הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

פחד משופרת מתח למידה, מודל מכרסמים חזקים של הפרעה פוסט-טראומטית

11.7K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58306

⸱

13 באוקטובר 2018

במאמר זה

סיכום

כאן נתאר את המתודולוגיה מפורט נדרשים לערוך ניסויים למידה (SEFL) משופרת מתח פחד, דגם פרה של הפרעה פוסט-טראומטית, חולדות ועכברים. המודל מנצל היבטים של פחד פבלוביות מיזוג קפוא כמו אינדקס של פחד משופרת בחולדות.

תקציר

פחד התנהגויות חשובים להישרדות, אך רמות גבוהות פרופורציה של פחד יכול להגביר את הפגיעות לפיתוח הפרעות פסיכיאטריות כגון הפרעה פוסט-טראומטית (PTSD). כדי להבין את המנגנונים הביולוגיים של פחד dysregulation של PTSD, חשוב להתחיל עם מודל בעלי חיים חוקית של ההפרעה. פרוטוקול זה מתאר את המתודולוגיה נדרשים לערוך ניסויים למידה (SEFL) משופרת מתח פחד, דגם פרה של PTSD, חולדות ועכברים. SEFL פותחה כדי לסכם PTSD, כולל רגישות עולה לטווח ארוך של לימוד פחד הנגרם על ידי הלחץ חריפה היבטים קריטיים. SEFL שימושים היבטי פבלוביות פחד מיזוג אבל מייצר תגובת פחד sensitized ברור וחזק בהרבה תגובות פחד מותנה נורמלי. הניתוח טראומה כרוך הצבת מכרסם תא מיזוג וניהול 15 זעזועים unsignaled באופן אקראי מבוזר מעל 90 דקות (לניסויים עכברוש; לניסויים העכבר, 10 unsignaled משמשים זעזועים בצורה אקראית מבוזרת מעל 60 דקות) . ביום 2, מכרסמים ממוקמים ברומן מיזוג ההקשר שבו הם מקבלים הלם יחיד; לאחר מכן, ביום 3 הם להציב בחזרה באותו ההקשר גם על יום 2, נבדקו שינויים קפואים רמות. מכרסמים שקיבלו בעבר התצוגה טראומה משופרת רמות של הקפאת ביום הבדיקה בהשוואה לאלו שלא התקבל ללא זעזועים ביום הראשון. לפיכך, עם מודל זה, חוויה מאוד מלחיצה יחיד (הטראומה) מייצר פחד קיצוני של הגירויים שמשויכת לאירוע טראומטי.

מבוא

הפחד הוא התנהגות קריטיים להישרדות, המאפשרת ליחידים לזהות ולהגיב לאיומים. עם זאת, תגובות פחד מוגזם יכול לתרום להתפתחות של הפרעות פסיכיאטריות כגון הפרעה פוסט-טראומטית (PTSD). מאפיין אחד של PTSD הוא מענה מוגזם לחצים מתון, במיוחד אלה מזכירים את הטראומה המקורית, ונטייה לפתח פחדים חדשים1,2. במעבדה, פחד נמדדת לעתים קרובות באמצעות הקפאת התנהגות, אשר הוא אינדקס ethologically חוקי ואמין של פחד3,של בני אדם, מכרסמים-4. אמנם ידוע כי PTSD כולל dysregulation של הבעת פחד משופרת ופחד, יש חוסר חזקים מודלים חייתיים של PTSD אמינה לוכד תגובה זו פחד מוגבר לגירוי יחסית לא מז....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. נושאים

  1. חולדות
    1. סדר חולדות מגיעים כאשר הם כ 90 ימים הישן ובו שכנו-יחיד בכלובים עכבר רגיל.
      הערה: דיור אחת, כיוון שלעתים דיור קבוצה מייצרת השתנות בשל האינטראקציות בין חיות בכלוב בבית, במיוחד בעקבות חשיפה ללחץ. SEFL הוכח בחולדות זכר ונקבה ב לונג-אוונס וחולדות Dawley ספראג, בחולדות צעיר בן 19 ימים7,10.
    2. באופן אקראי להקצות חיות לפחות שני תנאים: טראומה (n = 8), אין טראומה (n = 8) (ראו ראו. et al. 5 תנאים בקרה נוספים).
  2. עכברים
    1. סדר עכברים להגיע כאשר הם כ 60 ימים הישן ובו שכנו-יחיד בכלובים עכבר רגיל. יחיד-בית העכברים לפחות 4 ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

תוצאות הבדיקה ההקשר טראומה ביום 2 מוצגים באיור1. בעלי חיים במצב טראומה הראו רמות גבוהות באופן משמעותי להקפאת בהקשר A בהשוואה הפקדים טראומה אין, המציינת את רכישת פחד להקשר טראומה [חולדות: F(1,17) = 23.58, p < 0.01; עכברים: F(1,14) = 666.50, p < 0.0001]. הקפאה במהלך תקופת בסיסית לפני ההלם יחיד בהקשר הרומן על 3 יום מוצג באיור2. הטראומה והן חיות טראומה לא הראו רמות מקפיא מינימלי ולא נבדלים אחד את השני [חולדות:.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

SEFL הוא מודל התנהגותי חזקים של PTSD זה יכול להיות recapitulated אצל חולדות ועכברים והוא יכול לשמש כדי לחקור את התגובות פחד sensitized המאפיינות PTSD. בעקבות לחץ טראומטי, מכרסמים להראות בתגובת פחד מוגבר בהקשר שונה במובהק רק לאחר שההקשר מזווג עם מתון יותר מלחיץ משרת כתזכורת חוויה טראומטית הקודם. בעקבות לחץ טראומטי מכרסמים באופן לא מפתיע מראים רמות גבוהות של פחד כאשר חזר להקשר טראומטית ביום 2, המציין את הזיכרון הזה טראומטית הוא שלם (איור 1). עם זאת, הם מראים פחד מינימלי הכללה מההקשר טראומטית ל.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

ד ר Fanselow הוא חבר מועצת המנהלים המייסדות של מעבדות Neurovation.

תודות

עבודה זו מומן על ידי לאומי המכון של בריאות R01AA026530 (MSF), Staglin מרכז המוח ואת בריאות התנהגותית (MSF), NRSA-F32 MH10721201A1, NARSAD 26612 (AKR) של DGE אכ מ- 1650604 (SG).

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
תא מיזוג פחד לרצפות בפרופיל נמוךMed Associates Inc.VFC-008-LPתא מיזוג פחד
תא הנחתת קולAssociates Inc.NIR-022SDתא מושך קול למניעת חדירת רעש חיצוני
NIR/White Light Control BoxMed Associates Inc.NIR-100VRהמסוגלת לספק אור לבן וקרוב לאינפרא אדום
NIR VFC Light BoxMed Associates Inc.NIR-100L2תאורת בית עילית לבנה
Windex  מנקה זכוכית מקוריWindexפתרון לניקוי וריח תאי מיזוג פחד בין בעלי חיים
חומצה אצטיתפישר מדעיA38-212פתרון לניקוי וריח תאי מיזוג פחד בין בעלי חיים
A-Frame Chamber InsertMed Associates Inc.ENV-008-IRTתוספת משולשת פרספקס שחורה להבדיל בין פריסה פנימית של הקשרים A ו-B
הכנסת קיר מעוקלMed Associates Inc.VFC-008-CWIיריעת פלסטיק לבנה להבדיל בין פריסה פנימית של הקשרים A ו-B
רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת בגודל 1/8 אינץ' עבור MouseMed Associates Inc.VFC-005Aרצפת רשת שטוחה לעכברים
רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מתחלפים 1/8 אינץ' ו-3/16 אינץ' עכברMed Associates Inc.VFC-005-Sרצפת רשת מדורגת לעכברים
רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מדורגים בגודל 1/8 אינץ' עבור MouseMed Associates Inc.VFC-005A-Lרצפת רשת מתחלפת לעכברים
רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת בגודל 3/16 אינץ' עבור RatMed Associates Inc.VFC-005רצפת רשת שטוחה לחולדות
רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מתחלפים 3/16 אינץ' ו-3/8 אינץ' MedAssociates Inc.VFC-005-Lרצפת רשת מתחלפת לחולדות
רצפת רשת הקשרית בפרופיל נמוך עם מוטות רשת מדורגים בגודל 3/16 אינץ' עבור RatMed Associates Inc.VFC-005-Sרצפת רשת מדורגת לחולדות
מחבתות מתכתMed Associates Inc.מחבתות מתכת לתפיסת גללים מתחת לרצפות הרשת
Standalone Aversive Stimulator/ScramblerMed Associates Inc.ENV-414Sמחולל זעזועים וסקרמבלר לאספקת זעזועים
מולטימטרFluke87-5כלי למדידת משרעת זעזוע כף הרגל
VideoFreeze SoftwareMed Associates Inc.תוכנת SOF-843VideoFreeze לשליטה במסירת זעזועים
מצלמת וידאו מונוכרום במהירות גבוהה FirewireAssociates Inc.VID-CAM-MONO-4מצלמת וידאו המסוגלת להקליט באור אינפרא אדום קרוב
Med תיבת בקרת אור Med

מקורות

  1. Bremner, J. D., Krystal, J. H., Southwick, S. M., Charney, D. S. Functional neuroanatomical correlates of the effects of stress on memory. Journal of Traumatic Stress. 8 (4), 527-553 (1995).
  2. Dykman, R. A., Ackerman, P. T., Newton, J. E. ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מודל מכרסמים ל-PTSDתאי התניית פחדמתן שוק חשמלי בכף הרגלהקשר א' הקשר ב'הליך טראומהמדידת התנהגות קיפאוןמודל PTSD במכרסמיםהתניית פחד פבלוביאניתרגישות יתר לפחד