כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר טכיקרדיה-induced קרדיומיופתיה ב החזירים. מודל זה מייצג דרך חזק כדי ללמוד את ספיקת הדם של אי ספיקת לב כרונית מתקדמת ואת ההשפעות של טיפול יישומית.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר טכיקרדיה-induced קרדיומיופתיה ב החזירים. מודל זה מייצג דרך חזק כדי ללמוד את ספיקת הדם של אי ספיקת לב כרונית מתקדמת ואת ההשפעות של טיפול יישומית.
מודל יציבה ואמינה של אי ספיקת לב כרונית נדרש עבור ניסויים רבים כדי להבין את ספיקת הדם או כדי לבדוק את ההשפעות של שיטות טיפול חדשות. כאן, אנו מציגים מודל כזה על ידי שריר הלב-induced טכיקרדיה, אשר יכול להיות מיוצר על ידי הלב מהירה צועד על החזירים.
Pacing חוט transvenously הציג לתוך מלא מרדימים חזיר בריא, אל השיא של החדר הימני, מקובע. את הקצה השני מתבצע מינהור dorsally ואז הבין-חולייתיים באזור. שם, הוא מקושר אל יחידת קוצב הלב ששונה שבאתר הוא מושתל אז בכיס תת עורית.
לאחר 4-8 שבועות צועד חדרית מהירה במחירים של 200-240 פעימות לדקה, בדיקה גופנית גילתה סימנים של אי ספיקת לב חמורה - tachypnea, ספונטני סינוס טכיקרדיה, ועייפות. אקוקרדיוגרפיה ורנטגן הראתה התארכות של כל מחדרי הלב, הנוזלים בריאות, תפקוד קשות סיסטולי. ממצאים אלה תואמים היטב מפוצה קרדיומיופתיה, נשמרות גם לאחר הפסקת צועד.
מודל זה של קרדיומיופתיה טכיקרדיה-induced יכול לשמש לימוד הפתופיזיולוגיה של אי ספיקת לב כרונית מתקדמת, במיוחד והמודינמיקה השינויים שנגרמו על ידי הקדמה חדשה כמו מכני תומך במחזור הדם. מתודולוגיה זו הוא קל לביצוע, התוצאות לשחזור ועמיד.
מגוון רחב של שיטות טיפול חדשות לאי ספיקת לב (HF), ובמיוחד גדל והולך ברחבי העולם השימוש מכני תומך במחזור הדם, בעיות ממברנה חמצון (לאקמו) הקלינית, הוא משקף בבדיקת ניסיונית פרה. המוקד העיקרי כבר על בגרימת שינויים שנגרמו על ידי הקדמה שנבדקו, כלומר על לחץ דם סיסטמי1, contractility שריר הלב, לחץ ושינויים נפח מחדרי הלב ולב עבודה2,3, זרימת הדם בעורקים מערכתית והיקפי העורקים, יחד עם פיצוי מטבולית4 - אזורי רקמה רוויה זלוף ריאתי, בדיקות גזים בדם. מחקרים אחרים מכוונים על השפעות ארוכות טווח של תמיכה במחזור הדם5, והמצוות דלקת או מופע של המוליזה. כל אלה סוגים של המחקר צריך biomodel יציבה של HF מוגדש.
רוב הניסויים שפורסם ב עזב חדרית (LV) ביצועים, ספיקת הדם של תמיכה מכנית במחזור הדם שנעשו על גרסאות ניסיוניות של7,6,2,HF אקוטי8 , 9 , 10, או אפילו על לבבות תקינה לחלוטין. מצד שני, הקלינית, תומך במחזור הדם מכני לעיתים קרובות להיות מיושמים במעמד של הדם ההחרפה שמתפתח בעילה בעבר בהווה מחלות לב כרוניות. במצבים כאלה, מנגנוני הסתגלות מפותחים לחלוטין והוא יכול לשחק תפקידים חשובים בעקביות של תוצאות שנמדדו על פי "חדות או כרוניות" של מחלות לב שבבסיס11. לכן, מודל יציב של HF כרוני יכול להציע תובנות חדשות מנגנונים הקשורים pathophysiological וספיקת הדם. למרות שיש סיבות מדוע השימוש של מודלים HF כרוני נדיר - הכנה זמן רב, חוסר היציבות של קצב הלב, שאלות אתיות, שיעור התמותה - היתרונות ברורים, כפי שהם מציעים נוכחות של הפעלת neurohumoral לטווח ארוך, הסתגלות מערכתית כללית, שינויים פונקציונליים של cardiomyocytes, והשינויים המבניים של הלב שריר ושסתומים12,13.
באופן כללי, הזמינות ואת מגוון הדגמים בעלי חיים המשמש ללימודי והמודינמיקה רחב, ומציע מגוון לצרכים ספציפיים רבים. לניסויים אלה, בעיקר חזירי, כלבים, ovine, או עם הגדרות קטנים יותר מאתר מודלים, מתבצעת שנבחרה והצעת סימולציה טובה של תגובות הגוף האנושי הצפוי14. יתר על כן, צורות של איבר ואיבר הניסויים נעשים תכופים יותר15. לחקות בצורה אמינה הפתופיזיולוגיה של HF, מחזור הדם הוא להיות באופן מלאכותי התדרדרה. פגיעה בלב יכול להיגרם באמצעות שיטות שונות, לעיתים קרובות או איסכמיה, הפרעה בקצב הלב, לחץ יתר, או cardiotoxic להשפעות של סמים, עם כל אלה מוביל להתדרדרות והמודינמיקה של המודל. כדי לייצר מודל אמיתי של HF כרונית, זמן חייב להינתן לפתח הסתגלות לטווח ארוך של האורגניזם כולו. מודל כזה אמין ויציב מיוצג על ידי קרדיומיופתיה הנוצרות על-ידי טכיקרדיה (טיק), אשר יכול להיות מיוצר על ידי הלב מהירה צועד בחיות ניסוי.
הוכח כי בלבבות במיטה, tachyarrhythmias הבלתי פוסקת לטווח ארוך יכול להוביל לבעיות סיסטולי, התרחבות עם תפוקת הלב ירד. התנאי המכונה טיק היה הראשון תיאר בשנת 191316, בשימוש נרחב ניסויים מאז 196217, והוא עכשיו הפרעה מוכרת היטב. מקורו יכול לשקר בסוגים שונים של הפרעות בקצב הלב - עשר והן טכיקרדיה חדרית יכולה להוביל הידרדרות הדרגתית של הפונקציה סיסטולית, התארכות biventricular מתקדמת סימנים קליניים של HF כולל מיימת, בצקות, עייפות , ועל ההחרפה הלב ובסופו של דבר שמוביל HF מסוף, ואם אינו מטופל, מוות.
תופעות דומות של דיכוי הדם נצפו על ידי החדרת בקצב גבוה לב צועד במודלים של בעלי חיים. במודל חזירי, קצב הלב פרפור או חדרית מעל 200 פעימות לדקה הוא חזק מספיק כדי לגרום בשלב הסופי HF בתקופה של 3-5 שבועות (שלב מתקדם) עם מאפיינים של טיק, על פי הבדלים interindividual קיימים18, 19. ממצאים אלה תואמים היטב מפוצה שריר הלב, ועל חשוב, נשמר גם לאחר הפסקת צועד (שלב כרונית)19,20,21,22, 23.
מודלים טיק חזירי, כלבים או ovine הוכנו שוב ושוב ללמוד הפתופיזיולוגיה של HF14, כמו שינויים בעירוי לחקות את המאפיינים של קרדיומיופתיה24. המאפיינים והמודינמיקה מתוארים היטב - מוגבר לחצים דיאסטולי חדרית, הלב ירד פלט, גברה ההתנגדות כלי דם מערכתית, התרחבות של שני החדרים. לעומת זאת, קיר היפרטרופיה לא נצפית בעקביות, קיר אפילו דליל תוארה על ידי כמה חוקרים25,26. עם התקדמות של מידות חדרית, regurgitation על שסתומי atrioventricular מפתחת26.
בפרסום זה, אנו מציגים פרוטוקול להפקת טיקים על-ידי צועד מהר הלב לטווח ארוך בחזיר. Biomodel הזה מייצג עוצמה פירושו ללמוד מפוצה קרדיומיופתיה מורחבת, ספיקת הדם של HF כרונית מתקדמת עם תפוקת הלב נמוך, ואת ההשפעות של טיפול יישומית.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול נסיוני זה נבדקה שאושרו על-ידי ועדת מומחים בעלי חיים מוסדיים הראשון בפקולטה לרפואה, אוניברסיטת צ'ארלס, ואת בוצע במעבדה באוניברסיטה ניסיוני, במחלקה לפיזיולוגיה, הפקולטה הראשונה ברפואה, אוניברסיטת קארל ב פראג, צ'כיה, לפי חוק מס 246/1992 מתקפלת, בנושא ההגנה על בעלי חיים נגד אכזריות. כל בעלי החיים היו מטופלים דאגו לפי המדריך על הטיפול, השימוש של חיות מעבדה, המהדורה השמינית, שפורסם על ידי העיתונות הלאומי באקדמיות, 2011. כל ההליכים בוצעו על פי מוסכמות וטרינרי סטנדרטי, בסיום כל מחקר, החיה הוקרב וביצע necropsy. עקב אנטומיה מתאימים, חמש בריא crossbred הנשי חזיר (Sus scrofa דומסטיקה) עד גיל 6 חודשים נכללו בניסוי זה. ממשקל גופם מרושע היה ± 66 ק ג 20 היום של איסוף נתונים.
1. כללי הרדמה
2. חדרית השרשה עופרת
3. תת עורית מינהור עופרת
4. קוצב הלב השרשה
5. לאחר הניתוח טיפול
6. צועד פרוטוקול
7. אי ספיקת לב אינדוקציה וניטור

איור 1: לב צועד מפרטים טכניים של יחידת. כפולה תאיים קוצב הלב (1), מתאם "Y" בצורת (2) ביצוע convergently פלטי קוצב לב שניהם יחד כדי להתהלך יחיד מובילים (3). קצהו של קצה החוט הוא מקובע לתוך החלק הפסגה של חלל RV (4). הגדרה זו מספקת מגוון רחב של תדרים גבוהים צועד. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

איור 2 : לב צועד ההוראה רנטגן (A), צילום (B) של קוצב הלב כפולה תאיים (1), "Y" בצורת מתאם (2), ולהוביל צועד חדרית (3). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
| HR הרצוי | קוצב לב קבוע קצב | קצב לצעוד מרווח |
| פעימות לדקה | פעימות לדקה | ms |
| 200 | 100 | 300 |
| 220 | 110 | 270 |
| 240 | 120 | 250 |
| 250 | 125 | 240 |
טבלה 1: פרמטרים קוצב לב. כדי לאפשר בקצב גבוה לב צועד עם יחידת מושתל קוצב כפולה תאיים in-הבית-לאחרונה, הטבלה מציגה את קצב הלב בקצב הרצוי (HR) וקצב תואמות לצעוד ערכי מרווח. קוצב הלב חייב להיות מוגדר D00 מצב פעולה בקצב של חצי משאבי אנוש הרצוי, העיכוב AV לקבוע את הקצב המתאים לעמוד בקצב מרווח זמן באלפיות השניה.

איור 3 : צועד פרוטוקול. שלב מתקדם של אינדוקציה טיק מתחיל לאחר תקופת מנוחה של 3 ימים. לאחר מכן, קוצב הלב מוגדר למצב D00 עם תדירות pacing של 50% בתדירות בקצב הרצוי ולאחר עיכוב AV מוגדר הקצב תואמות לצעוד מרווח (ראה טבלה 1). בזכות מתאם "Y" בצורת, שתי יציאות קוצב לב מתנהלים להפניה pacing יחיד. bpm = פעימות לדקה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בדיקות הדגם: אחרי סימני מפוצה HF כרונית הפך בולט, הרדמה ואוורור מלאכותיים נוהלו שוב את העקרונות המתוארים לעיל, אבל המינון היה מותאם בשל דום לב נמוך פלט27. בשל תופעות cardiodepressive אפשרי של חומרי הרדמה, פיקוח אינטנסיבי קפדני על תפקידים חיוניים הכרחי.
החיה הוצמד במצב פרקדן, פולשנית כל הגישות התחילה. וריד הירך ואת עורק ווריד הצוואר היו גישות מנוקבת קרישה תוך-כלית מובטחת באמצעות תקן intral...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
HF כרונית היא בעיה בריאותית העיקריים התורם באופן משמעותי את התחלואה והתמותה. פתוגנזה והתקדמות של HF בבני אדם היא מורכבת, כך במודל חיה המתאים הוא קריטי כדי לחקור את המנגנונים המשמשת כבסיס, כדי לבדוק את הריפוי שמטרתן להפריע התקדמות המחלה חמורה מקורית. ללמוד פתוגנזה שלה, מודלים בעלי חיים גדולים נמצאים בשימוש בדיקה ניסויית.
באופן כללי, ניתוח מודלים של HF כרונית מקרוב לחקות את המחלה הזו. כאשר לעומת מודלים של HF חריפה, מודלים HF כרונית מציעים יותר תובנות לתוך הפתופיזיולוגיה, אך במחיר של הכנה ניסיוני...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים אין לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקי מחקר של אוניברסיטת קארל GA בבריטניה מס 538216 GA בבריטניה מס 1114213.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| <חזק>תרופות | |||
| מידאזולם | רוש | דורמיקום | חומר הרדמה |
| קטמין הידרוכלוריד | ריכטר גדעון | קליפסול | חומר הרדמה |
| פרופופול | ב.בראון | פרופופול | הרדמה |
| צפזולין | Medochemie | Azepo | אנטיביוטיקה |
| כסף תרסיס אלומיניום | הנרי שיין 9003273 | תמיסת | |
| פובידון יוד | Egis Praha | Betadine | חיטוי |
| מורפין | ביוטיקה בוהמיה | מורפין 1% inj | אנלגטי |
| <חזק>כלים | |||
| Metzenbaum מספריים, lancet עם להב #22, מלקחיים DeBakey, נהג מחט | ציוד | כירורגי בסיסי | |
| צריבה | |||
| 2-0 Vicryl | Ethicon | V323H | תפר קלוע נספג |
| 2-0 תפר משי פרמה יד | Ethicon | A185H | תפר עניבת משי |
| 2-0 Prolene | Ethicon | 8433H | תפר לא נספג |
| <חזק>התקני אבחון | |||
| ESP C-arm | GE Healthcare | ESP | רנטגן פלואורו C-arm |
| Acuson x300 | Siemens מערכת | אולטרסאונד | |
| Acuson P5-1 | סימנס | בדיקה אקו לב | |
| Acuson VF10-5 | Siemens Healthcare | בדיקה סונוגרפית לכלי דם | |
| 3PSB, 4PSB ו-6PSB | מערכות | בדיקות | |
| זרימה פרי-וסקולריותTS420 | Transonic Systems | מודול זרימה פריוסקולרית | |
| TruWave | Edwards Lifesciences | T001660A | מתמר לחץ מלא בנוזל |
| 7.0F VSL צמה | מערכות טרנסוניות | צנתר חיישן לחץ | |
| INVOS 5100C אוקסימטר מוחי/סומטי | סומנטיקה/מדטרוניק | ספקטרוסקופיה אינפרא אדום קרוב | |
| CCO צנתר משולב | אדוארדס Lifesciences | 744F75 | קטטר עורק ריאה ברבור-גאנז |
| Vigillace II | Edwards Lifesciences | VIG2E | מוניטור תפוקת לב |
| 7.0F VSL צמה | מערכות טרנסוניק | צמה צנתר לחץ-נפח | |
| ADV500 | טרנסוניות | מערכת לחץ-נפח | |
| LabChart ו-PowerLab | ADinstruments | מערכת איסוף וניתוח נתונים | |
| Prism 6 | GraphPad | ניתוח סטטיסטי תוכנה | |
| <התקני קוצב>חזקים | |||
| ICS 3000 | מתכנת קוצב לב | 349528 ביוטרוני | |
| ERA 3000 | קוצב לב חיצוני | 128828 | ביוטרוניק |
| Effecta DR | קוצב לב דו-תאי | 371199 | ביוטרוניק |
| קנוקנת STS | St. Jude Medical | 2088TC/58 | קוצב חדרים עופרת |
| מתאם קבוע עופרת | Osypka | מאמר 53422 | מתכנס "Y" חלק מחבר |
| מתאם קבוע עופרת | Osypka | מאמר 53904 | חלק מחבר "Y" מתכנס |
| 7F | B.Braun | 5210593 | לקרוע את נדן המציג |
| מנהרת צנתור | מפוצל medComp | AST-L | |
| קו עירוי | MPH מכשור רפואי | 2200045 | חיבור |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.