Method Article

Bioindication בדיקות של התאמת הסביבה זרם עבור צעירים מים מתוקים פנינה מולים בשיטות בחשיפה באתרו

DOI:

10.3791/57446

⸱

September 5th, 2018

 ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Environmental Sciences, Czech University of Life Sciences Prague, 2T. G. Masaryk Water Research Institute, 3Department of Zoology and Fisheries, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בחיי עיר bioindications מאפשרות קביעת ההתאמה של סביבת מאסל בסכנת הכחדה מינים. אנו מתארים שתי שיטות בהתבסס על החשיפה לנוער של צדפות פנינים מים מתוקים בתוך כלובים אל נהר oligotrophic בתי גידול. שתי השיטות מיושמות משתנים עבור מים פתוחים וסביבות מים hyporheic.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ידיעת בית גידול התאמתם מולים מים מתוקים היא צעד חשוב בשימור של הקבוצה בסכנת הכחדה. נתאר פרוטוקול לביצוע בחיי עיר ילדותי חשיפה בדיקות בתוך נהר oligotrophic catchments על פני תקופות חודש אחד, שלושה חודשים. שתי שיטות (ב שני שינויים) מוצגים כדי להעריך את קצב הגדילה וההישרדות לנוער. השיטות ואת השינויים נבדלים ערך bioindication המקומיות, לכל אחד יש את היתרונות שלה, כמו גם מגבלות. השיטה כלוב החולי עובדת עם קבוצה גדולה של אנשים, אבל רק בחלק של האנשים נמדדים, התוצאות מוערכות בצובר. השיטה כלוב רשת, האנשים הם כל הזמן נמדד בנפרד, אך בודדים במספר נמוך מוערך. השינוי חשיפה מים פתוחים יחסית קל ליישם; זה פוטנציאל הגידול לנוער של אתרים, יכול להיות גם יעיל לבדיקת רעילות מים. השינוי חשיפה בתוך המיטה צריך עומס עבודה גבוה אבל קרוב יותר לתנאי סביבה טבעית לנוער, עדיף על דיווח אמיתי והתאמתו יישובים. מצד שני, שכפולי יותר יש צורך בשינוי זה עקב השתנות הסביבה שלה גבוהה-hyporheic.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

החשיפה של אורגניזמים ניסיוני בחיי עיר עם הערכת מצבם לאחר מכן היא דרך אפשרית. אחת כדי לקבל מידע על איכות הסביבה ועל (במיוחד) את התאמת האתר עבור זן. בתוך בעלי חיים, כגון bioindication ישימה בעיקר עבור חסרי חוליות קטנים אשר מסוגלים לחיות בחלל חסומה מוגבלת. שלבים צעירים של צדפות (צדפות) הם אחד כזה מתאים האורגניזם קבוצה1.

צדפות של משפחת Unionidae הם מרכיב חשוב מאוד של המערכת האקולוגית הימית2. עם זאת, מינים אלה לעיתים קרובות אנושות בסכנה, בפרט נחלים ונהרות. חלקם מאופיינים כמו 'מינים מטריה' שימור אשר קשורה קשר הדוק שימור ביוטופ זרם שלם, המחייבות מקיפה לגשת3. בעלי חיים אלה יש מחזור חיים הקשורים רכיבים רבים סביבה, מים כימיה4,5 שינויים באוכלוסיות של דגים אשר לשמש מאסל הזחלים מארחים6. כי קטינים מאסל מייצגים לעיתים קרובות שלב קריטי של מחזור חיי מאסל, התאמת האתר לפיתוח שלהם בשלב זה הוא קריטי עבור התפתחות האוכלוסייה מינים מוצלחים ביישוב.

גברת פנינים מים מתוקים (FWPM, Margaritifera margaritifera; Unionida, צדפות) הוא של ביואלו בסכנת הכחדה חמורה המתרחשים oligotrophic נחלים אירופי. המספרים שלהם ירדו באופן דרסטי ה-20המאה ה לאורך אזור התרחשות . נראה כי הירידה הנוכחית של הרבייה ברוב המכריע של אוכלוסיות האירופי המרכזי נגרמת בעיקר על ידי נמוך מאוד להישרדות אפס בני נוער במהלך השנים הראשונות של החיים שלהם. ההנחה היא כי FWPMs לנוער לחיות שנים רבות hyporheic רדוד אזור7, מהם התנאים ולשינויים שלהם מתוארים עדיין לא טוב. יתר על כן, עד השנה השנייה של החיים, קטינים יש רק מימד של עד 1 מ מ, ולכן הם מאוד קשה למצוא בכמויות גדולות של משקעים תחת תנאים טבעיים8. לכן, ניסויים עם קטינים בשבי נחוצים לחקר האקולוגיה שלהם.

בתוך הצ'כית תוכנית הפעולה מים מתוקים מאסל פנינה9, ישנם אלפי בני נוער עולה בכל שנה מתוך תוכנית גידול טבעי למחצה. עם זאת, ישנה שאלה אשר יישובים, בתי גידול מתאימים עבור האוכלוסייה מוצלחת תמיכה על ידי קטינים אלה או מינים בסופו של דבר השבת בעלי חיים לטבע. בחיי עיר bioindications מציגים דרך למצוא את התשובה.

למרות העובדה כי שיעורי ההישרדות לא עקבי של מולים לנוער בכלובים חשיפה נצפתה כמה עבודות קודמות שחקר את ההתאמה של מולים לנוער bioindicators10, מחקרים שנעשו לאחרונה מספר אישרו הישימות של שיטות חשיפה לקטינים איכות המים בדיקות11,12,13. בנוסף, זה הוכח כי כמה גורמים צריך להיחשב כאשר לפרש את התוצאות של מחקרים אלה מסוים, כגון מניות מקור14 והשפעת שמירת תנאים זחל15.

עולה השאלה כיצד להתקין נוער ניסיוני ביישובים שנבדקו וכיצד להעריך את מצבם בצורה היעילה ביותר. היישום הקפדני הראשון ב באתרו שיטות חשיפה עם FWPMs נעורים בהוצאת Buddensiek16. לנוער FWPM אנשים הוחזקו בכלובים גיליון, חשוף במים זורמים זרמי, הישרדות והצמיחה שלהם היו לכמת לאחר מספר שבועות של חשיפה. הגישה פותחה במקור כשיטה הרבייה חצי-מלאכותי, אך המחבר גם הדגיש את תחולתן להערכה של דרישות הגידול ואיכות המים. למרות ההישרדות לנוער FWPM נמוכה באופן טבעי מאוד בסולם של חודשים/שנים, רק מספר קטן מאוד של בעלי חיים ישרדו, שיעור ההישרדות יכול להיות סמן טוב של אפקט סביבתי בקנה מידה של שבועות מספר16. במהלך שנים של מחקר, פותחו שיטות חשיפה יותר להחזיק ניסיוני מאסל לנוער ב- stream בתי גידול, כדי להעריך את שיעורי הצמיחה והישרדות שלהן; אלה כוללות תיבות החולי17, ממגורות מאסל המבוסס על עיקרון של עליית מי העומק18ושונים אחרים חשיפה הכלובים (מסוכם על ידי מסטיק ועמיתיו)11. כי קטינים להתרחש באופן טבעי ב אזור רדוד hyporheic7, היישום של התקנים ניסיוני בתוך הנחל התחתון רצוי מאוד.

במאמר שלנו, אנו מתארים את השימוש שני התקנים חשיפה עבור FWPMs: אני) שונה Buddensiek גיליון הכלובים ("כלובי רשת") גם הפיכת בדיקות בתנאים hyporheal; bioindication ו- ii) החולי Hruška תיבות ("כלובים החולי"). הפרוטוקול מתאר את היישום של שתי השיטות בתנאים פתוח מים ו- hyporheic (כלומר, ארבע גרסאות של חשיפה מתוארים). בהדרגה, השיטות היו ששינה ו מורחבת במשך יותר מ 15 שנים של יישום בתוך תכנית הפעולה הצ'כית מים מתוקים מאסל פנינה9 , מאומת על ידי קבוצה של ניסויים.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. כלוב רשת

הערה: ראה איור 1.

  1. להכין חומר
    1. להכין את החומר עבור החלק במעבדה של הניסוי: ~ 1-2 L של נהר מים לכל-כלוב רשת, כלובי רשת (1 גוף פלסטיק הראשי, כיסוי פלסטיק 2, 2 גיליונות של הנפות טכני מיוחד עם נקבוביות מיקרומטר 340, 4 ברגים ואומים 4 לכל כלוב), צבת , נודניק, פיפטות פסטר, מסננת, מצלמה דיגיטלית, של trinocular לנתח זום סטריאו מיקרוסקופ, רשת הכיול (מיקרוסקופ ציוד), 5 צלחות פטרי בקוטר 50 מ מ, ספלים, 2 מנות פלסטיק (~ 25 ס"מ על 15 ס"מ x 3 - 5 ס מ), ואת קופסת פלסטיק.
    2. כדי לבצע את ההתקנה hyporheal, להכין צינור גומי, רשת 100-מיקרומטר-נקבובית, ובקבוק מים. לבנייה של ההתקן, ראה 1 הקבצים המשלימים: S.1. רשת כלובים הבנייה.
  2. להרכיב את התחתון ואת חלק מרכזי הכלובים רשת. להרכיב את החלק של הכלוב שמחזיק את האנשים. הוספת כריכה פלסטיק קודם, גיליון אחד של הפלסטיק ניפוי, ואז סוף סוף הראשי גוף עליון. השתמש ארבעה ברגים לאבטח אותו.
  3. הכנת חומר ביולוגי
    1. מכניסים את כלוב רשת המנה פלסטיק המכיל מי הנהר. ודא כי התאים הינם חצי מלאה. . קח את נוער FWPM (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.6. חומר ביולוגי) מהקופסה בידודי תרמית ולהניח אותם צלחת פטרי.
      הערה: ודא כי שינויי טמפרטורה פתאומי תחרוג ~ 2 ° C.
    2. באמצעות בקבוק מים מסננת, לנפות נוער כדי לנקות את הפסולת.
  4. להגדיר את המיקרוסקופ והמצלמה. לבצע כיול של המכשירים (ראה File1 משלים: ס' 5. מיקרוסקופ ו- phototechnics). מניחים צלחת פטרי המכילות מעט מים מתחת למיקרוסקופ.
  5. מכניסים את נוער הכלובים (עבודת מעבדה ניסויית)
    1. השתמש פיפטה של פסטר להסיר אדם אחד צלחת פטרי ולמקם אותו בקפידה בצלוחית הפטרי מתחת למיקרוסקופ.
    2. בדוק הכושר של הפרט על ידי להסתכל לתוך העינית (~ 40 X הגדלה).
      הערה: כושר "טוב" מרמזת כי הפרט נע, סיבוב מצד לצד, ודוחף הרגל החוצה מעטפת, וכו ' להסיר את כושר נמוך או אנשים עם פסטר פיפטה ולמקם אותם בצלוחית נפרדת (FWPM כאן קטינים נפתח מעטפת, אין תנועה, כף הרגל הוא לא שלף, פגז מפוצלים, בני נוער אשר לצוף ללא שליטה במים, פירוק גלוי של המעטפת, decalcification חלקית).
    3. קח שתי תמונות של FWPM הפרט מציג כושר טוב באמצעות של הגדלה מתמדת של ~ 80 X. לראות קובץ משלים 1: S.5. מיקרוסקופ, phototechnics. שמור את התמונות.
      הערה: עבור יחידת מידה טובה אורכו, לנוער צריכות להיות. מונחות לאורכו (תצוגה לרוחב). המטרה העיקרית היא לקחת תמונה באיכות גבוהה של האורך המרבי של מעטפת מספיק טוב לאפשר ניתוח התמונות לאחר מכן.
    4. הכנס את לנוער אל החדר המתאים בכלוב ברגע התמונות נלקחים. רשום את המספרים של התמונות, את התא.
    5. חזור על שלב זה עם כל יחיד עבור כל התאים בשימוש בכלוב רשת.
      הערה: ראה 1 הקבצים המשלימים: S.1. רשת כלובים הבנייה.
    6. ברגע כל התאים בשימוש מולים פנינה, לשים מסננת פלסטיק בכלוב ואז בעדינות לשים מכסה פלסטיק, לאבטח את כל החלקים יחד עם האגוזים.
    7. במקרה של התקנה לאזור hyporheic, לעבור באחד הקצוות צינור דרך באחד התאים, לתקן אותה במצב הזה, ואז לקחת את רשת השינוי אנטי clogging לאגד אותו בקצה התחתון (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.1. רשת כלובים בנייה).
  6. חנות קטינים
    1. לשים את. הכלוב לתוך תיבת פלסטיק עם המים בנהר, כך נוער שקועים לחלוטין, והוא לשמור על thermobox. לפני ההתקנה, תן את קטינים להסתגל בחיי עיר הנהר טמפרטורת המים במקום של ההתקנה (מקסימום קירור, הדרגתית 5 ° C ב- 24 שעות).
  7. התקנת רשת כלובים
    1. הכנת החומר השדה כולל את הכלובים רשת עם קטינים, קוצים פלדה, בריחים, אגוזים מתכת, נודניק, שדה אוגרי נתוני טמפרטורה (ראה טבלה של חומרים ו- 1 הקבצים המשלימים: S.4.2. מים מדידה), של מחרוזת, מצלמה, פרוטוקול שדה, פטיש, ו ספייד.
    2. להעביר את בעונשי FWPM באתר thermobox שדה (תיבת מבודד), שמירה על טמפרטורה יציבה מים עם וריאציות < ~ 2 ° C. מכניסים את thermobox עם הכלובים רשת הנהר באתר כדי לאפשר את קטינים להסתגל לתנאי הסביבה המקומית (pH, מוליכות, וכו ').
    3. התקן את כלוב רשת.
      1. הסר את כלוב רשת thermobox שדה. לספק לו שני קוצים פלדה והדקו את אוגר נתונים בשדה. לעגן את הכלוב לתוך גידול עם מצבים אופייניים עבור FWPMs באזור המחקר (למשל, בקצה הזרם העיקרי זרם, לא בזרימת מים ישירה, לא בתוך מים עומדים, לא באור שמש ישיר).
        1. עבור מים פתוחים, באמצעות זוג הקוצים פלדה, לתקן את הכלוב בתחתית הנהר; קדימה, הצד שלו ורמת עם הנהר, מטה בזווית של 45 מעלות זרימת הנהר, לכיוון המרכז של הנהר. הקצה האופקי התחתון צריך להיות בערך 10-15 ס מ מעל פני השטח התחתון של הנהר. לשמור על מרחק מינימלי של 2 מ' בין כל הכלוב-ממקום אחד (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.4. כלובים תחזוקה).
        2. עבור אזור hyporheic, לחפור את הכלובים לתוך הנהר בעמדה נוף בניצב, בניצב זרם המים, כך הקצה אופקי העליון של הכלוב, הוא מקביל מהמשטח התחתון נהר ולא התאים ממוקמים hyporheic עומק צריך להיבדק. להוציא את החלק העליון של הצינור גומי מעל פני השטח התחתון לאפשרות של מי שופכין במהלך הניסוי (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.4.2. מים מדידה).
          הערה: מומלץ לבצע בדיקות סדירות ותחזוקה על הכלובים (ראה 1 הקבצים המשלימים: ס' 4. כלובים תחזוקה).
  8. להסיר את הכלובים ולהעביר את נוער לאחר החשיפה. בשביל זה, להוציא את הכלובים מהמים, לנקות אותם של משקעים בסדר גם כן החל חומר נסחף עם הזרם ולשים אותם לתוך thermobox שדה מלא במי הנהר. להעביר את הכלובים מיד למעבדה ולהתחיל הערכת שיעור התמותה וצמיחה.
    הערה: ראה קובץ משלים 1: S.3. משך החשיפה. במקרה של שינוי טמפרטורה של יותר מ 5 ° C בין הכלובים לסביבה מעבדה, זה הכרחי הראשונה כדי לאפשר את הטמפרטורה להשוות.
  9. להעריך את הניסוי על-ידי בדיקת הכושר/החיים של כל לנוער (ראה שלבים 1.5.2 ו 1.5.3) לקחת 2 תמונות של כל לנוער בשידור חי בצלחת פטרי באמצעות של הגדלה מתמדת של ~ 80 X. שיא הכושר והמספרים של תמונות, צ'יימברס.
  10. להשלים את הניסוי (משותף על כל אמצעי)
    1. ביצוע המדידות התמונה ניתוח תוכנה. השתמש בתוכנת ניתוח התמונה לקביעת גודל הגוף כל לנוער הערכה על שני הדימויים קלט (שלב 1.5.3) ועל הדימויים פלט (שלב 1.9). שימוש מהאורך המרבי מעטפת הכוללת רשמה בתצלומים שני ערכי גודל הגוף הקלט והפלט.
    2. להוסיף את הערכים נמדד לתוך המעבד טבלה ולחשב צמיחה תוספת (%) בשביל לשרוד את כל ילדותי.
    3. הערכת שיעור ההישרדות (%) לכל כלוב רשת שינוי באמצעות היחס בין מספר האנשים ששרדו ליחידים ניסיוני כל כלוב רשת.
      הערה: לאחר הניסוי, לחזור הניצולים הרבייה לתוכנית
      (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.6. חומר ביולוגי).

2. סנדי הכלוב

הערה: ראה באיור 2.

  1. להכין חומר
    1. להכין את החומר עבור החלק במעבדה של הניסוי: 2 צלחות פטרי (קוטר ~8.5 ס מ), פיפטות פסטר, מסננת, 25 לליטר מים בנהר, קופסת פלסטיק, הנפות (רשת שינוי גודל 1 ו- 2 מ"מ), קופסת פלסטיק גדול (25 L), כלוב החולי (ראה 1 קובץ משלים : S.2. סנדי בכלובים בנייה), מצלמה דיגיטלית, trinocular לנתח זום סטריאו מיקרוסקופ, רשת הכיול (מיקרוסקופ ציוד), מיון חול הנהר מאזור המחקר (ראה שלב 2.1.3), והפרוטוקול. ראה קובץ משלים, הטבלה של חומרים , 1: ס' 2. סנדי בכלובים הבנייה.
    2. להכין את החומר עבור תהליך בידוד: סיבוב מכולות (1 עבור כל הכלוב ועוד 1 נוסף), 2 צלחות פטרי (קוטר ~ 14 ס מ), פיפטה פסטר זכוכית מגדלת, 1 ליטר של מים בנהר.
    3. לנפות את החול הנהר דרך מסננת 2-מ מ, ואז דרך מסננת 1 מ מ כדי לקבל גודל גרגרים של 1-2 מ מ. לייבש את החול ולשמור אותו בצורה יבשה עד הנדרש.
  2. . קח את נוער (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.6. חומר ביולוגי) מתוך thermobox ולהניח אותם צלחת פטרי. באמצעות בקבוק מים מסננת, לנפות נוער כדי לנקות את הפסולת.
  3. להגדיר את המיקרוסקופ והמצלמה (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.5. מיקרוסקופ ו- phototechnics).
  4. להכניס קטינים הכלובים (עבודת מעבדה ניסויית)
    1. למקם את הכלוב החולי בתיבת פלסטיק. פיזור החול ממוינת (ראה שלב 2.1.3) עד כדי שליש הגובה של הכלוב החולי. יוצקים מים לתוך התיבה. ודא כי המשטח חול כ 10 מ מ מתחת למפלס המים. להוסיף את הכלוב החולי לתוך התיבה 25 L מי הנהר ולחשוף אותו לטמפרטורה אותו כמו FWPMs לנוער (ראה 1 הקבצים המשלימים: S.6.2. אחסון של חומר ביולוגי) עבור 12 ח להימנע מכל חשיפה של החול לאור השמש.
    2. קח את צלחת פטרי עם קטינים FWPM מוכן.
    3. בדוק כושר יחידים על-ידי בודקים העיינית של המצלמה (ראה שלב 1.5.2).
    4. לבצע בתיעוד צילומי כדלקמן. תמונה אחת של כל האנשים גילה (ראה שלב 1.5.3) ובחרו 10 אחד מהפרטים הגדולים. לחלופין, לצלם תמונות של קטינים כל יחד עם הגדלה נמוכה (~ 40 X) עבור הערכה בתפזורת ובחרו את האנשים הגדולים 10. להציל את כל התמונות והקלטה של המספרים שלהם.
    5. באמצעות בקבוק מים, להעביר את נוער FWPM לתוך הכלוב החולי מוכן.
  5. חנות קטינים
    1. לשים את הכלוב לתוך תיבת פלסטיק גדול עם נהר מים כך הכלוב הוא שקוע לחלוטין ולשמור אותו ב- thermobox. תן את קטינים להסתגל בחיי עיר הנהר טמפרטורת המים (מקסימום קירור, הדרגתית 5 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ביממה) לפני ההתקנה.
  6. להתקין את הכלובים החולי
    1. להכין את החומר עבור ההתקנה שדה: כלובים החולי, של thermobox ~ 25-L שדה, אבן שטוחה (מינימלי משקל 1 ק ג), רשת (רשת בגודל 10 x 10 מ מ), בקבוק מים, אוגרי נתוני טמפרטורה שדה (ראה טבלה של חומרים ו- 1 הקבצים המשלימים: מדידת מים S.4.2.), בשמו, והפרוטוקול שדה.
    2. מעבירים את הכלובים עם נוער לאתר thermobox שדה, שמירה על טמפרטורה יציבה מים (שינוי ~ 2 ° C). מכניסים את thermobox שדה עם הכלובים החולי הנהר באתר שדה לתת את FWPM קטינים להסתגל לתנאי הסביבה המקומית (pH, מוליכות, וכו ').
    3. התקן את הכלובים החולי לתוך בתי גידול עם מצבים אופייניים עבור FWPMs (למשל, בקצה הזרם העיקרי זרם ב בפיתול לא בזרימת מים ישירה, לא בתוך מים עומדים, לא באור שמש ישיר).
      1. מים פתוחים, הדקו את הכלובים החולי כדי אבן שטוחה באמצעות רשת ומניחים אותו על הנהר. ודא כי הצד גדול יותר של הכלוב יוצרת זווית של 45 מעלות עם הזרם.
      2. עבור Hyporheal, לחפור את הכלובים בתחתית הנהר בניצב זרימת המים כך המכסה את הכלוב היא רמת עם מהמשטח התחתון של הנהר.
        הערה: מומלץ לבצע בדיקות סדירות ותחזוקה על הכלובים (ראה 1 הקבצים המשלימים: ס' 4. 1. אתר בדיקות).
  7. להסיר את הכלובים ונוער תחבורה לאחר חשיפה
    הערה: ראה 1 הקבצים המשלימים: S.3. משך החשיפה.
    1. להוציא את הכלובים מהמים, לנקות אותם חומר נסחף עם הזרם ולשים אותם לתוך thermobox שדה מלא במי הנהר.
    2. להעביר את הכלובים למעבדה ולהתחיל הערכת שיעור התמותה וצמיחה.
      הערה: במקרה של שינוי טמפרטורה של יותר מ 5 ° C בין הכלובים לסביבה מעבדה, יש צורך תנו הטמפרטורות להשוות.
  8. נוער נפרדת FWPM מהחול
    1. להכין מיכל עגול עם עומק מים של 50 מ מ (עבור כל אחד בכלוב בנפרד), מיכל עגול נוסף אחד. להעביר את החול מן הכלוב לתוך המיכל עגול. השתמש תנועה מתערבל לשטוף את החלקיקים בהיר לתוך מכולה נוספת.
    2. לטעום את התוכן מתוך גורם מכיל זה בהדרגה ולחפש קטינים שלב אחר שלב באמצעות פיפטה של פסטר, זכוכית מגדלת. הכניסו את נוער הפטרי באמצעות פיפטה של פסטר. חזור על שלב זה עד לנוער שעבר נמצאה וועוד x 10 לאחר מציאת השלילי הראשון. לאחר כל שלב שטיפה, מוסיפים מים נקיים הנהר אל המיכל המקורי עם חול.
      הערה: במיוחד לאחר הכביסה הראשונה, כמו שצריך לבחון את התוכן ולנקות את זה של באלאסט משקעים בסדר ו alluvia אחרים.
  9. להעריך את הניסוי
    1. בדוק את הכושר של כל לנוער (ראה שלבים 2.4.3 ו- 1.5.2), לספור את מספר הניצולים.
    2. צלם תמונה (ראה שלב 2.4.4.) של כל אדם בנפרד, למרות שפירוש זה אין זהות ברורה של כל יחיד. לחלופין, לצלם תמונות בתפזורת, לבחור תת-קבוצה של אנשים הכי מבוגר 10 התוצאות הסופיות.
      הערה: בשתי אפשרויות יש ערך הדיווח דומה. אפשרות 1 יש מגבלה של עומס עבודה גבוה יותר, אך גם היתרון של ההגדלה צילום הגבוהה, דיוק וכך גם רב יותר.
  10. להשלים את הניסוי
    1. ביצוע מדידות התמונה ניתוח תוכנה. להשלים את הניסוי כפי שנעשה את כלובי רשת (ראה שלב 1.10) עם החריגה הבאה: לא להעריך את קצב הצמיחה (%) של כל לנוער אבל להעריך את הקבוצה בכללותה כלוב חולי לניסוי.
      הערה: לאחר הניסוי, הניצולים יש להחזיר את תוכנית רבייה
      (ראה S.6.1 הקבצים המשלימים. Selection של חומר ביולוגי).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השיטות bioindication ארבע (מים פתוחים החולי הכלובים, בתוך מיטות כלובים החולי לפתוח כלובי רשת מים, כלובי רשת בתוך המיטה) הוחלו לחקור את התאמת תנאי הסביבה עבור FWPMs ב העליון (vltava) באגן הנהר (יער בוהמיה, צ'כית הרפובליקה). הנהר הזה מייצג ממקום אחד של משקעי FWPM בתוך אירופה המרכזית19. כאן, אנו מציגים ערכה שנבחרו במיוחד של תוצאות הממחישות את ההיבטים החשובים ביותר של ארבע שיטות. פרטים נוספים מתוארים מחקר מקיף על ידי Černá et al. 13.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

זמן חשיפה:

אפילו חודש חשף רשת כלובים הצג גידול הגלויים משקפים הבדלים בין יישובים (איור 3), ולכן הם מאוד שמיש עבור גילוי מהיר וקל של אפיון במדינתך. למרות זאת, הרלוונטיות של התוצאות תלוי המדינה לטווח קצר של התנאים, אשר יכול נעים. בפרט, אירועי גשם קצר יכול לשחק תפקיד. לעומת זאת, לא צפויים אירועי זיהום לא תמיד ניתן להקליט. ביישוב V (איור 4A), בדיקות כימיה מים זיהה גל קצר של עלייה חזקה אמוניום13. זה היה כנראה אחראי על ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bílý מיכל וסיימון עמ' Ondřej נתמכו על ידי מענקים של הצ'כית האוניברסיטה של החיים המדע [פנימי גרנט סוכנות של הפקולטה למדעי הסביבה, CULS פראג (3175 1312 42110 (20164236))]. תמיכה עבור צ ' רלי הגר הגיעה קרן המדע הצ'כית (13-05872S). נתונים על bioindication ועל המופע הנוכחי של מולים פנינה שנאספו במהלך היישום של תכנית הפעולה הצ'כית עבור מים מתוקים מולים פרל המנוהל על-ידי הסוכנות שימור הטבע של הרפובליקה הצ'כית, אשר ממומן על ידי הממשלה של הרפובליקה הצ'כית והוא זמין

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
<חזק>תחזוקה וטיפול בחומרים ביולוגיים
מולים פנינים במים מתוקיםכלNAמתוכנית גידול FWPM
קופסאות פלסטיקכלNA
thermoboxMERCI212,070,600,030ישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
תרמובוקס שדה (ca25 l)כלקופסה קרה NA (קופסה מבודדת) המשמשת בדרך כלל להובלת מזון
מי נהרכלNA
Petriכל
עם נורת בלון (טפטפות)כלקוטר חור NA 1 מ"מ
מי חמצןכל
(כ 50 ליטר) למי נהרכלמסננת
כלNAבשימוש נפוץ בבניית
כלובי מטבח <חזקים > רשת < / חזק >
גופי פלסטיק עיקרייםכלNA
plactic מכסהכלמסננות
340 ומיקרו; ממשי & פרוגרסUHELON 20 T
מסננות טכניות מיוחדות 100 ומיקרו; ממשי & פרוגרסUHELON 67 M
צינור גומי (קוטר 5.5 מ"מ)כל
כל
כלNA
כל
כל
כל
כל
כלי פלסטיק NA (כ-25x15x3-5 ס"מ)כלשפריץ NA
כל
כל
כל
כל
כלNA
כלNA
<בנייה ושימוש בכלובים חוליים חזקים>
1 מ"מכלמסננת NA
2 מ"מכלמסננות
340 ומיקרו; ממשי & קופסאות פלסטיק פרוגרסיבUHELON 20 T
עם מכסה הדוקכלNA
חם נמסכל
(כ 250 x 150 x 100 ס"מ)
קופסת פלסטיק גדולה (כ 25 ליטר)כלאבן
כלNA
נטוכלNA
חול נהרכלמיכלים
כלמשקפי
קרסוןקרסון CP 60יש הרבה אפשרויות. זוהי דוגמה אחת בלבד
להתקנה ותחזוקה של כלובים <חזקים>חזקים>
נתוני טמפרטורת שדהחזק ONSETUA-001-64http://www.onsetcomp.com/products/data-loggers/ua-001-64
מברשת שינייםNA
ניתוח משולש זום סטריאו מיקרוסקופברסר אופטיICD 10x-160xישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
מצלמה דיגיטלית/ עינית אלקטרוניתBresser opticMikroCamLab 5Mישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
חגורת כיולAm Scopeמק"ט: MR100ישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
מקור כוח חיצוני עם שני מדריכי אור מטלטליםארסנלK1309010150021ישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
תוכנת תמונהתוכנתישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
מעבד טבלאותMS excelישנן אפשרויות רבות. זו דוגמה אחת בלבד.
צעירים כלי פיפטות פסטר מפלסטיק NA מיכל פלסטיק NA תה מפלסטיק NA טכניות מיוחדות NA ברגי פלדה NA אגוזי פלדה NA מפתח ברגים קוצים מפלדת NA צבת NA כוסות NA בקבוק פרוטוקולי שדה NA נייר מכתבים NA מיכל פלסטיק NA מחרוזת NA פטיש מסננת חזקה טכניות מיוחדות NA דבק קופסת פלסטיק NA שטוחה NA עגולים NA מגדלת NA כל כל הערכת ניסוי NA<חזק> ImageJ

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Goldberg, E. D. The mussel watch-a first step in global marine monitoring. Marine Pollution Bulletin. 6 (7), 111-114 (1975).
  2. Vaughn, C. C. Ecosystem services provided by freshwater mussels. Hydrobiologia. , In Press (2017).
  3. Lopes-Lima, M., et al. Conservation status of freshwater mussels in Europe: state of the art and future challenges. Biological Reviews. 92 (1), 572-607 (2017).
  4. Strayer, D. L., Malcom, H. M. Causes of recruitment failure in freshwater mussel populations in southeastern New York. Ecological Applications. 22 (6), 1780-1790 (2012).
  5. Douda, K. Effects of nitrate nitrogen pollution on Central European unionid bivalves revealed by distributional data and acute toxicity testing. Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems. 20 (2), 189-197 (2010).
  6. Modesto, V., et al. Fish and mussels: importance of fish for freshwater mussel conservation. Fish and Fisheries. , In Press (2017).
  7. Ecology and evolution of the freshwater mussels Unionoida. Bauer, G., Wächtler, K. 145, Ecological Studies. 1-394 (2001).
  8. Neves, R. J., Widlak, J. C. Habitat ecology of juvenile fresh-water mussels (Bivalvia, Unionidae) in a headwater stream in Virginia. American Malacological Bulletin. 5, 1-7 (1987).
  9. Švanyga, J., Simon, O. P., Mináriková, T., Spisar, O., Bílý, M. Záchranný program pro perlorodku říční v ČR (Action plan for the endangered freshwater pearl mussel in the Czech Republic). , NCA CR. Prague, Czech Republic. (2013).
  10. Schmidt, C., Vandré, R. Ten years of experience in the rearing of young freshwater pearl mussels (Margaritifera margaritifera). Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems. 20 (7), 735-747 (2010).
  11. Gum, B., Lange, M., Geist, J. A critical reflection on the success of rearing and culturing juvenile freshwater mussels with a focus on the endangered freshwater pearl mussel (Margaritifera margaritifera L.). Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems. 21 (7), 743-751 (2011).
  12. Denic, M., Taeubert, J. E., Lange, M., Thielen, F., Scheder, C., Gumpinger, C., Geist, J. Influence of stock origin and environmental conditions on the survival and growth of juvenile freshwater pearl mussels (Margaritifera margaritifera) in a cross-exposure experiment. Limnologica. 50, 67-74 (2015).
  13. Černá, M., Simon, O. P., Bílý, M., Douda, K., Dort, B., Galová, M., Volfová, M. Within-river variation in growth and survival of juvenile freshwater pearl mussels assessed by in situ exposure methods. Hydrobiologia. , In Press (2017).
  14. Denic, M., Taeubert, J. E. Trophic relationships between the larvae of two freshwater mussels and their fish hosts. Invertebrate Biology. 134 (2), 129-135 (2015).
  15. Douda, K. Host-dependent vitality of juvenile freshwater mussels: implications for breeding programs and host evaluation. Aquaculture. 445, 5-10 (2015).
  16. Buddensiek, V. The culture of juvenile freshwater pearl mussels Margaritifera margaritifera L. in cages: a contribution to conservation programmes and the knowledge of habitat requirements. Biological Conservation. 74 (1), 33-40 (1995).
  17. Hruška, J. Experience of semi-natural breeding program of freshwater pearl mussel in the Czech Republic. Die Flussperlmuschel in Europa: Bestandssituation und Schutzmaßnahmen. , Albert-Ludwigs Universität: Freiburg. Kongressband. WWA Hof 69-75 (2001).
  18. Barnhart, M. C. Buckets of muckets: a compact system for rearing juvenile freshwater mussels. Aquaculture. 254 (1), 227-233 (2006).
  19. Simon, O. P., Vaníčková, I., Bílý, M., Douda, K., Patzenhauerová, H., Hruška, J., Peltánová, A. The status of freshwater pearl mussel in the Czech Republic: several successfully rejuvenated populations but the absence of natural reproduction. Limnologica. 50, 11-20 (2015).
  20. R Core Team. A language and environment for statistical computing. , R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria. Available from: https://www.r-project.org/ (2013).
  21. Hastie, L. C., Yang, M. R. Conservation of the freshwater pearl mussel I: captive breeding techniques. 2, Natural England. Peterborough, UK. Conserving Natura 2000 Rivers Conservation Techniques Series No. 2 (2003).
  22. Hruška, J. Nahrungsansprüche der Flußperlmuschel und deren halbnatürliche Aufzucht in der Tschechischen Republik. Heldia. 4 (6), 69-79 (1999).
  23. Scheder, C., Lerchegger, B., Jung, M., Csar, D., Gumpinger, C. Practical experience in the rearing of freshwater pearl mussels (Margaritifera margaritifera): advantages of a work-saving infection approach, survival, and growth of early life stages. Hydrobiologia. 735 (1), 203-212 (2014).
  24. Braun, A., Auerswald, K., Geist, J. Drivers and spatio-temporal extent of hyporheic patch variation: implications for sampling. PLoS ONE. 7 (7), e42046(2012).
  25. Franken, R. J. M., Storey, R. G., Williams, D. D. Biological, chemical and physical characteristics of downwelling and upwelling zones in the hyporheic zone of a north-temperate stream. Hydrobiologia. , 183-195 (2001).
  26. Roley, S. S., Tank, J. L. Pore water physicochemical constraints on the endangered clubshell mussel (Pleurobema clava). Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 73 (12), 1712-1722 (2016).
  27. Larson, J. H., Eckert, N. L., Bartsch, M. R. Intrinsic variability in shell and soft tissue growth of the freshwater mussel Lampsilis siliquoidea. PLoS ONE. 9 (11), e112252(2014).
  28. Lavictoire, L., Moorkens, E., Ramsey, A. D., Sinclair, W., Sweeting, R. A. Effects of substrate size and cleaning regime on growth and survival of captive-bred juvenile freshwater pearl mussels, Margaritifera (Linnaeus, 1758). Hydrobiologia. 766 (1), 89-102 (2015).
  29. Hruška, J. Experience of semi-natural breeding programme of freshwater pearl mussel in the Czech Republic. Die Flussperlmuschel in Europa: Bestandssituation und Schutzmassnahmen. , 69-75 (2000).
  30. Bayne, B. L. Physiological components of growth differences between individual oysters (Crassostrea gigas) and a comparison with Saccostrea commercialis. Physiological and Biochemical Zoology. 72 (6), 705-713 (1999).
  31. Tamayo, D., Azpeitia, K., Markaide, P., Navarro, E., Ibarrola, I. Food regime modulates physiological processes underlying size differentiation in juvenile intertidal mussels Mytilus galloprovincialis. Marine Biology. 163 (6), (2016).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Freshwater Pearl MusselsIn Situ ExposureJuvenile GrowthSurvival RateSandy Cage MethodMesh Cage MethodHyporheic ZoneOpen Water ExposureWithin Bed ExposureRiver Bottom Installation

Related Articles