הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

ניטור לא הורסות של פיתוח מתכלה מבוססי לגרדום רקמות מהונדסים כלי דם באמצעות טומוגרפיה אופטית קוהרנטית

5.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58040

⸱

3 באוקטובר 2018

 ,  ,  ,  ,  , 

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול צעד אחר צעד גמישה, תקופה ארוכה ניטור התהליך של שיפוץ כלי הדם והשפלה לגרדום בתרבות בזמן אמת של מתכלה פולימריים מבוססי לגרדום רקמות מהונדסים כלי דם עם גירוי פועמת באמצעות טומוגרפיה אופטית קוהרנטית מתואר כאן.

תקציר

שתלי כלי הדם מהונדסים בעלת מאפיינים מבניים מכניים דומים לכלי הדם טבעי צפויים לפגוש את הדרישה הגוברת מעקף עורקים. אפיון של הדינמיקות צמיחה ואת תהליך שיפוץ של פולימר מתכלה מבוססי לגרדום רקמות מהונדסים כלי דם (TEBVs) עם גירוי פועמת חיונית הנדסת רקמות עילאיים. טכניקות דימות אופטי להתבלט בתור כלים רבי-עוצמה עבור ניטור אמוניה רקמות מהונדסים מאפשר דימות ברזולוציה בתרבות בזמן אמת. מאמר זה מדגים גמישה, מהר בזמן אמת הדמיה אסטרטגיה כדי לפקח על הגידול ובניה של TEBVs בתרבות לטווח ארוך באמצעות טומוגרפיה אופטית קוהרנטית (אוקטובר). מורפולוגיה גיאומטריות מחושבת, כולל תהליך שיפוץ כלי הדם, עובי הקיר של השוואה של עובי TEBV נקודות זמן תרבות אחרת, נוכחות של גירוי פועמת. לבסוף, OCT מספק אפשרויות מעשיות להשגחה בזמן אמת השפלה של פולימר ברקמות בשחזור תחת גירוי פועמת או לא, כל קטע כלי השיט, על ידי לעומת הערכת השימוש השפלה פולימרי סריקה microscopic(SEM) אלקטרון, מיקרוסקופ מקוטב.

מבוא

רקמות מהונדסים כלי הדם (TEBVs) הוא חומר המבטיחים ביותר שתל וסקולרית אידיאלי1. כדי לפתח שתלי להיות שימושי קלינית עם מאפיינים מבניים ופונקציונליים דומים ככלים מקורית, לטכניקות שונות עוצבו כדי לשמור על תפקוד כלי הדם2,3. אמנם היו כלי הנדסה במחירים patency קביל במהלך ההשתלה, מחקר קליני שלב III4, עלות גבוהה ותרבות ארוכת טווח להציג גם את הצורך בפיקוח על התפתחות TEBVs. הבנה matrix(ECM) חוץ-תאית צמיחה שיפוץ, עיבוד תהליכי TEBVs בסביבת כימותרפיה-מכניים ביונים יכול לספק מידע חיוני להתפתחות של הנדסת רקמות עילאיים.

האסטרטגיה אידיאלי כדי לעקוב אחר הת....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. מתכלה PGA לגרדום המבוסס על תרבות כלי רקמות מהונדסים

  1. ייצור PGA לגרדום
    1. לתפור רשת PGA (בקוטר 19 מ מ, עובי 1 מ"מ) סביב צינורות סיליקון מחוטא ע י אתילן אוקסיד (באורך 17 ס"מ 5.0 מ"מ קוטר, בעובי 0.3 מ מ) באמצעות 5-0 בתפר.
    2. לתפור טפלון (ePTFE, אורך 1 ס מ) 4-0 בתפר על גבי אחד מהקצוות של PGA רשת, החופף של 2 מ מ.
    3. טובלים PGA פיגומים עם יד 1 מול/ליטר NaOH במשך 1 דקה כדי להתאים את המבנה המרחבי של רשת השינוי ומשרים במים כיתה תרביות רקמה שלוש פעמים למשך 2 דקות כל אחד. בעדינות פאט יבש לגרדום בנייר טישו בכל פעם. ואז לייבש פיגומים בשכונה עם מפוח לשעה.
  2. הרכבה של ביוריאקטור ו- Y-הצומת עבור הדמיה OCT
    1. משרים את הזכוכית ע....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

מערכת תלת מימדי התרבות כללה תא תרבות את ביוריאקטור ובמערכת זלוף עם מחזור נוזל סגור10,13 (איור 1). הקטטר הדמיה OCT היה מוכנס לתוך בקצה הדיסטלי של Y-הצומת, התרחקה בצינור סיליקון עבור הדמיה. הדמיה OCT שימשה תחילה ניסחו אפיון מבניים TEBVs מבוססי לגרדום פולימריים מתכלים במהלך הטיפוח-תרגול ביוריאקטור.

איור 2 הראו בתהל.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

כדי ליצור מהונדסים כלי עם מבנה, תכונות מכניות דומים לאלה של כלי הדם יליד יכול להוביל לקצר את הזמן לשימוש קליני הוא המטרה הסופית של הנדסת כלי הדם. טכניקות דימות אופטי היתר הפריט החזותי של רקמות מהונדסים וסקולרית רכיבים ספציפיים, אשר לא יכול לפקח על מבנים בודדים ברחבי תרבות וחשיפה בשתלי סביבה תרבות מבלי להתפשר על עקרות7. במאמר זה, תא תרבות מופרד ממערכת זלוף. מערכת עצמאית יחסית זלוף מבטיח הקטנת הסיכון של זיהום במהלך התרבות והמיקום של OCT guidewire. בינתיים זה intraluminal הדמיה אימצו בקלות, בטיחות מה.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שיש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.

תודות

אנחנו רוצים להכיר את המדע ואת הטכנולוגיה תכנון הפרוייקט של בפרובינצית גואנג-דונג של סין (2016B070701007) לתמיכה עבודה זו.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
רשת PGAצינור סיליקון Synthecon
קול פארמר
Cole Parmer
St. Jude Medical, IncILUMIEN™ אופטיקה וסחר; מערכת
סריקת אלקטרונים מיקרוסקופיתפיליפסFEI פיליפס XL-30
מיקרוסקופ מקוטבאולימפוסאולימפוס BX51
תפריםג'ונסון & משאבת פעימות ג'ונסון
הלב וכלי הדם גואנגדונג
תוכנת הדמיה LightLabSt. Jude Medical, Inc
מחבר מערכת OCT תוך-וסקולרית מכון

מקורות

  1. Chan-Park, M. B., et al. Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 88, 1104-1121 (2009).
  2. Ballyns, J. J., Bonassar, L. J. Image-gui....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

כלי דם בהנדסת רקמותגירוי פולסטיליעיצוב מחדש של כלי דםניתוח עובי הדופןמיקרוסקופיה אלקטרונית סורקתמיקרוסקופיה מקוטבתפיגום PGAתאי שריר חלק של עורק טבילי אנושי