מאמר שיטה

מודל לשעבר Vivo חדש על ההערכה של ביצועי חומרים הזרקה Submucosal אנדוסקופי

5.9K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58029

⸱

19 באוקטובר 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Molecular Gastroenterology and Hepatology, Graduate School of Medical Science, Kyoto Prefectural University of Medicine, 2Department of Infectious Diseases, Graduate School of Medical Science, Kyoto Prefectural University of Medicine

במאמר זה

סיכום

פיתחנו שמחוץ מודל חדש חל מתח מתמיד הדגימה קיבה חזירי. התפתחות זו אפשרו להעריך את הביצועים (את הגובה ואת משך העלאת רמת הרשאות submucosal) של סימס שונות באופן מדויק.  המתודולוגיה הגדרה מפורטים של המודל החדש הוא הסביר.

תקציר

הגברת הביצועים של חומרי הזרקה submucosal (סימס) חשוב עבור טיפול אנדוסקופי של מוקדם סרטן במערכת העיכול. זה חיוני להקים דגם ex-vivo שיכול להעריך ביצועי ה-SIM במדויק, לפיתוח סימס ביצועים גבוהים. במחקר הקודם שלנו, פיתחנו שמחוץ מודל חדש ניתן להשתמש כדי להעריך את הביצועים של סימס שונות בפירוט על-ידי החלת מתח מתמיד לקצוות של הדגימה. אנחנו גם אישר כי המודל לשעבר vivo החדש המוצע מאפשר העלאת רמת הרשאות submucosal מדויק מדידת גובה (סה) תחת תנאים אחידים והשוואות מפורט של המופעים של סוגים שונים של סימס. כאן, אנו מתארים את החדשה ex-vivo דגם ולהסביר את המתודולוגיה הגדרה מפורטים של מודל זה. מאז כל החלקים של המודל החדש היה קל להשיג, ההתקנה של הדגם החדש תסתיים במהירות. סה של סימס שונות ניתן למדוד בצורה מדויקת יותר באמצעות המודל החדש. ניתן לזהות הגורם הקריטי הקובע את ביצועי ה-SIM בעזרת המודל החדש. SIM פיתוח מהירות יעלה אחרי הגורם זוהתה.

מבוא

ניתוח אנדוסקופי submucosal (ESD) והן כריתה אנדוסקופית הרירית (אלקטרומגנטית) הם הטיפולים הנפוצים כיום בשלב מוקדם סרטן מערכת העיכול1,2. הזרקת חומר הזרקה submucosal (SIM) לתוך submucosa הוא אחד הצעדים החשובים ביותר עבור EMR והן ESD הליכים2,3. העלאת רמת הרשאות submucosal גבוהה תחזוקה של העלאת רמת הרשאות submucosal קריטריונים קריטיים עבור בבטחה ניצוח EMR/ESD בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד.

למרות תמיסת מלח (NS) שימש בתור SIM מאז המצאת4,טיפול אנדוסקופי5, נתרן היאלורונית (HA) הונהג כטיפול בבשנים האחרונות6,7. חה הפך להיות בשימוש נרחב טיפולים אנדוסקופיים SIM סופריור עקב שלו ביצועים גבוהים8,9,10,11. כיום, נערכה השוואה ביצועים בין סימס הקיים, ביצועים גבוהים סימס פותחו כדי לזהות עוד מעולה SIM5,12,13,14, 15,16,17,18.

המודל שמחוץ באמצעות טיפוס הבטן חזירי שימש כדי להעריך את ביצועי ה-SIM, כי ההערכה של ה-SIM ביצועים במערכת העיכול האנושית היא קשה מאוד19,20,21 , 22. עם זאת, הדגם הזה קונבנציונלי שמחוץ היא פשוטה מאוד, ויש לו ההיקף לשיפור. שכפול סביבה קרובה יותר אל רירית מערכת העיכול האנושית תאפשר הערכה מדויקת של ביצועי ה-SIM.

במחקר הקודם שלנו, פיתחנו שמחוץ מודל חדש ניתן להשתמש כדי להעריך את הביצועים של סימס שונות בפירוט על-ידי החלת מתח מתמיד לקצוות של הדגימה. אנחנו גם אישר כי מודל לשעבר vivo החדש המוצע, מאפשר מדידה מדויקת היא תחת תנאים אחידים, השוואה מפורטת בין ההופעות של סוגים שונים של סימס23.

במחקר זה, אנו מציגים מראה שלם של הדגם ex-vivo החדש, המתודולוגיה הגדרה מפורטים של הדגם ex-vivo החדש מוסבר בפירוט באמצעות קטעי וידאו ודמויות. הדגם ex-vivo החדש כולל חלקים זמינים בקלות, ניתן להגדיר במהירות. תיאורים של הגדרה מפורטים מתודולוגיה יתרום להפצת המודל החדש.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

להלן כללי התנהגות מנחים את טיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת קיוטו הפאכטאראל מראש של התרופה.

1. הכנת דגימות באמצעות בטן חזירי

הערה: הצעד הראשון הוא להכין דגימות כדי לשמש הדגם ex-vivo (איור 1). עובי הקיר קיבה חזירי משתנה באזורים שונים של הקיבה. השתמש בשליש העליון של הקיבה חזירי, אשר דומה יחסית שהבטן האנושית. הכללת דגימות לא במקום שבו לא נמצא העלאת הרשאות submucosal בשל פיברוזיס.

  1. חותכים דגימות קיבה לריבועים עם מידות משוער 6 × 6 ס מ.
  2. לאחסן דגימות קיבה באופן מיידי בטמפרטורה של-30 מעלות צלזיוס.
  3. הפשרת קפוא דגימות קיבה לפני ההפריה מדידה כדי להבטיח תנאי מדידה אחידה.

2. הגדרה מפורטים מתודולוגיה של מודל לשעבר Vivo חדש

הערה: למתוח את הדגימה המופשרים על לוח בשתי דרכים שונות. במודל קונבנציונאלי ex-vivo , לתקן את הדגימה עם סיכות (איור 1 א')19,20,21,22. מצד שני, ב- ex-vivo הדגם החדש, לתקן או למתוח את שני הקצוות של הדגימה עם קטעי לייצר מתח תמידי (איור 1B, ג). כל החלקים של המודל החדש קל להשיג, ניתן להשלים את ההתקנה של הדגם החדש במהירות (איור 2). ההליך של הדגם החדש הוא כדלקמן (איור 3):

  1. לחבר את הקליפ מפלדת ואת החוט מפתח הקרס בצורת S (איור 3 א).
  2. לחבר את החוט, הקרס בצורת S ואת המשקל (איור 3 א).
  3. לחבר את הקרס הקצה השני של הכבל. מכשיר המתיחה הושלמה בתוך התהליך הנ ל (איור 3B).
  4. לתקן בגלגלת (איור 2b) בשני קצותיו של הבסיס (איור 3C).
  5. במקום במשטח גומי (6 x 6 ס מ) על המרכז של הבסיס (איור 3C).
  6. מקם את הדגימה קיבה על צלחת גומי ו צביטה שהדגימה מסתיים עם הקליפ של המכשיר המתיחה.
  7. לתלות את המשקל דרך גלגלת (צד שני). ובכך, מתח מתמיד ניתן ליישם את הדגימה (איור 4).
  8. להתחיל את המדידה של SEH, כי בתום לחלוטין ההתקנה של הדגם החדש (ראה שלב 3 להלן).

3. הערכה של ביצועי ה-SIM

הערה: במחקר זה, השתמשנו תמיסת מלח (NS) ו- 0.4% נתרן היאלורונית (HA) כמו סימס כדי להיבדק, ולמדוד את סה של סימס 2. שלוש מדידות עצמאי מבוצעות. נתונים המתקבלים מבוטא את וסטיית (ש). ניתוח סטטיסטי בוצעה באמצעות התוכנה ניתוח סטטיסטי (GraphPad מנסרה 7). ניתחנו משתנים רציפים (סה) עם מבחן t של הסטודנט, את מגניטודות עם P < 0.05 נחשבו משמעותית. המדד של SEH הוא כדלקמן (איור 5).

  1. לבצע התאמת נקודת אפס מד גובה, בהתבסס על הגובה של רירית לפני הליך העלאת הרשאות submucosal. בפירוט, לבצע התאמת נקודת אפס על-ידי לחיצה על לחצן מראש לאחר תיקון גם בשיאה של השטח הרירית.
  2. להזריק 2.0 מ ל כל אחד מהפתרונות אופקית לתוך submucosa מן השוליים הדגימה באמצעות מזרק 2.5-mL ואת מחט בקוטר 23, לבצע הליך של העלאת רמת הרשאות submucosal (איור 5A-C).
  3. מדד SEH מיד באמצעות מד גובה דיגיטלי ב 0, 2.5, 5, 7.5, 10, 12.5, 15, 17.5, 20, 30, 45, ו- 60 דקות לאחר הזריקה (איור 5D). בפירוט, שיא הגובה מוצג על מד גובה בעת תיקון גם לראש העלאת רמת הרשאות submucosal.
  4. לבצע שלוש מדידות עצמאי ולבטא את התוצאות שהושג ממוצע, סטיית תקן.
  5. לנתח נתונים המתקבלים באמצעות תוכנה סטטיסטית מתאימה, להעריך את הביצועים של סימס (הביצועים ניתן להשוות בין כל סים.)

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

סה נמדדה לאורך זמן דגם ex-vivo חדש או קונבנציונלי שמחוץ מודל. הערכים של SEH (NS) נמדד באמצעות מודל המקובלת [NS שהוזרק למחזור submucosa של הדגימה קבוע עם סיכות (0.0 N)] היו 5.7 mm (0 דקות), 3.6 מ מ (5 דקות), 3.0 מ מ (10 דקות), ו- 2.2 מ"מ (30 דקות). בדרך זו, הערכים של SEH ירד עם הגדלת הקפצות הזרקה. ניתוח דומה בוצעה באמצעות 0.4% HA במקום NS. הערכים של SEH (0.4% HA) היו 6.5 מ מ (0 דקות), 5.2 מ מ (5 דקות), 4.8 מ מ (10 דקות), ו 4.1 מ"מ (30 דקות). SEHs שנוצר של 0.4% HA היו גבוה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הקיבה חזירי המשמש עבור הדגם החדש לאחסן במקפיא מיד לאחר כריתה, לשמש בתוך כמה חודשים אחרי קפוא, מאז הרעננות של הקיבה החזירים חיונית למדידה SEH. (נמדד SEH באמצעות דגימות קיבה מוקפאים ולא מוקפאים, ואנו אישר כי לא היה הבדל בתוצאה מידה סה.)

האיכות של דגימות קיבה מושפעת במידה רבה השונות האינדיבידואלית של חזירי בטנם. לפיכך, מומלץ לכלול דגימות מן הסתם עבה או דגימות עם קפלי רבים לפני המדידה. יתר על כן, ייתכן הדגימות דגימות לא מתאים למדידה SEH בשל פיברוזיס. מומלץ להוציא דגימות לא במקום שבו לא נמצא העלאת ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי קיוטו הטכנולוגיה החדשנית למחקר רפואי & פיתוח מערכת תמיכה, ועל ידי התוכנית המחקר Translational; קידום אסטרטגי עבור היישום המעשי של טכנולוגיה רפואית חדשנית (TR-ספרינט) מהסוכנות יפן למחקר רפואי, פיתוח (AMED).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
משקל (153.1 גרם)
גלגלת מסוג קבועH.H.H. ייצורVS25
בקוטר 0.45 מ"משרשרת ניסהY-5
קליפ נירוסטה ברוחב 147 מ"מKOKUYOללא
חוט מפתח נירוסטה באורך 12 ס"משרשרת ניסהP-702
נירוסטה וו בצורת STRUSCO NAKAYAMATCS1.2
נירוסטה הניתנת לנעילה וו בצורתS מכונת Mizumoto MfgB2054
בסיס עץ מלבני (45 x 60 ס"מ)ללא
צלחת גומי (5 x 5 ס"מ)ללא
מד גובה דיגיטליMitutoyoHDS-20C
2.5 מ"ל מזרקTerumoSS-02SZ
מחט 23 מדTerumoNN-2332R
MucoUpבוסטון סיינטיפיקאף אחד0.4% נתרן היאלורונאט (HA)
מי מלח (20 מ"ל)Otsuka Pharmaceuticalללאתמיסת מלח רגילה (NS)
GraphPad Prism 7 תוכנהGraphPad Incאף אחד
חוט נירוסטה חוט חיתוך

מקורות

  1. Ono, H., et al. Endoscopic mucosal resection for treatment of early gastric cancer. Gut. 48 (2), 225-229 (2001).
  2. Conio, M., Ponchon, T., Blanchi, S., Filiberti, R. Endoscopic mucosal resection. The American journal of gastroenterology. 101 (3), 653-663 (2006).
  3. Soetikno, R. M., Gotoda, T., Nakanishi, Y., Soehendra, N. Endoscopic mucosal resection. Gastrointestinal endoscopy. 57 (4), 567-579 (2003).
  4. Iishi, H., et al. Endoscopic resection of large sessile colorectal polyps using a submucosal saline injection technique. Hepato-gastroenterology. 44 (15), 698-702 (1997).
  5. Katsinelos, P., et al. A comparative study of 50% dextrose and normal saline solution on their ability to create submucosal fluid cushions for endoscopic resection of sessile rectosigmoid polyps. Gastrointestinal endoscopy. 68 (4), 692-698 (2008).
  6. Yamamoto, H., et al. A novel method of endoscopic mucosal resection using sodium hyaluronate. Gastrointestinal endoscopy. 50 (2), 251-256 (1999).
  7. Yamamoto, H., et al. A successful single-step endoscopic resection of a 40 millimeter flat-elevated tumor in the rectum: endoscopic mucosal resection using sodium hyaluronate. Gastrointestinal endoscopy. 50 (5), 701-704 (1999).
  8. Yamamoto, H., et al. Usefulness and safety of 0.4% sodium hyaluronate solution as a submucosal fluid "cushion" in endoscopic resection for gastric neoplasms: a prospective multicenter trial. Gastrointestinal endoscopy. 67 (6), 830-839 (2008).
  9. Yamamoto, H., et al. Successful en-bloc resection of large superficial tumors in the stomach and colon using sodium hyaluronate and small-caliber-tip transparent hood. Endoscopy. 35 (8), 690-694 (2003).
  10. Kishihara, T., et al. Usefulness of sodium hyaluronate solution in colorectal endoscopic mucosal resection. Digestive endoscopy. 24 (5), 348-352 (2012).
  11. Yoshida, N., et al. Endoscopic mucosal resection with 0.13% hyaluronic acid solution for colorectal polyps less than 20 mm: a randomized controlled trial. Journal of gastroenterology and hepatology. 27 (8), 1377-1383 (2012).
  12. Uraoka, T., et al. Effectiveness of glycerol as a submucosal injection for EMR. Gastrointestinal endoscopy. 61 (6), 736-740 (2005).
  13. Conio, M., et al. Comparative performance in the porcine esophagus of different solutions used for submucosal injection. Gastrointestinal endoscopy. 56 (4), 513-516 (2002).
  14. Moss, A., Bourke, M. J., Metz, A. J. A randomized, double-blind trial of succinylated gelatin submucosal injection for endoscopic resection of large sessile polyps of the colon. The American journal of gastroenterology. 105 (11), 2375-2382 (2010).
  15. Lee, S. H., et al. A new method of EMR: submucosal injection of a fibrinogen mixture. Gastrointestinal endoscopy. 59 (2), 220-224 (2004).
  16. Hurlstone, D. P., et al. EMR using dextrose solution versus sodium hyaluronate for colorectal Paris type I and 0-II lesions: a randomized endoscopist-blinded study. Endoscopy. 40 (2), 110-114 (2008).
  17. Huai, Z. Y., Feng Xian, W., Chang Jiang, L., Xi Chen, W. Submucosal injection solution for endoscopic resection in gastrointestinal tract: a traditional and network meta-analysis. Gastroenterology research and practice. 2015, 702768(2015).
  18. Yandrapu, H., et al. Normal saline solution versus other viscous solutions for submucosal injection during endoscopic mucosal resection: a systematic review and meta-analysis. Gastrointestinal endoscopy. , (2016).
  19. Fernandez-Esparrach, G., Shaikh, S. N., Cohen, A., Ryan, M. B., Thompson, C. C. Efficacy of a reverse-phase polymer as a submucosal injection solution for EMR: a comparative study (with video). Gastrointestinal endoscopy. 69 (6), 1135-1139 (2009).
  20. Tran, R. T., Palmer, M., Tang, S. J., Abell, T. L., Yang, J. Injectable drug-eluting elastomeric polymer: a novel submucosal injection material. Gastrointestinal endoscopy. 75 (5), 1092-1097 (2012).
  21. Akagi, T., et al. Sodium alginate as an ideal submucosal injection material for endoscopic submucosal resection: preliminary experimental and clinical study. Gastrointestinal endoscopy. 74 (5), 1026-1032 (2011).
  22. Eun, S. H., et al. Effectiveness of sodium alginate as a submucosal injection material for endoscopic mucosal resection in animal. Gut and Liver. 1 (1), 27-32 (2007).
  23. Hirose, R., et al. Development of a new ex vivo model for evaluation of endoscopic submucosal injection materials performance. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 79, 219-225 (2018).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים