אנו מציגים שיטה כירורגית לזירוז היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון בחולדות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
אנו מציגים שיטה כירורגית לזירוז היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון בחולדות.
נכון חדרית (RV) כשל הנגרם על ידי עומס ממושך הוא תורם מרכזי על התחלואה והתמותה מספר הפרעות ריאות. לשחזור ואמין מודלים חייתיים של RV כשל הן מוצדקת ולכן על מנת לחקור מנגנוני המחלה ואפקטים של אסטרטגיות טיפוליות אפשריות. פסים של תא המטען ריאתי היא שיטה נפוצה לזירוז היפרטרופיה RV מבודד אבל באופן כללי, מודלים שתואר לעיל לא הצליחו ליצור מודל יציב של RV היפרטרופיה וכישלון.
אנו מציגים מודל עכברוש של לחץ יתר הנגרמת RV היפרטרופיה הנגרמת על ידי עורק ריאתי פסים (PTB) המאפשר מתבטא בצורות שונות של RV היפרטרופיה עם ובלי RV כשל. אנו משתמשים המהדק ligating ששונה כדי לדחוס סרטון טיטניום סביב תא-המטען ריאתי קוטר פנימי מוגדר מראש. אנו משתמשים קטרים שונים קליפ לזירוז בשלבים שונים של המחלה של היפרטרופיה RV מתון לכישלון RV מפוצה.
RV היפרטרופיה מפתחת באופן עקבי בחולדות נתון להליך PTB, בהתאם לקוטר של הסרטון סימון יישומית, אנחנו יכולים להפיק עולה מחלות שונות ועד היפרטרופיה מדובבים RV מפוצה חמור כשל עם גילויי לב במיוחד.
המודל PTB הציג הוא שמודל תקף וחזק של עומס המושרה RV היפרטרופיה וכישלון זה יש כמה יתרונות אחרים דגמי סימון כולל הפארמצבטית גבוהה ואפשרות גרימת כשל RV חמור ולא מפוצה.
החדר הימני (RV) יכול להסתגל עומס לחץ מתמיד. עם הזמן, אולם, מנגנונים גמישים להיכשל לקיים את תפוקת הלב, הקרוואן dilates, בסופו של דבר RV נכשל. תפקוד RV הוא הגורם העיקרי prognostic של מספר הפרעות ריאות כולל לחץ דם עורקי ריאתי (הפה), לחץ דם ריאתי תרומבואמבוליים (CTEPH) של צורות שונות של מחלת לב מולדת עם עומס הלחץ (או אמצעי אחסון) של לקרוואן למרות הטיפול האינטנסיבי, RV כשל נשאר השולט סיבת המוות בתנאים אלו.
כתוצאה מאפיינים ייחודיים1,2 ופיתוח embryological3 של הקרוואן, הידע המופק ספיקת לב שמאל לא יכול פשוט להיות אקסטרפולציה ספיקת לב ימין. מודלים חייתיים של ספיקת לב ימין ולכן הדרושים על מנת לחקור את המנגנונים של RV כשל ואסטרטגיות טיפול תרופתי פוטנציאליים.
ישנם ניסיוני מודלים של יתר לחץ דם ריאתי שנגזרות SU5416 בשילוב עם היפוקסיה (SuHx)4 או monocrotaline (MCT)5, אשר זירוז RV אי ספיקת למחלות להערכת ריאתי. מודלים אלה משמשים להעריך הטיפולית השפעות הסמים את המטרה להערכת ריאתי. גם את SuHx וגם את דגם MCT הם afterload שאינו קבוע דגמי קרוואנים כשל. כתוצאה מכך, זה בלתי אפשרי להסיק אם שיפור תפקוד RV לאחר התערבות היא משנית ביחס afterload הפחתת תופעות כלי דם ריאתי או אם היא נגרמת על ידי השפעה ישירה על לקרוואן בנוסף, דגם MCT יש מספר השפעות לבבי במיוחד.
במודלים סימון עורק ריאתי ניסיוני, afterload של הקרוואן קבוע עקב כיווץ מכאני של תא המטען ריאתי. דבר זה מאפשר חקירת ההשפעות לב ישירה של התערבות על הקרוואן עצמאית כל ההשפעות כלי דם ריאתי6,7,8,9. בדרך כלל, פסי מתבצע על ידי הצבת מחט לאורך המטען ריאתי. חבל ממוקמים סביב המחט ואת תא המטען ריאתי וקשר עם קשר, ואז המחט הוסר עוזב את התפר סביב המטען ריאתי. בהתאם מד של המחט, דרגות שונות של constrictions יכול להיות מיושם, אך למרות גישה זו בשימוש נרחב, יש לו כמה חסרונות. ראשית, מקוטר פסים הוא לא בדיוק זהה הקוטר החיצוני של המחט כמו קשירה קשורה סביב המחט וגם תא המטען ריאתי. שנית, ייתכן וריאציה משמעותית עד כמה הדוק הקשר קשורה ומקשה להתרבות מידה מסוימת של פסים. זה יוביל וריאציה בקוטר סימון ועל ידי כך פיזור גדול יותר. לבסוף, הקשר עשוי לבוא חופשי לאורך זמן.
מחקר אחד חל על סרטון טנטלום עצומות למחצה סביב עורק ריאתי10. הם דחוסים הסרטון סביב המטען ריאתי בשטח הפנימי של 1.10 מ מ2 , לעומת זה נתון פסים בתפר באמצעות מחט 18 גרם של חולדות. בסך הכל, פסים עם הקליפ היה קשור עם פחות סיבוכים כירורגיים-פרי, נתונים שונות.
מבוססת על עקרונות שתואר על ידי Schou ואח11, אנחנו עוד יותר שפותחו, אפיינו את המטען ריאתי פסים (PTB) מודל של RV היפרטרופיה וכישלון. כאן, אנו מציגים את הניסיון שלנו באמצעות מודל זה מבוסס על תוצאות מחקרים קודמים12,13. עבור דגם זה, סרטון טיטניום דחוס סביב תא-המטען ריאתי מדויק מראש הקוטר הפנימי, אשר עשוי להיות מותאם בתערובות לזירוז פנוטיפים כשל RV ברורים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל העכברושים טופלו בהתאם להנחיות הלאומי הדני שמתואר החוק הדני על ניסויים בבעלי חיים וסדר השרים על ניסויים בבעלי חיים. כל הניסויים שאושרו על-ידי ועדת הבדיקה אתיקה מוסדית, לפי החוק הדני לחקר בעלי חיים (מספר אישור 2012-15-2934-00384, דנית משרד המשפטים).
1. התאמת המהדק Ligating
הערה: רצועות של תא המטען ריאתי מבוצע עם ששונה פתוח ligating המהדק עם הלסת בזווית. Applier משתנה עם מנגנון מתכוונן להפסיק לעצור את הדחיסה הלסתות מגיעות המרחק המדויק של אחד מהשני. כאשר כספת קטנה נבדק קליפ דחוס עם applier שונה, לומן נמשכת בין הרגליים של הסרטון בקוטר מסוים על פי ההתאמה של מנגנון עצירה (איור 1).

איור 1: הליך PTB. (א) כירורגי כלים המשמשים עבור ההליך PTB כולל את המהדק ligating (חץ כחול). (B) התחנה מתכוונן מנגנון של נבדק קליפ applier. להפוך את גלגל השיניים (חץ כחול) יתאים את המיקום של ה-pin (חץ צהוב), אשר עוצר את סגירת applier הלסתות מגיעות מרחק מסויים אחד מהשני. המרחק מקביל פעמיים את העובי של הרגליים של הקליפ פלוס הקוטר הפנימי של הסרטון, כאשר הסרטון דחוס, התפקיד באמצעות מחט למשל בקוטר חיצוני ידוע. (ג) applier דחיסת קליפ טיטניום הקוטר הפנימי המדויק שצוין מראש על-ידי התאמת applier. קוטר (D) הפנימי של הסרטון דחוס יכול להיות מותאם בתערובות לזירוז severities שונות של RV היפרטרופיה וכישלון. עבור הנתונים שהוצגו, הקוטר הפנימי של 1.0 מ מ שימשה לזירוז מתון RV היפרטרופיה הקוטר הפנימי של 0.6 מ"מ שימש כדי לגרום כשל RV מתון, הקוטר הפנימי של 0.5 מ מ שימש כדי לגרום כשל חמור RV. (E) הסרטון לאחר היישום סביב המטען ריאתי. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
2. הכנה של העכברוש
הערה: משטרי אחרים של משככי כאבים ניתן להחיל.
3. בידוד של המטען ריאתי
4. יישום של הקליפ
5. סגירת בית החזה
6. ניתוח דמה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
באמצעות ההליך PTB המתוארים במחקרים קודמים שלנו קבוצה12,13, אנחנו המושרה RV היפרטרופיה (PTB מתון) על ידי פסים עם סרטון 1.0 מ מ, מידה מתונה של RV כשל (PTB מתון) על ידי ערעור עם סרטון 0.6 מ"מ, תואר חמור RV כשל (PTB חמורה) על ידי ערעור עם סרטון 0.5 מ מ. העכברושים נתון חמור סימון מפותחת במיוחד הלב ביטויים מכישלון RV כולל אי ספיקת כבד, מיימת (איור 5E). כל העכברושים הוערכו שבעה שבועות לאחר PTB ועברתי עכברי ד...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
אנו מתארים שיטה נגיש, מאוד לשחזור של עורק ריאתי פסים באמצעות המהדק ligating ששונה כדי לדחוס סרטון טיטניום סביב המטען ריאתי. על-ידי התאמת את applier כדי לדחוס את הקליפ במגוון קטרים הפנימי, פנוטיפים שונים של RV היפרטרופיה וכישלון יכולה להיגרם כולל כשל חמור RV עם גילוי לב במיוחד ההחרפה.
למרות פשוט, הפרוטוקול מכיל כמה צעדים קריטיים. חשוב, החולדות אינו יכול להיות גדול מדי כאשר הם עוברים את ההליך PTB. מניסיוננו, היונקים עכברוש Wistar במשקל של 100-120 גר' מתאימים עבור ההליך. אצל חולדות גדולות יותר, י...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים אין לחשוף
עבודה זו נתמכה על ידי המועצה הדנית מחקר עצמאי [11e108410], קרן לב הדנית [12e04-R90-A3852 ו 12e04-R90-A3907] של נובו נורדיסק קרן [NNF16OC0023244].
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 17 G IV Venflon Cannola | Becton Dickinson, US | 393228 | דיסטלי 2 מ"מ מהמחט נחתכו |
| מזרק 1 מ"ל + 26 G מחט | Becton Dickinson, US | 303172 & 303800 | |
| 4-0 תפר רב-פילמנט נספג | Covidien, US | GL-46-MG | Polysorb, סגול, 5x18 " |
| 4-0 קשירה רב-פילמנטית | Covidien, ארה"ב | LL-221 | פוליסורב, סגול, 98 אינץ' |
| בופרנורפין | אינדיביור בריטניה בע"מ | רכש מקומי, Temgesic 0.3 מ"ג/מ"ל | |
| קרפרופן | ScanVet, DK | 27693 | נורודיל 50 מ"ג/מ"ל |
| כלורהקסידין | Faaborg Pharma, DK | ||
| קבלן | Aesculap, גרמניה | BV010R | Blunt, שמירה עצמית, 70 מ"מ |
| אוזן Hooklet | Lawton, גרמניה | 66-0261 | קטן, 14 ס"מ, קצה מותאם לזווית של 85° |
| ג'ל עיניים | Decra, UK | Lubrithal, | |
| מלקחיים לרכש מקומי, רקמות עדינות | לוטון, גרמניה | 09-0020 | |
| מלקחיים, ניתוח | לוטון, גרמניה | 09-0013 | 1 רגיל, 1 עם קצה שונה לזווית של 100° |
| מערכת הרדמה גז | Penlon Limited, בריטניה | SD0217SL | גוזם שיער סיגמא דלתא וופורייזר |
| Oster | 76998-320-051 | ||
| אופק פתוח קשירה קליפ Applier | Teleflex, ארה"ב | 137085 | שונה עם מנגנון עצירה מתכוונן |
| אופק טיטניום | קליפים טלפלקס, ארה"ב | 001200 | |
| תא אינדוקציה | N/A | ||
| איריס מספריים | לוטון, גרמניה | 05-1450 | |
| איריס מספריים | אסקולאפ, גרמניה | BC060R | |
| מאוורר מכני | אוגו בזיל, איטליה | 7025 | |
| מיקרוסקופ | לוטון, גרמניה | 63-1406 | |
| מיקרוסקופ | קארל זייס, גרמניה | 303294-9903 | |
| מחזיק מחט | לוטון, גרמניה | 08-0011 | TITEGRIP |
| פין | לוטון, גרמניה | 06-0100 | Halsted-Mosquito , ישר |
| בעד Optha | Lohmann & Rauscher, גרמניה | 16515 | טמפון |
| מלח 9 מ"ג/מ"ל | Fresenius Kabi, DK | 209319 | |
| Sevoflurane | AbbVie, ארה"ב | סבוראן, רכש מקומי | |
| וו כירורגי | לוטון, גרמניה | 51-0665 | קושינג, 19 ס"מ, קצה שונה לזווית של 90° |
| סרט כירורגי | 3M, US | 1530-0 | |
| בקר טמפרטורת | CMA מיקרודיאליזה; שוודיה | 8003760 | CMA 450 |
| מכונת שקילה | VWR, ארה"ב | ||
| גמילת חולדות Wistar | Janvier Labs, צרפת | RjHan:WI, 100-120 גרם |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.