בדיקת ריכוז הקורטיזול שיער מספק אלטרנטיבה מדדים מסורתיים של קורטיזול; עם זאת, איסוף דגימות שיער אפריקאים אמריקאים, מדענים צריכים להיות מושכלת מבחינה תרבותית, המוסמכת. המטרה של פרוטוקול זה היא להפגין טכניקה תרבותית מושכלת לאסוף דגימות שיער לניתוח קורטיזול אפריקאים אמריקאים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
איסוף דגימות שיער עבור בדיקת קורטיזול שיער אפריקאים אמריקאים
במאמר זה
סיכום
תקציר
הורמון הקורטיזול בדרך כלל שקובעת רוק, סרום או בדיקות שתן. לאחרונה, קורטיזול חולץ בהצלחה מן השיער, כולל בני אדם. היתרון של ריכוז הקורטיזול שיער הוא כי הוא משקף ייצוג רטרוספקטיבה של הפונקציה ציר ההיפותלמוס-יותרת המוח-יותרת הכליה (HPA) לאורך זמן, ממש כמו המוגלובין A1C מייצג הבקרה הגליקמית. עם זאת, קבלת דגימות שיער עשויה להיות מאתגרת, עקב אמונות תרבותיות שיער שיטות טיפול של מיעוט משתתפים. לדוגמה, ייתכן אפריקאים אמריקאים מסרבים לספק דוגמאות. בנוסף, כמה חוקרים מאומנים כדי לאסוף דגימות שיער אפרו אמריקנים. מטרת מאמר זה היא להציג פרוטוקול תרבותית מושכלת כדי לסייע לחוקרים להשיג דגימות שיער של אמריקאים אפריקאים. כדי להמחיש את התוצאות נציג של יישום פרוטוקול זה, ניתנים נתונים מזוהה מבטל את אפרו אמריקנים השתתפו במחקר קהילה מבוסס על מתח כרוני. העדפות תרגול שיער הם העריכו. המשתתפים נעשים נוחים על ידי הצגת תמונות של דגימות שיער לפני חיתוך השיער שלהם. הסינגל זן טוויסט ומשמש בעדינות שיטת המשיכה לאסוף כ- 30-50 קווצות שיער מאזור הקודקוד האחורי של הקרקפת. פרוטוקול זה תשפר באופן משמעותי את אוסף דגימות שיער אפרו אמריקנים.
מבוא
איסוף דגימות רוק, דם או שתן לניתוח קורטיזול יש באתגרים הייחודיים פרוצדורלי, נטל המשתתף גדולה יותר, כמו התהליך מצריך מספר דגימות רוק, דוגמאות venipuncture, או איסוף שתן 24 שעות ביממה. קבלת קורטיזול מדגימות את השיער מהווה אלטרנטיבה פשוטה ומקובלת באמצעות רוק, סרום, או שתן דגימות1,2. שיער קורטיזול מספק ייצוג רטרוספקטיבה של הפונקציה ציר ההיפותלמוס-יותרת המוח-יותרת הכליה (HPA) לאורך זמן. כ- 3 ס מ של שיער שנאסף הקרקפת שווה לממוצע של שחרור קורטיזול במשך 3 חודשים1. עם זאת, החוקרים נתקלים באתגרים הייחודיים כאשר מנסים לאסוף דגימות שיער על פני אוכלוסיות מגוונות. אתגרים כאלה כוללות אמונות דתיות או רוחניות, כולל חשיפת שיער (למשל, נשים מוסלמיות), השיער כמו קדוש (קבוצות האינדיאנים), או נורמות להתחבר שיער בסטנדרטים של היופי ואת הדימוי העצמי.
בתרבות אפרו-אמריקאית, במיוחד בקרב נשים, שיער הקרקפת הוא היבט אישי ומאוד חשוב של דימוי גוף שלהם,3,4. חוויות נוספות, היסטורית (למשל, הניסויים בטסקיגי) להמשיך לטפח את חוסר האמון תהליך מחקר5. כמה אמונות תרבותיות והופולקלורים אמריקאים אפריקאים גם להציע כי המדגם שיער יכול לשמש בטקסים שעלולה לגרום נזק6,7. החוקרים צריכים להיות מודעים של אתגרים פוטנציאליים הוא עלול להיחשף במחקרים כאשר אפרו-אמריקאית המשתתפים מתבקשים לספק דגימות שיער.
בנוסף בעיות סביב דימוי גוף, טכניקות ספציפיות עבור איסוף וטיפול דגימות שיער אפרו אמריקנים עשוי להיות שונה מזה של האמריקאים האירופית6,7. לדוגמה, אפריקאים אמריקאים ייתכן שיהיה ישר, דק, מתולתל, סוטה, גס, או שילוב של סוגי שיער אלה, כל דרישת טכניקות שונות כדי לאסוף ולאבטח שיער נאותה דוגמאות לצורך עיבוד. מחקרים שנעשו לאחרונה על דגימות של בני נוער אמריקאים אפריקאים8, כמו גם דגימות רב-אתנית9, הראה כי אוסף של שיער למדידה רמת קורטיזול היה מקובל בקרב המשתתפים אפרו-אמריקאית. כיום, ישנם הליכים אימון ויזואלי לא נועד לספק לחוקרים בעלי מיומנות וידע תרבות לאסוף דגימות שיער אפריקאים אמריקאים. מטרת מאמר זה היא להציג פרוטוקול תרבותית מושכלת כדי לסייע לחוקרים להשיג דגימות שיער נאותה של המשתתפים אפרו-אמריקאית. שיטה זו פותחה עם שיקול דעת זהיר של מאפיינים פיזיים, פסיכו-סוציאלי, תרבות הרלוונטיים לאוסף של דגימות שיער ממבוגרים אפרו-אמריקאית. עד כה, שם אין שיטות חזותי של איסוף הדגימות, פרוטוקול זה יהיה הראשון להנחות אותו אוסף דגימת שיער נכונה פרטי ממבוגרים אפרו-אמריקאית. כדי להמחיש את התוצאות נציג של יישום פרוטוקול, מוצגים נתונים מבטל את שזוהה מ אפרו אמריקנים השתתפו במחקר קהילה מבוסס על מתח כרוני זה היו בגילאי 65 ומעלה. שני עוזרי מחקר זכר ונקבה ממגוון רחב של רקעים גזעית ליצור קשר עם המשתתפים הפוטנציאליים מתוך רשימה מרפאת שנוצר עלונים. החוקר הראשי, היא אישה אפרו-אמריקאית, דיבר מרכזים קהילתיים, בכיר דירות דיור מסובסד בוגרים-המבוגרים אפריקאים אמריקאים על המחקר, כולל תיאור של שיטות איסוף השיער.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
המחקר אושרה על ידי אוניברסיטת בתי חולים קליבלנד מרכז מוסדי לסקור לוועדה הרפואית, הפרוטוקול מנחים את המשתתף בטיחות הגנה ונתונים כמצוין על-ידי ועדת ביקורת.
1. מכינים את המשתתף דוגמת שיער ושאלות אוסף דגימת שיער
- להסביר למשתתף כי המדגם שיער שנאספו הוא פחות שיער מאשר זה הולך לאיבוד בדרך כלל צחצוח בכל יום מן הצד האחורי של הראש (קודקוד האחורי). תגיד המשתתף כי דרך האתר דגימת שיער מוסתר על-ידי תחימת שיער, לפיכך, אינה מוצגת לאחר אוסף. ליידע המשתתף כי המדגם ישמש כדי למדוד את הורמון הנקרא קורטיזול נוכח שיער10,11.
- להוציא את התמונה מדגם ולהראות המשתתף כמות השיער יהיה אסף (30-50 שערות).
הערה: ראה איור 1 עבור צילום של דגימת שיער. - שואל את המשתתף שיער טיפוח תרגול12 השאלות המפורטים בטבלה1.
2. לאסוף את דגימת שיער
- תגיד המשתתף כי המדגם נאסף באזור פרטי מאחורי מחיצה ניידת, וילון, או דלת סגורה. מבטיח המשתתפים כי, אם הן לובשות פאה או פאה של, השיער שלהם הוא לא חתך באזור שבו אחרים ייתכן שתראה. למדוד את אורך השיער של הקרקפת לסיים על ידי משיכת השיער בעדינות ומתח.
- אם השיער קצר (פחות מ 3 ס מ), לפי התקנון שיער קצר בשלב 3 (אף אם השיער הוא פחות מ 1 ס"מ, אין אפשרות לאסוף דגימת ה, ו, באופן אידיאלי, השיער צריך להיות לפחות 3 ס מ). לשיער ארוך מ- 6 ס מ, לפי התקנון שיער ארוך בשלב 4. אחרת, המשך לשלב הבא.
- להבטיח כי חומרים מוכנים על ידי הצבת האספקה חיתוך השיער (גיליון של רדיד אלומיניום, המעטפה עסקים, סלון ציונים מספריים, מסרק פרידה השן גדולים וקטנים, אלכוהול preps, ציירים הקלטת, בטוש, כפפות לטקס הלא [אופציונלית] השיער קליפים)10 על משטח ליד המשתתף. לנקות את המספריים ותסרוק עם משטח ההכנה אלכוהול לפני איסוף הדגימה. לגזור 8 x 10" גיליון של נייר אלומיניום לשימוש עבור המדגם.
- . תלבש כפפות לטקס הלא אקח את המסרק, חלק השיער אופקית לאורך הקודקוד האחורי של הקרקפת בין קצות האוזניים.
- לקחת קליפ, להזיז את השיער מהחלק העליון של החלק ולאחר מכן מקם סרטון אחר בתחתית כדי לחשוף את מלבן 5 10x ס מ בין שני סרטונים ופזור (בערך בגודל של חפיסת קלפים).
- תשאל אם הם מעדיפים שימוש השן רחב או צר השן מסרק המלבן 2-3" של שיער המשתתף. לשאול המשתתף כיצד היא או הוא רוצה לקבל את השיער הנותר המסרק שנמחקו. לוותר על השיער המסרק המשתתף, או, אם (ואם רק) המשתתף מצהיר שזה בסדר למחוק את ופזור, למחוק את השיער הנותר של המסרק לתוך פח אשפה.
- לקלוט כ- 30-50 קווצות שיער בצד ימין של המלבן 2-3" משוך בעדינות, לסובב את מהשיער. הקרקפת בתנועה מתגלגל בין האצבעות.
- להבטיח הדגימה כמה שיותר קרוב הקרקפת ככל האפשר, אבל לא לחתוך את הקרקפת. השתמש סלון-ציונים מספריים ולהפוך חתך ישר ונקי.
- לתפוס את דגימת שיער ולהבטיח בקצה השורש מיושר בקפידה לאורך החתך.
- לצרף את השיער הגיליון רדיד אלומיניום על ידי מקליטה עם הקלטת של הצייר. אינם מכסים את הקצה הקרקפת ולאחר אין להשתמש על שיער קצר יותר או שווה 3 ס"מ. מקום חופשי לגזור את השיער לתוך מרכז רדיד האלומיניום ומקפלים למרובע, המבטיח כי השיער לא נופל מתוך לסכל את הקלטת של הצייר.
- קח את הסמן, תווית הסוף הקרקפת על רדיד האלומיניום. השתמש תוויות ברקודים premade כדי לצרף נייר ומעטפה.
- קפל רדיד האלומיניום מבלי לקפל את השיער על קצה הקרקפת כדי למנוע בראש המיטה (התקפלה, התכופף שיער), למקם אותו בתוך המעטפה גודל העסק, לאטום.
- תווית מחוץ המעטפה עם מספר זיהוי של מחקר ייחודי של המשתתף, התאריך, שם החוקר הראשי, או השתמש תווית ברקוד אם הם זמינים.
- אחסן את הדגימה באזור יבש בטמפרטורת החדר.
3. מדגם אוסף עבור שיער קצר (1-3 ס מ)
- בצע שלבים 2.3 ו- 2.4.
- לאחר פרידה, מבקשים את המשתתף להחזיק את השיער נפרדו קרוב הקרקפת. חותך את השיער לאורך החלק, בעוד אתה מחזיק את השיער בצורה הדוקה עם האצבע המורה ואגודל10
- מקום שערות בנייר ומקפלים אותו בצורה מאובטחת. לא קלטת את השיער רדיד האלומיניום.
- בצע את שלבים 2.11 דרך 2.14.
4. המדגם אוסף עבור שיער ארוך (יותר מ 6 ס מ)
- חלק השיער משמאל לימין-הקודקוד האחורי.
- השתמש את סיכות לעכב את תוספת השיער.
- ליצור טוויסט של השיער, להחזיק בחוזקה האצבע והאגודל כדי לא להוריד את הדגימה10.
- לעשות חתך ישר נקי כמה שיותר קרוב הקרקפת ככל האפשר. לאסוף 30-50 קווצות שיער.
- אם למשתתף יש שיער דק, ואז לחתוך אזורים קטנים 2-3 (1 ס מ אחד מהשני) על פני הקודקוד האחורי כדי להסתיר את האתר של החתך.
- בצע את שלבים 2.10 דרך 2.14.
5. לטעום עיבוד
- אחסן את המנות רדיד אלומיניום המכיל את דגימת שיער בטמפרטורת החדר ללא הגבלת זמן עד הניתוח.
הערה: קורטיזול השיער יציב מאוד בשיער, ניתן לאחסן במשך שנים. למעשה, קורטיזול נמדד דגימות שיער מן השרידים חנוט11. - לנתח קורטיזול שיער כמו שפורסמו בעבר12. דוגמאות יכול להישלח ללילה בטמפרטורת החדר.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
במחקר שלנו, עשרים ואחד אפריקאים אמריקאים (גיל ממוצע = 75; SD = 6.9; 85% נקבה) הסכים להשתתף. ארבעה משתתפים (19%) סירב למסור דגימת שיער ו-2 (9.5 אחוזים) לא לתת דגימה כי השיער שלהם היה קצר מדי. סך של 15 דוגמאות שיער התקבלו ומעובדים (טבלה 2). האורך של דגימות שיער שעובדו נע בין 1 ס מ אל 4.8 ס מ. בעיות טכניות כללו דגימות היו מיושרים לקוי הסוף הקרקפת, סבוכים, או מתולתל, ואת הסרט של הצייר להצבה מעל לקצה הקרקפת.
לאחר ייש...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
שלבים חיוניים בפרוטוקול אוסף שיער כוללים מתן דוגמה יילקח כמה שיער, מציג האתר מדגם (מערבולת האחורי), שימוש התפנית מאמץ יחיד ומשוך בעדינות שיטת ואבטחה הדגימה עם הקלטת של הצייר להתרחק ממנו קצה הקרקפת. על ידי בעדינות פיתול ומושך את הדגימה, שיער מתולתל הוא מאורכים, יישור קצה הקרקפת נשמר. זה מפחית מעבדה הזמן הדרוש כדי ליישר את קצוות קרקפת, מידה ו לחתוך הדגימה. למרות שירס דליל השתמשו במחקר מוקדמת, הן אינן הכלי המועדף עבור קוצץ שיער בגלל יישור קצה הקרקפת לא אחיד וזמן מוגברת כדי להכין את דגימת שיער לניתוח.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
אימונולוגיה התנהגותית של מעבדה לאנדוקרינולוגיה מיועדת כמו המעבדה של מצוינות על-ידי Salimetrics, LLC.
תודות
פרסום זה התאפשר על ידי קלינית Translational המדע שיתופי של קליבלנד; KL2TR000440 של המרכז הארצי לקידום Translational מדעי (NCATS) רכיב של מכוני הבריאות הלאומיים; מפת הדרכים NIH למחקר רפואי. מחקריו זכו למימון מוסדות של המוסד לביטוח לאומי הלאומי על שימוש בסמים (1R21DA034960) של ד ר ג'ודי פורד עובדים באזור הזה ולהעניק המכון האוניברסיטאי מדינת אוהיו אוכלוסיית המחקר זרע מימון מן המכון הלאומי של הילד לבריאות, פיתוח (2P2CHD058484). התוכן הוא אך ורק באחריות המחברים, ואינם מייצגים בהכרח את הנופים הרשמי של מכוני הבריאות הלאומיים. העבודה של ד ר Laudenslager באזור זה מחקריו זכו למימון חוזה מכון המחקר תוצאות Patient-Centered (CE-1304-6208), מענק של המינהל לילדים ומשפחות (90 שנה 0058), מענק של פסיכוביולוגיה התפתחותית קבוצת מחקר קרן ר המחלקה לפסיכיאטריה, אוניברסיטת קולורדו בדנוור Anschutz רפואי הקמפוס.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מספריים בדרגת סלון | קריקט | S-3 550 | גזירת שיער מקצועית, 5.5 אינץ ' |
| מסרק שיניים גדול | גודי | ללא קטלוג number__Goody מסרק מגרפה סטייליסטה | קישור לאתר החברה http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 |
| מסרק שיניים קטן | Goody | No catalog number_ Goody Start.Style.Finish. קישור לאתר החברה http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| מכינות אלכוהול | קנדל וובקול מכינות אלכוהול | אין מספר קטלוגי. קנדל וובקול אלכוהול מכין | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| סרט צייר | 3M סקוטי | סקוטי צייר מקורי s סרט | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| טוש קבוע | Sharpie | שחור Sharpie Fine Point | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
| כפפות שאינן לטקס | Proté gé | 93997 | Protege® כפפות בדיקה ללא אבקת ניטריל http://aureliagloves.com/product/protege/ |
| קליפסים לשיער | גודי גודי התחלה.סגנון.גימור. קליפס תלתלים | http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips | |
| מעטפה | Office Depo | 330808 | Office Depot® מעטפות אבזם מותג, 9 אינץ' x 12 אינץ', חום, קופסה של 100 |
| גיליונות נייר כסף | בחירה | קופסת 1229105 של 500 דפים שירות מזון דפי נייר כסף קופצים מקופלים | |
| שקילה מוקדמת של 2 מ"ל קריוביאל | וויטון, מילוויל, ניו ג'רזי, ארה"ב | W985902 | |
| 100% איזופרופנול | ספקטרום | I1275 | 67-63-0 | |
| חנקן נוזלי | אוניברסיטת אוהיו סטייט מאחסן | מחסן צילינדר גז | http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx |
| מיסב כדורי נירוסטה | McMasterCarr | 9291K42 | https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0 |
| קלטות אלומיניום טחונות במיוחד | FisherScientific | Retsch 20.745.0001 | |
| מתנול בדרגת HPLC | FisherScientific | A452N1-19 | |
| https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129 צינור מיקרוצנטריפוגה | אפנדורף צפון אמריקה | 22363352 https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212 | |
| קורטיזול ELISA Kit | Salimetrics LLC, סטייט קולג', פנסילבניה, ארה"ב | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| צנטריפוגה לצינור המיקרוצנטריפוגה | בקמן קולטר | מיקרופוגה סדרת 20 | http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
מקורות
- Sauve, B. K. G., Walsh, G., Tokmakejian, S., Van Uum, S. H. Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure. Clin Invest Med. 30 (5), 183-191 (2007).
- Wright, K. D., Hickman, R., Laudenslager, M. L. Hair cortisol analysis: a promising biomarker of HPA activation in older adults. Gerontologist. 55, Suppl 1 140-145 (2015).
- Awad, G. H., et al. Beauty and body image concerns among African American college women. J Black Psychol. 41 (6), 540-564 (2015).
- Capodilupo, C. M., Kim, S. Gender and race matter: the importance of considering intersections in Black women's body image. J Couns Psychol. 61 (1), 37-49 (2014).
- Miracle, V. A. The Belmont Report: the triple crown of research ethics. Dimens Crit Care Nurs. 35 (4), 223-228 (2016).
- Fishman, B. M., Bobo, L., Kosub, K., Womeodu, R. J. Cultural issues in serving minority populations: emphasis on Mexican Americans and African Americans. Am J Med Sci. 306 (3), 160-166 (1993).
- Webb, J. Y. Louisiana voodoo and superstitions related to health. HSMHA Health Rep. 86 (4), 291-301 (1971).
- Ford, J. L., Boch, S. J., McCarthy, D. O. Feasibility of hair collection for cortisol measurement in population research on adolescent health. Nurs Res. 65 (3), 249-255 (2016).
- Wosu, A. C., et al. Hair cortisol in relation to sociodemographic and lifestyle characteristics in a multiethnic US sample. Ann Epidemiol. 25 (2), 90-95 (2015).
- Laudenslager, M. L. Hair collection and shipping instructions. , Available from: http://www.ucdenver.edu/academics/colleges/medicalschool/departments/psychiatry/Research/biel/Pages/Overview.aspx (2016).
- Webb, E., et al. Assessing individual systemic stress through cortisol analysis of archaeological hair. J Archaeolog Sci. 37 (4), 807-812 (2010).
- Russell, E., et al. Toward standardization of hair cortisol measurement: results of the first international interlaboratory round robin. Ther Drug Monit. 37 (1), 71-75 (2015).
- Bosley, R. E., Daveluy, S. A primer to natural hair care practices in black patients. Cutis. 95 (2), 78-80 (2015).
- Loussouarn, G. African hair growth parameters. Brit J Derm. 145 (2), 294-297 (2001).
- Hoffman, M. C., Karban, L. V., Goodteacher, A., Laudenslager, M. L. Chemical processing and shampooing impact cortisol measured in human hair. Clin Invest Med. 37 (4), 252-257 (2014).
- Ramirez, J., Elmofty, M., Castillo, E., DeRouen, M., Shariff-Marco, S., Allen, L., et al. Evaluation of cortisol and telomere length measurements in ethnically diverse women with breast cancer using culturally sensitive methods. J Community Genet. 8, 75-86 (2017).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
