מחקר זה מציג את הארנב משופרת של מודל נגוע Staphylococcus aureus על ידי חסימת את אותה כמות של חיידקים במח העצם. סולפט סידן ואנקומיצין טעון ועצמות autogenous משמשות לטיפול ותיקון אנטיביוטיקה ועצמות. הפרוטוקול יכול להיות מועיל עבור הלומדים העצם זיהום והתחדשות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
טיפול ונקומיצין טעון סולפט סידן ועצמות Autogenous במודל משופר הארנב של זיהום עצם
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
עצם התוצאות זיהום מפני פלישה חיידקים, אשר קשה מאוד לטפל בחדר ניתוח הקליני, אורטופדי, טראומטי. הזיהום העצם עלולה לגרום לדלקת ממושכת, דלקת עצם מוגלתית, והמעלית העצם בסופו של דבר. הקמת מודל בעלי חיים ריאלי לשחזור חשובה עצם זיהום מחקר וטיפול אנטיביוטי. כמודל ויוו, דגם ארנב נעשה שימוש נרחב במחקר זיהום של העצם. עם זאת, מחקרים קודמים על הארנב עצם מודלים זיהום כי מצב זיהום הוא לא עקבי, כמו גם כמות החיידקים משתנה. מחקר זה מציג שיטה כירורגית משופרת עבור גרימת זיהום עצם על ארנב, על ידי חסימת החיידק במח העצם. לאחר מכן, הערכות רשתי יכול להתבצע כדי לאמת את שיטת הדוגמנות.
באופן כללי, להסיר רקמות מתות רקמת נמק, השרשה של סידן טעון ואנקומיצין סולפט (VCS) הם השולט טיפול אנטיביוטי. למרות סולפט סידן ב VCS הטבות osteocyte זוחלים, צמיחת עצם חדשה, עצם מסיבית פגמים להתרחש לאחר להסיר רקמות מתות. עצם autogenous (אלב) היא אסטרטגיית מושך כדי להתגבר על עצם פגמים לטיפול של פגמים עצם מסיבית לאחר להסיר רקמות מתות נמק עצם.
במחקר זה, השתמשנו בעצם הזנב כמו עצם autogenous הושתלו בתוך עצם הפגם. עצם תיקון נמדדה באמצעות מיקרו-מחושב-טומוגרפיה (מיקרו-CT) וניתוח היסטולוגית לאחר להקריב חיה. כתוצאה מכך, בקבוצה VCS, עצם והמעלית בעקביות הושג. לעומת זאת, האזורים פגם עצם בקבוצה VCS-AB ירדו באופן משמעותי. שיטת מידול נוכח תיאר שיטה לשחזור, ריאלי, יציב כדי להכין מודל זיהום של העצם. הטיפול VCS-AB הביא נמוכים, והמעלית עצם לאחר טיפול אנטיביוטי. המודל זיהום עצם משופרת והטיפול שילוב של VCS ועצמות autogenous יכולים להיות לעזר בלימוד מנגנוני כבסיס זיהום ועצם התחדשות העצם הרלוונטי ליישומים אורתופדיים טראומה.
מבוא
דלקת העצם נובע בדרך כלל חיידקים או אחרים הפלישה מיקרואורגניזם לאחר טראומה, שבר או מחלות אחרות עצם1. עצם זיהום עלול לגרום רמה גבוהה של דלקת והרס רקמות העצם. במרפאה, Staphylococcus aureus (S. aureus) הוא סוכן סיבתי הדומיננטית של העצם זיהום2,3. הזיהום עצם מכאיב, מתישה, ולוקח בדרך כלל קורס כרונית קשה מאוד לטפל4. בזמן הנוכחי, הטריה של רקמת נמק, השתלת של סידן טעון ונקומיצין (VCS) חרוזים אושרו כמו אסטרטגיית יעיל לשליטה זיהום מקומי5,6. עם זאת, 10% עד 15% מהמטופלים חוו של תהליך התיקון עצם ממושך, ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
ארנבים השתמשו במחקר הנוכחי טופלו לפי המדריך על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה. כל ההליכים ניסיוני הובילו את החוקים של ביואתיקה הוועדה של ג'ה-ג'יאנג האקדמיה של הרפואה הסינית המסורתית.
1. הכנת ההשעיה חיידקי
- להמיס 0.5 מ ג של S. aureus ליופיליזציה אבקת (בקרת האוויר 6538) עם mL 0.3 לוריא-Bertani תרבות בינוני. מערבבים התלוי לחלוטין.
- צובעות את המתלים חיידקים על פלטות אגר סויה tryptic, דגירה מושבות חיידקים ב 37 מעלות צלזיוס במשך 16 שעות.
- בחר מושבת חיידקים יחיד ויוצרים יחידה (CFU) ותרבות סויה tryptic צינורות מרק עבור ה 24 בצע גלובלי עבור 24 שעות ב 37 מעלות צלזיוס, ולקבל אמצע-לוגריתמי הצמיחה חיידקים שלב לאחר 16 ע....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
הערכה של מודל זיהום עצם
לאחר זיהום עם S. aureus, ביטויים פתולוגיים ארנבים היו הדומה הסימפטום הייצוגי ביותר של דלקת עצם מוגלתית כרונית במרפאה. במחקר שלנו, ארנבים 30 היו נגועים, נתון כקבוצה מודל, ונחשפו ארנבים 10 היו כמו חיות בקרת. כל הארנבונים דגם יש נגוע הסינוסים של האתר המקומי השוקה, עם מוגלה צהוב ולבן זרימת מ הסינוסים (איור 3א). התוצאות של צביעת המטוקסילין מצביעים על כך אגרגטים חיידקי ממוקמים סביב עצם מת בקבוצה .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
במחקרים קודמים, נבנו סוגים שונים של מודלים בעלי חיים כדי ללמוד הן זיהום אקוטי וכרוני העצם; עם זאת, חפש את המודל האידיאלי עדיין נמשכת17,18. בנוסף, המודל זיהום עצם אידיאלי צפוי לדמות את מאפייני פתולוגי של העצם זיהום בסביבה קלינית, תוך התקופות הדוגמנות, להישאר זולה וקלה לביצוע. עד כה, המודל זיהום של העצם ארנב הוא המודל הנפוץ ביותר במחקר מחלת עצם דלקתיות, כמו הארנבים הם זמינים, ריאלי וזולה. במחקר הקודם שלנו, השווינו את שיעור התמותה ואת שיעור ההידבקות ארנבים עם משקולו.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים מדווחים שאין ניגודי אינטרסים בעבודה זו.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי את נבחרת מדעי הטבע קרן של סין (81803808, 81873062), ג'ג'יאנג המחוז רפואי, מדע הבריאות בטכנולוגיית קרן (2017KY271) ו המדע ואת הטכנולוגיה פרוייקט של בפרובינצית ג'ה-ג'יאנג (2017C 37181).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| תפר כירורגי נספג | Jinghuan | 18S0604A | |
| מזרק אספסיס | Jinglong | 20170501 | |
| שעוות עצם | ETHICON | JH5CQLM | |
| CCD מצלמה | אולימפוס | DP72 | |
| EDTA-K2 כלי דם נוגד קרישה | XINGE | 20170802 | |
| יחידת מקדחת עצם חשמלית | באו קאנג | BKZ-1 | |
| מכונת גילוח חשמלית | Codos | 3800 | |
| תבנית ג'ל סיליקה גמישה | של WRIGHT | 1527745 | |
| Hematoxylin ו-Eosin | Beyotime | 20170523 | |
| מדיום תרבית לוריא-ברטאני | Baisi Biothchnology | 20170306 | |
| סידן גופרתי בדרגה רפואית | WRIGHT | 1527745 | |
| טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT) | Bruker | SkyScan 1172 | |
| מיקרוסקופ | אולימפוס | CX41 | |
| ניו זילנד ארנבים לבנים | ג'ג'יאנג מרכז בעלי חיים ניסיוניים | SCXK 2014-0047 | |
| אזמל מס' 11 | Yuanlikang 20170604 | ||
| תמיסת מלח רגילה | Mingsheng | 20170903 | |
| PBS | TBD (Jingyi) | 20170703-0592 | |
| פנטוברביטל נתרן | מרק | 2070124 | |
| תמיסת פובידון-יוד | Lierkang | 20170114 | |
| S. aureus אבקת ייבוש בהקפאה | סין מיקרוביולוגית כללית מרכז איסוף תרבות | ATCC 6538 | |
| אגר דם כבשים | HuanKai מיקרוביאלי | 3103210 | |
| צלחות אגר סויה טריפטיות | HuanKai צינורות | ||
| טריפטי | HuanKai Microbial | 3104260 | |
| Vancomycin | Lilly | C599180 |
מקורות
- Malizos, K. N. Global Forum: The Burden of Bone and Joint Infection: A Growing Demand for More Resources. Journal of Bone and Joint Surgery-American Volume. 99, 20(2017).
- Peeters, O.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
