Method Article

מודל לולאת המעי מחוברים בעופות חינם ומורדמת פתוגן מסוים ללמוד החיידק Clostridium התקפה אלימה

DOI:

10.3791/57523

⸱

October 11th, 2018

 ,  ,  , 
1Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Université de Montréal, 2University of Bristol

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן אנו מציגים פרוטוקול ליצירת בניתוח 'לולאות מעיים מחוברים' בהמעי הדק עוף. הליך זה מאפשר ההשוואה של מספר זנים של החיידק Clostridium התקפה אלימה בחיי עיר שורה בודדת. שיטה זו פוחתת במידה ניכרת את מספר התרנגולות ההכרחיות בדרך כלל לצורך ניסויים דומים ויוו .

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת מעיים נמק נחקרה תרנגולות באמצעות ויוו זיהום מודלים שונים. רוב אלה להשתמש בשילוב של גורמים נטייה, כגון כגון ותזונה, עם gavage או באמצעות ההזנה באמצעות החיידק Clostridium. דגמים אלה, השוואת מספר זני החיידק ללימודי התקפה אלימה דורש מספר רב של מחשבים מארחים עד להשגת תוצאות משמעותיות. התמותה במהלך המחקר יכול להיות גבוה בהתאם לדגם ניסיוני, ומכאן העלאת חששות אתיים בנוגע רווחת בעלי חיים במחקר. הפיתוח של הדגמים החדשים של זיהום, הדורשים פחות חיות ללמוד פתוגנזה, טרם מתן תוצאות משמעותיות מבחינה סטטיסטית וחוקית, חשוב להפחית את השימוש בבעלי חיים במחקר. לולאת המעי מחוברים מודלים שימשו ללמוד זיהומים clostridial מינים שונים כגון עכברים, ארנבים, עגלים. בעקבות ניתוחים ליצירת לולאה מחוברים מקטעי, זני החיידק הם מוזרק ישירות לתוך לולאות להקים במגע ישיר בין החיידק לבין רירית המעי. דוגמאות המעי הדק ותוכנו luminal נלקחים על הפסקת ההליכים אחרי כמה שעות. מספר זני חיידקים יכולים לקבל חיסון בכל בעל חיים, ומכאן הקטנת מספר הנושאים הנדרשים בניסויים. בנוסף, נהלים מבוצעים בהרדמה כללית כדי להפחית כאב בבעלי חיים. בעופות, מודל זה יהיה מתאים יותר מאשר ניהול דרך הפה כדי להשוות בין החיידק זן פתוגניות כי בעלי חיים פחות נחוצים ללא גורמי predisposing נדרשים כדי לגרום למחלה, כאב נשלטת על ידי משככי כאבים . המודל לולאת המעי מחוברים מתואר בצורה גרועה בעופות, תקינה חיונית עבור השימוש האופטימלי. כתב יד זה מספק את כל הצעדים הדרושים כדי ליצור לולאות מחוברים מעיים רבים בעופות ומביא מידע על נקודות קריטי כדי להשיג תוצאות בתוקף.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השימוש במודלים לחקר מחלות זיהומיות להשפיע על בני האדם ובעלי החיים הוא כלי מרכזי בהערכת הגורמים התקפה אלימה ויסות בפתוגנזה של תנאי ספציפי כמו גם באשר לפרט אסטרטגיות כדי למנוע או לרפא מחלות1. למרות יתרונות רבים לשימוש בבעלי חיים כדי ללמוד מחלות שונות, חופרים אתית חששות לגבי המנהג. חוקרים צריך למזער את השימוש בבעלי חיים בעת השגת תוצאות משמעותיות וחוקית. הרעיון של ר' 3 העקרונות (החלף, הקטן, מקד) היה פירט כדי להבטיח רווחה סוגיות נדונו בניסויים כאלה. במחקרים דלקת מעיים נמק עוף, ויוו עוף מודלים משמשים כדי לחקור את אטיולוגיה, מניעת וטיפולים זה תנאי2,3,4,5. פתוגניים זנים של החיידק נושאת גורמים התקפה אלימה ספציפיים, כגון הרעלן NetB6, מנוהלים כדי לגרום דלקת מעיים נמק של תרנגולות7. העיקרון החלפת הוא, לכן, קשה לתפיסה ולהשגה במקרה כזה כמו אלה הגורמים התקפה אלימה לא יכול להיות קריטי של מיני בעלי חיים אחרים. רוב הדגמים עבור דלקת מעיים נמק בעופות להשתמש בשילוב של גורמי סיכון, כגון כגון ושינינו דיאטה כדי לגרום דלקת מעיים נמק ואחריו gavage של תרבות מרק המכיל מספר גדול של החיידק2. מודלים אלה יגרום למחלה במספר רב של עופות, תמותה יכול להיות חשוב כזה ניסויים8, וליחסיו חששות לגבי העקרונות הפחתת ועידון מחקר בבעלי חיים.

לולאות מעיים מחוברים הן חלופה רצויה לחקר מחלות הנגרמת על ידי פתוגנים במעיים ביחס עיקרון הפחתת ולאחר עידון. מודלים אלה, מקטעי מעיים שנקרא "לולאות" נוצרים על-ידי הצבת ליגטורות לאורך צינור העיכול כדי ליצור תאים עצמאית, הרמטי איפה פתוגנים יכול להיות מוזרק לבד9 או עם מולקולות אחרות, כגון חיסון מועמדים 10 , 11. פתוגנים עניין ממוקמים קשר הדוק עם תאי המעי, אחרי כמה שעות של זמן זיהום, דגימות מעיים ניתן לשחזר לצורך ניתוח נוסף. זה מאפשר את השימוש במספר קבוצות שליטה וטיפול של אותה חיה. ניתן לבצע ניתוח סטטיסטי עם דגמים מידות החוזרות ונשנות, אשר מגדילה את כוחו של אפליה בין קבוצות, מקטין את מספר תרנגולות הכרחי בהשוואה gavage אוראלי ניסויים. כמו כן, ניתוחים ושעות זיהום לאחר מכן מבוצעים תחת הרדמה כללית רציפה, שיכוך כאבים, ומכאן הקטנת הכאב בעלי חיים. לולאה סגורה ligations הם תבנית אידיאלית עבור הפחתת מספרים מארח ויצירת מערכת אנושית יותר מחקר בבעלי חיים.

לולאות מעיים מחוברים מודלים היטיב לתאר במינים שונים, כגון עגלים, שפנים, עכברים2,9, אך גרוע שמתואר תרנגולות7. לשימוש מיטבי של מודל ניתוח זה, טכניקה נכונה וביצוע חיוניים ליצירת מחוברים לולאות מעיים כדי למנוע נזקים את השלמות מעיים. המטרה של כתב יד זה היא לתאר את שיטת צעד אחר צעד ליצירת של מספר לולאות מעיים במודל של עוף. טכניקה זו הוא מוגבל על ידי מיומנותו וניסיונו של המנתח, כמו נהלים מדויקים חיוניים להצלחת הפרויקט.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים עם שימוש בבעלי חיים חיים היו מורשים על-ידי הוועדה האתית של הפקולטה לרפואה וטרינרית, דה מאוניברסיטת מונטריאול (CÉUA, 'Comité d' éthique de l'utilisation des Animaux ").

1. שיקולים לפני הניתוח

  1. בחר בן 10 שבועות פתוגן מסוים חינם (SPF) לגהורן תרנגולות לניתוח.
    הערה: המשקל שלהם חייב להיות בין 1.0 ו- 1.2 ק ג.
  2. למשוך את ההזנה 12 שעות לפני ההליכים כדי לרוקן את המעיים.
  3. לפני הניתוח, מקם את התרנגולות בהרדמה כללית בעקבות פרוטוקול אומתו מרדים. Premedicate עוף כל 15 דקות לפני הניתוח עם זריקה תוך שרירית (IM) של midazolam 1 מ"ג/ק"ג ו- butorphanol 4 מ"ג/ק"ג. אני חוזר, כל 4 שעות, ההזרקה של butorphanol 4 מ"ג/ק"ג IM או כאשר השינויים דפוס הנשימה ותדירות עולה במהלך הרדמה. בהרדמה, במהלך כל ההליכים, לנהל איזופלוריין-ריכוז של בין 1.5 ל- 2.5% עם שפופרת intratracheal.
    הערה: השימוש premedication הרגעה, שיכוך כאבים מומלץ כפי שהם באופן משמעותי לשפר את העומק של הרדמה, להפחית את כמות חומרי הרדמה במהלך כל ההליכים הדרושים, וכן לאפשר לחוקרים לקבוע רמות כאב.
  4. נטר את ההרדמה בהקלטת טמפרטורת הגוף, קצב הלב, רל (א), הנשימה שיעור וקצב, חמצן, שפג תוקפו פחמן דו-חמצני (CO2) ורפלקסים נוירולוגיים.
    הערה: אדם יש להקצות לעקוב אחר פרמטרים אלה לאורך כל ההליכים.
  5. בצע את עקרונות עקרות לאורך כל הניתוחים. ודא כי המנתח ואת המנתח עוזר השמלה עם שמלות סטריליים, כפפות, מסיכה, משקפי מגן על פי פרוטוקולים ממושכות מוסדיים. ודא כי המנתח scrubs הידיים עם chlorhexidine gluconate ספוג מברשת סטרילי עד המרפק עם דגש על ציפורניים, משטח כל אצבע.
  6. לעקר את מכשירי הניתוח עם מעקר.

2. ניתוח האתר הכנה

  1. ראשית, להסיר באופן ידני את הנוצות מהבטן עם המתיחה עדינה.
  2. להשתתף באתר כירורגית במברשת chlorhexidine gluconate דטרגנט ספוג סטרילי. לשפשף בעדינות את העור מן המרכז החוצה במשך זמן ההתקשרות הכולל של 5 דקות מבלי לחזור למרכז.
  3. מבצע 3 קטעים חלופי באתר כירורגית עם chlorhexidine gluconate פתרון, אלכוהול איזופרופיל בעזרת פדים סטריליים.
    הערה: המעבר חייב להתחיל מהאמצע של האתר כירורגית את גבולות כדי למנוע הדבקות של האזורים שאינם נקיים באתר כירורגית.
  4. מניחים את הכיסוי ותאבטחי כירורגי סטרילי על העוף.

3. מיצוי של המעי הדק של חלל הבטן

  1. תחתכי את הכיסוי ותאבטחי כירורגית עם מספריים לחשוף רק את העור של האתר כירורגית.
  2. פצעים וחתכים בעור על ידי ביצוע חתך נמוך-קו האמצע של הצורה ' L ' עם להב סכין #3.
    1. להתחיל את החתך הראשון 1 ס מ סימטרית לעצם החזה, וזהו-גולגולתי כדי קלואקה 1 ס מ
    2. לבצע את החתך השני בניצב החתך הראשון. להתחיל מהסוף סימטרית של החתך הראשוני ולהמשיך 5 ס מ בצד שמאל של הבטן על ידי ביצוע קו האגן.
      הערה: פתיחה זו תיצור דש שתאפשר הוצאה קלה יותר של המעיים.
  3. עם ניתוח מספריים לחתוך את צפק ואת שרירי הבטן עם דפוס זהה לצורה "L" כדי לפתוח את חלל הבטן.
    הערה: זו תחשוף את שקי האוויר. המעיים ממוקמים מתחת מבנים אלה. שקי האוויר חייב להיות humidified עם פדים רווי סטרילי מלוחים 0.85% כדי למנוע לייבוש קרע אפשרי לכל אורך ההליך.
  4. הוספה סנוק לסירוס וו בחלל הבטן על ידי ביצוע לקיר הבטן השמאלית ולעבוד בדרך שקי האוויר בטן.
  5. בעדינות exteriorize המעיים, פרושים אלו על המגרש כירורגי.
    הערה: לשמור על המעיים humidified ע י ריסוס לעתים קרובות סטרילי-saline 0.9% לאורך כל ההליך. כמו כן, פדים humidified עם סליין סטרילי יכול להיות ממוקם על המעיים כדי להימנע לייבוש.
  6. . תפוס את המעיים בעזרת גזה סטרילי יבש ומשוך בעדינות את המעי הדק על ידי גרירה ידנית כדי לחשוף מעי צם.
    הערה: כלי מצע המעי העליון הם שבירים, המתח מופרז יכול לקרוע אותם אשר עשויים להוביל פצעים איסכמיים מעיים, לסכן באופן משמעותי את תוצאת ההליך.

4. ייצור של לולאות מעיים

  1. יצירת לולאה מס ' 1.
    1. מקום חבל פשוט בחומר polyglactin multifilament סינתטי שנספג מעי צם הפרוקסימלית על ידי הימנעות של הקשירה של כלי מצע המעי העליון הגדולות.
    2. מקום חבל דיסטלי 2 ס מ בלבד הקשירה הפרוקסימלית.
      הערה: ליגטורות פשוט עשה עם חומר תפרים multifilament ממוקמים לאורך צינור העיכול כדי ליצור מקטעי הרמטי. סכימה (איור 1) מתאר את המיקום של כל ליגטורות. הלולאות מורכב קשירה לקרע, מופרדים על-ידי 2 ס מ.
  2. יצירה של interloop מס ' 1.
    1. המקום פשוט קשירה 0.5 ס מ aborally ל הקשירה דיסטלי של לולאה מס ' 1.
      הערה: בין לולאות רצופים, יש interloops של 1 ס מ, כלומר קטעים עושה הפרדה פיזית בין הלולאות. סביר להקטין את הסיכון האפשרי של זיהום צולב של לולאה אחת לאחרת, חבל פשוט תמוקם במרכז interloop (0.5 ס מ קשירה הדיסטלי, מקורב של 2 לולאות סמוכים). זו מפחיתה את הסיכון של מזהם דלף אפשרי של לולאה כדי להגיע את הקשירה ללולאה סמוכים. מקטעים אלה אינם חובה אך יקטין את הסיכון של זיהום צולב.
  3. יצירה של לולאות עוקבות, interloops.
    1. חזור על שלבים 4.1 ו- 4.2 כדי להשיג את המספר של לולאות הרצוי.
      הערה: בניסוי זה, לולאות 9, 8 interloops נוצרו. האורך הכולל הסתכם 26 ס מ. ניתן להתאים את מספר לולאות בהתאם המחקר.

5. הזרקה של החיידק Clostridium זנים לתוך לולאות

  1. מזריקים מזרק סטרילי ואת המחט 26 גרם את הפתוגן מספר1 לולאה. הכנס בעדינות את המחט על הצד antimesenteric של המעי בזווית של 45°.
    הערה: בניסוי זה, 0.2 מ של המוח הלב אינפוזיה (BHI) המכיל 1 x 106 CFU (יחידות ויוצרים מושבה) של החיידק בשלב הצמיחה יומן אמצע הוזרק בלולאה כל. 5 זנים שונים הוזרקו בלולאות שונים 5, ה-4 הנותרים לולאות הוזרקו פקד שלילי המכיל אין חיידקים (BHI סטרילי), מתחלפים פתוגנים ולולאות BHI סטרילי.
  2. חזור על שלב 5.1 להזריק כל לולאות.
  3. בעדינות להחליף את מערכת העיכול באזור הגבי של חלל הבטן, מתחת שקי האוויר.

6. סגירת חלל הבטן

  1. התפר של צפק ואת שרירי הבטן.
    1. תפר את צפק ואת שרירי הבטן לאורך האגן (שנעשתה בשלב 3.3) עם דפוס פשוטה בתפר רצוף באמצעות polyglactin multifilament סינתטי שנספג חומר.
    2. תפר של צפק של שרירי הבטן של עצם החזה קלואקה (שנעשתה בשלב 3.3. עם דפוס פשוטה בתפר רצוף באמצעות polyglactin multifilament סינתטי שנספג חומר.
  2. התפר של העור.
    1. שימוש בחומר סינתטי multifilament polyglactin, דפוס פשוטה בתפר רצוף, סגור את החתך של העור לאורך האגן שבוצעו בשלב 3.2.
    2. שימוש באותו חומר קשירה multifilament תבנית פשוטה בתפר רצוף, סגור את החתך של העור של עצם החזה קלואקה שבוצעו בשלב 3.2.

7. לסיכום

  1. לאחר הניתוחים, לשמור את העוף בהרדמה כללית עם שימוש נכון משככי כאבים כדי למזער את חיה בכאב בזמן זיהום. המשך ניטור הרדמה כדי להבטיח רמה נאותה הרדמה.
  2. אחרי הפעם זיהום הרצוי, בצורה הומאנית המתת חסד את העוף על ידי נקע בצוואר הרחם בהרדמה כללית.
    הערה: להליכי אלו, הזמן הנדרש כדי לגרום מיקרוסקופיים נגעים עם זנים פתוגניים החיידק היה 7 שעות.
  3. עם להב סכין #3, חתך של 0.5 ס מ לחלק לולאה ארוכה 1 ס מ ומניחים אותו בפורמלין 10% עבור קיבוע לילה וניתוח נוסף histopathological.
  4. עם הלהב ומהדקים אותו, לחתוך המקטע לולאה הנותר ומניחים אותו בצינור microcentrifuge סטרילי עבור הבידוד של זנים החיידק בניתוח נוסף bacteriologic כל לולאה על אפיון גנטי שלהם.
  5. חזור על שלבים 7.2 ו- 7.3 עבור כל לולאות על-ידי שינוי הלהב האזמל בין כל לולאה.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תיאור סכמטי של לולאות מעיים 9, 8 interloops מוצג באיור1. במודל זה, סך של לולאות 9, 8 interloops נוצרים עם ליגטורות פשוטה. הלולאה מורכבת ליגטורות לקרע, במרווחים קבועים על ידי 2 ס מ נמדד מאמצע הקשירה הפרוקסימלית. שתי לולאות הסמוכים מופרדות interloop של 1 ס מ. כדי להקטין את הסכנה של זיהום צולב בין לולאות על ידי זליגות קשירה, קשירה interloop ממוקם באמצע הדרך מן דיסטלי קשירה קשירה הפרוקסימלית של 2 לולאות סמוכים. ניתן להתאים את מספר לולאות בהתאם לדרישות המחקר.

...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

לולאות מעיים מודלים תוארו במינים רבים ללמוד פתוגן-פונדקאי אינטראקציה, בפתוגנזה של מחלות הנגרמות על ידי פתוגנים מעיים שונות, כגון החיידק Clostridium, Clostridium difficile , סלמונלה enterica7,9,13,14,15. הוא גם שימש כדי לנתח את התגובה החיסונית הרירית16, היעילות של נוגדנים לנטרל רעלים חיידקי מופרש על ידי פתוגנים...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי הכיסא במחקר עופות (Boulianne מ') מן הפקולטה לרפואה וטרינרית של דה מאוניברסיטת מונטריאול. ד"ר Boulianne, האב פיתח את המודל. ד"ר Boulianne, האב לבצע את הניתוחים. ד ר ברנס סייע בפיתוח פרוטוקול הרדמה. ד ר הורה לערוך הוידאו וכתב את כתב היד. Drs ברנס, Desrochers ו- Boulianne לערוך את כתב היד.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
EZ-Scrub 747Becton Dickinson and Company4% מברשת סטרילית ספוגה בחומר ניקוי כלורהקסידין גלוקונאט. אין מספר קטלוגי זמין. כתובת אינטרנט: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes 
איזופרופיל אלכוהול 70% USP 4 ליטראלכוהול איזופרופיל מסחריP016IP70כתובת אינטרנט: http://www.comalc.com/products/
ChlorexidineSigma-Aldrich282227-1Gתמיסת כלורהקסידין גלוקונאט, יש לדלל ל-4%. כתובת אינטרנט: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr®ion=CA&gclid=EAIaIQ
obChMI8vHr4_OY1wIV3rrACh2Z
WQKuEAAYAiAAEgLKx_D_BwE
וילון כירורגי קטן (27 אינץ 'x 24 אינץ ') עם 3 x 6 אינץ 'מוצרים מיוחדים וטרינריים32724כתובת אינטרנט: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog.
detail&productgroup_id=15
להבי אזמל #3Swann-Morton301כתובת אינטרנט: https://www.swann-morton.com/product/16.php
מי מלח סטריליים NaCl 0.9%Sigma-AldrichS8776-100MLכתובת אינטרנט: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr®ion=CA
Vicryl 3-0EthiconD9003חומר תפר נספג מולטיפילמנט פוליגלקטין. כתובת אינטרנט:
מזרק http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture 1 מ"ל עם מחט 26Gבקטון דיקינסון וחברה329652כתובת אינטרנט: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes
Brain Heart InfusionSigma-Aldrich1104930500כתובת אינטרנט: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr®ion=CA&cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1
צינור אפנדורף צינור מיקרוצנטריפוגהסיגמא-אולדריץ'T9661-500EA. כתובת אינטרנט: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr®ion=CA&gclid=EAIaIQ
obChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh
30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE
תמיסת פורמלין, ניטרלית חוצצת, 10%רקמת יחס סיגמא-אולדריץ'HT501128-4L: פורמלין של 1: 10 לקיבוע נאות. כתובת אינטרנט: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr®ion=CA
Clostridium perfringens strainsUniversité de Montré al, Chaire en recherche avicoleN/Aספציפי לכל מעבדה, זמין על פי בקשה למחבר הכתב

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Vitale, A., Chiarotti, F., Alleva, E. The use of animal models in disease research. Rare diseases and orphan drugs. 2 (1), 1-4 (2015).
  2. Uzal, F. A., et al. Animal models to study the pathogenesis of human and animal Clostridium perfringens infections. Veterinary Microbiology. , (2015).
  3. Bernier, G., Phaneuf, J. B., Filion, R. Necrotic enteritis in broiler chickens. III. Study of the factors favoring the multiplication of Clostridium perfringens and the experimental transmission of the disease. Canadian Journal of Comparative Medicine. 41 (1), 112-116 (1977).
  4. Al-Sheikhly, F., Truscott, R. B. The pathology of necrotic enteritis of chickens following infusion of broth cultures of Clostridium perfringens into the duodenum. Avian Diseases. 21 (2), 230-240 (1977).
  5. Wicker, D. L., Iscrigg, W. N., Trammell, J. H. The control and prevention of necrotic enteritis in broilers with zinc bacitracin. Poultry Science. 56 (4), 1229-1231 (1977).
  6. Keyburn, A. L., et al. NetB, a new toxin that is associated with avian necrotic enteritis caused by Clostridium perfringens. PLoS Pathog. 4 (2), e26(2008).
  7. Timbermont, L., et al. Origin of Clostridium perfringens isolates determines the ability to induce necrotic enteritis in broilers. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 32 (6), 503-512 (2009).
  8. Paradis, M. A., et al. Efficacy of avilamycin for the prevention of necrotic enteritis caused by a pathogenic strain of Clostridium perfringens in broiler chickens. Avian Pathol. 45 (3), 365-369 (2016).
  9. Valgaeren, B., et al. Lesion development in a new intestinal loop model indicates the involvement of a shared Clostridium perfringens virulence factor in haemorrhagic enteritis in calves. Journal of Comparative Pathology. 149 (1), 103-112 (2013).
  10. Goossens, E., et al. The C-terminal domain of Clostridium perfringens alpha toxin as a vaccine candidate against bovine necrohemorrhagic enteritis. Vet Res. 47 (1), 52(2016).
  11. Goossens, E., et al. Toxin-neutralizing antibodies protect against Clostridium perfringens-induced necrosis in an intestinal loop model for bovine necrohemorrhagic enteritis. BMC Vet Res. 12 (1), 101(2016).
  12. Parent, E., Archambault, M., Charlebois, A., Bernier-Lachance, J., Boulianne, M. A chicken intestinal ligated loop model to study the virulence of Clostridium perfringens isolates recovered from antibiotic-free chicken flocks. Avian Pathol. 46 (2), 138-149 (2017).
  13. Janvilisri, T., et al. Temporal differential proteomes of Clostridium difficile in the pig ileal-ligated loop model. PLoS One. 7 (9), e45608(2012).
  14. Aabo, S., et al. Development of an in vivo model for study of intestinal invasion by Salmonella enterica in chickens. Infection and Immunity. 68 (12), 7122-7125 (2000).
  15. Meurens, F., et al. Early immune response following Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium infection in porcine jejunal gut loops. Vet Res. 40 (1), 5(2009).
  16. Gerdts, V., et al. Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J Immunol Methods. 256 (1-2), 19-33 (2001).
  17. Wade, B., et al. The adherent abilities of Clostridium perfringens strains are critical for the pathogenesis of avian necrotic enteritis. Vet Microbiol. 197, 53-61 (2016).
  18. Cooper, K. K., et al. Virulence for chickens of Clostridium perfringens isolated from poultry and other sources. Anaerobe. 16 (3), 289-292 (2010).
  19. Cooper, K. K., Songer, J. G. Virulence of Clostridium perfringens in an experimental model of poultry necrotic enteritis. Veterinary Microbiology. 142 (3-4), 323-328 (2010).
  20. Chalmers, G., Bruce, H. L., Toole, D. L., Barnum, D. A., Boerlin, P. Necrotic enteritis potential in a model system using Clostridium perfringens isolated from field outbreaks. Avian Diseases. 51 (4), 834-839 (2007).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Intestinal Ligated LoopClostridium PerfringensChicken Necrotic EnteritisSurgical ProcedureAnesthesia MonitoringBacterial InjectionHistopathological AnalysisVirulence Strain ComparisonSpecific Pathogen FreeIntestinal Mucosa Contact

Related Articles