הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

יצירת מודל של סרטן שד גרורתי Orthotopic מאתר וביצוע מאתר כריתה רדיקלית

10.8K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/57849

⸱

29 בנובמבר 2018

 ,  ,  , 
1Breast Surgery, Department of Surgical Oncology, Roswell Park Comprehensive Cancer Center, 2Holy Cross Hospital Michael and Dianne Bienes Comprehensive Cancer Center, 3Department of Surgery, Massachusetts General Hospital, 4Department of Surgery, University of Miami Miller School of Medicine, 5Department of Surgery, Nova Southeastern University School of Medicine, 6Department of Surgery, University at Buffalo Jacobs School of Medicine and Biomedical Sciences, 7Department of Breast Surgery and Oncology, Tokyo Medical University, 8Department of Surgery, Yokohama City University, 9Department of Surgery, Niigata University Graduate School of Medical and Dental Sciences, 10Department of Surgery, Fukushima Medical University

במאמר זה

סיכום

אנחנו מציגים את orthotopic מאתר השד סרטן ומודל כריתה רדיקלית בטכנולוגיה ביולומינסנציה לכמת את נטל הגידול לחקות התקדמות סרטן השד אנושי.

תקציר

מודלים העכבר in vivo כדי להעריך את התקדמות סרטן השד חיוניים לחקר הסרטן, כולל פיתוחים סמים פרה. עם זאת, הרוב המכריע של פרטים טכניים מעשיים מושמטים נפוץ ב לאור כתבי יד מה, לכן, שהופך את זה מאתגר לשחזר את הדגמים, במיוחד כשזה כרוך טכניקות ניתוחיות. ביולומינסנציה הטכנולוגיה מאפשרת על ההערכה של כמויות קטנות של תאים סרטניים גם כאשר הגידול הוא לא מוחשי. ניצול לבטא לוציפראז תאים סרטניים, אנחנו לבסס טכניקה חיסון orthotopic של סרטן השד, בקצב גבוה tumorigenesis. גרורות בריאה שקובעת ניצול של שמחוץ טכניקה. ואז, להקים מודל כריתה עם שיעור הישנות מקומית נמוכה כדי להעריך את נטל גידול גרורתי. במסמך זה, אנו מתארים, בפירוט, טכניקות כירורגיות של orthotopic-השרשה ו כריתה לסרטן השד עם שיעור גבוה tumorigenesis ו שיעורי הישנות מקומית נמוכה, בהתאמה, כדי לשפר את יעילות מודל של סרטן השד.

מבוא

מודלים בעלי חיים לשחק תפקיד מפתח בחקר הסרטן. כאשר השערה זה הוכח במבחנה, זה צריך להיבדק ויוו להערכת הרלוונטיות הקלינית שלה. התקדמות סרטן, גרורות לעיתים קרובות יותר בשבי על ידי מודלים בעלי חיים לעומת מודלים במבחנה, זה חיוני כדי לבדוק תרופה חדשה במודל חיה כמו מחקר קליני סמים פיתוח1,2. עם זאת, הפרטים הטכניים של ניסויים בבעלי חיים מתוארים לעתים קרובות לא טוב המאמרים שפורסמו, שהופך אותו מאתגר לשחזר את המודל בהצלחה. אכן, המחברים שהקים חיסון ו כריתה מודלים אלה orthotopic עברה תהליכים ארוכים קפדני של ניסוי וטעייה. שיעור ההצלחה של tumorigenesis לאחר חיסון תאי סרטן הוא אחד הגורמים מפתח כדי לקבוע את ההצלחה ואת היעילות של חיים לומדים3. את שורת התאים את מספר התאים כדי לחסן חיסון באתר, את המתח של העכברים גורמים חשובים כל בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד. זה ידוע כי ישנם וריאציות ענקי בתוצאות של ניסויים בבעלי חיים בשל הבדלים אישיים, לעומת טכניקות הפרייה. לכן, באמצעות מודל ומבוססת עם טכניקה סטנדרטית היא חשובה להשיג תוצאות יציב, כדי לשפר את היעילות של ניסויים בבעלי חיים, וכדי למנוע תוצאות מטעות.

מאמר זה מספק טכניקות ומבוססת4 להפקת השד סרטן orthotopic ו כריתה העכבר מודלים. המטרות של שיטות אלה הן 1) כדי לחקות התקדמות סרטן השד אנושי וקורסי טיפול ו- 2) כדי לערוך ניסויים ויוו עם שיעור הצלחה גבוה יותר לעומת אחרים חיסון סרטן השד או כריתת שד טכניקות ויעילות רבה יותר. Orthotopic סרטן תאי חיסון, כדי לחקות את התקדמות סרטן השד אנושי, אנחנו לבחור כרית שומן החלב #2 כאתר חיסון, אשר ממוקם באזור החזה. ברוב המחקרים, תאים סרטניים בשד מחוסנים subcutaneously5. טכניקה זו אינה דורשת ניתוח, לפיכך, הוא פשוט וברור. עם זאת, microenvironment תת עורית שונה לגמרי microenvironment בלוטת חלב, שתוצאתה התקדמות סרטן שונים ופרופילים אפילו מולקולרית6,7. מספר מחקרים להשתמש בלוטת החלב #4, הממוקמת בחלל הבטן, כמו האתר חיסון6. אולם, מאז #4 עטין נמצאים בחלל הבטן, הדפוס גרורתי השכיח ביותר הוא גרורות בחלל הצפק7, אשר מתרחשת עם פחות מ- 10% של סרטן שד גרורתי8. סרטן השד שנוצר על ידי הטכניקה המובאת כאן, בבלוטת החלב #2, מתפשט אל הריאות, אשר הוא אחד הנפוצים ביותר השד סרטן גרורתי אתרי9.

בטכניקה זו, המטרה היא גם להשיג שיעור גבוה יותר של tumorigenesis עם השתנות גודל הגידול מינימלי לעומת טכניקות חיסון אחרות סרטן השד. כדי לעשות זאת, תאים סרטניים מושעה בתערובת חלבון ז'לטין מחוסנים תחת חזון ישירה דרך חתך קיר החזה הקדמי החציוני. טכניקה זו מפיקה קצב tumorigenesis גבוהה עם פחות השתנות גידול בגודל וצורה לעומת הזרקה תת עורית או ניתוחי, כפי שדווחה בעבר3,7.

אנחנו מוסיפים גם טכניקה כריתה רדיקלית העכבר שבו הגידול השד orthotopic הוא resected עם הרקמות הסובבות ואת בלוטות הלימפה בבית השחי. בהגדרה קלינית, רמת הטיפול לחולי סרטן השד ללא גרורות רחוקות המחלה הוא כריתה10,11. לפני כריתת שד, לנתיחה הלימפה בבית השחי הצומת גרורות הוא שנסקרו על ידי הדמיה ו בלוטת הזקיף ביופסיה. אם אין עדות לנתיחה הלימפה בבית השחי הצומת גרורות, החולה ואז מטופל עם כריתה מוחלט או חלקי, שבו ההסרה לנתיחה הלימפה בבית השחי הצומת מושמט. סך כריתה היא טכניקה לכרות את סרטן השד עם רקמת השד כולו en bloc, בעוד כריתה חלקית היא לכרות את סרטן השד עם שוליים של סביב רקמת השד רגיל בלבד, ובכך שימור רקמת השד רגיל הנותר אצל החולה. עם זאת, חולים אשר לשמר שנותרו רקמת השד רגיל לאחר כריתה חלקית לדרוש הקרנות לאחר הניתוח כדי למנוע הישנות מקומית10. מטופלים עם לנתיחה הלימפה בבית השחי הצומת גרורות מתחייב כריתה רדיקלית אשר מסיר את סרטן השד עם נורמלי כל השד רקמות, בבית השחי הלימפה, פלש לרקמות en גוש10,11. במודל עכבר, מעקב לנתיחה הלימפה בבית השחי הצומת גרורות ו/או שלאחר קרינה אינה סבירה או ריאלי. לפיכך, אנו מנצלים את הטכניקה כריתה רדיקלית כדי למנוע גרורות הצומת לימפה מקומיות או בבית השחי.

חיסון תאי סרטן דרך הווריד הזנב של הוא הנפוץ ביותר ריאות גרורות העכבר מודל12, מה שנקרא "גרורות ניסיוני". מודל זה קל ליצור, ללא צורך בניתוח; עם זאת, זה לא לחקות התקדמות סרטן השד אנושי והתוצאה עשויה להיות התנהגות שונים במחלה גרורתית. כדי לחקות את הקורס לטיפול סרטן השד אנושי שבו גרורות מתרחש לעיתים קרובות לאחר כריתת שד, הגידול העיקרי הוא הוסר לאחר חיסון תאי סרטן orthotopic. טכניקה זו מייצרת פחות המקומיים הישנות לעומת כריתה הגידול פשוטה, כפי שדווחה בעבר13, והיא שימושית על הריפוי, מחקרים פרה, ועל מחקרים סרטן שד גרורתי. מהטכניקות שתוארו כאן חלים עבור רוב השד סרטן orthotopic דגם הניסויים. עם זאת, חשוב לקחת בחשבון כי התערובת חלבון כמו ג'לי יכול להשפיע על microenvironment, ניתוח יכול להשפיע על התגובה החיסוניתמתח/14. לכן, החוקרים ללמוד את microenvironment ו/או מתח/מערכת החיסון צריך להיות מודע של פוטנציאל משתנה מתערב גורמים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

אישור מן רוזוול פארק מקיף סרטן מרכז מוסדי חיה אכפת לי להשתמש ועדת הושג עבור כל הניסויים.

הערה: תשע שנים עשר שבועות בת נקבה BALB/c לעכברים מתקבלים. תאים 4T1-luc2, העכבר החלב אדנוקרצינומה תא קו נגזר BALB/c עכברים תוכנן כדי לוציפראז אקספרס, משמשים. תאים אלה מתורבתים במדיום 1640 המכון ממוריאל פארק רוזוול (RPMI) עם 10% סרום שור עוברית (FBS).

1. הכנת כלי נגינה

  1. הפשרת תערובת חלבונים כמו ג'לי קפוא (למשל, Matrigel) על הקרח בשכונה תרביות רקמה.
  2. ונקי אוטוקלב שני סטים של כלי ניתוח (מספריים microdissection לאדאמסון מלקחיים, בעל מחט) לפני הניתוח. להכין 5-0 סטיריליים התפרים משי ויבש sterilant (כאשר טורי ניתוחים מתוכננים).
  3. קליפ על שיער החזה האמצעי של העכברים שימוש בטלוויזיה ולסמן העכברים לזיהוי על ידי ניקוב האוזן לשעת הניתוח.
  4. להכין את השולחן בהליך, אשר יכול לשמש באופן מיידי עבור הפעולה.
    1. להפיץ את רכיב pad סופג, לתקן את הפינות עם הקלטת, לתקן את הקונוסים האף הרדמה עם הקלטת, את sterilant ואת חיטוי (chlorhexidine יוד, 75% אתנול) לצד המרחב, ולמקם העכברים הסדר מבצע.

2. הכנה של תאים (עכברים 10)

הערה: התאים צריכים לקבל חיסון בתוך 1 h לאחר ניתוק מן המנה כדי למנוע ירידה תא הכדאיות. באופן ספציפי, התליה תא צריך להיות מעורב לתוך התערובת חלבון ז'לטין בתוך 15 דקות לאחר ניתוק תאים מן המנה כדי לשמור על יכולת הקיום שלהם.

  1. התרבות התאים 4T1-luc2, קו תא החלב אדנוקרצינומה העכבר לבטא לוציפראז, בתקשורת RPMI 1640 עם 10% FBS ב חממה humidified ב 37 ° C 5% CO2.
  2. לשטוף את התאים 4T1 חסיד-luc2 בצלחת ס מ-10 עם באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS) באמצעות פיפטה סרולוגית 10 מ. להוסיף 1 מ"ל של טריפסין 0.25% באמצעות פיפטה P1000, ואז, דגירה המדגם ב 37 מעלות צלזיוס במשך 5 דקות. לאחר מכן, הוסף 4 מ"ל של צמיחה מדיה (RPMI-1640 עם 10% FBS) באמצעות סרולוגית 5 מ ל פיפטה ולהעביר התליה תא צינור חרוטי 15-mL בשכונה תרביות רקמה. Centrifuge התליה תא ב x 180 גרם במשך 5 דקות.
  3. וארוקן את תגובת שיקוע, resuspend תאי 2 מ של PBS; ואז, לספור את התאים באמצעות את hemocytometer.
  4. להשעות 2 x 106 תאים 4T1-luc2 μL 40 ל- PBS קר (pH 7.4, 4 ° C) בשכונה תרביות רקמה.
  5. מערבבים התליה תא 40-μL עם μL 360 של תערובת חלבונים כמו ג'לי בצינור microcentrifuge 1.5 mL על הקרח בשכונה תרביות רקמה.
    הערה: הריכוז הסופי הוא עונה 1 פרק 105/20 μL (1:9 PBS: תערובת החלבון כמו ג'לי). עבור המודל orthotopic (ללא כריתת שד), שימש μL4/20 1 פרק 10 של הריכוז הסופי, כדי להימנע להגיע קריטריונים המתת חסד (גידול בגודל > 2 ס מ) תוך שבועיים.

3. סרטן תאי חיסון

  1. את העכברים בבית הבליעה אינדוקציה הרדמה עם 2-4% איזופלוריין ו- 0.2 L/min זרימת חמצן עד העכברים לנשום בשקט (2-3 דקות).
  2. לתפוס את העכבר, להזריק 0.05 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין לתוך כתפו subcutaneously.
  3. לאשר הרדמה נאותה על ידי חוסר תגובה קמצוץ הבוהן. הכנס את האף של העכבר לתוך החור של המסכה העכבר, המאפשר הרדמה inhalational עם איזופלוריין 2-4%, 2 ל'/min זרימת חמצן המצורפת יחידה מיכל פחם.
  4. לרסן את הגפיים של העכבר באמצעות הקלטת למעבדה, לחטא את העור באמצעות chlorhexidine יוד, 75% אתנול, באמצעות ספוגיות כותנה.
  5. עושים חתך בעור 5 מ מ באמצע קיר החזה הקדמי ניצול microdissection סטרילי מספריים, להרים צד ימין העור ליד החתך לנתק את העור מן הקיר החזה בעזרת המספריים ואני, להפוך את העור כדי לחשוף את הזכות #2 כרית שומן החלב.
  6. בזהירות להזריק μL 20 של השעיה התא סרטן באמצעות מזרק אינסולין 1 מ"ל עם מחט 28.5 G אל תוך כרית שומן תחת חזון ישירה דרך הפצע.
    הערה: המחט עובר את הפצע, לא על העור. תמשיך להחזיק את המחט בלוח השמן לפני s 5 מושכת אותו החוצה, המאפשר זמן התערובת חלבון ז'לטין לגבש.
  7. לסגור את החתכים העור על ידי תפרים, בעזרת תפרים נספגים סטרילי 5-0.
  8. לאחר הניתוח, להחזיר את החיות כלוב נקי, לפקח עליהם עד שהם התאוששו עוברים באופן חופשי (לאחר ~ 1-2 דקות). אם חיים אינו מופיע להיות במצב בריאותי טוב בתוך 24 שעות של ניתוח, לנהל הבופרנורפין (0.2 מ ג/ק ג).
  9. להסיר את התפרים בהרדמה (ראה שלב 3.1) d 7 לאחר הניתוח.

4. כריתה

הערה: העיתוי של שיווי משקל חשוב מאוד. אם עושים את זה מוקדם מדי, גרורות ריאה לא יתרחש. אם זה נעשה מאוחר מדי, הגידול העיקרי פלש כלי הדם הגדולים, אשר עושים כריתה oncologic מלאה מאתגרת. לפיכך, מספר נקודות זמן נבדקו עבור כריתה לקבוע באיזו נקודת זמן המיוצר על האיזון המתאים מחכה גרורות לפני כריתה הפכה גם מאתגר. לאחר שתעשה זאת בניסויים העכבר מעל 50, הוכח כי כריתה-8 ימים לאחר חיסון תאי הסרטן (או כאשר גודל הגידול מגיע ל- 5 מ מ) היה האידיאל זמן המצביעים על מנת להשיג איזון13.

  1. עזים ומתנגד עכבר עם 2-4% בשאיפה איזופלוריין ולהזריק. הבופרנורפין (ראה שלבים 3.1 ו- 3.2).
  2. לרסן את העכבר או לחטא את העור שלה (ראה שלב 3.4).
  3. עושים חתך בעור 5 מ מ 2 מ מ שמאלה לפי הצלקת כירורגי שבוצע ב חיסון תאי סרטן ראשוני בעזרת המספריים microdissection. להרחיב את החתך לכיוון הבסיס של forelimb כדי להסיר את הגידול, העור כולל את הצלקת כירורגי הנגע בקשר עם הגידול, כמו גם את אגן לנתיחה הלימפה בבית השחי הצומת שבה רוב הזמן אין הצומת לימפה גלוי קיים בזמנו של mastect מקורקעת13. ודא שלא יגרמו נזק את הווריד בבית השחי.
  4. לסגור את הליקויים העור על ידי תפרים, בעזרת תפרים נספגים סטרילי 5-0 בצורה של "Y".
  5. כמו שלב 3.8, להחזיר את העכבר כלוב נקי, צג, עד הם התאוששו.
  6. להסיר את התפרים בהרדמה (ראה שלב 3.1) 7 ימים לאחר הניתוח.

5. ביולומנאסן כימות של הגידול העיקרי (Orthotopic חיסון ללא כריתה) או גרורות ריאה (כריתה מודל)

הערה: על כימות נטל הגידול העיקרי, ביולומינסנציה הוא נמדד 2 x שבוע מיום לאחר חיסון orthotopic. על כימות גרורות ריאה, ביולומינסנציה הוא נמדד 2 x שבוע מיום לאחר כריתת שד.

  1. להמיס D-luciferin באגירה פוספט תמיסת מלח של Dulbecco (DPBS) כדי ריכוז סופי של 15 מ"ג/מ"ל בשכונה תרביות רקמה. Aliquot זה לתוך הצינור מוגן אור mL 1.5 microcentrifuge צינורות. חנות הפתרון מדולל ב-80 מעלות צלזיוס.
    הערה: עבור עכבר 20 גרם, נדרש µL 200 של D מדולל-luciferin.
  2. פתח את תוכנת הדמיה ולחץ לאתחל.
    הערה: זה לוקח בערך 15 דקות לצנן את תשלום מצמידים מכשיר (CCD). כאשר ה-CCD מגיע לטמפרטורה להגדיר, הצבע של שורת הטמפרטורה משתנה מאדום לירוק.
  3. עזים ומתנגד העכברים עם 2-4% איזופלוריין בתוך תא ייעודי אינדוקציה לפני הדמיה (ראה שלב 3.1).
  4. שוקלים העכברים.
  5. להזריק 150 מ"ג/ק"ג של D-luciferin intraperitoneally בנקודת אמצע הבטן, באמצעות מחט 28.5 G.
  6. התאם כל עכבר עם קונוס האף בתוך המערכת הדמיה במצב פרקדן (מקום מקסימלית של עכברים חמש באותו זמן). לשמור על הרדמה בבית איזופלוריין 1% - 3% (ב 100% חמצן) דרך הקונוסים האף במהלך דימות.
  7. לכידת תמונה כל 5 דקות כדי לזהות את ביולומינסנציה שיא למשך 50 דקות (או עד ביולומינסנציה את שיא מאושרות).
    1. בחר הארה אוטומטי, Binning כמו בינוני, שדה ראייה D.
    2. לחץ על ייבוא כדי ללכוד את התמונה.
  8. העכברים לשוב cage(s) שלהם, לפקח עליהם עד שהם התאוששו (ראה שלב 3.8).

6. ריאות גרורות הגידול נטל כמת על ידי הדמיה Vivo לשעבר

הערה: כימות גרורות ריאה ישימה עבור חיסון orthotopic גם עם וגם בלי מודלים כריתה. במודל כריתה, נבחר שמחוץ לדימות או הישרדות תצפית, בהתאם למטרה. במודל חיסון (ללא כריתה) orthotopic, ברוב המקרים לייצר קריטריונים המתת חסד גודל הגידול העיקרי (> 2 ס מ) כ 21 ימים לאחר חיסון.

  1. לכמת ריאות גרורתי נגעים 21 ימים לאחר חיסון תאי סרטן על ידי ex-vivo הדמיה.
  2. עזים ומתנגד העכברים עם 2-4% איזופלוריין בתוך תא ייעודי אינדוקציה (ראה שלב 3.1).
  3. שוקלים העכברים.
  4. להזריק 150 מ"ג/ק"ג D-luciferin intraperitoneally (ראה שלב 5.6).
  5. המתת חסד העכברים מאת נקע בצוואר הרחם, 15 דקות לאחר הזריקות.
  6. לפתוח את הבטן על ידי גזירה את העור ואת צפק בבטן באמצע, באמצעות מספריים מאיו מעוקל. להרחיב את החתך גם ימינה וגם שמאלה. משוך החוצה את הכבד עם מלקחיים עד הסרעפת הוא מדמיין; . תעצור את הסרעפת.
  7. בעזרת המספריים מאיו מעוקל, לחתוך לצלעות בילטראליים מ caudad (12 צלעות) כדי cephalad (צלעות 1) לחשוף את הריאות על ידי flipping לקיר בית החזה הקדמי.
  8. לזהות את הוושט בית החזה, אשר נראה כמו חוט מתחבר בריאות עמוד השדרה, על ידי הרמת הריאות באמצעות מלקחיים וחותכים, ואז, הוושט באמצעות מספריים microdissection.
  9. הרם את הדו-צדדיים הריאות והלב באמצעות מלקחיים (החלת המתיחה מושך למטה, לכיוון של cephalad עד caudad), ואז לחתוך את קנה הנשימה וכלי מרכזי אל השיא ריאות ב cephalad, באמצעות מספריים microdissection.
    הערה: דבר זה מאפשר ניתוקה של הריאה והלב מן הגוף.
  10. הסר את הלב של הריאה באמצעות מספריים microdissection.
  11. הכניסו את הריאות 10 ס מ פטרי.
  12. ללכוד את התמונה ביולומינסנציה (ראה שלבים 5.7.1 ו 5.7.2) 5 דקות לאחר המתת חסד (20 דקות אחרי הזריקה luciferin).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

מטרת המודל orthotopic היא לחקות את התקדמות סרטן אנושי (קרי, את צמיחת הגידול העיקרי ואחריו גרורות הצומת לימפה, גרורות ריאה אז רחוקים)15. לאחר חיסון תאי סרטן, ביולומינסנציה לכמת באופן קבוע (שתיים עד שלוש פעמים / שבוע) (איור 1 א'). ביולומינסנציה הריאות הוא עמוק יותר, קטן יותר הנגע העיקרי. ביולומינסנציה משקפת בעיקר את נטל הגידול העיקרי עכברים חיים3 (איור 1B וג 1

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

בעשור האחרון, אנו יש כבר הקמת מספר דגמים מאתר סרטן, כולל השד סרטן מודלים3,7,13,16,20,21. בעבר, הפגנו כי השד סרטן תא orthotopic חיסון לתוך הרקמה בלוטת חלב תחת חזון ישירה מיוצר גידול גדול יותר עם פחות השתנות גודל בהשוואה הזרקת תאים סביב הפטמה ללא חתך כירורגי7 . מודל זה שופרה על ידי ניצול השעיה תא בתערובת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמך על ידי מענק-NIH גרנט R01CA160688, סוזן ג קרן Komen החוקר יזמה מחקר (IIR12222224) K.T. לעכברים ביולומינסנציה תמונות נרכשו על-ידי המשאב המשותף Translational הדמיה משאב משותף בפארק רוזוול מקיף במרכז לחקר הסרטן, אשר נתמך על ידי סרטן מרכז תמיכה גרנט (P30CA01656) ועל מכשור משותפים גרנט (S10OD016450).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מספריים מיקרו דיסקציהRobozRS-5983לחיסון תאים סרטניים וכריתת
מסה Adson מלקחייםRobozRS-5233לחיסון תאים סרטניים וכריתת מסה
מחזיק מחטRobozRS-7830לחיסון תאים סרטניים וכריתת מסה
MayoRobozRS-6873לתפרי
משי ex vivo 5-0מראה774Bלחיסון תאים סרטניים וכריתת מסה
סטרילנט יבש (Germinator 500)Braintree ScientificGER 5287-120Vלחיסון תאים סרטניים וכריתת מסה
ClipperWahl9908-717לחיסון תאים סרטניים וכריתת מסה
MatrigelCorning354234לחיסון תאי סרטן
D-Luciferin, מלחאשלגןGOLD-BioLUCK-1Kלכימות ביולומינסנציה
הזיכרון רוזוול פארק 1640Gibco11875093לתרבית
תאים סרוב בקר עובריGibco10437028לתרבית תאים
Trypsin-EDTA (0.25%)Gibco25200056לתרבית תאים
מכון

מקורות

  1. Rashid, O. M., Takabe, K. Animal models for exploring the pharmacokinetics of breast cancer therapies. Expert Opinion on Drug Metabolism & Toxicology. 11 (2), 221-230 (2015).
  2. Schuh, J. C. Trials, tribulations, and trends in tumor modeling in mice. Toxicologic Pathology. 32, 53-66 (2004).
  3. Katsuta, E., et al. Modified breast cancer model for preclinical immunotherapy studies. Journal of Surgical Research. 204 (2), 467-474 (2016).
  4. Sidell, D. R., et al. Composite mandibulectomy: a novel animal model. Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 146 (6), 932-937 (2012).
  5. Ewens, A., Mihich, E., Ehrke, M. J. Distant metastasis from subcutaneously grown E0771 medullary breast adenocarcinoma. Anticancer Research. 25, 3905-3915 (2005).
  6. Kocaturk, B., Versteeg, H. H. Orthotopic injection of breast cancer cells into the mammary fat pad of mice to study tumor growth. Journal of Visualized Experiments. (96), e51967(2015).
  7. Rashid, O. M., et al. An improved syngeneic orthotopic murine model of human breast cancer progression. Breast Cancer Research and Treatment. 147 (3), 501-512 (2014).
  8. Bertozzi, S., et al. Prevalence, risk factors, and prognosis of peritoneal metastasis from breast cancer. SpringerPlus. 4, 688(2015).
  9. Kennecke, H., et al. Metastatic behavior of breast cancer subtypes. Journal of Clinical Oncology. 28 (20), 3271-3277 (2010).
  10. Valero, M. G., Golshan, M. Management of the Axilla in Early Breast Cancer. Cancer Treatment and Research. 173, 39-52 (2018).
  11. National Comprehensive Cancer Network. Breast Cancer, NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology. , Available from: https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/breast.pdf (2018).
  12. Versteeg, H. H., et al. Inhibition of tissue factor signaling suppresses tumor growth. Blood. 111 (1), 190-199 (2008).
  13. Katsuta, E., Rashid, O. M., Takabe, K. Murine breast cancer mastectomy model that predicts patient outcomes for drug development. Journal of Surgical Research. 219, 310-318 (2017).
  14. Veenhof, A. A., et al. Surgical stress response and postoperative immune function after laparoscopy or open surgery with fast track or standard perioperative care: a randomized trial. Annals of Surgery. 255 (2), 216-221 (2012).
  15. Wei, S., Siegal, G. P. Surviving at a distant site: The organotropism of metastatic breast cancer. Seminars in Diagnostic Pathology. 35 (2), 108-111 (2018).
  16. Nagahashi, M., et al. Sphingosine-1-phosphate produced by sphingosine kinase 1 promotes breast cancer progression by stimulating angiogenesis and lymphangiogenesis. Cancer Research. 72 (3), 726-735 (2012).
  17. Jones, C., Lancaster, R. Evolution of Operative Technique for Mastectomy. Surgical Clinics of North America. 98 (4), 835-844 (2018).
  18. Rashid, O. M., Maurente, D., Takabe, K. A Systematic Approach to Preclinical Trials in Metastatic Breast Cancer. Chemotherapy (Los Angeles). 5 (3), (2016).
  19. Ramaswamy, S., Ross, K. N., Lander, E. S., Golub, T. R. A molecular signature of metastasis in primary solid tumors. Nature Genetics. 33 (1), 49-54 (2003).
  20. Aoki, H., et al. Murine model of long-term obstructive jaundice. Journal of Surgical Research. 206 (1), 118-125 (2016).
  21. Terracina, K. P., et al. Development of a metastatic murine colon cancer model. Journal of Surgical Research. 199 (1), 106-114 (2015).
  22. Rashid, O. M., et al. Is tail vein injection a relevant breast cancer lung metastasis model? Journal of Thoracic Disease. 5 (4), 385-392 (2013).
  23. Rashid, O. M., et al. Resection of the primary tumor improves survival in metastatic breast cancer by reducing overall tumor burden. Surgery. 153 (6), 771-778 (2013).
  24. Troy, T., Jekic-McMullen, D., Sambucetti, L., Rice, B. Quantitative comparison of the sensitivity of detection of fluorescent and bioluminescent reporters in animal models. Molecular Imaging. 3 (1), 9-23 (2004).
  25. Adams, S. T. Jr, Miller, S. C. Beyond D-luciferin: expanding the scope of bioluminescence imaging in vivo. Current Opinion in Chemical Biology. 21, 112-120 (2014).
  26. Close, D. M., Xu, T., Sayler, G. S., Ripp, S. In vivo bioluminescent imaging (BLI): noninvasive visualization and interrogation of biological processes in living animals. Sensors (Basel). 11 (1), 180-206 (2011).
  27. Chen, H., Thorne, S. H. Practical Methods for Molecular In Vivo Optical Imaging. Current Protocols in Cytometry. 59 (1224), (2012).
  28. Wurdinger, T., et al. A secreted luciferase for ex vivo monitoring of in vivo processes. Nature Methods. 5 (2), 171-173 (2008).
  29. Aoki, H., et al. Host sphingosine kinase 1 worsens pancreatic cancer peritoneal carcinomatosis. Journal of Surgical Research. 205 (2), 510-517 (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

השתלה אורתוטופיתמסטקטומיה בעכבריםדימות ביו-לומינסנציהכימות גרורות בריאותהזרקת תאי סרטןהכנת לוח ניתוחיםרפידת שומן של בלוטת החלבתפריר שאינו נספגמתן D-Luciferinניתוח ריאות ex vivo
יצירת מודל של סרטן שד גרורתי Orthotopic מאתר וביצוע מאתר כריתה רדיקלית
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.