הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

טיפול ממוקד, סלקטיבי של Teratomas נגזר תאי גזע Pluripotent באמצעות קרינה חיצוני קרן במודל של חיית-קטן

5.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58115

⸱

17 בפברואר 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Stanford Cardiovascular Institute, Stanford University School of Medicine, 2Department of Medicine, Division of Cardiology, Stanford University School of Medicine, 3Medical Service, Cardiology Section, Veteran Affairs Palo Alto Health Care System, 4Department of Pathology, Stanford University School of Medicine, 5Department of Radiology, Molecular Imaging Program, Stanford University School of Medicine, 6Peking University Shenzhen Health Science Institute, 7Department of Radiation Oncology, Stanford University School of Medicine

במאמר זה

סיכום

מחקר על אסטרטגיות טיפול teratomas נגזר תאי גזע pluripotent חשוב התרגום קלינית של טיפול בתאי גזע. כאן, אנו מתארים לפרוטוקול, ראשית, להפיק תאי גזע-derived teratomas בעכברים ולאחר, מכן, ל סלקטיבי היעד ולטפל ויוו שימוש בעוצמה קטנה-חיה של גידולים אלה.

תקציר

המספר הגדל והולך של קורבנות של "תאי גזע תיירות," השתלת ללא פיקוח של תאי גזע ברחבי העולם, העלה חששות לגבי הבטיחות של השתלת תא גזע. למרות השתלת של הבדיל ולא התאים מובחן הוא מנהג נפוץ, teratomas יכול עדיין לנבוע הנוכחות של תאי גזע מובחן שיורית בזמנו של השתלה או של מוטציות ספונטניות הבדיל תאים. כי תאי הגזע טיפולים מועברות לעיתים קרובות לאתרים רגישים מבחינה אנטומית, גידולים קטנים אפילו יכולה להיות הרסנית קלינית, וכתוצאה מכך עיוורון, שיתוק, הפרעות קוגניטיביות, בתפקוד הלב וכלי הדם. גישה כירורגית באתרים אלה עשוי גם להיות מוגבל, עוזב חולים עם כמה אפשרויות טיפוליות. שליטה תאי גזע התנהגות בלתי הולמת, לפיכך, הוא קריטי עבור התרגום קלינית של טיפול בתאי גזע.

קרינה חיצוני קרן מציע אמצעי יעיל של העברת טיפול ממוקד כדי להקטין את הנטל טרטומה תוך מזעור הפגיעה סביב האיברים. בנוסף, שיטה זו מונע מניפולציה גנטית או ויראלי התמרה חושית של תאי גזע-אשר משויכים חששות יעילות ובטיחות קליניים נוספים. כאן, אנו מתארים את פרוטוקול ליצירת teratomas נגזר תאי גזע pluripotent בעכברים וכדי להחיל חיצוני קרן הקרנות באופן סלקטיבי ablate ויוו גידולים אלה.

מבוא

ההתפתחות של תאי גזע טיפולים התחדשות רקמות נתקל מספר מחסומים בעשרות השנים האחרונות, פוגעות המאמצים לפריסה קליניים יעיל. משוכות אלה כוללים שמירה תא המסכן באתרים של משלוח, תאי הגזע immunogenicity פוטנציאל אמצעים teratomas טופס1. Tumorigenicity הוא של דאגה קלינית מסוימת כמו זה עלולים להזיק לתאי גזע להשתלות נמענים2. חשבונות היווצרות גידול עקב הזרקת תאי גזע ללא פיקוח כבר דווחו מספר הגדרות קליניים3,4,5. פוטנציאל היווצרות טרטומה הוא ביותר לעתים קרובות ציטט את הדאגה קליניים בהתפתחות תאי גזע (PSC) pluripotent יש הביא עיכובים וביטולים של מספר בעלי פרופיל גבוה בתאי גזע עובריים (ESC) וכן המושרה תא גזע pluripotent (iPSC) ניסויים6,7,8,9. לפיכך, יש צורך דחוף חקירה translational ייעודי לקראת מתן טיפול מתאים, צריך להיווצר גידולים iatrogenic אלה.

נכון להיום, רוב אסטרטגיות כדי לשלוט התנהגות בלתי הולמת תאי גזע התמקדו הפחתת מספר מגירסה tumorigenic פוטנציאליים2,10. למרבה הצער, רק מספר קטן של תאים שיורית (למשל., עונה 1 פרק 104 -עונה 1 פרק 105 תאים11) דרוש עבור טרטומה המרמזת, רחוק מתחת לגבול זיהוי צוטט על ידי מבחני זמין כעת12, 13. מגבלות אחרות של באמצעות שיטות preseparation אלה כוללים יעילות נמוכה, הוצאות גבוהות, הסתמכות על המתלים מתא בודד יכול להיות לא מתאימות גישות הנדסת רקמות חדשות יותר, ירידת ערך פוטנציאלית של התא הישרדות, engraftment.

מחקרים מעטים עסקו אפשרויות טיפול בעקבות היווצרות טרטומה. אולי האסטרטגיה ביותר למד היטב הוא שילוב של "התאבדות" גנים לתוך תאי גזע14,15. שיטה זו כרוכה מניפולציה גנטית תאי גזע לשלב של ג'ין inducible אפופטוזיס-הפעלת כי יכול להיות מופעל על ידי גירוי תרופתי postinjection, ובכך מספק גישה הצלה אם מוזרק מפרישים teratomas. גישה זו, עם זאת, סובל חסרונות משמעותיים, כולל את המטרה השפעות שינויים גנטיים של מגירסה ואת הפוטנציאל התפתחות הדרגתית של ההתנגדות סמים16. בגישה דומה מנצל מולקולות קטנות כדי לגרום מוות תאי סלקטיבי של מגירסה דרך עיכוב של מסלולים אנטי-מוות17. קבוצות אחרות בוחר תא מות מגירסה באמצעות נוגדנים נגד סמני פני השטח pluripotency, כגון podocalyxin, כמו חלבון-1 (PODXL)18. העיתוי של מולקולה קטנה או נוגדן משלוח עומד יש השפעה משמעותית על הפוטנציאל הטיפולי מגירסה אם נמסר מוקדם מדי, אולי חוסר יעילות טיפולית אם נמסר מאוחר מדי. בנוסף, ההשפעות מערכתית של מולקולות קטנות, נוגדנים להשתמש בצורה הזאת לא נחקרו.

גישה אלטרנטיבית לטיפול גידולים אלה מסתמך על באמצעות טיפול קרינתי חיצוני קרן (EBRT). EBRT הוא אחד שהאפנות העיקריים מועסקים כיום הטיפול של גידולים מוצקים19. חידושים EBRT, כולל הפיתוח של קרן פרוטונים ו סטיאוטטי radiosurgery, אפשרו מיקוד משופרת של מבנים פתולוגי תוך הימנעות נזק הרקמות, שהופך EBRT קונפורמית אידיאלי עבור מיעון תפלצת היווצרות מבנים רגישים מבחינה אנטומית20. בנוסף, שיטה זו מונע את מניפולציה גנטית או ויראלי התמרה חושית של תאי גזע, אשר הם שניהם כרוך בטיחות קלינית נוספת, היעילות נוגע15. לבסוף, ההתקדמות מיקרו-irradiators הפעלת היישום של EBRT מכרסמים21.

במאמר זה נדגים כיצד ליצור מודל קטן-חיה היווצרות טרטומה באמצעות הזרקת iPSCs אנושי בעכברים. ואז נראה איך ליישם EBRT באופן סלקטיבי להשמיד גידולים אלה ויוו עם מינימום נזק לרקמות. גישה זו מספקת טיפול ממוקד teratomas נגזר PSC תוך הימנעות ההשפעות את המטרה של המשלוח מערכתית של מולקולות ביולוגיות, פפטידים מניפולציה גנטית של מגירסה. למטרות לניסויים קליניים, אנו מציעים שלב אופציונלי כדי מגלי תאי גזע עם הגנים כתב כדי לעקוב אחר הגידול בתגובה הקרנות באמצעות ביולומינסנציה הדמיה (בלי).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

ניסויים בבעלי חיים זו אושרה והופיע תחת ועדת הבדיקה מוסדיים והפאנל ניהול על מעבדה חיה אכפת באוניברסיטת סטנפורד.

1. תא תרבות של iPSCs

  1. לגדול iPSCs האדם נגזר על ידי התכנות lentiviral על 6-ובכן צלחות מצופה קרום המרתף מטריקס (למשל, matrigel, המכונה מטריקס לכאן בזמן שנסעתי).
  2. מדי יום לשנות את התקשורת של iPSCs מועשר תרבות בינונית (ראה טבלה של חומרים) המקננת-CO 37 ° C ו-5%2.
  3. ברגע התאים להגיע למפגש 80-90% (כ מדי 4 ימים), להוסיף 1 מ"ל של האנזים תא רקומביננטי-דיסוציאציה (ראה טבלה של חומרים) לכל טוב ואני דגירה ב 37 מעלות צלזיוס במשך 5 דקות.
  4. לאחר 5 דקות, לנתק את התאים מן הבאר מאת pipetting להעביר אותם ל צינור 15 מ"ל, צנטריפוגה ב 300 x גרם.
  5. לאחר צנטריפוגה, וארוקן את תגובת שיקוע, resuspend בגדר תא לתוך מועשר תרבות בינוני (ראה טבלה של חומרים) מועשר Y27632 מעכב-לדילול 1:1,000.
  6. לבצע ספירת תאים של תאי dissociated, replate את התאים על מצופים מטריצה לוחות 6-ובכן-צפיפות של 2 x 105 4 x 105.

2. התמרה חושית של iPSCs עם גנים כתב כפול-fusion

  1. מעבר iPSCs ב 6-ובכן צלחות לפי השגרה ולהוסיף מועשר תרבות בינוני (ראה טבלה של חומרים) המכיל 6 µg/mL hexadimethrine ברומיד.
    הערה: הגודל האידיאלי המושבה הוא 200-400 תאים/המושבה להניב את היעילות הגבוהה של התמרה חושית.
  2. להתרכז lentivirus עצמית inactivating נושאת גחלילית לוציפראז וירוק חלבון פלואורסצנטי (FLuc-eGFP) מונע על ידי האדם אוביקוויטין promotor-C על ידי צנטריפוגה משקעים עם הרוטור SW-29 ב x 50,000 g עבור 2 h-4 מעלות צלזיוס.
  3. מוסיפים את תרכיז ויראלי iPSCs בצלחת 6-ובכן-ריבוי של זיהום (MOI) של 10, דגירה בין לילה ב 37 ° C-5% CO2.
    הערה: הריבוי של זיהום נקבע על-ידי הביטוי של חלבון זריחה monomeric נותחו על ידי תא לפעיל על-ידי קרינה פלואורסצנטית מיון (FACS) סריקה.
  4. למחרת, להסיר את הווירוס בעזרת צנטריפוגה הלוחיות 6-ובכן iPSC ב x 300 גרם במשך 6 דקות בטמפרטורת החדר.
  5. לשנות את התקשורת מדי יום עם מועשר תרבות בינוני (ראה טבלה של חומרים) ומעבר לפי פרוטוקול. לנצל מיקרוסקופ זריחה כדי לקבוע את היעילות התמרה חושית המשוער עבור eGFP.
  6. יעילות של 30-40% מספיקה לצורך מיון FACS. להמשיך FACS של hiPSCs לבטא eGFP אם לפחות 30-40% של התאים אקספרס eGFP.
  7. כדי לאשר פעילות FLuc ex-vivo, צלחת התאים לבטא GFP ממוין לפי FACS על צפיפות של תאים 5,000 לכל טוב.
  8. דגירה התאים transduced ו- transduced תאים (אשר ישמש הפקד שלילי) עם הכתב ביולומינסנציה בדיקה D-luciferin (μmol 100/L) עבור 6-אייץ למדוד את ביולומינסנציה עם מצלמות-דיגיטליות microplate.

3. השתלת של מגירסה לאגף הגבי של היווצרות טרטומה בעכברים Immunodeficient

  1. להוסיף 1 מ"ל של תא רקומביננטי-דיסוציאציה תערובת אנזימים לכל צלחת 6-ובכן המכיל iPSCs האדם transduced עם גנים כפול-fusion כתב (FLuc-GFP) בתרבות (ראה סעיף 2), תקופת דגירה של 5 דקות.
  2. לאחר תקופת דגירה, לפזר את התאים על ידי השאיפה פיפטה וביטוי. הוסף אמצעי שווה של תרבות בינוני, ואז צנטריפוגה ב x 250 g למשך 4 דקות.
  3. בתום צנטריפוגה, וארוקן את הפתרון supernatant, resuspend בגדר תא ב 30 µL של מטריקס, ומניחים אותו על קרח כדי לשמר את יכולת הקיום שלה לפני ההזרקה. לאשר הקציר של עונה 1 פרק 106 תאים באמצעות של hemocytometer.
  4. אם ניצול כפול-fusion כתב-ג'ין-transfected תאים, להשעות את התאים FACS כפול-חיוביות (מתוך סעיף 2) µL 30 של מטריקס.
  5. לגרום הרדמה בשבוע 8-10 athymic עירום עכברים באמצעות 2% isoflurance עם חמצן 1 ליטר/דקה, ולאחר מכן השתמש תחזוקה 2% איזופלוריין עם 1 ליטר/דקה של חמצן.
  6. באמצעות מזרק 28.5 G, להזריק תא/מטריצה תערובת (ראה טבלה של חומרים) השעיה לחלל תת עורית-האגף, מכוון זריקה של 5 x 10 סה כ3 5 x 106 תאים (כ-100 ul לכל זריקה).
  7. שקול אתר הזרקת יותר סימטרית אם מתכנן לשמור על עכברים הממושכת, מצפה הגידול גדול.
  8. מרדימים בעלי חיים מותרים לשחזר על כרית מחוממת עד אמבולטורי (בדרך כלל < 1h) עם ניטור של קצב נשימה, צבע העור של האצבעות עד אמבולטורי.

4. ביולומינסנציה הדמיה (בלי) של התאים המושתלים להעריך הישרדות Cell וצמיחה תפלצת

  1. -Timepoints הרצוי לאחר חיסון, לבצע זריקה (IP) בקרום הבטן של 375 מ"ג/ק"ג של המכשיר כתב D-Luciferin לתוך העכברים.
  2. 10 דקות לאחר זריקה IP, התמונה ביולומינסנציה אות את החיות anesthetized (מתבצעות כשלב שמתואר 3.5) במשך 30 דקות באמצעות windows רכישה 1דקות במרווחים של 5-מין.
    הערה: רכישות תמונה שבועית מומלצת. הרדמה תישמר במהלך דימות על-ידי אספקת בשאיפה איזופלוריין באמצעות קונוס האף.
  3. לניתוח נתונים, לצייר אזור בעל עניין (ROI) מעל האות רבנות בלי ו, אז, לנרמל הפעם הרכישה לכמת פליטות ביחידות של מרבית פוטונים לשניה לסנטימטר מרובע לכל סטרדיאן (פוטונים/s/ס מ2/sr).

5. תפלצת הקרנה באמצעות של פרה תמונה מונחה בעוצמה (איור 1)

  1. עזים ומתנגד עכבר בקופסת תמונות ציפורים באמצעות 2% איזופלוריין 100% חמצן בספיקה של 1 ליטר/דקה. אחרי העכבר הוא מורדם לחלוטין, להעביר אותו אל המיטה של תמונה מונחה בעוצמה קליניים (ראה טבלה של חומרים). לשמור על הרדמה על ידי 2% איזופלוריין באופן רציף באמצעות קונוס האף.
  2. לרכוש תמונות מיקרו-CT כערכה של הקרנה 400 תמונות מעל 360 מעלות באמצעות של kVp 40, אמא 2 קרן רנטגן, ולשחזר אותם לתוך נפח תמונות עם גודל פיקסל איזוטרופיות של 0.2 מ מ.
  3. תוכנית טיפול קרינה באמצעות הדימויים מיקרו-CT באמצעות חבילת התוכנה RT_Image (http://rtimage.sourceforge.net/) ולבצע את הטיפול.
    הערה: תוכנית הטיפול נעשה שימוש מורכב kVp 225 שני קרני רנטגן, מונחה לעבור טרטומה היעד שטחית תוך כדי עוקפת את פני השטח של כל של העכבר, ממעט את הקרביים המשמש כבסיס. זמני חשיפה עבור הקורות מותאמים לפי רבעון נתוני כיול המערכת כך המינון במרכז הגידול היעד היה 6 Gy.
  4. חזור על תהליך הטיפול ב- 3 ימים רצופים כדי להעביר סך של 18 Gy הגידול היעד.
  5. לשמור על סטנדרט שלאחר הטיפול על בעלי החיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

עכברים מוזרק בדרך כלל תדגים טרטומה היווצרות צמיחה לאחר 4-8 שבועות, כפי שאושר על-ידי מתה על הדמיה (איור 2). גידולים יתכווץ באופן משמעותי כאשר מוקרן עם מנה מצטברת של Gy 18 בהתחשב חודש לאחר הלידה תא, וכתוצאה מכך ירידה משמעותית אות לוציפראז (איור 2). חשוב, רקמות רגילה לקחת 5 מ מ מאתר לקרינה אינן מופיעות יש נזק משמעותי (איור 3).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מקרים אנקדוטיים קורבנות של "תאי גזע תיירות" ונתונים פרה לאשר הסיכון לפתח teratomas הוא חיסרון רציני המשויך PSC טיפולים23. פיתוח של גישות זהיר כדי למנוע ולטפל שהסיכון אמצעים תאי טיפולים, לפיכך, הוא צעד חשוב בקידום התרגום קליני בתאי גזע משובי טיפולים. במאמר זה, אנחנו תיאר שיטה טיפולית פילוח של teratomas PSC-הקשורים באמצעות EBRT במודל של עכברים והראו ניוון דינמי של גידולים לקרינה באמצעות הדמיה רבנות בלי.

אנו מנוצל iPSCs האנושי, נוצר על ידי lentivirus התכנות שיטה, מוזרק במו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

המחברים רוצה להודות את נבחרת מוסדות של בריאות R01 HL134830 (PKN) K08 HL135343 (קאי אס), 5F32HL134221 (JWR); המכון הרפואי הווארד יוז (ASL); את סטנפורד לב וכלי דם המכון (ASL) לתמיכה שלהם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
קו בקרת תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרה אוניברסיטתסטנפורדמעבדת נגויןתרבית תאים של iPSC
Corning מטריג'ל מטריג'ל מטריצת קרום בסיס 354234פישר סיינטיפיקCB-40234תרבית תאים של מדיום תרבית iPSC
Essential 8ATCC-מרכז המשאבים הביולוגיים העולמי30-2203תרבית תאים של iPSC
Tryple EGibco12605-036תרבית תאים של
מעכב iPSC Y27632 2 HCL (מעכב ROCK)Fisher ScientificS104950MGתרבית תאים של iPSC
LentivirusCyagenP170721-1001cjnטרנסדוקציה של iPSC עם גן מדווח היתוך כפול
Polyrbrene זיהום/טרנספקציהמגיב Millipore SigmaTR-1003-Gטרנסדוקציה של iPSC עם גן
מדווח היתוך כפולגן מדווח Fluc-eGFP מונע על ידי מקדם יוביקוויטיןאוניברסיטת סטנפורדמעבדת סם גמבירהתמרה של iPSC עם גן מדווח היתוך כפול
D-luciferinPerkin Elmer122799התמרה של iPSC עם גן מדווח היתוך כפול
וציטומטר זרימה BLI (BD FACSARIA III)BD Biosciences FACSAriaTransduction of iPSC with double fusion reporter gene
microplate spectrofluorometer (Glomax Navigator System)Promega Bio Systems, Sunnyvale, CAGM2000התמרה של iPSC עם גן מדווח היתוך כפול
Xenogen IVIS 200 Perkin Elmer124262BLI
IsofluraneSigma-AldrichCDS019936הקרנה
X-Rad SmART irradiator מונחה תמונה Precision X-ray Inc., North Branford, CTX-Rad SmARTתוכנה להקרנת
RT_Imageאוניברסיטת סטנפורד (http://rtimage.sourceforge.net/)RT_Imagev0.2βהקרנה
חבילת

מקורות

  1. Sallam, K., Wu, J. C. Embryonic stem cell biology: insights from molecular imaging. Methods in Molecular Biology. 660, 185-199 (2010).
  2. Lee, A. S., Tang, C., Rao, M. S., Weissman, I. L., Wu, J. C. Tumorigenicity as a clinical hurdle for pluripotent stem cell therapies. Nature Medicine. 19 (8), 998-1004 (2013).
  3. Amariglio, N., et al. Donor-derived brain tumor following neural stem cell transplantation in an ataxia telangiectasia patient. PLOS Medicine. 6 (2), e1000029(2009).
  4. Kuriyan, A. E., et al. Vision Loss after Intravitreal Injection of Autologous "Stem Cells" for AMD. The New England Journal of Medicine. 376 (11), 1047-1053 (2017).
  5. Berkowitz, A. L., et al. Glioproliferative Lesion of the Spinal Cord as a Complication of "Stem-Cell Tourism". The New England Journal of Medicine. 375, 196-198 (2016).
  6. Zhang, W. Y., de Almeida, P. E., Wu, J. C. Teratoma formation: A tool for monitoring pluripotency in stem cell research. StemBook. , The Stem Cell Research Community. (2012).
  7. Scott, C. T., Magnus, D. Wrongful termination: lessons from the Geron clinical trial. STEM CELLS Translational Medicine. 3 (12), 1398-1401 (2014).
  8. Strauss, S. Geron trial resumes, but standards for stem cell trials remain elusive. Nature Biotechnology. 28 (10), 989-990 (2010).
  9. Coghlan, A. Unexpected mutations put stem cell trial on hold. New Scientist. 227 (3033), 9(2015).
  10. Tang, C., et al. An antibody against SSEA-5 glycan on human pluripotent stem cells enables removal of teratoma-forming cells. Nature Biotechnology. 29 (9), 829-834 (2011).
  11. Lee, A. S., et al. Effects of cell number on teratoma formation by human embryonic stem cells. Cell Cycle. 8 (16), 2608-2612 (2009).
  12. Tano, K., et al. A novel in vitro method for detecting undifferentiated human pluripotent stem cells as impurities in cell therapy products using a highly efficient culture system. PLoS One. 9 (10), e110496(2014).
  13. Kuroda, T., et al. Highly sensitive in vitro methods for detection of residual undifferentiated cells in retinal pigment epithelial cells derived from human iPS cells. PLoS One. 7 (5), e37342(2012).
  14. Cao, F., et al. In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery. Circulation. 113 (7), 1005-1014 (2006).
  15. Cao, F., et al. Molecular imaging of embryonic stem cell misbehavior and suicide gene ablation. Cloning Stem Cells. 9 (1), 107-117 (2007).
  16. Kotini, A. G., de Stanchina, E., Themeli, M., Sadelain, M., Papapetrou, E. P. Escape Mutations, Ganciclovir Resistance, and Teratoma Formation in Human iPSCs Expressing an HSVtk Suicide Gene. Molecular Therapy - Nucleic Acids. 5, e284(2016).
  17. Smith, A. J., et al. Apoptotic susceptibility to DNA damage of pluripotent stem cells facilitates pharmacologic purging of teratoma risk. STEM CELLS Translational Medicine. 1 (10), 709-718 (2012).
  18. Choo, A. B., et al. Selection against undifferentiated human embryonic stem cells by a cytotoxic antibody recognizing podocalyxin-like protein-1. Stem Cells. 26 (6), 1454-1463 (2008).
  19. Yorke, E., Gelblum, D., Ford, E. Patient safety in external beam radiation therapy. American Journal of Roentgenology. 196 (4), 768-772 (2011).
  20. Zhou, H., et al. Development of a micro-computed tomography-based image-guided conformal radiotherapy system for small animals. International Journal of Radiation Oncology • Biology • Physics. 78 (1), 297-305 (2010).
  21. Slatkin, D. N., Spanne, P., Dilmanian, F. A., Gebbers, J. O., Laissue, J. A. Subacute neuropathological effects of microplanar beams of x-rays from a synchrotron wiggler. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 92 (19), 8783-8787 (1995).
  22. Lee, A. S., et al. Brief Report: External Beam Radiation Therapy for the Treatment of Human Pluripotent Stem Cell-Derived Teratomas. Stem Cells. 35 (8), 1994-2000 (2017).
  23. Berkowitz, A. L., et al. Glioproliferative Lesion of the Spinal Cord as a Complication of "Stem-Cell Tourism". The New England Journal of Medicine. 375 (2), 196-198 (2016).
  24. Swijnenburg, R. J., et al. In vivo imaging of embryonic stem cells reveals patterns of survival and immune rejection following transplantation. Stem Cells and Development. 17 (6), 1023-1029 (2008).
  25. Cao, F., et al. Noninvasive de novo imaging of human embryonic stem cell-derived teratoma formation. Cancer Research. 69 (7), 2709-2713 (2009).
  26. Priddle, H., et al. Bioluminescence imaging of human embryonic stem cells transplanted in vivo in murine and chick models. Cloning and Stem Cells. 11 (2), 259-267 (2009).
  27. Dale, R. G. Dose-rate effects in targeted radiotherapy. Physics in Medicine & Biology. 41 (10), 1871-1884 (1996).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

טרטומות של תאי גזעתאי גזע פלוריפוטנטייםדימות ביו-לומינצנציהדימות Micro-CTמקרין מונחה-תמונההזרקה תת-עוריתעכברים עם חסר חיסוניפרוטוקול לטיפול בקרינהאבלציה של גידולים
טיפול ממוקד, סלקטיבי של Teratomas נגזר תאי גזע Pluripotent באמצעות קרינה חיצוני קרן במודל של חיית-קטן
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.