כאן, נדגים כיצד מבוססי agarose מחקה רקמות פאנטום אופטי נעשות וכיצד התכונות האופטיות שלהם נקבעים באמצעות מערכת אופטית קונבנציונאלי עם כדור שילוב.
Method Article
* These authors contributed equally
כאן, נדגים כיצד מבוססי agarose מחקה רקמות פאנטום אופטי נעשות וכיצד התכונות האופטיות שלהם נקבעים באמצעות מערכת אופטית קונבנציונאלי עם כדור שילוב.
פרוטוקול זה מתאר כיצד להפוך מבוסס agarose פאנטום מחקה רקמות ומדגים כיצד לקבוע את התכונות האופטיות שלהם באמצעות מערכת אופטית קונבנציונאלי עם כדור שילוב. מדידה עבור הרכישה של השתקפות ' מאטום לשקוף ', הכולל להדמיה ספקטרה נבנות עם מקור אור לבן פס רחב, מדריך אור, של עדשה אכרומטית, כדור של שילוב, בעל מדגם, בדיקה עם סיב אופטי, ו- a ספקטרומטר רב ערוצית. עובש אקריליק בהיקף של שתי חתיכות אקריליק מלבניות, חתיכה אקריליק בצורת U הוא נבנה כדי ליצור פנטום באפידרמיס של רוח רפאים עורי עם דם. היישום של נתרן dithionite (Na2S2O4) פתרון הפאנטום עורי מאפשר deoxygenate המוגלובין בתאי דם אדומים מופץ ב הפאנטום עורי. ההופכי סימולציה מונטה קרלו עם השתקפות ' מאטום לשקוף ', הכולל להדמיה ספקטרה נמדדת ספקטרומטר עם כדור שילוב מתבצע כדי לקבוע הקליטה מקדם ספקטרום ממוצע(λ) ו מופחת פיזור מקדם ספקטרום ממוצעs' (λ) של כל אחת מהשכבות פנטום. פנטום דו שכבתי מחקה את השתקפות ' מאטום לשקוף ' של רקמת העור האנושי מומחש גם לערום את הפאנטום עוריות על הפאנטום עורי.
מטוסי פאנטום אופטי אובייקטים מחקה את התכונות האופטיות של רקמות ביולוגיות, היה בשימוש נרחב בתחום אופטיקה ביו. הם מעוצבים כך תואמת התכונות האופטיות, כגון פיזור אור, מקדמי קליטה, עם אלה של רקמות אדם ובבעלי חיים. מטוסי פאנטום אופטי משמשות בדרך כלל למטרות המפורטות להלן: הדמיית התעבורה האור ברקמות ביולוגיות, כיול בעיצוב פיתח מערכת אופטית, להעריך את האיכות והביצועים של המערכות הקיימות, השוואת הביצועים בין מערכות ואימות של היכולת של השיטות אופטי כדי לכמת את התכונות האופטיות1,2,3,4,5. לכן, חומרים קלים להשגה, תהליך ייצור פשוטה, של הפארמצבטית גבוהה ויציבות אופטי של נדרשים לייצור מטוסי פאנטום אופטי.
סוגים שונים של פאנטום אופטי עם חומרי בסיס שונים כגון ההשעיה מימית6, ג'לטין ג'ל7, agarose ג'ל8,9,10, ג'ל לזיהוי11, שרף12, 13,14,15,16, ו- vulcanizing-החדר-הטמפרטורה סיליקון17 דווחו בספרות הקודם. בעבר דווח כי ג'לטין alginate מבוססות ג'לים שימושיים פאנטום אופטי עם מבנים הטרוגנית18. מטוסי פאנטום alginate יש יציבות מכנית וחום מתאימים להערכת photothermal אפקטים כגון מחקרים אבלציה לייזר ו היפרתרמיה מבוססת לייזר מחקרים18. Agarose ג'ל יש היכולת ליצור מבנים הטרוגנית, שלהם המכאניות והפיזיקליות יציבים במשך זמן רב18. טוהר גבוהה agarose ג'לים של עכירות נמוכה מאוד ויש קליטה אופטי חלש. לכן, התכונות האופטיות של פאנטום מבוססי agarose יכול בקלות להיות מתוכנן עם האור המתאימה פיזור וקליטת סוכנים. לאחרונה, styrene-אתילן-butylene-styrene (SEBS) בלוק copolymers19 ו פוליוויניל כלוריד (PVC) ג'לים20 דווחו כחומרי פנטום מעניין עבור אופטי וטכניקות photoacoustic.
פולימר microspheres7,12,21,22, טיטניום אוקסיד אבקת1ו ליפיד אמולסיות23,24,25,26 כגון חלב, ליפיד אמולסיה משמשים כסוכנים פיזור אור, ואילו דיו שחור27,28 ו-29,מולקולרית צבעי30 משמשים בולמי אור. ' מאטום לשקוף ' השתקפות ספקטרום של איברים חיים ביותר נשלטים על ידי קליטת רווית חמצן, המוגלובין בתאי דם אדומים. לכן, המוגלובין פתרונות31,32 ו דם מלא8,9,10,33,36 משמשים לעתים קרובות בתור בולמי אור ב מטוסי פאנטום ספקטרוסקופיה ' מאטום לשקוף ', מולטי ספקטריאליות הדמיה.
השיטה המתוארת במאמר זה משמש ליצור של פנטום אופטי מחקה התעבורה האור ברקמות ביולוגיות לאפיון התכונות האופטיות שלה. כדוגמה, הוא הפגין דו שכבתי אופטי דמה היה שווה התכונות האופטיות של רקמת העור האנושי. היתרונות של שיטה זו על טכניקות חלופיות הם היכולת לייצג ספקטרום ' מאטום לשקוף ' השתקפות של רקמות ביולוגיות חי ב גלוי אורך הגל הקרוב אינפרא אדום באזור, כמו גם את הפשטות להגיע, שימוש זמין בקלות חומרים וכלים אופטיים קונבנציונלי. לכן, הפאנטום אופטי שנעשו על ידי שיטה זו יהיה שימושי עבור פיתוח שיטות אופטי מבוסס על ספקטרוסקופיה ' מאטום לשקוף ' והדמיה מולטי ספקטריאליות.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
1. בניית קונבנציונלי ' מאטום לשקוף ' השתקפות להדמיה הכולל ספקטרוסקופיות מערכת
הערה: לבנות את מערכות מדידה עבור השתקפות ' מאטום לשקוף ' וספקטרה להדמיה הכולל באמצעות מקור אור לבן פס רחב, מדריך אור, של עדשה אכרומטית, בתחום שילוב של, בעל מדגם, של סיב אופטי ספקטרומטר רב ערוצית. התפקיד של המלכודת אור הוא להסיר את הרכיב סימונים השתקפות השתקפות הספקטרום. בעל מדגם לספרה שילוב מורכב צלחת הרכבה ו dovetail הרכבה מלקחיים קפיץ שמכיל המדגם נגד היציאה. Dovetail והרכבה מלקחיים קפיץ יוסרו מן המחזיק לדוגמה, הדום מעוקב בעבודת יד של פוליסטירן מוקצף מחובר לצלחת הרכבה במקום. הפריסות של רכיבים אופטיים, המוצגת באיור 1a ו- 1b, ניתן להפנות עבור הליך הבנייה המדידות ' מאטום לשקוף ' השתקפות ומידות להדמיה הכולל, בהתאמה.
2. הכנה עובש אקריליק
הערה: עובש אקרילי מורכב שתי חתיכות אקריליק מלבניות, חתיכה אקריליק בצורת U הוא נבנה כדי ליצור טפט ג'ל פנטום. איור 2 ניתן להפנות להליך זה בנייה.
3. הכנת חומר הבסיס
4. הכנת העור-מחקה פאנטום אופטי
הערה: פתרון קפה משמש כדי לחקות את ספקטרום הבליעה של מלנין. הפתרון קפה מכיל חום בפיגמנט שנקרא melanoidin. ספקטרום הבליעה של melanoidin דווח להיות דומה לזה של מלנין10.
5. רכישת ספקטרום ' מאטום לשקוף ' השתקפות
6. רכישת הספקטרום להדמיה סה
7. הערכת את הקליטה והמאפיינים אור-פיזור
הערה: ערכה של הקשת ' מאטום לשקוף ' השתקפות הספקטרום להדמיה הכולל נשמרת על הכונן הקשיח של מחשב אישי ואם ניתח באופן לא מקוון. הפוך מונטה קרלו סימולציה8,38,39,40 ואז מתבצעת לקבלת הערכה הקליטה מקדם ספקטרום ממוצע(λ), המקדם פיזור מופחת ספקטרום ממוצעs'(λ). בבית הזה הפוך סימולציה מונטה קרלו, פיזור מוערך מקדם ממוצעs, תחת ההנחה כי חיזקו גורם g הוא 0, נחשב את פיזור מופחתת מקדם ממוצעs' . השקיפות והן את הנתונים אנו משמשים עבור הדמיה יחיד להפעיל. האלגוריתם מפורטת בשימוש פרוטוקול זה דווח בשנים קודמות ספרות8,39. אנחנו מעריכים הקליטה מקדם ספקטרום ממוצע(λ) ו את פיזור מופחתת מקדם ספקטרום ממוצעs'(λ) של שכבת אפידרמיס מתוך קבוצת השקיפות ' מאטום לשקוף ' ספקטרום, הכולל להדמיה הספקטרום המתקבל על השכבה האפידרמלית. באותו אופן, אנחנו מעריכים ממוצע(λ) וממוצעs'(λ) של שכבת הדרמיס מתוך קבוצה של הספקטרום השתקפות ' מאטום לשקוף ', הכולל להדמיה הספקטרום המתקבל את עורי שכבה.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
איור 3 מראה ספקטרום מוערך נציג של המקדם פיזור מופחתת, המקדם הקליטה עבור פנטום עוריות ו פנטום עורי. התוצאות המוצגות באיור 3 הן הממוצעים של עשרה המידות של השתקפות והן להדמיה ספקטרה. פיזור מופחתת מקדם ממוצעs' יש קשת פיזור רחב, מפגין בעוצמה גבוהה יותר באורכי גל קצרים יותר. תכונות ספקטרליות תואמות ספקטרום אופייני פיזור של רקמות רכות. הקליטה מקדם ממוצע של נרקב פנטום עוריות אקספוננציאלית ...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
השלב הקריטי ביותר של פרוטוקול זה הוא השליטה בטמפרטורה של חומר הבסיס. הטמפרטורה כדי לשמור על חומר הבסיס נע בין 58 עד 60 מעלות צלזיוס. אם הטמפרטורה היא יותר מ 70 מעלות צלזיוס, תתרחש דנטורציה של האמולסיה השומנים והן את כל הדם. כתוצאה מכך, יחריף התכונות האופטיות של הפאנטום. אם הטמפרטורה הוא פחות מ 40 ° צלזיוס, חומר הבסיס להיות הג'לי ununiformly ו, לכן, הסוכנים פיזור וקליטה קלה heterogeneously יחולקו הפאנטום. למרות חומר הבסיס נשמרת ב 60 מעלות צלזיוס, suctioning אותו עם מזרק מורידה את הטמפרטורה. הטמפרטורה של חומר בסיס מוריד עד...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
המחברים אין לחשוף.
חלק מעבודה זו נתמכה על ידי מענק הסיוע על Scientific Research (C) של החברה היפנית עבור קידום של המדע (25350520, 22500401, 15 K 06105) ואת צבא ארה ב המרכז לטניס בישראל-פאק מחקר בפרויקט פיתוח (FA5209-15-P-0175, FA5209-16-P-0132).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 150-W הלוגן-מנורת אור מקור | Hayashi Watch Works Co., Ltd, טוקיו, יפן | LA-150SAE | |
| מדריך אור | Hayashi Watch Works Co., Ltd, טוקיו, יפן | LGC1-5L1000 | |
| שילוב Sphere | Labsphere Incorporated, צפון סאטון, NH, ארה"ב | RT-060-SF | |
| מתאם יציאה | Labsphere Incorporated, צפון סאטון, NH, ארה"ב | PA-050-SMA-SF | |
| מלכודת אור | Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, ארה"ב | LTRP-100-C | |
| ספקטרלון תקן לבן עם 99% השתקפות מפוזרת | Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, ארה"ב | SRS-99-020 | |
| סיבים אופטיים | Ocean Optics Inc., דנידין, פלורידה, ארה"ב | P400-2-VIS-NIR | |
| ספקטרומטר סיבים אופטיים מיניאטוריים | Ocean Optics Inc., דנידין, פלורידה, ארה"ב | ||
| עדשה אכרומטית | Chuo Precision Industrial Co., Ltd, טוקיו, יפן | ACL-50-75M | |
| Intralipid | Fresenius Kabi AB, אופסלה, שוודיה | אינטרליפיד 10% | |
| קפה (תערובת תערובת מוקה קפה רגיל) | Ajinomoto AGF, Inc. טוקיו, יפן | לא זמין | |
| מלא | Nippon Bio-Test Laboratories Inc. סאיטאמה, יפן | 0103-2 | |
| Agarose | Nippon Genetics Co., Ltd, טוקיו, יפן | NE-AG02 | |
| תנור בישול | TOSHIBA CORPORATION טוקיו, יפן | HP-103K |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission