHVC נותרו צעד מאתגר. במאמר זה, אנו מתארים טכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שיקום SHVC חולדה OLT. היישום של טכניקה זו לצמצם את זמן השיקום SHVC פחות מ 2 דקות, שלב anhepatic של החולדה OLT כ 10 דקות. אנו מאמינים שטכניקה זו יש השלכות גדול במחקר להשתלה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים אין לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים משרד של החינוך חדשנות צוות פיתוח תוכנית של סין (מס ' IRT16R57), הלאומית למדע הטבע של סין (מספר 81470896), מחקר קרן עבור צעירים כישרון גיוס תוכניות של שיאן ג'יאוטונג של האוניברסיטה (RW).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מכונת הרדמה | הרווארד | שולחן | הרדמה לבעלי חיים |
| PLX7000B HF נייד דיגיטלי C-arm מערכת | פרלונג PLX7000B רפואי | הוא משמש בעיקר לאנגיוגרפיה וצילום של פעולות שונות | |
| משאבת מזרק | Mindray | BeneFusion SP5 | עירוי תוך ורידי |
| Isoflurane | RWD Life Science Co. | הרדמה: לאינדוקציה ותחזוקה של הרדמה | |
| iohexol | שנחאי General Pharmaceutical Co | חומרי ניגוד תוך-וסקולריים | |
| הזרקת נתרן הפרין | SPH מס' 1 ביוכימי & פרמצבטיקה בע"מ | למנוע היווצרות פקקת | |
| צפורוקסימה | Glaxo Operations UK Limited | אנטיביוטיקה | |
| בופרנורפין | TIPR פרמצבטיקה אחראית ושות', בע"מ | משכך כאבים | |
| מיקרו-מלקחיים מעוקל | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | W40350 | כלי כירורגי |
| מלקחיים המוסטטיים (ישר) | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | J31010 | כלי כירורגי |
| מלקחיים המוסטטיים (מעוקלים) | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | J31020 | כלי כירורגי |
| Satinsky clamp | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, Corp. | כלי כירורגי | XEC050 |
| שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | J32010 | כלי כירורגי | |
| שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | WBA040 | כלי כירורגי | |
| מלקחיים מחורצים | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | J42010 | כלי כירורגי |
| מלקחיים לרקמות (עם וו) | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | J41010 | רקמות כלי כירורגי |
| שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | Y00040 | מספריים כירורגיים כלי כירורגי | |
| שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | Y00030 | כלי כירורגי | |
| מיקרו מספריים | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | MR-S121T | כלי כירורגי |
| מיקרו-כלי קליפס | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | XEC240 | כלי כירורגי |
| מיקרו-מלקחיים ישרים (סגסוגת טיטניום) | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | כלי כירורגי | WCC010 |
| מיקרו-מלקחיים מעוקלים (סגסוגת טיטניום) | שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ. | כלי כירורגי | WCC020 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.