כאן נתאר את המתודולוגיה מפורט נדרשים לערוך ניסויים למידה (SEFL) משופרת מתח פחד, דגם פרה של הפרעה פוסט-טראומטית, חולדות ועכברים. המודל מנצל היבטים של פחד פבלוביות מיזוג קפוא כמו אינדקס של פחד משופרת בחולדות.
מאמר שיטה
כאן נתאר את המתודולוגיה מפורט נדרשים לערוך ניסויים למידה (SEFL) משופרת מתח פחד, דגם פרה של הפרעה פוסט-טראומטית, חולדות ועכברים. המודל מנצל היבטים של פחד פבלוביות מיזוג קפוא כמו אינדקס של פחד משופרת בחולדות.
פחד התנהגויות חשובים להישרדות, אך רמות גבוהות פרופורציה של פחד יכול להגביר את הפגיעות לפיתוח הפרעות פסיכיאטריות כגון הפרעה פוסט-טראומטית (PTSD). כדי להבין את המנגנונים הביולוגיים של פחד dysregulation של PTSD, חשוב להתחיל עם מודל בעלי חיים חוקית של ההפרעה. פרוטוקול זה מתאר את המתודולוגיה נדרשים לערוך ניסויים למידה (SEFL) משופרת מתח פחד, דגם פרה של PTSD, חולדות ועכברים. SEFL פותחה כדי לסכם PTSD, כולל רגישות עולה לטווח ארוך של לימוד פחד הנגרם על ידי הלחץ חריפה היבטים קריטיים. SEFL שימושים היבטי פבלוביות פחד מיזוג אבל מייצר תגובת פחד sensitized ברור וחזק בהרבה תגובות פחד מותנה נורמלי. הניתוח טראומה כרוך הצבת מכרסם תא מיזוג וניהול 15 זעזועים unsignaled באופן אקראי מבוזר מעל 90 דקות (לניסויים עכברוש; לניסויים העכבר, 10 unsignaled משמשים זעזועים בצורה אקראית מבוזרת מעל 60 דקות) . ביום 2, מכרסמים ממוקמים ברומן מיזוג ההקשר שבו הם מקבלים הלם יחיד; לאחר מכן, ביום 3 הם להציב בחזרה באותו ההקשר גם על יום 2, נבדקו שינויים קפואים רמות. מכרסמים שקיבלו בעבר התצוגה טראומה משופרת רמות של הקפאת ביום הבדיקה בהשוואה לאלו שלא התקבל ללא זעזועים ביום הראשון. לפיכך, עם מודל זה, חוויה מאוד מלחיצה יחיד (הטראומה) מייצר פחד קיצוני של הגירויים שמשויכת לאירוע טראומטי.
הפחד הוא התנהגות קריטיים להישרדות, המאפשרת ליחידים לזהות ולהגיב לאיומים. עם זאת, תגובות פחד מוגזם יכול לתרום להתפתחות של הפרעות פסיכיאטריות כגון הפרעה פוסט-טראומטית (PTSD). מאפיין אחד של PTSD הוא מענה מוגזם לחצים מתון, במיוחד אלה מזכירים את הטראומה המקורית, ונטייה לפתח פחדים חדשים1,2. במעבדה, פחד נמדדת לעתים קרובות באמצעות הקפאת התנהגות, אשר הוא אינדקס ethologically חוקי ואמין של פחד3,של בני אדם, מכרסמים-4. אמנם ידוע כי PTSD כולל dysregulation של הבעת פחד משופרת ופחד, יש חוסר חזקים מודלים חייתיים של PTSD אמינה לוכד תגובה זו פחד מוגבר לגירוי יחסית לא מזיק.
פרוטוקול זה מספק את המתודולוגיה מפורט נדרשים לערוך ניסויים למידה (SEFL) משופרת מתח פחד, אמין וחזק פרה מודל של PTSD, חולדות ועכברים. SEFL מנצל היבטי פבלוביות פחד מיזוג, ובכל זאת הוא מייצר תגובות נפרדות מיזוג פחד רגיל, recapitulates את הפחד משופרת טראומטית הבאים שנצפתה PTSD מטופלים5,6. במודל זה, חוויה מאוד מלחיצה יחיד (המכונה כאן כמו טראומה) שמוביל שנמשך שינויים התנהגותיים, כולל פחד קיצוני של גירויים שמשויכת לאירוע טראומטי, חרדה מוגברת, גדל להבהיל תגובתיות, שונה glucocorticoid איתות7,8. התכונה העיקרית של SEFL היא כי החשיפה הבאה יותר מלחיץ טראומטי (סדרת זעזועים unsignaled) בהקשר ברורים, חיות להציג מענה פחד מוגזם מתון יותר מלחיץ (למשל., הלם יחיד) בהקשר אחר. חשוב לציין, האפקט SEFL ואינו ההכללה מההקשר טראומה בהקשר הרומן או רגישות מוגברת הלם5. במודל שלנו, אנו מנצלים בכוונה הליכים להפחית כל הכללה כדי הקשר חדשניים כגון תחבורה, ריח, רשת רצפת דפוס פעולה ברור. לכן, בניגוד מיזוג פחד רגיל, SEFL הוא תהליך לשיוך שמוביל הלמידה פחד חדש שקשור פרופורציה רמזים סביבתיים הקשורים ישירות עם החוויה הטראומטית. עבודה נרחב מראה כי טיפול 90 דקות אחד המכיל 15 לא צפויים זעזועים חולדות (או מושב בודד 60 דקות, המכיל 10 לא צפויים זעזועים בעכברים) המניע של רגישות עולה לטווח ארוך של פחד מיזוג יחד עם חרדה מוגברת, dysregulation בקצב השעון הביולוגי של corticosterone הבזליים. לעומת זאת, טרום חשיפה יחיד footshock אינו מייצר SEFL9. יתר על כן, SEFL יכול להיות מנוצל באופן אמין אצל חולדות ועכברים.
ומכאן, המודל SEFL של PTSD הוא כלי רב עוצמה עבור בודק את המנגנונים הביולוגיים המעורבים פתופסיולוגיה PTSD. באמצעות SEFL, חוקרים יכולים לבחון כיצד חשיפה לטראומה יכולות להשפיע על הלמידה פחד העתיד. בנוסף, מודל זה יכול להיות שימושי עבור חוקרים מנגנונים תאית ומולקולרית ספציפי זה עשויים להיות מעורבים בוויסות הבעת פחד משופרת כפי שנצפה ב- PTSD.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
1. נושאים
2. ציוד התקנה
3. SEFL נוהל חולדות ועכברים
4. ניתוח נתונים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות הבדיקה ההקשר טראומה ביום 2 מוצגים באיור1. בעלי חיים במצב טראומה הראו רמות גבוהות באופן משמעותי להקפאת בהקשר A בהשוואה הפקדים טראומה אין, המציינת את רכישת פחד להקשר טראומה [חולדות: F(1,17) = 23.58, p < 0.01; עכברים: F(1,14) = 666.50, p < 0.0001]. הקפאה במהלך תקופת בסיסית לפני ההלם יחיד בהקשר הרומן על 3 יום מוצג באיור2. הטראומה והן חיות טראומה לא הראו רמות מקפיא מינימלי ולא נבדלים אחד את השני [חולדות:...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
SEFL הוא מודל התנהגותי חזקים של PTSD זה יכול להיות recapitulated אצל חולדות ועכברים והוא יכול לשמש כדי לחקור את התגובות פחד sensitized המאפיינות PTSD. בעקבות לחץ טראומטי, מכרסמים להראות בתגובת פחד מוגבר בהקשר שונה במובהק רק לאחר שההקשר מזווג עם מתון יותר מלחיץ משרת כתזכורת חוויה טראומטית הקודם. בעקבות לחץ טראומטי מכרסמים באופן לא מפתיע מראים רמות גבוהות של פחד כאשר חזר להקשר טראומטית ביום 2, המציין את הזיכרון הזה טראומטית הוא שלם (איור 1). עם זאת, הם מראים פחד מינימלי הכללה מההקשר טראומטית ל...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
ד ר Fanselow הוא חבר מועצת המנהלים המייסדות של מעבדות Neurovation.
עבודה זו מומן על ידי לאומי המכון של בריאות R01AA026530 (MSF), Staglin מרכז המוח ואת בריאות התנהגותית (MSF), NRSA-F32 MH10721201A1, NARSAD 26612 (AKR) של DGE אכ מ- 1650604 (SG).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| תא מיזוג פחד לרצפות בפרופיל נמוך | Med Associates Inc. | VFC-008-LP | תא מיזוג פחד |
| תא הנחתת קול | Associates Inc. | NIR-022SD | תא מושך קול למניעת חדירת רעש חיצוני |
| NIR/White Light Control Box | Med Associates Inc. | NIR-100VR | המסוגלת לספק אור לבן וקרוב לאינפרא אדום |
| NIR VFC Light Box | Med Associates Inc. | NIR-100L2 | תאורת בית עילית לבנה |
| Windex מנקה זכוכית מקורי | Windex | פתרון לניקוי וריח תאי מיזוג פחד בין בעלי חיים | |
| חומצה אצטית | פישר מדעי | A38-212 | פתרון לניקוי וריח תאי מיזוג פחד בין בעלי חיים |
| A-Frame Chamber Insert | Med Associates Inc. | ENV-008-IRT | תוספת משולשת פרספקס שחורה להבדיל בין פריסה פנימית של הקשרים A ו-B |
| הכנסת קיר מעוקל | Med Associates Inc. | VFC-008-CWI | יריעת פלסטיק לבנה להבדיל בין פריסה פנימית של הקשרים A ו-B |
| רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת בגודל 1/8 אינץ' עבור Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005A | רצפת רשת שטוחה לעכברים |
| רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מתחלפים 1/8 אינץ' ו-3/16 אינץ' עכבר | Med Associates Inc. | VFC-005-S | רצפת רשת מדורגת לעכברים |
| רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מדורגים בגודל 1/8 אינץ' עבור Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005A-L | רצפת רשת מתחלפת לעכברים |
| רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת בגודל 3/16 אינץ' עבור Rat | Med Associates Inc. | VFC-005 | רצפת רשת שטוחה לחולדות |
| רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מתחלפים 3/16 אינץ' ו-3/8 אינץ' Med | Associates Inc. | VFC-005-L | רצפת רשת מתחלפת לחולדות |
| רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מדורגים בגודל 3/16 אינץ' עבור Rat | Med Associates Inc. | VFC-005-S | רצפת רשת מדורגת לחולדות |
| מחבתות מתכת | Med Associates Inc. | מחבתות מתכת לתפיסת גללים מתחת לרצפות הרשת | |
| Standalone Aversive Stimulator/Scrambler | Med Associates Inc. | ENV-414S | מחולל זעזועים וסקרמבלר לאספקת זעזועים |
| מולטימטר | Fluke | 87-5 | כלי למדידת משרעת זעזוע כף הרגל |
| VideoFreeze Software | Med Associates Inc. | תוכנת SOF-843 | VideoFreeze לשליטה במסירת זעזועים |
| מצלמת וידאו מונוכרום במהירות גבוהה Firewire | Associates Inc. | VID-CAM-MONO-4 | מצלמת וידאו המסוגלת להקליט באור אינפרא אדום קרוב |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה
בקש הרשאה