מאמר שיטה

הכנה, נהלים והערכת הזרקת הפלסמה טסיות דם עשיר בטיפול של דלקת מפרקים ניוונית בברך

DOI:

10.3791/57700

⸱

4 בינואר 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopedics, Guangdong General Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), 2Shantou University Medical College

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת מפרקים ניוונית בברך נתפסת לעתים קרובות במחלקה אורתופדית. אנחנו מציגים בפרוטרוט תהליך הטיפול דלקת מפרקים ניוונית בברך כולו עם הזרקת טסיות דם עשיר פלזמה, כולל הכנה, תהליכי הערכה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת מפרקים ניוונית בברך (קואה) היא אחת המחלות הנפוצות ביותר המערכת נתקלה במחלקה אורתופדית. טיפול ניתוחי קיימת השפעה מוגבלת על התיקון של סחוס ועל התחדשות העצם. טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) הוא חומר ביו עצמיים שניתן לתקן סחוס פציעה או להאיץ ביעילות התחדשות העצם. אולם, דיווח מהפרוטוקולים הכנה PRP במחקרים קליניים הוא מאוד לא עקבי, עם רוב המחקרים מתן מידע מספיק כדי לאפשר את פרוטוקול כדי להיות מועתק. אנו מתארים שיטה הדיר של הכנת PRP באופן חזותי, הטיפול של KOA באמצעות הזרקה תוך-מפרקיות PRP, ושיטות להערכת התוצאה. PRP הוכן בעזרת צנטריפוגה זוגי ידנית. השכבה PRP היה שחולצו מן הדם ההיקפיים, משמש הזרקה משותפת חלל הברך. הערכות כללו הערכות של טסיות דם ריכוזים, התוצאות הקליניות. הכנת PRP על ידי צנטריפוגה ידנית דורשת פחות מכשירים, והוא פחות יקר מאשר סינון פלזמה או באמצעות ציוד צנטריפוגה. הפעם צנטריפוגה בשיטה שלנו צנטריפוגה כפול 6, 5 דקות עבור centrifugations בהתאמה כוחות של g x 800 ל- 1400, בהתאמה, כדי לאפשר הכנת עקבי סטנדרטית PRP. עם זאת, שיטה ידנית היא חשופה אופרטור השגיאה ולאחר הכנה אצווה PRP אינה זמינה. הזרקה תוך-מפרקיות של PRP הוכיחה להיות טיפול יעיל עבור דלקת מפרקים ניוונית בברך. ההליך כולו טיפול לקח פחות מ-30 דקות, יכול להיות מוגדר טסיות דם ריכוז PRP, הטיפול הוכח להיות יעיל כאשר הערכה על ידי מעקב.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת מפרקים ניוונית בברך (קואה) היא אחת המחלות השכיחות ביותר במחלקה אורתופדית; 30% - 50% מהאנשים מעל גיל 65 שנה ניסיון זו המחלה1. בזמן הנוכחי, ניהול שמרני של KOA כולל בעיקר אוראלי הניהול של תרופות אנטי דלקתיות לא סטרואידיות וסמים התזונתי של הסחוס, הזרקה תוך-מפרקיות של נתרן היאלורונית, פיזיותרפיה. עם זאת, שיטות אלה לא יכול לעצור את התהליך של ניוון מפרקים בברך2. פגמים הסחוס במפרק יכולים לגרום ללבוש משטח מפרקיות, יציבות משותפת, שינויים מטבוליים, אשר מהווים חלק בפתוגנזה של קואה3. עם זאת, בשל העדרם של כלי דם, עצבים ורקמות הלימפה של הסחוס במפרק, שחזור לאחר נזק קשה. שיטה יעילה של תיקון הסחוס חשוב במיוחד לטיפול של KOA. הטיפול של osteoclasia הוא גם מוקד מרכזי בטיפול קואה.

טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) הוא חומר ביו עצמיים, היישום של PRP עצם ובעיות מפרק הוא נחקר יותר ויותר. הרציונל ביולוגי לשימוש קליני של PRP כוללת השפעתו על המסירה המקומי של גורמי גדילה ושינוי של תגובת דלקתית, השפעות חיוביות על התפשטות ובידול תא4. לאחר ההפעלה לאחר הזרקה תוך-מפרקיות, PRP משחרר α-גרגר דרך degranulation, מפריש גורמי גדילה שונים, כולל את גורם גידול נגזר טסית דם, את הפיכת גורם גידול-β, הגורם גדילה דמויי אינסולין, גורם הגדילה באפידרמיס של צמיחה אנדותל כלי הדם, הגורם הצמיחה פיברובלסט. אלה לקדם את הפצת אוסטאובלסט ו- chondrocyte, לעכב התנוונות הסחוס, לחזק את יציבותו של עצם subchondral סחוס, לווסת את החומר המדכא רקמות של ביטוי גנים של מטאלו-פרוטאינאז ולתחזק את האיזון של סינתזה, השפלה של5,proteoglycans6. לכן, PRP יכול לתקן סחוס פציעה ולהאיץ התחדשות העצם.

התוצאה של הזרקת PRP מושפע על ידי גורמים שונים, לרבות את האתר של הדגימה7, סוג צנטריפוגה הכנה שיטה8השימוש של תרופות נגד קרישת דם9 ומפעילים10. ישנן שיטות צנטריפוגלי בערך 3 סוגים כדי להכין PRP. צנטריפוגה ידנית, המבוסס על ציוד צנטריפוגה או טכניקות סינון פלזמה זמינים, למרות שיטות ידנית, מבוסס על ציוד נמצאים בשימוש הנפוץ ביותר. השיטה הידנית דורשת ציוד לפחות, נוח, עלות נמוכה, הוא פשוט לביצוע (איור 1). PRP מוכן על ידי ביצוע ידני צנטריפוגה פעמיים. מעורב דם היקפיים, נוגד קרישה הם centrifuged כדי להפריד בין hemocytes לבין פלזמה, טסיות דם. לאחר השמטת כדוריות דם אדומות על השכבה התחתונה, הנוזל supernatant הוא centrifuged להפרדה מחדש, חלוקתו supernatant טסיות-עניים פלזמה PRP האמצעית, subnatant משקעי כדוריות דם אדומות. השכבה האמצעית משמש הזרקה משותפת חלל הברך (אם הכמות אינה מספיקה, חלק תגובת שיקוע ניתן להסיק). הערכות של השיטה כוללים הערכות של טסיות דם ריכוז לבין התוצאות הקליניות.

תפוקתב מהפרוטוקולים הכנה PRP במחקרים קליניים הוא מאוד לא עקבי, הרוב המכריע של המחקרים אינם מספקים מידע מספיק כדי לאפשר את הפרוטוקול יהיה לשכפל11. כאן, אנו מתארים שיטה ישימה הכנת PRP וטיפול של KOA עם PRP הזרקה תוך-מפרקיות, עם הערכה של התוצאה. קריטריוני ההכללה היו חולים עם דלקת מפרקים ניוונית בברך שיש הקלה בכאב המסכן תרופות להרגעה פשוטים (כגון פרצטמול), טיפול שמרני. לקבלת פטור כללו חולים עם הפרעה ניקוז ורידי החזרה או הלימפה; חולים עם דלקות מפרקים ברך; חולים עם dermatosis או זיהום באזור ההזרקה; חולים עם חום; חולים עם קרישה תפקוד סטייה; בחולים עם מחלת לב וכלי דם רציני. ההליך כולו טיפול לוקח פחות מ-30 דקות, טסיות דם ריכוז PRP מוכח להגיע מדידה מתוקננת. יעילותו מומחש הערכת התוצאות במהלך מעקב הדוק.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בשיטות המתוארות אושרו על ידי ועדת האתיקה של החולים הכללי גואנג-דונג.

1. לקבל PRP על ידי צנטריפוגה ידנית

  1. להכין את החולה במצב פרקדן בחדר ההפעלה סטרילי זרימה שכבתית עם טמפרטורת החדר נוח, לחות: טמפרטורת החדר היא 22 ° C והוא חדר לחות 60%.
  2. השתמש מזרק 1-mL כדי לצייר 0.2 מ"ל של הפארין נתרן (2 מ ל = 12,500 U), ולאחר מכן להרטיב מזרק 50-mL.
    הערה: 3 מ"ל של סודיום ציטרט הוא גם אופייני בשלב זה כדי להחליף את הנתרן הפארין.
  3. מעטה חוסם עורקים, לעקר את המרפק 2 - 3 פעמים ולהשתמש המזרק 50-מ לחה כדי לצייר 30 מ של דם היקפיים מן הווריד של המרפק.
  4. לבצע את צנטריפוגה הראשון.
    1. לחלק דם היקפיים במידה שווה שני צינורות סטרילי צנטריפוגה 50 מ.
    2. לשים שני צינורות הרוטורים אופקי ואחר בצנטריפוגה, בתנאים אספטי.
    3. צנטריפוגה במשך 6 דקות ב 800 x g.
    4. לקחת את הרוטורים אופקי החוצה, ללבוש כפפות סטריליות, להוציא את צינורות צנטריפוגה.
    5. לבחון את ושרידים כדי לוודא כי הדם ההיקפיים היא מרובדת לתוך שתי שכבות.
    6. משתמשים מזרק נקי 10-mL לאיסוף הנוזל supernatant משפופרות צנטריפוגה שני אלה לתוך שפופרת צנטרפוגה נקי.
  5. לבצע את צנטריפוגה השני.
    1. השתמש מזרק נקי 10-mL כדי להוסיף כמות שווה של מים סטרילי או תמיסת מלח לתוך צינור נקי צנטריפוגה אחר לאיזון. הכניסו את הצינורות הרוטורים אופקי. לסמן זה עם הנוזל שכבה supernatant-ידי טיח דבק.
    2. צנטריפוגה למשך 5 דקות ב 1400 x g.
    3. לקחת את הרוטורים אופקי החוצה ובדוק על ידי התבוננות ושרידים הנוזל של הצינור מסומן מחולק שלוש שכבות.
    4. השתמש מזרק 10-mL כדי לצייר 4 מ של נוזל מן השכבה האמצעית תאים גרעיניים (ליקוציט עשיר, PRP שכבה) השכבה התחתונה של תגובת שיקוע. אם הכמות שכבה אמצעית מספיקה, רק לצייר 4 מ"ל מזה.
    5. לשים 0.4 מ של הנוזל בצינור ובקופת סטרילי (K2EDTA, 3.6 מ"ג) להערכה, עוזב 3.6 מ של נוזל הנותר במזרק.
      הערה: הפרוטוקול אפשר לעצור כאן.

2. תוך-מפרקיות מינהל PRP

  1. תנו לשקר חולה פרקדן על שולחן הניתוחים, לכופף את הברך עד 90 מעלות.
  2. אתר החדירה בקצה תחום נחות של צלחית ו- 1 ס מ לרוחב רצועה ברך. השתמש עט מרקר כדי לסמן את האתר.
  3. לבצע עיקור העור על החדירה שלוש פעמים עם anerdian III, לבש כפפות סטרילי, ולכסות עם חור-המגבת אספטי.
  4. מקם את המזרק מקביל השוקה, ולאחר מכן לבצע הניקוב בזווית של 45 מעלות. לחלוטין את המחט לתוך העור.
  5. להזריק את מ 3.6 ל PRP מן המזרק לתוך חלל משותף הברך.
  6. מכסה את המיקום לנקב עם גזה סטרילית, לתקן אותו עם טיח דבק.
  7. הפעילו לחץ על הפצע למשך 10 דקות. להתבונן על כל תגובה שלילית חמורה במשך 30 דקות.
  8. לנהל סך של שלוש זריקות במרווחי זמן חודשי.
    הערה: הפרוטוקול אפשר לעצור כאן.

3. לאחר הניתוח הערכה של הזרקת PRP

  1. להעריך את הריכוז של טסיות דם ב- PRP.
    1. השתמש mL 0.4 של PRP מהצינור קרישה (K2EDTA, 3.6 מ"ג).
    2. לנתח את ריכוז PRP באמצעות מנתח אוטומטית תאי הדם של טסיות דם.
  2. להעריך את התוצאה לאחר הניתוח של הזריקה PRP.
    1. עם התייעצות יום אחד לפני אחד של שלושה טיפולים, התנהלות נוספת מעקב אחר מטופלים 1 יום לאחר כל טיפול, 3 ימים לאחר כל טיפול, שבוע 1 לאחר כל טיפול, חודש לאחר הטיפול השלישי, 3 חודשים לאחר הטיפול השלישי, ל- 6 חודשים לאחר הטיפול השלישי.
    2. השתמש סולם אנלוגי חזותי (באס), מערב אונטריו, מדד אוסטיאוארתריטיס אוניברסיטאות מקמאסטר (WOMAC), ציון החברה הברך (KSS) ו Lysholm הברך מידה תפקודית כדי להעריך את ההשפעה לאחר הניתוח.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כתוצאה מכך, טסיות רוזן PRP להגיע ריכוז סטנדרטי ברמה של 1121 x 103/µL. ערכנו את הסקרים להמשך טיפול 15 שמתואר הפרוטוקול למטופל זכר בת 55 עם קואה מוקדם. זה היה ברור שהתוצאה הקלינית המוקדמות כי היה משביע רצון לאחר מתן תוך-מפרקיות של PRP (איור 2). אך יעילותם לטווח בינוני היה נחות מעט. תופעת כאבים משמעותיים במידה ניכרת נצפתה (איור 2 א). KSS הברך הציון היה גבוה יותר מאשר פונקציה KSS הציון (איור 2 C

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הריכוז של טסיות דם בדם אנושי נורמלי הוא בין 150,000/µL ל- 350,000/µL, הוא נרחב האמין כי טסיות דם ריכוז PRP צריך להגיע 1,000,000/µL, אשר הוא 3 עד 5 פעמים ריכוזים נורמלים9. על-פי מערכת היררכית כפת, הוא האמין כי PRP יש השפעה ברורה כאשר הריכוז טסיות דם הוא פחות מ 3 פעמים ריכוז רגיל, בעוד PRP יש אפקט מעכבים כאשר ריכוז טסיות הדם שלה הוא יותר משישה ריכוז רגיל12פעמים. לכן הדרישה המינימלית עבור פרוטוקול זה היא כי ריכוז PRP טסיות דם הוא בין רמות אלה.

הכנה ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים אין לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה נתמך על ידי את נבחרת מדעי הטבע קרן סין (81371991), חוגי מדע, טכנולוגיה של גואנג-דונג (2015B020225007).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
צנטריפוגהEppendorf5702
צינור צנטריפוגהCORNING430828
רוטור אופקיEppendorfLL080
Anerdian IIIשנחאי Likang חיטוי HiTech Co., LTD310173חיטוי העור
מזרק 1 מ"לKDL  ציוד רפואי ושות', בע"מ0.4*13 RWLB
מזרק 10 מ"לKDL  ציוד רפואי ושות', בע"מ1.2*38 TWSB
50 מ"ל מזרקKDL  ציוד רפואי ושות', בע"מ0.7*32 TWLB
חוסם עורקים רפואיצ'אנגג'ואו Jinli לטקס מוצרים ושות', בע"מ0087-2011
כפפות כירורגיות גומי סטריליות לשימוש חד פעמישנחאי jinxiang לטקס מוצרים ושות', בע"מ17060
חד פעמי לשאוב מחט דםKDL  ציוד רפואי ושות', בע"מ0.55*20 L(II) RWLB
Heparin הזרקת נתרןSPH מס' 1 ביוכימיה & פרמצבטיקה ושות', בע"מ17061012 מ"ל: 12500U
Jifro יד חיטוי שטיפה חינם ג'לשנחאי Likang חיטוי הייטק ושות', בע"מ311793
ספוגית כותנה רפואיתFoshan Kangzheng ציוד רפואי ושות', בע"מKZ3-12לחטא את העור
10 מ"ל מי מלח רגילים Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD140211458
מנתח תאי דם אוטומטיבקמן קולטרLH-750
צינור נוגד קרישה סטרילי חוראחסן במקום קריר ויבש בטווח של 4 עד 25 מעלות צלזיוס
F12006-10
גזה סטריליתגואנגדונג Ze צ'אנג סחר ושות', בע"מ170915
דבק טיח3M Transpore1527C-0
סמן עור עטגואנגג'ואו Mingjia מכשור רפואי ייצור ושות', בע"מ10110
(צינורות איסוף דם, K2E 3.6 מ"ג) Becton, Dickinson and Company CNL17-COO56 פינצטה RWD LIFE SCIENCE

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Loeser, R. F. Age-related changes in the musculoskeletal system and the development of osteoarthritis. Clinics in Geriatric Medicine. 26 (3), 371-386 (2010).
  2. Bhatia, A., Peng, P., Cohen, S. P. Radiofrequency procedures to relieve chronic knee pain: an evidence-based narrative review. Reg Anesth Pain Med. 43 (1), 72(2018).
  3. Sánchez, M., et al. A randomized clinical trial evaluating plasma rich in growth factors (PRGF-endoret) versus hyaluronic acid in the short-term treatment of symptomatic knee osteoarthritis. Arthroscopy the Journal of Arthroscopic & Related Surgery. 28 (8), 1070-1078 (2012).
  4. LaPrade, R. F., et al. Biologic treatments for sports injuries II think tank-current concepts, future research, and barriers to advancement, part 1: biologics overview, ligament injury, tendinopathy. Am J Sports Med. 44 (12), 3270-3283 (2016).
  5. Ornetti, P., et al. Does platelet-rich plasma have a role in the treatment of osteoarthritis? Joint Bone Spine. 83 (1), 31-36 (2016).
  6. Knop, E., Paula, L. E. D., Fuller, R. Platelet-rich plasma for osteoarthritis treatment. Revista Brasileira de Reumatologia (English Edition). 56 (2), 152-164 (2016).
  7. Weibrich, G., Kleis, W. K., Hafner, G., Hitzler, W. E. Growth factor levels in platelet-rich plasma and correlations with donor age, sex, and platelet count. J Craniomaxillofac Surg. 30 (2), 97-102 (2002).
  8. Landesberg, R., Roy, M., Glickman, R. S. Quantification of growth factor levels using a simplified method of platelet-rich plasma gel preparation. Journal of Oral & Maxillofacial Surgery. 58 (3), 297-300 (2000).
  9. Wasterlain, A. S., Braun, H. J., Dragoo, J. L. Contents and formulations of platelet-rich plasma. Operative Techniques in Orthopaedics. 22 (1), 33-42 (2012).
  10. Gobbi, G., Vitale, M. Platelet rich plasma for biological therapy: applications and limits. Operative Techniques in Orthopaedics. 22 (1), 10-15 (2012).
  11. Chahla, J., et al. A call for standardization in platelet-rich plasma preparation protocols and composition reporting: a systematic review of the clinical orthopaedic literature. Journal of Bone & Joint Surgery-american. 99 (20), 1769-1779 (2017).
  12. Delong, J. M., Russell, R. P., Mazzocca, A. D. Platelet-rich plasma: the PAW classification system. Arthroscopy the Journal of Arthroscopic & Related Surgery. 28 (7), 998-1009 (2012).
  13. Yazigi Junior, J. A., et al. Quantification of platelets obtained by different centrifugation protocols in SHR rats. Revista Brasileira de Ortopedia (English Edition). 50 (6), 729-738 (2015).
  14. Moojen, D. J. F., et al. Antimicrobial activity of platelet-leukocyte gel against Staphylococcus aureus. Journal of Orthopaedic Research. 26 (3), 404-410 (2008).
  15. Tinsley, B. A., Ferreira, J. V., Dukas, A. G., Mazzocca, A. D. Platelet-rich plasma nonoperative injection therapy-A review of indications and evidence. Operative Techniques in Sports Medicine. 20 (2), 192-200 (2012).
  16. Arora, S., Doda, V., Kotwal, U., Dogra, M. Quantification of platelets and platelet derived growth factors from platelet-rich-plasma (PRP) prepared at different centrifugal force (g) and time. Transfusion & Apheresis Science. 54 (1), 103-110 (2016).
  17. Cohn, C. S., Lockhart, E. Autologous platelet-rich plasma: evidence for clinical use. Current Opinion in Hematology. 22 (6), 527-532 (2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

PRP

מאמרים קשורים