הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

אפיון והמודינמיקה פולשנית של התסמונת פורטל-יתר לחץ דם אצל חולדות זה קשה וחיוור.

14.7K צפיות

DOI:

10.3791/57261

1 באוגוסט 2018

במאמר זה

סיכום

כאן נתאר פרוטוקול מפורט למדידות פולשנית של פרמטרים והמודינמיקה כולל הפורטל לחץ, זרימת הדם splanchnic ספיקת הדם מערכתית על מנת לאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם אצל חולדות.

תקציר

זהו פרוטוקול מפורט המתאר פולשנית מדידות והמודינמיקה בחולדות חולה איידס על האפיון של תסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם. פורטל יתר לחץ דם (PHT) עקב שחמת הכבד אחראי על סיבוכים חמורים ביותר בחולים עם מחלת כבד. תמונה מלאה של התסמונת עם יתר לחץ דם הפורטל מאופיין על ידי לחץ מוגבר פורטל (PP) עקב מוגברת התנגדות כלי הדם intrahepatic (IHVR), hyperdynamic זרימת הדם, זרימת דם מוגברת splanchnic. מתקדמת splanchnic vasodilation עורקי, תפוקת הלב מוגבר עם קצב לב גבוה (HR) אבל לחץ הדם בעורק נמוך מאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם.

טיפולים כיום מפותחים הזה במטרה להקטין PP מאת גם IHVR מיקוד או מוגברת זרימת הדם splanchnic — אבל תופעות לוואי על ספיקת הדם מערכתית עלולה להתרחש. לפיכך, אפיון מפורט של פורטל ורידים, splanchnic ופרמטרים והמודינמיקה מערכתית, כולל מדידה של PP זרימת דם ורידי פורטל (PVBF), זרימת דם עורקית מצע המעי העליון, כלומר לחץ הדם בעורק (מפה), HR יש צורך פרה הערכת יעילותם של טיפולים חדשניים עבור PHT. המאמר הסרטונים שלנו מספק את הקורא עם פרוטוקול מובנה לביצוע מדידות והמודינמיקה פולשנית בחולדות חולה איידס. בפרט, נתאר את צנתור עורק הירך, וריד שער הכבד דרך הווריד ileocolic ואת המידה של פורטל ורידים, splanchnic הדם לזרום דרך perivascular אולטרסאונד דופלר זרימה הגששים. התוצאות נציג של עכברוש שונים דגמי PHT יוצגו.

מבוא

PHT מוגדר כמו לחץ דם מוגברת פתולוגית וריד שיכולים לגרום סיבוכים חמורים בחולים עם שחמת כגון דימום variceal, מיימת1. בעוד ולשננו מראש (למשל, פקקת וריד שער), שלאחר ולשננו (למשל, תסמונת באד-קיארי) PHT נדירים, PHT intrahepatic עקב שחמת הכבד מייצג הגורם הנפוץ ביותר של PHT2.

בשחמת הכבד, PP הוא גדל בעיקר כתוצאה IHVR גבוהות3. בשלבים מתקדמים, PHT מועצמת על ידי PVBF מוגברת עקב תפוקת הלב מוגבר וירידה מערכתית ו splanchnic התנגדות כלי הדם – הגדרת תסמונת הפורטל לחץ דם גבוהה4. חוק אוהם (ΔP = Q * R) מרמז על כי IHVR וזרימת הדם אינם פרופורציונליים לעמ'5. בחולים, מדידה ישירה של PP הוא מסוכן, לא שגרתי שבוצעו; במקום זאת, מעבר הצבע לחץ ורידי הכבד (HVPG) משמש מדד עקיף של6,עמ'7. HVPG מחושבת על-ידי חיסור חינם הכבד ורידים הלחץ (FHVP) wedged הכבד ורידים הלחץ (WHVP), אשר נמדדים באמצעות צנתר בלון ממוקמת ב וריד הכבד8. HVPG פיזיולוגית נע בין 1-5 מ מ כספית, בזמן HVPG ≥ 10 מ מ כספית מגדיר משמעותיים קלינית הפורטל לחץ דם (CSPH), מצביעה על סיכון מוגבר לסיבוכים הקשורים PHT, כגון דימום variceal, מיימת, אנצפלופתיה כבדית9 . למרות PP (קרי, HVPG) הוא הפרמטר הרלוונטי ביותר עבור חומרת PHT, מידע על רכיבים אחרים של PHT, כולל חומרת hyperdynamic מחזור (HR, מפה), זרימת דם עורקית מצע המעי splanchnic העליון /, IHVR, הם קריטיים להשיג הבנה מקיפה של המנגנון הבסיסי ברורים של PHT.

לפיכך, בניגוד מדידות עקיפות של PP בבני אדם, המתודולוגיה הציג על חולדות מציעה את היתרון של מדידה ישירה של PP ו מאפשרת ההקלטה של פרמטרים נוספים והמודינמיקה אפיון התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם. בנוסף, מדידה ישירה של PP readout אינטגרטיבית מעולה הסכום של פיברוזיס בכבד (דטרמיננטה העיקריים של IHVR), מתגבר על מגבלות מסוימות של כימות פיברוזיס הקשורים טעויות דגימה של רקמת הכבד.

הדגמים מכרסמים הנפוצות ביותר של חולה איידס PHT כוללים מצדו צינור המרה כירורגי (BDL) הנוצרות על-ידי רעלן הכבד פגיעה (כלומר, על ידי פחמן tetrachloride, thioacetamide או אינטרוסמין המינהל), תזונה-induced כבד מטבולית מודלים המחלה. Prehepatic PHT (הלא-חולה איידס) יכולה להיגרם על ידי חלקי וריד שער הכבד מצדו (PPVL)10.

מכרסמים קטנים מתאימים היטב שיטת שהוצגו, לרבות עכברים, אוגרים, חולדות או ארנבים, והן משויכות עלויות תחזוקה נמוכה יחסית. למרות זאת כל ההערכות והמודינמיקה ניתנים לביצוע לביצוע עכברים, יותר דיוק, הפארמצבטית של תוצאות נראים עם חולדות או מכרסמים גדולים בשל היתרון הברור של גודל בעלי חיים. בנוסף, מיקרו-הנגינה המסוימים והתקנים נחוצים כדי לקבל פרמטרים והמודינמיקה דומה בעכברים. לבסוף הם עמידים יותר עם תחתון משויכות התחלואה והתמותה, לפיכך, שיעור הנשירה צפויים נמוך אצל חולדות מאשר בעכברים.

המתודולוגיה הציג הוא מתאים היטב עבור הערכת טיפולים ספציפיים של מחלת כבד (קרי, תרופות אנטי דלקתיות או anti-fibrotic) או רומן תרופתי מתקרב את הטון וסקולרית השפעה ו/או אנדותל ביולוגיה; ופרמטרים. לפיכך, סביר אפקט והמודינמיקה PHT.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת וינה רפואי, אוסטרי משרד המדע, המחקר, הכלכלה (BMWFW). נהלים בטח שבוצעו בתנאים aseptic בחדר הניתוח או דומים לנקות אזור עבודה מאז המדידות והמודינמיקה מייצגים התערבויות כירורגיות. באופן כללי, עובד בתנאים סטריליים מומלץ. בעת שימוש של הרדמה אינהלציה, שקול אוורור נאותים של חדר ניתוח על בטיחות בעבודה. תקופת זמן של 40-50 דקות/חיה חייב להילקח בחשבון במקרה כל המפרט והמודינמיקה הוצג פרוטוקול זה.

1. בפגישת ההכנות

  1. הפעל ולאחר לכייל את ההקלטה רב-ערוצי אלקטרונית כולל את מתמרים לחץ על-פי הוראות היצרן.
  2. לחבר את הגששים זרימה קולי (1 מ מ ו- 2 מ מ) המגבר גשר.
  3. להכין מאגר של פתרון סטרילי תמיסת מלח פיזיולוגית, מחוממים לטמפרטורת הגוף, 37 ° C, עבור הרטבה רקמות או גזה קומפרסים.
  4. להקליט את משקל הגוף החי כדי לספק הרדמה מותאמים משקל ונורמליזציה של פרמטרים והמודינמיקה לפי משקל הגוף.
  5. להכין את כל ציוד הרדמה אינהלציה.
    הערה: אם שאיפת הרדמה ו/או הציוד הנדרש הוא לא באתר או ריאלי, ואז הזרקת ההרדמה קטמין באמצעות חריגות השירותים הווטרינריים ניתן להשתמש (80 – 100 מ"ג/ק"ג קטמין עם 5-10 מ"ג/ק"ג חריגות השירותים הווטרינריים בפתרון תמיסת מלח פיזיולוגית, בקרום הבטן (i.p.)). מחדש מינון של קטמין (הפחתת מינון של 20-30 מ"ג/ק"ג, תוך שרירית (i.m.)) אחרי 30-45 דקות יש צורך לגרום הרדמה כירורגי-plane רציפה.
  6. את החיה תחת הרדמה איזופלוריין לטווח קצר באמצעות תיבת אינדוקציה של שאיפת הרדמה (5 דקות, 5% v/v איזופלוריין, 3-4 L O2-זרימה). בזהירות להטות את התיבה, בדוק את עומק ההרדמה על-ידי המצב פקקת של החיה.
  7. לצנרר את העכברוש עם צינור מתאים אנדוטרכאליות מתוצרת עצמית.
    הערה: עבור אנשי חדש הטכניקה צנרור, שיכוך כאבים/ההרדמה (שלב 1.10) יכולה להינתן מיד אחרי הרדמה שאיפת לטווח קצר כדי לאפשר זמן נוסף לצנרור. אפשרות נוספת היא facemask חיה ספציפית עבור שאיפה הרדמה.
    1. השתמש צינור אנדוטרכאליות מתוצרת עצמית של קטטר ורידי היקפיים ששונתה (14 גרם). לחתוך את הכנפיים טיפול, ולהצמיד ללולאה סרט דביק על קיבוע אחורי ללחי של החולדה כדי למנוע פריקה של הצינור אנדוטרכאליות (איור 1 א').
    2. להשתמש בהתקן תיל מתוצרת עצמית מדריך מ בצינורית עורקי ששונה וגם בעל חוט מדריך מתאים שקצהו בלאנט חוט (איור 1B).
    3. השתמש שולחן צנרור מתאימים עבור מיקום מתאים של החיה. מקם את החיה במצב פרקדן עם הראש במצב בזווית.
      הערה: אם אין דלפק צנרור זמין, זה אפשר להניח את החיה במצב פרקדן עם הצוואר בקפידה הנמתחת מעל הקצה של הטבלה. עם זאת, הליך זה אינו מומלץ עקב סיכון מוגבר של פציעות.
    4. לתקן את התפר מאחורי החותכות בצד אחד של העכברוש, למתוח בעדינות את צווארו של בעל החיים על ידי קשירת את התפר בצד השני (איור 1C).
    5. להאיר אזור הצווארון הגחון והכו אותי מראש ע י קרן אור ממוקדת. בעיקר בבעלי חיים לבקנים, ודא כי מיתרי מוארים דרך העור כדי לאפשר הדמיה משופר ו צנרור מהירה.
      הערה: השתמש laryngoscope של בעל חיים ספציפי לצנרור בעלי פיגמנט.
    6. . תפוס את הלשון, משוך אותו בעדינות באמצעות שתי אצבעות.
    7. השתמש במקלון צמר גפן מטופלים על ידי לידוקאין (משאבה ריסוס) כדי בקפידה עזים ומתנגד האזור בגרון.
    8. לצנרר את החיה על-ידי הוספת הצינור אנדוטרכאליות בין את שפתות הקול לתוך קנה הנשימה, באמצעות התמיכה של המכשיר תיל מדריך (איור 1D).
    9. הסר את ההתקן תיל מדריך.
    10. לחבר את הצינור ההנשמה.
    11. להתחיל ההנשמה באמצעות ההגדרות המתאימות עבור החיה (1 ליטר/דקה O2-זרימה, זרימה אוטומטי = 90/min; לחץ inspiratory: 18 מ מ כספית; הצצה: 3 מ מ כספית, אני / E = 1:2) וחפש צנרור נכונה.
      הערה: אם האינפלציה של הקיבה הוא ציין, להסיר את הצינור ונסה שוב. בנוסף, להשוות את פעילות מערכת הנשימה לקצב ההנשמה, או שתי אצבעות על קיר הבטן נכון על הבטן כדי להעריך את פוטנציאל האינפלציה של הקיבה.
  8. תתחיל איזופלוריין הרדמה בבית 0.5-1.0% v/v ו- 1 ליטר/דקה O2-זרימה מיד לאחר מוצלחת צנרור (איור 2 א).
  9. לתקן את הצינור אנדוטרכאליות מאת בתפר transbuccal דרך הלחי לבין הלולאה מוצמדת דבק של הצינור.
  10. לנהל נגד כאבים על ידי שני מזרקים 1 מ"ל, למשל, קטמין (100 מ ג/ק ג) i.p. (23 גרם בצינורית) [או i.m. על ידי הפצת האחסון מוזרק (מנה) הדו-צדדי זריקות לשריר הירך סימטרית (30 גרם בצינורית)] והרדמה נוספים, piritramide (2 מ"ג/ק"ג) על ידי הזרקה תת-עוריים (ש) (23 גרם בצינורית). הערה הנפח המרבי של זריקות i.m. בכל אתר ההחדרה (איור 2B).
  11. להחיל משחה העין. קליפ של שיער הגוף-אזור הבטן והירכיים הפנימיות הן. לחטא את העור.
    הערה: ינשל הפנימי צריך גלחו לאפשר השימוש עורק הירך contralateral למדידות HR והמפה במקרה צנתור של עורק הירך נכשל בצד אחד. גילוח בנקודת זמן מאוחרת יותר עלול לגרום לשיער לזהם את השדה הכירורגי.
  12. לתקן את החיה במצב פרקדן על כרית החימום (38 ° C) עם דבק (איור 2C).
  13. לפקח על טמפרטורת הגוף של בעל החיים ללא הרף, למשל, באמצעות בדיקה טמפרטורה רקטלית (איור דו-ממדי).
  14. להעריך את עומק הרדמה על ידי סגירת המכסה רפלקס ואת הבוהן-קורט-בדיקה לפני כל התערבות או ניתוח.

2. מדידה של HR ו מפה

  1. פצעים וחתכים העור על הירך הפנימית (צד אחד בחר) מעל המיקום המשוער של עורק הירך ע י הרמת העור על ידי רקמת מלקחיים, הסרת אזור עור של כ 2 ס מ. אורך מאת מאיו מספריים (איור 3 א).
  2. לחשוף ומנתחים בלשון בוטה המתחם העורק-וריד-העצבים הכוללת את עורק הירך של רקמת חיבור (adventitia) על-ידי פתיחת שוב ושוב עוצר דימום לאורך המתחם.
  3. לנתח המתחם העורק-וריד-עצב מן הרקמה שמסביב לאורך ~1–1.5 ס מ (איור 3B).
  4. במידת הצורך, להסיר שומן תת עורי/perivascular לראות טוב יותר, לנתיחה.
    הערה: להיזהר בעת הסרת שומן תת עורי/perivascular על ידי מספריים לציפורן, מאז כלי הדם הפגוע עלול לגרום לפרקים. אם הדימום הוא ציין, להפעיל לחץ על האזור המדמם בעזרת גזה קטנים או לעצור את הדימום על ידי עוצר דימום.
  5. להפריד בין עורק הירך ווריד הירך, עצב עם שני ברמת דיוק גבוהה 45° זווית רחבה נקודת מלקחיים (שקול וריד הירך היא המבנה ביותר המדיאלי, עורק הירך הינו ממוקם יותר לרוחב) (איור 3C-F).
  6. מקום חבל על עורק הירך כמו דיסטלי ככל האפשר והשתמש מלחציים מעוקל התפר כדי להחיל המתיחה האורך עדין על עורק הירך.
  7. מקום suture אניע מראש (אך הקשר לא סגורה) השני על עורק הירך כמו צינתור כמו האפשר (איור 3G).
  8. להכין צנתר מתאימים (PE-50 עבור עורק הירך עכברוש) עם טיפ ניתוק משופע (~ 45°) סמוקות עם תמיסת מלח פיזיולוגית סטרילית heparinized פתרון (5 מ"ל מזרק, 23 גרם בוטה בצינורית). ודא אין בועות אוויר בתוך הקטטר כמו שהם קוליטיסה את לחץ הדם ואת readout HR (איור 3 H).
  9. לדחוס עורק הירך בסוף הפרוקסימלית של המקטע חשוף באמצעות מלחציים מיקרו כדי לעצור באופן זמני את זרימת הדם בעורקים (איור 3עכשיו).
  10. לנקב הקיר עורקי במיקום דיסטלי של המקטע גזור על-ידי שימוש של בצינורית כפופות (23 גרם) תוך מתן תמיכה מרית מתכת מיקרו מתחת עורק הירך (איור 3J).
  11. בזהירות catheterize עורק הירך דרך הנקב. עם קצה משופע של הקטטר כלפי מעלה. מראש הקטטר עד המלחציים מיקרו לקרב את ערכיהן (איור 3 K).
    הערה: במקרה של צנתור לא מוצלח של עורק הירך בניסיון הראשון, ניסיון נוסף מקורב יותר ניתן לבצע (מתחילים בשלב 2.8). אם העורק יתבקע או דימום חמור מתרחש, מאתרים ומפסיקים או מהדק את העורק הכי קרובים ככל האפשר למנוע איבוד דם. אם איבוד דם הוא מזערי, ניסיון catheterizing עורק הירך contralateral (מתחילים בשלב 2.1).
  12. פתח את המלחציים מיקרו ואבדוק את זרימת הדם בעורקים פועמת לתוך הצנתר (איור 3 L).
  13. למנוע זרימה של דם לתוך הצנתר על ידי חסימת זרימה יוצאת של הקטטר.
  14. לתקן את הצנתר במיקומה intraluminal על-ידי סגירת את הקשירה proximal מוכן סביב הירך הקטטר הציג (איור 3 מ').
  15. שוב ושוב לשטוף, וארוקן את הצנתר בעורק הירך כדי להעריך השמה נכונה קרישה תוך-כלית. עורקי pulsation בעמודה של דם aspirated צריך להיות מורגש בקלות.
  16. לתקן את מיקום הצנתר לאורך הספינה באמצעות קצות הקשירה דיסטלי כדי למנוע נקע ולהבטיח עמדה האורך של הקטטר (איור 3N).
  17. בנוסף, קלטת את הצנתר קרוב החיה על השולחן כירורגי כדי לאבטח וכדי למנוע פריקה בשוגג.
  18. לחבר את הצנתר מלא עם תמיסת מלח פיזיולוגית לפתרון מתמר לחץ תוך הימנעות היווצרות בועות אוויר.
  19. . תתחיל להקליט את HR ומפת באמצעות ממשק דיגיטלי (איור 3O)
  20. לכסות את האזור חשוף על הירך הפנימית עם קומפרס גזה בטעימת קטן (איור 3 P).
  21. חישוב מדד hyperdynamic (HD): HD = מפה לשעה.
    הערה: ב- PHT מתקדם, מדד HD הוא גבוה לעומת יתר לחץ דם שאינו של פורטל חיות. אולם, עלייה במדד HD במהלך הניתוח עשוי גם להצביע על דימום, hypovolemia או כאב. אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד אבל האות הוא טוב, זרימה פועמת ומתגלה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל הרדמה לא מספקת עומק על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.

3. זרימת הדם מעולה עורק מצע המעי העליון (SMABF)

  1. לבצע פתיחה של הבטן החציוני (איור 4A-C)
    1. הרם את שכבת העור עם מלקחיים רקמות 5-6 ס מ מתחת מצאתי ולהסיר רצועה דקה של העור באמצעות מאז'ו. מספריים מעל linea alba עד מצאתי מתמלאת.
    2. באמצע החתך בעור, הרם את שכבת השרירים על ידי רקמת מלקחיים לאורך לינאה אלבה כדי ליצור את המרחק בין דופן הבטן splanchnic איברים.
    3. פתיחת חלל הצפק על ידי אם לקיר הבטן עם אזמל-linea alba. הרחבת הפתח כשאתם מרימים את דופן הבטן על ידי רקמת מלקחיים עם מספריים Metzenbaum לאורך לינאה אלבה מעל המרחק אותו כמו שכבת העור.
  2. בזהירות חפירת המעי באמצעות צמר גפן רטוב על-ידי הפעלת coecum ומניחים אותו על קומפרס גזה גדולה ספוג בתמיסה תמיסת מלח פיזיולוגית סטרילית ליד החתך (איור 4D-F).
  3. לעטוף את המעי לתוך הקומפרס גזה וודא כי זה הוא לחלח עם תמיסת מלח פיזיולוגית סטרילית פתרון (איור 4G).
  4. לאתר ולחשוף את עורק מצע המעי העליון מעולה.
  5. לנתח את עורק מצע המעי העליון סופריור עם שני מתוצרת עצמית בוטה 'Schwabl'-הוקס: הרם את העורק עם הקרס הראשונה ולנסות למקם את השני דרך המנהרה רקמות באותו. לחשוף את עורק מצע המעי העליון מעולה לאורך מרחק 5 מ מ כדי להבטיח שהחללית זרימה (1 מ מ) ניתן להניח סביבו (איור 4 H-K).
    הערה: אם מועדף, מלקחיים נקודה רחב זווית דיוק 45° ניתן להרים את העורק גם כן. 'Schwabl'-ווים מוכן מ 30 G קנולות עם טיפים בגילוי לב שבור מכופף לצורת וו. אם משני העורקים הן מקיפות 'Schwabl'-ווים עשוי להיות בטוח יותר כמו לפרקים מ בהתקפה בעוד לנתח את עורק מצע המעי העליון סופריור ניתן להימנע. אם הדימום מתרחש תוך כדי הכנת עורק מצע המעי העליון מעולה, במקום לדחוס גזה קטנים על האתר דימום במשך 1-2 דקות עם לחץ עדין. דימום קטן יפסק בדרך כלל במהירות; עליך תמיד לזכור כדי הרטבה רקמות מעת לעת (שלב 1.12). אם עורק מצע המעי העליון מעולה עצמו ייפגע, ההערכות והמודינמיקה חייב להפסק.
  6. חלות אולטרסאונד ג'ל החיישן של החללית זרימה קולי ולחבר אותו עורק מצע המעי העליון splanchnic. . ליישר אותה לתוואי הטבעי של עורק מצע המעי העליון סופריור (איור 4י-ם)
  7. לסגור את המכשיר זרימה (1 מ מ) ולהחיל במידת הצורך בעדינות ג'ל אולטרסאונד נוסף על חיישן דופלר כדי לשפר את איכות האות. לעשות זאת באמצעות מזרק (20 מ ל) מלא ג'ל אולטרסאונד של בצינורית שקצהו בלאנט (18 גרם) (איור 4N-O).
    הערה: אם המכשיר זרימה לא מיושרים כראוי לאורך הנתיב הרגיל של כלי השיט, המתח עלול לגרום כיווץ כלי הדם, וכך מערבולות זרימה, אשר מפחית את הדיוק של המדידות זרימה. נסה ליישר מחדש את הכיוון של המכשיר זרימה לאורך המסלול הטבעי של כלי השיט ואז מספיק לתקן את החללית זרימה במצב המתאים.
  8. למדוד את SMABF ולהעריך את בהתאמה של האות זרימה פועמת ועד לפסגות סיסטולי של ההקלטה בעורק הירך.
    הערה: אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד, אך האות היא טובה פועמת זרימה מזוהה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל לא מספיק עומק ההרדמה על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.
  9. בעמדה יציבה של המכשיר זרימה (1 מ מ) ולפתור את הכבל של המכשיר זרימה. . תתחיל להקליט את SMABF בלי עוד יותר מניפולציה של המכשיר זרימה (1 מ) (איור 4 P)

4. PVBF

  1. לאתר ולחשוף את וריד שער הכבד את פני הגבי מצע המעי קרוב hilum הכבד (איור 5A).
  2. בעדינות לנתח את וריד שער הכבד מן הרקמה שמסביב באמצעות מלקחיים נקודה רחב זווית ברמת דיוק גבוהה 45°: לבודד את וריד שער הכבד על ידי בעדינות, שוב ושוב דחיפת המלקחיים תחת וריד שער הכבד כדי ליצור מנהרה רקמות (איור 5B).
    הערה: אם הדם מתרחשת מתוך הרקמה periportal בעת הכנת וריד שער הכבד, להפעיל לחץ עדין באתר דימום למשך 1-2 דקות שימוש במקלון צמר גפן; זה לעתים קרובות עוצר את הדימום.
  3. להגדיל את המנהרה על-ידי פתיחת ברמת דיוק גבוהה 45° זווית רחבה נקודת המלקחיים לאט ולחשוף את וריד שער הכבד לאורך מרחק של 5-6 מ מ, כדי לאפשר את המיקום של המכשיר זרימת perivascular (2 מ מ) (איור 5C, יח).
  4. חלות אולטרסאונד ג'ל החיישן של החללית זרימה קולי ולחבר אותו וריד שער הכבד מיושר עם תוואי טבעי (איור 5E).
  5. לסגור את המכשיר זרימה (2 מ מ) ולהחיל ג'ל אולטרסאונד נוסף אם יש צורך, כפי שתואר לעיל (שלב 3.7) (איור 5F).
  6. ודא כי המכשיר זרימה מושם באופן שאינו שמושגיו סביב וריד שער הכבד (איור 5G).
    הערה: אם המכשיר זרימה לא מיושרים כראוי לאורך הנתיב הרגיל של כלי השיט, המתח עלול לגרום כיווץ כלי הדם, וכך מערבולות זרימה, אשר מפחית את הדיוק של המדידות זרימה. נסה ליישר מחדש את הכיוון של המכשיר זרימה לאורך המסלול הטבעי של כלי השיט ואז מספיק לתקן את החללית זרימה במצב המתאים.
  7. בעמדה יציבה של המכשיר זרימה (2 מ מ) ולפתור את הכבל של המכשיר זרימה. לאחר מכן, התחל הקלטה של PVBF (איור 5 H).
    הערה: אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד, אך האות היא טובה פועמת זרימה מזוהה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל לא מספיק עומק ההרדמה על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.

5. PP

  1. להכין צנתר (PE-50 על הורידים מצע המעי העליון עכברוש) עם וחציים (כ- 45°) עצה ניתוק זה התרוקן עם פתרון סטרילי תמיסת מלח פיזיולוגית (מזרק 5 מ ל ו בוטה בצינורית 23 גרם). שימו לב כי אין בועות אוויר הם בתוך הקטטר כפי שהם להכשיל את המדידה PP (איור 6A).
  2. להתמודד עם המעי עם כפפות רטובים ומקום שזה מפוזרים על פני האצבעות (איור 6B).
  3. למטב את התצוגה של המיטה וסקולרית מצע המעי העליון קרוב המעי הדק (איור 6C).
  4. זיהוי של כלי הראשי מצע המעי העליון ורידים מוביל וריד שער הכבד (vena ileocolica - vena mesenterica סופריור - vena portae).
  5. למצוא צומת מתאים של הווריד ileocolonic הנגיש עבור צנתור.
  6. תחילה לתקוע את הצנתר לתוך הרקמה מצע המעי העליון על ידי ניקוב של הצפק הקרביים של מצע המעי קרוב לצומת וסקולרית במחירים צנתור.
  7. בקפידה מראש מלוכסנות קצה הצנתר קרוב לצומת של הווריד ileocolic עד רושם קלה של הצומת כלי נתפסת (6D איור).
  8. לבסוף, catheterize מערכת ורידים בקנה אחד עם המסלול כלי מצטרף על ידי ניקוב הקיר כלי הדם-הזווית למעבר של כלי. (איור 6E).
    הערה: אם הדימום מתרחש צנתור של הווריד ileocolic, באמצעות מכבש האגודל עם קומפרס גזה קטנים באזור דימום. הלחץ הזה צריך להישמר למשך 1-2 דקות לעצור את הדימום. לאחר מכן, מנסה להוסיף את הצנתר בסניף יותר הפרוקסימלית של הווריד של ileocolic.
  9. לקדם הקטטר בעיון נוסף לאורך העורק הראשי ורידים וריד שער הכבד ממש את הווריד (איור 6F) בלי.
    הערה: שומר את הצנתר במרחק מספיק כדי החללית זרימה להציב בסביבת הסניף הראשי של וריד שער הכבד כדי להימנע חפצים בתוך האות זרימה וכדי למנוע לחירור של וריד שער הכבד.
  10. לחבר את הצנתר מלא עם תמיסת מלח פיזיולוגית לפתרון מתמר לחץ תוך הימנעות היווצרות בועות אוויר.
  11. . תתחיל להקליט PP
  12. לתעד את כל הפרמטרים והמודינמיקה בו זמנית. תחת תנאים יציבים למשך מספר דקות (איור 6G, H). באופן אופציונלי, הקטטר ורידים הפורטל יכול להיות קבוע במקום באמצעות דבק רקמות, המעיים עשויה להימצא מחדש לתוך חלל הבטן.
    הערה: אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד, אך האות היא טובה פועמת זרימה מזוהה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל לא מספיק עומק ההרדמה על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.

6. IHVR

  1. לאחר הקרבת החיה, למדוד את המשקל הכבד. לחשב את IHVR: IHVR = PVBF/עמ' לנרמל את הערך PVBF למשקל של הכבד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

בהתאם לדגם חיה את חומרת מחלת כבד, מידת PHT ואת חומרת התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם היא שונה (איור 7).

המודל BDL גורמת שחמת המרה עקב לחסימת מרה תוך כבדית. בהתאם לכך, PP מגדילה hyperdynamic ובזמן מחזור מתפתח, כפי שנראה גידול משאבי אנוש וכן ירידה של מפת. בבעלי חיים זה קשה וחיוור, SMABF, PVBF, IHVR גם להגדיל את אולי תבין את הכבד, בגרימת השינויים (איור 7 א

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

PP הוא הפרמטר העיקרי לתוצאה להערכה של התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם, משקף את חומרת שבבסיס שחמת. התצהיר מטריקס (קרי, פיברוזיס) והן vasoconstriction sinusoidal (בשל גדל ביטוי הכבד של vasoconstrictors, ירד היענות vasodilators) לגרום IHVR מוגברת. החשיבות של PP והשפעתה על מחלת כבד כרונית הוכח מרובים פרה11,12,13,14 , מחקרים קליניים15,16

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

אנו מודים וטרינרים, אחיות, בעלי חיים שומרי-מרכז של המחקר הביו-רפואי על תמיכתם רציפה במהלך פרויקטים מחקריים שלנו. המחברים להכיר את הקלט החשובים של כל הסוקרים של פרוטוקול זה. כמה המחקר מומן על ידי "יאנג המדע בפרס" של החברה האוסטרית לגסטרואנטרולוגיה ו Hepatology (ÖGGH) ל PS ופרס "סקודה" של האוסטרי החברה לרפואה פנימית כדי ללכוד את...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<חזק>מכשירים
LabChart 7 Pro תוכנהADInstruments, קולורדו ספרינגס, קולורדו, ארה"ב -תוכנה
ML870 PowerLab 8/30ADInstruments, קולורדו ספרינגס, קולורדו, ארה"ב -מקליט רב-ערוצי אלקטרוני
>MLT0380/DADIstruments, קולורדו ספרינגס, קולורדו, ארה"ב>-
ML112 מגבר גשר מרובעADInstruments, קולורדו ספרינגס, קולורדו, ארה"ב&-מגבר גשר
TS420Transonic Systems Inc., איתקה, ניו יורק, ארה"ב&-מודול מד זרימה
מחקר ביולוגי מכשיר 7025UGO BASILE S.R.L., קומריו, איטליה -Ventilator
Vapor 2000Drä ger Medical AG & Co. KG, Lü בק, גרמניה -Isofluran Vaporizer
בדיקות פריווסקולריות (חולדה) למערכות טרנסוניות (עורק מזנטרי עליון)Transonic Systems Inc., איתקה, ניו יורק, ארה"בבדיקת זרימה אולטרסאונד (1 מ"מ)
בדיקות פריווסקולריות (חולדה) למערכות טרנסוניות (Portal Vein)Transonic Systems Inc., איתקה, ניו יורק, ארה"בבדיקת זרימה אולטרסאונד ( 2 מ"מ)
ראשון לאינטובציה ושני לחתכים בעור נקי>- -מספריים מאיו [x2]
em - - ;-
מספריים לציפורן - - - -למשל
מלקחייםלרקמות אדסון בראון - -מלקחיים לרקמות
דיוק גבוה 45° מלקחיים רחבים בזווית [x2] ;- - -
Hemostat [x4] - - ;-
מהדק צפקי מיקוליץ' - -מהדק מעוקל
למשל מהדק דיפנבך - -מהדק מיקרו
למשל מיקרו מרית עם קצוות שטוחים, רוחב 4 מ"מ, - -<em>מרית מתכת מיקרו
לתפר טרנסבוקאלי באינטובציה - -מחזיק מחט
>אחיזת אזמל - - -
תוצרת עצמית -שולחן אינטובציה
blut, גמיש ובקוטר מתאים לצינורית עורקים וזרימה - -חוט פלדה קהה
קו עורקי שונה 20G עם FlowstichBecton Dickinson, Farady Road, Swindon, בריטניה#682245קו עורקי
כרית חימום - - ;-
בדיקת טמרטורת פי הטבעת - - -
מחמם מלח - - -
לרינגוסקופ (ספציפי לגודל בעלי חיים, למשל חולדה) - -
Inductionbox להרדמה באינהלציה - -&
em>סולם (מסוגל למדוד מ"ג) - - -
קוצץ שיער - - -
שם החברה Catalog NumberComments
חומרים מתכלים
למשל שונה BD Venflon Pro Safety 14GABecton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 הלסינגבורג, שוודיה#393230צנתר ורידי היקפי (14G)
צינורות פוליאתילן עדין, ID 0.58 מ"מ, OD 0.96 מ"מ, Portex,Smiths Medical International Ltd., Kent, UK#800/100/200צינור קטטר (PE-50)
למשל Omnifix-F SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#9161406Vמזרק 1mLלמשל
Injekt SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, גרמניה#4606051Vמזרק 5mL
למשל Injekt SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, גרמניה#4606205Vמזרק 20 מ"ל
למשל BD Microlance 3, 18G - 1 1/2 "Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#304622Cannula (18G)
למשל BD Microlance 3, 23G - 1"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#300800Cannula (23G)
למשל BD Microlance 3, 30G - 1/2"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#304000Cannula (30G)
למשל Leukoplast SBSN medical GmbH, Hamburg,  גרמניה#47619-00סרט דבק
למשל Gazin RK Mullkompressen (18x8 ס"מ)Lohmann & ראושר, וינה, אוסטריה#10972דחיסת גזה (קטנה)
למשל Gazin RK Mullkompressen (5x5 ס"מ)Lohmann & Rauscher, וינה, אוסטריה#10961דחיסת גזה (גדול)
Silk Braided black, USP 4/0, EP 1.5SMI AG, St. Vith, Belgium#2021-04Suture (Silk 4/0, EP 1.5)
למשל Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 PrimeJohnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Germany#EH7552Transbuccal suture
למשל Cottonbuds (2.2 מ"מ, 15 ס"מ)Paul Hartmann AG, היידנהיים, גרמניה#967936Cotton buds
למשל Vue UltrasoundgelOptimum Medical Limited, UK#1157ג'ל אולטרסאונד
למשל Glubran 2Gem srl, ויארג'יו, איטליה#G-NB2-50דבק רקמות
למשל סכין אזמל כירורגית מס' 10 - פלדת פחמןסוואן-מורטון, אנגליה, BS#202סכין אזמל
Heparin, 5000 כלומר/מ"ל (Natriumheparin)Medicamentum Pharma GmbH, אלרהייליגן ו-Mü rztal, אוסטריה -Heparin
FloraneAesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK -Isoflurane
OeloVital (5g)Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria -ג'ל עיניים
KetasolaniMedica GmbH, Senden-Bö sensell, גרמניה -Ketamine
RompunBayer Austria Ges.m.b.H., וינה, אוסטריה -Xylazine
Xylocain 10% PumpsprayAstraZeneca Ö sterreich GmbH, וינה, אוסטריה -ספריי משאבת לידוקאין
DipidolorJansen-Cilag Pharma GmbH, וינה, אוסטריה -Piritramide
NaCl 0.9% Fresenius, 1LFresenius Kabi Austira GmbH, גראץ, אוסטריה#13LIP132תמיסת מלח פיזיולוגית
#MA1PRB#MA2PSBלמשל <

מקורות

  1. Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
  2. Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments. J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).
  3. Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data. J Hepatol. 58 (3), 593-608 (2013).
  4. Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension. Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291 (6), 699-713 (2008).
  5. Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice. Liver International. 25 (6), 1079-1090 (2005).
  6. Franchis, R. d Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension. Journal of Hepatology. 33 (5), 846-852 (2000).
  7. Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review. Annals of medicine. 46 (1), 8-17 (2014).
  8. Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn. Indian J Gastroenterol. 27 (2), 74-80 (2008).
  9. Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. Liver cirrhosis. Lancet. 383 (9930), 1749-1761 (2014).
  10. Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. Animal models of portal hypertension. World Journal of Gastroenterology : WJG. 12 (41), 6577-6584 (2006).
  11. Reiberger, T., et al. Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats. Journal of Hepatology. 51 (5), 865-873 (2009).
  12. Schwabl, P., et al. Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats. Journal of Hepatology. 60 (6), 1135-1142 (2014).
  13. Reiberger, T., et al. Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling. Liver International. 33 (4), 561-568 (2013).
  14. Schwabl, P., et al. The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction. Journal of Hepatology. 66 (4), 724-733 (2017).
  15. Mandorfer, M., et al. Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension. J Hepatol. 65 (4), 692-699 (2016).
  16. Schwabl, P., et al. Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease. Aliment Pharmacol Ther. 45 (1), 139-149 (2017).
  17. Reiberger, T., Mandorfer, M. Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis. Journal of Hepatology. 66 (4), 849-859 (2017).
  18. Reiberger, T., et al. Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol. Gut. 62 (11), 1634-1641 (2013).
  19. Reiberger, T., et al. Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III). Wiener klinische Wochenschrift. 129 (3), 135-158 (2017).
  20. de Franchis, R. Expanding consensus in portal hypertension. Journal of Hepatology. 63 (3), 743-752 (2015).
  21. Pinter, M., et al. The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma - a pilot study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35 (1), 83-91 (2012).
  22. Schwabl, P., Laleman, W. Novel treatment options for portal hypertension. Gastroenterol Rep (Oxf). 5 (2), 90-103 (2017).
  23. Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension. , (2017).
  24. Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
  25. Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. Routine animal use procedures. , Institute of Veterinary Physiology, University of Zurich, Physiology and Behavior Laboratory, Institute of Food, Nutrition and Health, ETH Zurich. (2016).
  26. Animal Care and Use Program. Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information. , The University of British Columbia. (2016).
  27. Davis, J. A. Current Protocols in Neuroscience. , John Wiley & Sons, Inc. (2001).
  28. Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats. BMC Veterinary Research. 10 (1), 198(2014).
  29. Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
  30. Becker, K., et al. Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits. , GV-SOLAS - German veterinary association for animal welfare. (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות