הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הערכת התקפה אלימה ו פתוגנזה של זיהום Aeromonas במודל Caenorhabditis elegans

7.4K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58768

⸱

20 בדצמבר 2018

 ,  ,  , 
1Institute of Basic Medical Sciences, College of Medicine, National Cheng Kung University, 2Department of Internal Medicine, National Cheng Kung University Hospital, College of Medicine, National Cheng Kung University, 3Department of Biochemistry and Molecular Biology, College of Medicine, National Cheng Kung University, 4Department of Microbiology and Immunology, College of Medicine, National Cheng Kung University

במאמר זה

סיכום

כאן, אנחנו מציגים 3 ניסויים שונים כדי ללמוד זיהום Aeromonas C. elegans. באמצעות שיטות אלה נוח, קל להעריך את הרעילות בין מיני ותוך מיני Aeromonas .

תקציר

פתוגניות Aeromonas הוכח קלינית לגרום דלקת הקבה והמעים, הפצע, ספטיסמיה דלקות בדרכי השתן. רוב המחלות האנושיות דווחו להיות מזוהה עם ארבעה מינים של חיידקים: Aeromonas dhakensis, Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii, Aeromonas caviae. האורגניזם דגם Caenorhabditis elegans הוא bacterivore זה מספק מודל הידבקות מעולה שבו ללמוד חיידקי בפתוגנזה של Aeromonas. כאן, אנחנו מציגים 3 ניסויים שונים כדי ללמוד זיהום Aeromonas באמצעות מודל של C. elegans , כולל הישרדות, רעילות נוזלי של מבחני נמק שריר. התוצאות של שלוש שיטות לקביעת של התקפה אלימה של Aeromonas היו עקביים. Dhakensis א הוצגה רעיל ביותר בין הגדולות Aeromonas מינים גרימת זיהומים קליניים. שיטות אלה מוצגים להיות דרך נוחה כדי להעריך את הרעילות בין מיני ותוך מיני Aeromonas ולתרום להבנת בפתוגנזה של זיהום Aeromonas .

מבוא

פתוגניות, Aeromonas, הוכח קלינית לגרום דלקת הקבה והמעים, הפצע, ספטיסמיה דלקות בדרכי השתן בזיהומים1,2. ביותר הקשורים מחלות האדם דווחו להיות מזוהה עם ארבעת המינים חיידקי: 2, Aeromonas dhakensis, Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii, Aeromonas caviae 3 , 4 , 5. בין מחלות זיהומיות Aeromonas , דלקות ברקמות הרכות עלולה לגרום לזיהום חמור בבני אדם. ראוי לציין, נמק שריר היא הצורה החמורה ביותר של זיהום רקמות רכות6. תצפית של הישרדות, נמק שריר של Caenorhabditis elegans לאחר ההדבקה היא שיטה נוחה שלפיו לשער הרעילות של Aeromonas.

מדענים פיתחו כבר אורגניזמים רבים דגם ללמוד זיהומים חיידקיים. במחקרים קודמים, עכברים zebrafishes, נמטודות שימשו כמודלים חיים ללמוד הפתוגנזה של התקפה אלימה של7,6, Aeromonas8. כל המודל החייתי יש שלה "יתרונות ויישומים. האורגניזם מודל, Caenorhabditis elegans, היא תולעים נימיות bacterivorous אילו חיידקים intakes כמו foodnaturally. C. elegansפיתחה מערכת חיסונית מולדת מסובך נגד זיהום חיידקי במהלך האבולוציה שלה. תחת הלחץ של זיהום חיידקי, C. elegans הוכח להיות מודל זיהום מצוינת ללמוד חיידקי בפתוגנזה של Aeromonas6,7,9 , פתוגנים אחרים כמו פטריה10 ו- enterohaemorrhagic Escherichia coli O157:H711. עם זאת, יש עדיין אין פרסום המתמקד המתודולוגיה בשימוש C. elegans כמודל ללימוד של התקפה אלימה של Aeromonas.

. כאן, אנחנו מציגים 3 ניסויים שונים כדי ללמוד Aeromonas זיהום באמצעות C. elegans כמו במודל חיה: מבחני הישרדות, רעילות נוזלי של נמק שריר. שיטות אלה הן דרך נוחה להעריך הרעילות בין מיני ותוך מיני Aeromonas , לשפר את ההבנה של הפתוגנזה של Aeromonas.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכנת המדיום תרבות

הערה: ראה טבלה 1 להכנה פתרון.

  1. כדי להכין M9 בינוני12, להמיס 1.5 גר'2פו ח'4, g 5.66 של Na-2-HPO-4ו- 2.5 גר' NaCl ב 500 מ"ל מים יונים. אוטוקלב ב 121 מעלות צלזיוס במשך 20 דק עד מקורר לטמפרטורת החדר ולאחר מכן להוסיף 0.5 מ של 1 מ' MgSO4 לפני השימוש הראשון.
  2. כדי להכין נמטודות צמיחה בינוני (NGM)12, להמיס 3g NaCl, peptone חיידקי 2.5 g, ו- 20 גרם אגר ב- 1 ליטר של מים יונים. אוטוקלב ב 121 מעלות צלזיוס במשך 20 דק עד מקורר עד 55 מעלות צלזיוס בתוך אמבט מים ולאחר מכן להוסיף 1 מ"ל של 1 מ' CaCl2, 1 מ"ל של 1 מ' MgSO4, 1 מ"ל של 5% כולסטרול אתנול, 25 מ של מאגר פוספט. מערבולת לערבב היטב.
  3. יוצקים על 5 מ"ל NGM לתוך כל 6 ס מ פטרי. הימנע לייצור בועות על פני השטח של צלחת. להשאיר צלחות בטמפרטורת החדר במשך לילה 1 וחבילת כדי לשמור על 4 מעלות צלזיוס. להביא לטמפרטורת החדר לפני השימוש.
  4. כדי להכין מועשר NGM ואקלים, להמיס 3g NaCl, 5 g peptone חיידקי, תמצית שמרים 1 g, ו- 30 גרם אגר ב- 1 ליטר של מים יונים. אוטוקלב ב 121 מעלות צלזיוס במשך 20 דק עד מקורר עד 55 מעלות צלזיוס בתוך אמבט מים, ולהוסיף 1 מ"ל של 1 מ' CaCl2, 1 מ"ל של 1 מ' MgSO4, 1 מ"ל של 5% כולסטרול אתנול, 25 מ של מאגר פוספט. מערבולת לערבב היטב.
  5. יוצקים על 10 מ"ל ENGM לתוך כל 9 ס מ פטרי. הימנע לייצור בועות על פני השטח של צלחת. להשאיר צלחות בטמפרטורת החדר במשך לילה 1 וחבילת כדי לשמור על 4 מעלות צלזיוס. מביאים לטמפרטורת החדר לפני השימוש.
  6. כדי להכין S בינוני12, מערבבים 40 מ ל S הבזליים, 0.4 מ ל 1 מ' פוטסיום ציטראט, מעקב מ ל 0.4 מתכות פתרון, 0.12 מ של 1 מ' CaCl2, 0.12 מ של 1 מ' MgSO4, 40 µL של 5% כולסטרול אתנול, 1 מ"ל של 8 מ"מ FudR לפני השימוש.

2. סינכרון של C. elegans6,9,12

  1. רחץ תולעים כ-2,000 בשלב םיפתתשמ gravid עם 10 מ ל מים יונים סטרילי בשפופרת 15 מ"ל. לשטוף החוצה את החיידקים 3 x, לשמור את התולעים בתחתית הצינורית.
  2. Centrifuge לדוגמה עבור 1 דקות ב x 500 g כדי להוריד את התולעים. הסר את תגובת שיקוע, ולשמור את התולעים יונים 3.5 מ"ל מים.
  3. להוסיף 1 mL NaOCl (10-15%) ו- 0.5 מ ל 5 מ' KOH לתוך הצינור. תערובת אחיד ע י ניעור עבור < 6 דקות כדי lyse הגופים תולעת.
  4. אחרי הביצים משתחררים מן התולעים, מוסיפים יונים 10 מ"ל מים כדי לעצור את פירוק. צנטריפוגה עבור 1 דקות ב x 1,200 g כדי לנתץ את הביצים ולהסיר את תגובת שיקוע ככל האפשר. לשטוף עם x לפחות 3 בינוני 15 מ"ל M9.
    הערה: ראה צעד 1.1 ההרכב של M9 בינוני.
  5. שמור ביצים 1 מ"ל M9 בינוני. תחבורה ביצים מאכל 3.5 ס"מ עבור הדגירה ב- 20 ° C ללילה אחד (כ ח 12-18).
    הערה: לאחר הדגירה, הביצים יבקעו לתעל זחל אשר נקרא בשם בשלב הראשון פגית (L1).
  6. פיפטה החוצה µL 10 התולעים L1 M9 בינוני. לספור את התולעת ולחשב שהריכוז של L1 תולעים M9 בינוני.
  7. זרע לכל היותר 10,000 מודגרות L1 הבמה תולעים עם pipet על צלחת ENGM 9 ס מ, מורחים עם Escherichia coli OP50.
    1. בשלב זה, התפשטות 0.5 mL תרבותי בין לילה e. coli OP50 עם מרק לוריא-Bertani (LB) על הצלחת ENGM 9 ס מ. דגירה את הצלחת ב 37 מעלות צלזיוס במשך 16-18 h
      הערה: כדי למנוע זיהום, הצעד מתפשטת צריכה להתבצע בתוך תא למינארי.
    2. להתקרר לטמפרטורת החדר לפני זריעה L1 תולעים. זרע לכל היותר 10,000 מודגרות L1 תולעים הבמה בצלחת ENGM עם OP50 e. coli .
  8. דגירה התולעים ב- 20 ° C 44 h או עד שהם גדלים לבמהth פגית (L4) 4.
    הערה: ראה שלב 1.3 להרכב ENGM בינוני. תולעת יש נקודה לבנה בצורת חצי ירח-אמצע הגוף בצד בשלב L4.
  9. השתמש L4 מסונכרן על הבמה תולעים את מבחני הבאים. השתמש בסוג הפרוע ש-n2 תולעים וזמינותו להישרדות C. elegans עם Aeromonas dhakensis ואת וזמינותו רעילות נוזלי C. elegans עם Aeromonas dhakensis. השתמש תולעים RW1596 (myo-3(st386); stEx30 [myo-3p::GFP::myo-3 + rol-6(su1006)]) ב- C. elegans נמק שריר וזמינותו עם Aeromonas dhakensis.

3. C. elegans וזמינותו להישרדות עם6, Aeromonas9

  1. ביום של זריעה L1 תולעים על ENGM התפשטות עם OP50 e. coli , לבחור מושבה בודדת של כל אחד של ארבעה זנים Aeromonas או e. coli OP50 והתרבות עם 2 מ ל ציר LB בהתאמה ב 37 מעלות צלזיוס במשך 16 שעות.
    הערה: כדי למנוע זיהום, שלב זה צריך להתבצע בתוך תא למינארי. כאן, שימשו את זני חיידקים הבאים: e. coli OP50, המקור אוכל רגיל של C. elegans. Dhakensis א AAK1, לבודד הראשון וסודרו באופן מלא פתוגניים קלינית dhakensis א . א hydrophila A2-066 veronii א A2-007, caviae א A2-9307121 הם מבודד representatively קלינית של בית חולים האוניברסיטה הלאומית צ'נג קונג.
  2. למדוד את ספיגת600 OD מרק חיידקי ולהתאים שהמרק בקטריאלי כדי OD600 = 2.0 עם מרק ליברות.
  3. לזהות ולהפיץ 30 µL מרק חיידקי שהלוח NGM 6 ס מ. תרבות הלוחות בטמפרטורת החדר למשך הלילה.
    הערה: ראה שלב 1.2 עבור הרכב NGM בינוני.
  4. ביום שהתולעים L1 לגדול על הבמה L4, באופן אקראי לאסוף ולהעביר תולעים 50 ל צלחת NGM עם אחד של ארבעה זנים Aeromonas או OP50 e. coli .
  5. דגירה הלוחות NGM ב- 20 ° C עד לסיום וזמינותו.
  6. העברת כל התולעים חי צלחת NGM החדש מוכן עם חיידקים, לספור המספרים של לחיות, מת, חיישן תולעים כל יום עד התולעת האחרון מת.
    הערה: להעביר תולעים צלחת NGM מוכן טרי כל יום לשם קיום זיהום, גם אם באמצעות תולעים סטרילי (לדוגמהglp-4, או עם FudR).
  7. להתוות את עקומות הישרדות מבוסס על חישוב נתונים יומי.

4. C. elegans Assay רעילות נוזלי עם Aeromonas7

הערה: כדי למנוע זיהום, צעדים צריכה להתבצע בתוך תא למינארי.

  1. יום לאחר זריעה התולעים L1 על הצלחת ENGM פזורים OP50 e. coli , לבחור מושבה בודדת של כל אחד של ארבעה זנים Aeromonas ו- e. coli OP50, והתרבות 5 מ ל ציר ליברות כל ב 37 מעלות צלזיוס במשך 16 שעות.
    הערה: בפרוטוקול, זני חיידקים הבאים שימשו: e. coli OP50, המקור אוכל רגיל של C. elegans. Dhakensis א AAK1, לבודד הראשון וסודרו באופן מלא פתוגניים קלינית dhakensis א . א hydrophila A2-066 veronii א A2-007, caviae א A2-9307121 הם מבודד representatively קלינית של בית חולים האוניברסיטה הלאומית צ'נג קונג.
  2. למדוד את ספיגת600 OD ציר חיידקים.
  3. Centrifuge שהמרק בקטריאלי ב x 3,500 g למשך 15 דקות להסיר שהמרק ליברות. Resuspend החיידק ולהתאים שהמרק בקטריאלי כדי OD600 = 3.0 S בינונית. להוסיף µL 195 מרק חיידקי S בינוני לפחות 8 בארות של צלחת 96-ובכן.
    הערה: ראה שלב 1.6 על ההרכב של S בינוני.
  4. לשטוף את התולעים L4 בצלחת ENGM עם e. coli OP5 באמצעות M9 בינוני. להתאים את הפתרון תולעת ריכוז של תולעים 5 לכל µL ולהוסיף 5 µL של הפתרון תולעת מכל קידוח של צלחת 96-ובכן. ודא כי ישנם כ 25 תולעים לכל טוב.
  5. דגירה על הלוחית 96-ובכן מטרף-200 סל ד ב 25 º C.
  6. לספור את מספר בשידור חי תולעים, תולעים מתים לאחר 24, 48, 72 ח' חשב שיעורי ההישרדות של כל טוב עם הנוסחה הבאה: (תולעים תולעים בשידור חי/סה כ) × 100%.
  7. צייר גרף פיזור מגרש עם החישוב נתונים יומי.

5. C. elegans שריר נמק Assay עם Aeromonas6

הערה: כדי למנוע זיהום, שלבים אלה צריכה להתבצע בתוך תא למינארי.

  1. ביום שהתולעים L1 הם נזרע על ENGM להתפשט עם OP50 e. coli , לבחור מושבה בודדת של כל אחד של ארבעה זנים Aeromonas ו- e. coli OP50 והתרבות עם 2 מ ל LB מרק כל ב 37 מעלות צלזיוס במשך 16 שעות.
    הערה: כאן, שימשו את זני חיידקים הבאים: e. coli OP50, המקור אוכל רגיל של C. elegans. Dhakensis א AAK1, לבודד הראשון וסודרו באופן מלא פתוגניים קלינית dhakensis א . א hydrophila A2-066 veronii א A2-007, caviae א A2-9307121 הם מבודד representatively קלינית של בית חולים האוניברסיטה הלאומית צ'נג קונג.
  2. למדוד את ספיגת600 OD ציר חיידקים ולהתאים שהמרק חיידקים כדי OD600 = 2.0 עם מרק ליברות. לזהות ולהפיץ 30 µL מרק חיידקי על צלחות NGM 6 ס מ. תרבות הלוחות בטמפרטורת החדר למשך הלילה.
  3. ביום לגדל התולעים L1 לבמה L4, תולעים 50 העברת כל צלחת NGM עם אחד של ארבעה זנים Aeromonas או OP50 e. coli . דגירה הלוחות NGM ב 20 º C. להעביר תולעים כל 24 שעות החדש מוכן NGM צלחות עם חיידקים.
  4. קח תמונות שריר באמצעות מיקרוסקופ זריחה.
    1. נבחר באקראי 10 תולעים על 2% agarose ג'ל מדיום M9 בשקופית. לשתק את התולעים באמצעות 2 µL של אזיד הנתרן 1% במדיום M9 על agarose עבור פחות מ 5 דקות לפני לקיחת תמונות.
    2. המקום מכסה, ללכוד את התמונות שריר באמצעות ירוקה חלבון פלואורסצנטי (GFP) לסנן על מיקרוסקופ פלואורסצנטי עם תשלום מצמידים מכשיר המצלמה. ללכוד את התמונות שריר בגיל 24, 48, 72 h פוסט על הבמה L4.
  5. התנהגות הכנה לניתוח ודמות תמונה עם תמונה בתוכנת עיבוד.
    הערה: ציוני לבין רמות נזק השריר המיובאים והקיימים מוצגות באיור 3, שעבורם הקריטריון מפורטים כדלקמן: 3 נקודות על סיבי השריר חסר; 2 נקודות עבור סיבי שריר קרוע או שבורים; 1 נקודה עבור סיבי השריר מכופף; 0 נקודות עבור סיבי שריר בריא.

6. ניתוחים סטטיסטיים

  1. לבצע ניסויים כל מינימום של שלוש פעמים באופן עצמאי.
  2. השתמש בשיטת קפלן-מאייר כדי להעריך את מבחני הישרדות של C. elegans , והשתמש לבדוק את יומן-דרגה ניתוח הישרדות הבדלים. להגדיר מובהקות סטטיסטית 0.05.
  3. השתמש בשם מבחן t של סטודנט כדי לנתח את התוצאות הסטטיסטיות של מבחני רעילות נוזלי C. elegans עבור שתי הקבוצות השונות. השתמש במבחן חד-כיווני אנובה בניתוח הבדלים בין שלושה ערכים או יותר אחד המשתנה הבלתי תלוי. להגדיר מובהקות סטטיסטית 0.05.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

לפי הפרוטוקולים שתוארו לעיל, קל להבחין בין רעילות של זנים Aeromonas 4. וזמינותו להישרדות של C. elegans מוצג באיור1. שיעורי ההישרדות של C. elegans נגוע Aeromonas מינים, שמוצג צו מגבוה לנמוך היו: א caviae, veronii א, א hydrophila, ו dhakensis א. למרות שיש גיוון מבחינת רעילות בין מיני ותוך מיני Aeromonas , שיעורי ההישרדות של C. elegans, הראה בממוצע, התמותה הגבוהה ביותר בין התולעים נגוע d...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

C. elegans הוא תולעים נימיות bacterivorous זה טבעי intakes חיידקים כמזון, פיתחה חיסון מולדת מסובך חיידקים במהלך התהליך האבולוציוני שלו. שני האיברים החיוניים לתחזוקה ותמיכה החסינות הן האפידרמיס והמעי9,13. האפידרמיס ואת להקות של שריר של C. elegans דומים המבנים ברקמות הרכות יונקים ו בני6. בשל מאפיינים אלו, C. elegans ישימה כאורגניזם מודל לימוד בפתוגנזה של זיהום Aeromonas .

כאן, א...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

אנחנו אסירי תודה על הסיוע המתקן הליבה C. elegans בטייוואן, מיקרוביולוגיה אבחון ומבודד Antimicrobial ההתנגדות מעבדה של הלאומית צ'נג קונג החולים האוניברסיטאי למתן את Aeromonas . אנו להכיר גם מרכז הגנטיקה Caenorhabditis (CGC), את WormBase. אנו מודים גם Savana מור לעריכת כתב היד.

מחקר זה מומן בחלקו על ידי מענקים של משרד המדע, הטכנולוגיה של טייוואן (105-2628-B-006-017-MY3 ביותר) ומבית החולים האוניברסיטאי קונג צ'אנג (NCKUH-10705001) הלאומי חן פ. ל.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
חממת שייקרYIH DERLM-570Rדגירה של חיידקים
K2HPO4J.T.Bakerתרבית MP021519455 הכנת מדיום 
KH2PO4J.T.Baker3246-05הכנת מדיום תרבית 
Na2HPO4J.T.BakerMP021914405תרבית הכנת מדיום 
NaClSIGMA31434תרבית הכנה בינונית 
MgSO4SIGMAM7506תרבית תרבית הכנה בינונית 
אגרDifco214530תרבית הכנה בינונית 
CaCl2SIGMAC1016תרבית הכנה בינונית 
כולסטרולSIGMAC8503תרבית תרבית הכנה בינונית 
אתנולSIGMA32205תרבית הכנה בינונית 
KOHSIGMAP5958תרבית הכנה בינונית 
צלחת פטרי 6 ס"מALPHA PLUS46הכנת צלחת אגר
96 בארותFALCON353072בדיקה נוזלית
פפטון חיידקיAffymetrix/USBAAJ20048P2 תרבית הכנה בינונית 
תמצית שמריםSIGMA92144תרבית הכנה בינונית 
חומצת לימון ושור; H2OSIGMAC1909תרבית בינונית הכנה 
תלת-אשלגן ציטראט ושור; H2OSIGMAתרבית 104956הכנה בינונית 
FudR SIGMA1271008תרבית הכנה בינונית 
דיסודיום EDTASIGMAE1644תרבית הכנה בינונית 
FeSO4• 7 H2OSIGMA215422תרבית הכנה בינונית 
MnCl2• 4 H2OSIGMAתרבית 221279הכנה בינונית 
ZnSO4• 7 H2OSIGMAתרבית 204986הכנה בינונית 
CuSO4• 5 H2OSIGMAC8027תרבית הכנה בינונית 
טריפטוןSIGMA16922תרבית הכנה בינונית 
מערכת מיקרוסקופNikon ליקוי Ti הפוך הדמיית מיקרוסקופ
מצלמת CCD מדעיתQImaging Retiga-2000R מהיר 1394 הדמיית מיקרוסקופ

מקורות

  1. Parker, J. L., Shaw, J. G. Aeromonas spp. clinical microbiology and disease. Journal of Infection. 62 (2), 109-118 (2011).
  2. Chao, C. M., Lai, C. C., Tang, H. J., Ko, W. C., Hsueh, P. R. Skin and soft-tissue infections caused by Aeromonas species. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 32 (4), 543-547 (2013).
  3. Chao, C. M., Lai, C. C., Tang, H. J., Ko, W. C., Hsueh, P. R. Biliary tract infections caused by Aeromonas species. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 32 (2), 245-251 (2013).
  4. Chuang, H. C., et al. Different clinical characteristics among Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii biovar sobria and Aeromonas caviae monomicrobial bacteremia. Journal of Korean Medical Science. 26 (11), 1415-1420 (2011).
  5. Chao, C. M., Lai, C. C., Gau, S. J., Hsueh, P. R. Skin and soft tissue infection caused by Aeromonas species in cancer patients. Journal of Microbiology, Immunology and Infection. 46 (2), 144-146 (2013).
  6. Chen, P. L., et al. A Disease Model of Muscle necrosis caused by Aeromonas dhakensis infection in Caenorhabditis elegans. Frontiers in Microbiology. 7, 2058(2016).
  7. Chen, P. L., et al. Virulence diversity among bacteremic Aeromonas isolates: ex vivo, animal, and clinical evidences. PLoS One. 9 (11), 111213(2014).
  8. Saraceni, P. R., Romero, A., Figueras, A., Novoa, B. Establishment of infection models in zebrafish larvae (Danio rerio) to study the pathogenesis of Aeromonas hydrophila. Frontiers in Microbiology. 7, 1219(2016).
  9. Chen, Y. W., Ko, W. C., Chen, C. S., Chen, P. L. RIOK-1 Is a Suppressor of the p38 MAPK Innate Immune Pathway in Caenorhabditis elegans. Frontiers in Immunology. 9, 774(2018).
  10. Powell, J. R., Ausubel, F. M. Models of Caenorhabditis elegans infection by bacterial and fungal pathogens. Methods in Molecular Biology. 415, 403-427 (2008).
  11. Chou, T. C., et al. Enterohaemorrhagic Escherichia coli O157:H7 Shiga-like toxin 1 is required for full pathogenicity and activation of the p38 mitogen-activated protein kinase pathway in Caenorhabditis elegans. Cellular Microbiology. 15 (1), 82-97 (2013).
  12. Stiernagle, T. Maintenance of C. elegans. WormBook. , 1-11 (2006).
  13. Engelmann, I., Pujol, N. Innate immunity in C. elegans. Advances in Experimental Medicine and Biology. 708, 105-121 (2010).
  14. Feinbaum, R. L., et al. Genome-wide identification of Pseudomonas aeruginosa virulence-related genes using a Caenorhabditis elegans infection model. PLoS Pathogens. 8 (7), 1002813(2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

C elegansNGMAeromonas
הערכת התקפה אלימה ו פתוגנזה של זיהום Aeromonas במודל Caenorhabditis elegans
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.