מאמר שיטה

ייצור של התקנים השבירה-אינדקס-מתאימים עבור מיקרופלואידיקה ביו

DOI:

10.3791/58296

⸱

10 בספטמבר 2018

 ,  , 
1Department of Chemical Engineering, University of Utah, 2Huntsman Cancer Institute, University of Utah

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מתאר את הזיוף של התקנים microfluidic מ- MY133-V2000 כדי לסלק חפצים שעולות לעתים קרובות microchannels עקב המדדים השבירה המאולתר בין מבנים microchannel של תמיסה מימית. פרוטוקול זה משתמש של מחזיק אקרילי כדי לדחוס את המכשיר שעברו אנקפסולציה, שיפור הדבקות הן מבחינה כימית והן מבחינה מכנית.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השימוש בהתקנים microfluidic התפתחה ככלי המעצב ביו יישומים. בשילוב עם טכניקות במיקרוסקופ מודרני, התקנים אלה ניתן ליישם כחלק פלטפורמה חזקה מסוגל לבצע מדידות משלימות בו זמנית. האתגר העיקרי נוצר על ידי השילוב של שתי טכניקות אלה הוא ההתאמה של שבירה בין החומרים אשר השתמשו בהם באופן מסורתי כדי להפוך התקנים microfluidic הפתרונות מימית המשמש בדרך כלל וההתערבות. חוסר ההתאמה הזה יכול ליצור חפצים אופטי סמוך לקצות ערוץ או התקן. פתרון אחד הוא כדי להפחית את מקדם שבירה של חומר המשמש לפברק את המכשיר באמצעות פולימר fluorinated כגון MY133-V2000 השבירה שלו דומה לזו של מים (n = 1.33). כאן, הבנייה של מכשיר microfluidic עשוי MY133-V2000 באמצעות טכניקות הדפס אבן רכה זה הפגינו, באמצעות פלזמה2 O בשיתוף עם מחזיק אקרילי כדי להגדיל את הידבקות בין המכשיר MY133-V2000 המציא את המצע polydimethylsiloxane (PDMS). המכשיר לאחר מכן נבדק על ידי המקננת אותו, מלא תא מדיה תרבות במשך 24 שעות ביממה להפגין את היכולת של המכשיר כדי לשמור על תנאים התרבות התא במהלך ניסוי הדמיה טיפוסי. לבסוף, מיקרוסקופיה שלב כמותית (אולאנזפין) משמש כדי למדוד את התפלגות מסה בתוך התאים חסיד חי microchannel. בדרך זו, דיוק מוגבר, מופעל על-ידי בדיית על המכשיר פולימר אינדקס השבירה נמוך כגון MY133-V2000 במקום בחומרים מסורתיים ליתוגרפיה רך כגון PDMS, הוא הפגין. באופן כללי, גישה זו עבור בדיית microfluidic התקנים שניתן בקלות לשלב בתהליכי עבודה קיימים ליתוגרפיה רך על מנת להפחית לכלוכים אופטי, להגביר את הדיוק מדידה.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התפתחות הטכנולוגיה microfluidic אפשרה מגוון רחב של טכניקות חדשות ביו המנצלים את פיזיקה ייחודי של תזרימי מיקרוסקופיים בקנה מידה1,2. זה כולל את טכניקות אבחון בנוי על פלטפורמות microfluidic אשר לכמת הרלוונטית קלינית סמנים ביולוגיים, לרבות תא נוקשות3, סמני פני שטח4הצמיחה5. על-ידי מניפולציה תאים בודדים, התקנים microfluidic יכול לשמש גם כדי למדוד את סמן הטרוגניות, לדוגמה כמחוון של ממאירות6. ביכולת לשלב בין microfluidic יישומים עם מיקרוסקופ יש הגבירו את התועלת של פלטפורמות אלה על-ידי התרת התקנים המודדים סמנים ביולוגיים מרובים בו זמנית7.

אולאנזפין היא טכניקה מיקרוסקופית המודד את המופע. ההתחלתי, כאשר אור עובר דרך אינטראקציה עם החומר בתוך דגימות שקוף. ניתן לחשב את המסה של תאים בודדים מתוך מדידות אולאנזפין, באמצעות הקשר הידוע בין מקדם שבירה של ביומסה צפיפות8,9. עבודה קודמים הראו כי אולאנזפין הוא מסוגל מדידת פרמטרים הרלוונטית קלינית כגון תא הצמיחה10,11 ו תא תכונות מכניות דרך ההפרעה כוח12. בשילוב עם מיקרופלואידיקה, אולאנזפין פוטנציאלי ניתן למדוד בהתנהגות התא הסביבה מבוקרת מאוד במבחנה. אחד האתגרים העיקריים שילוב אולאנזפין עם מיקרופלואידיקה הוא השבירה הגבוה במדד של פולימרים רוב נעשה שימוש כדי לבנות את ערוצי microfluidic באמצעות הדפס אבן רכה13.

מהווה אתגר חשוב מול השילוב של מיקרופלואידיקה עם טכניקות שונות של מיקרוסקופ הוא ההתאמה בין מקדם שבירה של החומר המכשיר יחסית מקדם שבירה של מים14,15. שיטה אחת לכתובת זו היא באמצעות פולימר מקדם שבירה נמוך כגון CYTOP16 או MY133-V200013. האחרון הוא fluorinated אולטרה סגול (UV)-פולימר אקרילט לריפוי זה בעל אינדקס השבירה דומה למים (n = 1.33) וזה תואם עם טכניקות הדפס אבן רכה, המאפשר שילוב חלקה לתוך microfluidic הוקמה רבים זרימות עבודה ייצור המכשיר. זה גורם MY133-V2000 מתאים לא רק ייצור ההתקן microfluidic, אך גם מאפשר לו בקלות לשלב עם אולאנזפין וגישות אחרות מיקרוסקופ, למדוד בהתנהגות התא-המושבה והן בקנה מידה תא בודד. MY133-V2000 מבטלת חפצים עקב שלב הסרת העטיפה על ידי ייצור ההתחלתי קצת, אם בכלל, כמו אור שעובר דרך הממשק מים-MY133.

למרות ביטול של התאמה שבירה, אחד האתגרים הגדולים הקשורים עם המכשירים מפוברק של פולימרים fluorinated, כגון MY133-V2000, הוא הדבקות חומרים אחרים כגון זכוכית או PDMS נמוכה. העבודה הנוכחית ממחישה את ייצור של מכשיר microfluidic MY133-V2000 באמצעות הדפס אבן רכה. שימוש פלזמה2 O לטיפול השטח של הערוץ והן את PDMS המצע בשילוב עם מחזיק אקרילי אישית מפוברק מבטיח כי המכשיר דבקה המצע, יצירת ערוץ אטום. מכשיר זה הינו מתאים תרבית תאים, אולאנזפין כדי למדוד את המסה של התאים לערוץ שבו יש יישומים חשובים מודדים את הצמיחה של תאים חיים, התעבורה תאיים של ביומסה התא, אשר שניהם יש הרלוונטיות הקלינית אבחון גילוי תרופות וסמים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. ייצור של התשליל Polydimethylsiloxane

  1. הכנת polydimethylsiloxane
    1. מידה 18 גרם של אלסטומר סיליקון PDMS ו- 1.8 g מהתרכובת ריפוי. שופכים הכימית ריפוי לתוך סירה מדידה המכילה את elastomer.
    2. לערבב את elastomer הכימית ריפוי נמרצות במשך 1 דקה ולשים את התערובת לתוך תא ואקום למשך 30 דקות.
    3. הסר את PDMS של שואב האבק, למזוג 15 גרם על גבי התשליל באמצעות חותכן עוגיות (radius = 3.8 ס מ) כדי למנוע את PDMS פועל בצד ולכסות את התערובת PDMS הנותרים.
    4. לשים את התבנית המכילה את PDMS אל החדר ואקום למשך 10 דקות.
    5. להסיר את התבנית המכילה את PDMS מן החדר ואקום, להניחה על פלטה חמה מוגדר כ- 150 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות לרפא, לכסות אותו ברדיד אלומיניום.
    6. לשפוך PDMS שנותרו על גבי זכוכית הפוכה צלחת פטרי (10 ס מ קוטר), באמצעות חותכן עוגיות אחר כתבנית, כדי ליצור משטח של PDMS. את זה אל החדר ואקום עד השלילי PDMS נרפאה לחלוטין.
    7. להעביר את צלחת פטרי עם PDMS הוואקום הכיריים preheated לרפא ב 150 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות.
  2. פלזמה טיפול פני שטח של polydimethylsiloxane
    1. הכנס סכין גילוח חד מתחת את PDMS, החותך את העוגיה בזהירות להסיר את PDMS השלילי.
    2. להשתמש בסכין חדה תחביב כדי לגזור את השלילי של היצירה גדול יותר של PDMS; זה צריך להיות חתוך עם מספיק שטח מאגר לצרף עוד חתיכה של PDMS על גבי זה ללא הפרעה את השלילי.
    3. הכנס סכין גילוח חד מתחת PDMS נרפא עם השליליות בזהירות להסיר את PDMS צלחת פטרי.
    4. השתמש לחתוך סכין תחביב לחתוך חתיכה של PDMS מהמקלדת הוא באותו גודל כמו החלק השלילי. לאחר מכן, חותכים מלבן מתוך היצירה החדשה של PDMS עם מספיק מקום להתאים את זה מסביב microchannel כאשר מניחים אותה על גבי התשליל.
    5. שים את שני החלקים של PDMS (את השלילי, את המלבן) על גבי מצע שטוח (כגון שקופית עשוי זכוכית, קוורץ, פוליסטירן או חומר אחר) ולהוסיפם בפלזמה בתדר רדיו (RF) מנקה. . סגור את הדלת ויסגור את התא ע י פינוי האוויר באמצעות משאבה ואקום. הכנסת האוויר תלוי בלחץ של 400 mTorr באמצעות בקר לחץ ואקום דיגיטלי.
      הערה: אם המצע המשמש לניקוי פלזמה לא נעשה שימוש ב הפלזמה מנקה, להכניס את זה הפלזמה מנקה מעצמו 60 s לפני בטיפול השליליות, על מנת למנוע את שכבת בסיס אקרילי נדבקות המצע.
    6. להפוך את ההגדרה RF גבוהה, מסך פלזמה אוויר ורוד אמור להופיע בחלון הצפייה. פלזמה-פינוק שתי חתיכות של PDMS ל 30 s, ואז לבטל את הגדרת RF. לאפשר לאוויר להתחיל לאט לאט החדר על מנת למנוע זרימת האוויר הסוער מטריד את התוכן של התא.
    7. להסיר את PDMS הפלזמה מנקה ומניחים אותו על benchtop. . אז, בזהירות להפוך את המלבן PDMS מעל השלילי ולחץ כלפי מטה עם זוג מלקחיים. תן לזה לנוח 10 דקות לאפשר שתי חתיכות של PDMS לדבוק אחד בשני.
  3. טיפול פני שטח Fluorosilane polydimethylsiloxane שלילית
    1. שימוש טפטפת לשים 2 טיפות טריכלורו (1H 1H, 2H, 2H-perfluoro-תמצית) silane (PFOTS) לתוך קטן שוקל הסירה והוספתו לתוך תא ואקום זכוכית.
    2. להפוך את PDMS על גבי פיסת נייר אלומיניום (כך השלילי microchannel פונה כלפי מעלה) והכניס אותו לתוך תא ואקום זכוכית. לאחר מכן, לפנות את החדר באופן רציף במשך 24 שעות ביממה.

2. ייצור של Microchannel MY133

  1. הקמת המבנה microchannel MY133-V2000
    1. למלא את PDMS שלילי עם 400 µL של MY133-V2000.
      הערה: השלילי חייב להיות מעט יתר על המידה.
    2. מניחים את PDMS MY133-V2000-מילוי שלילי אל החדר ואקום במשך שעתיים להסיר את כל הבועות.
    3. הסר MY133-V2000 של שואב האבק והקש לאט שקופית מזכוכית נגד העליון של השלילי מעט יתר על המידה כדי ליצור משטח שטוח של MY133-V2000 וכדי למנוע עיכוב פלמור של חמצן.
      הערה: PDMS, על פני ערוץ, חלקית לעכב את פלמור, הפעלת מליטה בשלבים יותר. השקופית זכוכית יש שקיפות UV מופחת מעט (35%) לעומת קוורץ, אשר מסייעת למנוע כל הצהבה של המכשיר נרפא.
    4. הכנס MY133-V2000 לתוך תנור W UV 400 והגדר את קרינת UV 50% העוצמה המקסימלית 300 s כדי לרפא את microchannel MY133-V2000.
      הערה: אורך הגל שיא להשתמש כדי לרפא את המכשיר הוא כ 375 nm עם רוחב פס של 25 ננומטר. MJ/cm כ 4,5002 כוח שימשה לרפא את microchannel, אשר נמצא מעט יותר מהמינימום כפול אשפרה כוח המומלץ על ידי היצרן.
  2. בניין בעל אקריליק
    1. ציור אקריליק שכבת הבסיס באמצעות תוכנת הציור וקטורית. ודא שכבת הבסיס היא מלבן זה 1.5 מ מ עבה, 75 מ מ רב, ועד 25 מ מ רחב, עם מלבן ממורכז המודד 25 מ"מ x 11 מ"מ.
    2. לצייר את שכבת אמצע אקריליק באמצעות וקטור תוכנת ציור. ודא שכבת אמצע מלבן (1.5 מ מ עבה, 75 מ מ וארוך 25 מ"מ) עם ריבוע ממורכז (5 מ מ x 5 מ מ), שני מעגלים (שניהם בקוטר של 3 מ מ) מופרדים על-ידי 15 מ מ.
    3. לצייר את השכבה העליונה אקריליק באמצעות וקטור תוכנת ציור. ודא שהשכבה העליונה היא מלבן (בעובי 3 מ מ, 30 מ מ וארוך 25 מ"מ) עם ריבוע ממורכז (5 מ מ x 5 מ מ), שני מעגלים (שניהם בקוטר של 3 מ מ) מופרדים על-ידי 15 מ מ.
    4. לגזור את העיצובים התקן שנוצר בתוכנת ציור וקטורי בחותך לייזר. השתמש בהגדרות מדגם של מהירות כוח, 30% 100%. הפעל את התוכנית פעמיים כדי להבטיח אקריליק היא לחתוך החוצה.
    5. הקש על החורים בשכבה העליונה אקריליק באמצעות כלי הקשה 0.80-מ מ גודל M5.
    6. נגב את חתיכות אקרילי עם אצטון כדי להסיר את כל סימני שיורית או כוויות.
  3. מליטה של MY133-V2000 ב מחזיק אקרילי
    1. לצרף שכבת הבסיס של אקריליק המצע זכוכית באמצעות דבק, כגון דבק סופר דבק מגע. במקום שתי טיפות קטנות על הקצוות של אקריליק ולאחר מכן להשתמש כלי חד פעמיות להפיץ באופן שווה את הדבק. למקם את המצע זכוכית על גבי אקריליק ולאפשר את דבק יבש באמצעות המשקל של הזכוכית כדי להחזיקו במקום.
    2. המעיל הזכוכית חשופים עם 100 µL של PDMS באמצעות פיפטה של תזוזה חיובית; לאחר מכן, להוסיף שכבת הבסיס coater ספין ואקום ולהגדיר אותו 1,500 סל"ד למשך 2 דקות אחיד מעיל הזכוכית עם סרט PDMS כ 10-מיקרומטר עבה.
    3. הסרת שכבת הבסיס coater ספין, בזהירות לנגב כל PDMS עודף זה מצופה של אקריליק עם אצטון, נייר מגבת. להיזהר שלא להפריע את PDMS משומרים.
    4. אופים את שכבת הבסיס עם PDMS בתנור ב 65 מעלות צלזיוס במשך שעתיים כדי לרפא את PDMS.
    5. פיפטה 1 מ"ל של PDMS על זכוכית ולהשתמש, לאחר מכן, עוד שקופיות זכוכית להפיץ באופן שווה את PDMS עד שזה יתחיל לזלוג החוצה הצדדים. . לרפא את זה על פלטה חמה ב 150 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות.
    6. חותכים את PDMS נרפא מלבן עם אותן מידות כמו המכשיר MY133-V2000 ואז, באמצעות השכבה אמצע של אקריליק כתבנית, מנקבים חורים עבור המאגר גזור ריבוע הצגת החלון PDMS כדי להפוך את האטם PDMS.
    7. הנח את MY133-V2000, לצד ערוץ למעלה, זהה או מצע שטוח דומים המשמשים לטיפול פלזמה-PDMS שלב 1.2.5. מניחים שכבת הבסיס אקרילי המכיל את המצע PDMS נרפא לצד ערוץ MY133-V2000 ב פלזמה2 O מנקה. הגדר את הלחץ ואקום 200 mTorr ו- RF ברמה גבוהה ולהתייחס השטח-המצע ערוץ וזכוכית ב-30 s.
    8. באמצעות מלקחיים, מיד להניח את ערוץ MY133-V2000 לצד השני ב אזור החיתוך מלבני של אקריליק שכבת הבסיס כגון MY133-V2000 אנשי קשר PDMS.
    9. מקם את האטם PDMS על גבי המכשיר MY133-V2000, בתור החורים האטם עם המאגרים במכשיר.
    10. מניחים את המכשיר לא סגורים על גבי משטח מוגבה מעל הספסל כדי לספק משטח clamping להרכבה התקן.
    11. חילוץ 3 מ"ל של צמנט אקרילי באמצעות מזרק. להפיץ מספיק צמנט אקרילי על גבי שכבת הבסיס כדי לספק ציפוי דק. להפוך את המעיל כמו אפילו ככל האפשר ולא לתת את seep גשמי לתוך הערוץ.
    12. מניחים שכבת אמצע היצירה אקרילי על גבי אקריליק שכבת הבסיס. ודא כי החורים בשורה אחת עם המאגרים של הערוץ MY133-V2000.
    13. השתמש תופסנים קטנים 3 להחזיק את שכבת הבסיס, אמצע שכבת יחד כמו צמוד ככל האפשר למשך 2 דקות תוך צמנט אקרילי מתקשה להתחבר החלקים של אקריליק ביחד. ודא כי המאגרים הם לא כל כך הפריע במהלך שלב זה כדי למנוע אוויר מלהיות לכוד מתחת המכשיר MY133-V2000.
    14. להסיר את הלחץ של ההתקן ומקם צמנט אקרילי על שכבת אמצע במקומות של מגע הצפוי עם השכבה העליונה של אקריליק.
    15. מניחים שכבה עליונה של אקריליק על היצירה שכבת אמצע של אקריליק, המבטיח כי מיושרים החורים עם המאגרים, ולאפשר לנוח על הספסל למשך 2 דקות בזמן צמנט אקרילי מתייבש.

3. בדיקה ושימוש של המכשיר MY133-V2000

  1. דליפה בדיקות
    1. לבדוק את המכשיר MY133-V2000 על-ידי הוספת 10 µL של המאכל או מים יונים באחד החורים מאגר לבדיקת אדהזיה של זרימה.
    2. הכנס צינור (בקוטר 1/8-ב החיצוני) לתוך המאגר וחבר את הקצה השני מלכודת ואקום. הפעל את ואקום כדי למשוך הצבע או את המים דרך ערוץ כדי לוודא כי מכשיר מוצלח נוצר.
    3. לבדוק תחת מיקרוסקופ כדי לוודא כי ישנן אין דליפות ערוץ או מאגר, מילוי המאגר עם אתנול, ולאפשר האתנול לשבת בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר מכן, משוך האתנול דרך באמצעות שואב האבק, לנקות את צבען או מים מן התעלה.
    4. לרסס את הערוץ עם אתנול והכניס אותו לתוך תבשיל פוליסטירן סטרילי. לעטוף את זה בחוזקה עם מצלמות-מיקרוסקופים ואחסן אותו בסביבה סטרילית עד שהוא נדרש.
      הערה: בשלב זה, המכשיר להיות מטופלת גילוח ורחיצה כירורגית על מנת למנוע זיהום. כשתהיה מוכן להשתמש בהתקן, החלק החיצוני של המכולה צריכים לעקר באמצעות אתנול והביא לתוך ארון לפני פתיחת המכולה אבטחה.
  2. ציפוי MCF7 בתאים המכשיר MY133-V2000
    1. לגדל תאים MCF7 על צלחות פטרי ס מ-10 בתקשורת מלאה המורכבת המינימום חיוני בינוני של Dulbecco (DMEM), בתוספת 10% סרום שור עוברית, פניצילין-סטרפטומיצין, גלוטמין ו חומצות אמינו שאינן הכרחיות, חממה תרבות תא זה שומר על אווירה לח המכיל 5% CO2 ו- 20% O2 בטמפרטורה של 37 ° C. לגדול התאים כ 80% הנהרות לפני זריעה אותם ב microchannel.
    2. ראשית, לרסס את המנה פוליסטירן המכיל את microchannel עם 70% אתנול. לאחר מכן, להתאים אותה אבטחה בארון לפני הסרת את מצלמות-מיקרוסקופים מגן על הערוץ מתוך סביבת מעבדה אמביינט.
    3. לשתק fibronectin האדם פלזמה-נגזר על פני השטח microchannel על ידי לדלל אותה ב- saline פוספט באגירה של Dulbecco (DPBS) µg 10/מ. לאחר מכן, להזריק µL 20 של פתרון זה לתוך התעלה, דגירה זה ב 20 מעלות צלזיוס למשך 45 דקות.
    4. לשטוף את הפתרון fibronectin התעלה על ידי שהזרקת 20 µL תא תרבות המדיה לתוך התעלה, ולאפשר לו דגירה ב 20 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות.
    5. רוחצים את התאים עם 10 מ"ל של DPBS, את trypsinize בתאים על-ידי הוספת 1 מ"ל של טריפסין 1 x. דגירה התאים ב 37 מעלות צלזיוס במשך 7 דקות נטרול טריפסין 9 מ של התקשורת מלאה.
    6. מזריקים µL 20 של התאים לתוך התעלה, דגירה אותם ב 37 מעלות צלזיוס למשך 45-120 דקות לאפשר את הקובץ המצורף המצע לפני הדמיה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מתאר את הזיוף של MY133-V2000, פולימר fluorinated עם שבירה נמוך ההתאמה של מים. תכונה מרכזית של פרוטוקול זה הוא כיצד להתגבר על היעדר אדהזיה היא מאפיין של פולימרים fluorinated באמצעות חמצן פלזמה ועל ידי בדיית המכשיר בתוך מחזיק אקרילי כדי לספק את כוח מכני נוסף נדרש כדי לסגור את הערוץ נגד המצע PDMS (איור 1). מקדם שבירה נמוך של המכשיר האחרון מוצג בבירור בסולם מאקרוסקופית (איור 2). הקצוות של ערוץ עשוי חומר זה נראים בבירור בא...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MY133-V2000 יכול לשמש כחלופה ליתוגרפיה רך מסורתי ייצור חומרים כגון PDMS. העבודות הקודמות הראו כי חומרים עם גבוהה אינדקס השבירה, כגון PDMS, להציג ממצאים משמעותיים ליד ערוץ חומות עקב השבירה של מדדי המאולתר בין החומר ייצור של תמיסה מימית בתוך הערוץ 13. MY133-V2000 מאפשרת התאמת את מקדם שבירה של המכשיר microfluidic הפתרונות מימית בשימוש נפוץ ביישומים הביו-רפואית. זה מפחית חפצים הדמיה בשעת שילוב מיקרופלואידיקה עם טכניקות מתקדמות מיקרוסקופ, מתן יתרון מובהק על פני microfluidic מסורתי ייצור חומרים. ההפחתה ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים אין לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי אוניברסיטת יוטה משרד סגן הנשיא למחקר, כמו גם על ידי קרנות בשיתוף עם גרנט CA042014 P30 זכה מכון הסרטן האנטסמן, התוכנית CRR במכון הסרטן הצייד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
MY133-V2000MY PolymersMY133-V2000
Sylgard 184דבקי אלסוורת'184 SIL ELAST KIT 0.5 ק"ג
שקופיות מיקרוסקופ פרימיום פישרפישר סיינטיפיק12-544-4.118
אינץ' (3.0 מ"מ) x 12 אינץ' x 12 אינץ' גיליון אקריליארצות הברית Plastic Corp44290.060
אינץ' (1.5 מ"מ) x 12 אינץ' x 12 אינץ' גיליון אקריליארצות הברית פלסטיק קורפ44200
SCIGRIP 3 סט מהיר מאוד אקריליק צמנטארצות הברית פלסטיק קורפ45735
רדיד אלומיניום סטנדרטי (עובי 0.6 מ"מ)VWR89107-726
קים מגבוניםפישר סיינטיפיק06-666
אינסטה-קיור+ סופר דבקבוב סמית תעשיותBSI-109
1/8" צינורות PVCמקמאסטר קאר5231K55
מקורמיק יעד צבעי מאכל13353207
X-Acto #1 סכין דיוקX-ActoX3201
X-Acto #18 להב סיתות עץ במשקל כבדX-ActoX218
VWR סכיני גילוחVWR55411-055
משטח טיפול בתרבית תאיםכלים פישר ScientificFBO12922
פיברונקטין פלזמה אנושיתסיגמא-אולדריץ'F0895-1MG
טריפסין-EDTA 10xפישר סיינטיפיק15-400-054
קורנינג דולבקו'ס פוספט חוצץמלח פישר סיינטיפיקMT21030CM
גיבקו פניצילין-סטרפטומיציןפישר סיינטיפיק15-140-148
HyClone חומצות אמינו לא חיוניות 100xFisher ScientificSH3023801
סרום בקר עובריאומגה ScientificFB-12
Corning DMEM עם L-גלוטמין וגלוקוזMT10013CVפישר סיינטיפיק
טריכלורו (1H,1H,2H,2H-perfluorooctyl)סילאןסיגמא-אלדריץ'448931מגיב באלימות עם אתנול מים
, 200 הוכחה Decon Labsפישר סיינטיפיק04-355-223
אצטוןפישר סיינטיפיקA18P-4
בל-ארט 42025 מסיר פלסטיקקול-פארמרEW-06514-30
חותך לייזר אפילוג פיוז'ן, 120 Wאפילוג לייזראפילוג פיוז'ן M2 32 לייזר
איזוטמפ ערבוב פלטה חמהפישר סיינטיפיקSP88850200
Ateco 14111 חותך נירוסטה 1.5 אינץ'Ateco14111
צלחת תרבית תאי זכוכית פיירקספישר סיינטיפיק08-747B
מנקה פלזמה בתדר רדיוהאריק פלזמהPDC-32Gבשימוש עם מעבדות חור
שחור גז חמצן מעבדות חור שחור Digivacדגם 215
תנור אולטרה סגול Intelli-RayUvitronUVO338
קומפקטי ספין ציפויMTI CorporationVTC-100A
פישר מותג איזוטמפ תנורפישר סיינטיפיק15-103-0510הסעת אוויר מאולצת
גילסון תזוזה חיובית פיפטה P1000פישר סיינטיפיקFD10006G
HeraCell VIOS 160iפישר סיינטיפיק13 998 212PM

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zare, R. N., Kim, S. Microfluidic platforms for single-cell analysis. Annual Review Biomedical Engineering. 12, 187-201 (2010).
  2. Neuzi, P., Giselbrecht, S., Lange, K., Huang, T. J., Manz, A. Revisiting lab-on-a-chip technology for drug discovery. Nature Reviews Drug Discovery. 11 (8), 620-632 (2012).
  3. Xu, W., et al. Cell stiffness is a biomarker of the metastatic potential of ovarian cancer cells. PLoS ONE. 7 (10), 46609(2012).
  4. Karakas, H. E., et al. A microfluidic chip for screening individual cancer cells via eavesdropping on autophagy-inducing crosstalk in the stroma niche. Scientific Reports. 7 (1), 2050(2017).
  5. DeBerardinis, R. J., Lum, J. J., Hatzivassiliou, G., Thompson, C. B. The biology of cancer: metabolic reprogramming fuels cell growth and proliferation. Cell Metabolism. 7 (1), 11-20 (2008).
  6. Yin, H., Marshall, D. Microfluidics for single cell analysis. Current Opinion in Biotechnology. 23 (1), 110-119 (2012).
  7. Kemper, B., et al. Monitoring of laser micromanipulated optically trapped cells by digital holographic microscopy. Journal of Biophotonics. 3 (7), 425-431 (2010).
  8. Barer, R. Interference micorscopy and mass determination. Nature. 169 (4296), 366-367 (1952).
  9. Zangle, T. A., Teitell, M. A. Live-cell mass profiling: an emerging approach in quantitative biophysics. Nature Methods. 11 (12), 1221-1228 (2014).
  10. Chun, J., et al. Rapidly quantifying drug sensitivity of dispersed and clumped breast cancer cells by mass profiling. Analyst. 137 (23), 5495-5498 (2012).
  11. Reed, J., et al. Live cell interferometry reveals cellular dynamism during force propagation. Acs Nano. 2 (5), 841-846 (2011).
  12. Eldridge, W. J., Steelman, Z. A., Loomis, B., Wax, A. Optical Phase Measurements of Disorder Strength Link Microstructure to Cell Stiffness. Biophysical Journal. 112 (4), 692-702 (2017).
  13. Kim, D. N. H., Kim, K. T., Kim, C., Teitell, M. A., Zangle, T. A. Soft lithography fabrication of index-matched microfluidic devices for reducing artifacts in fluorescence and quantitative phase imaging. Microfluidics and Nanofluidics. 22 (1), 11(2018).
  14. Byron, M. L., Variano, E. A. Refractive-index-matched hydrogel materials for measuring flow-structure interactions. Experiments in Fluids. 54 (2), 6(2013).
  15. Ogawa, T., Hanada, Y. Microfabrication of the UV transparent polymer CYTOP using a conventional pulsed green laser. Applied Physics a-Materials Science & Processing. 122 (3), 6(2016).
  16. Hanada, Y., Ogawa, T., Koike, K., Sugioka, K. Making the invisible visible: a microfluidic chip using a low refractive index polymer. Lab on a Chip. 16 (13), 2481-2486 (2016).
  17. Zangle, T. A., Burnes, D., Mathis, C., Witte, O. N., Teitell, M. A. Quantifying biomass changes of single CD8+ T cells during antigen specific cytotoxicity. PLoS One. 8 (7), 68916(2013).
  18. Huang, D., et al. High Speed Live Cell Interferometry: A New Method for Rapidly Quantifying Tumor Drug Resistance and Heterogeneity. Analytical Chemistry. 90 (5), 3299-3306 (2018).
  19. Mir, M., Bergamaschi, A., Katzenellenbogen, B. S., Popescu, G. Highly sensitive quantitative imaging for monitoring single cancer cell growth kinetics and drug response. PLoS ONE. 9 (2), 89000(2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

MY133 V2000Quantitative Phase MicroscopyPDMS

מאמרים קשורים