הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

תהליך לכייר רטוב-ספינינג מבוססי ג'לטין על התחדשות רקמות

8.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58932

⸱

7 במרץ 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Materials Science and Engineering, National Taiwan University of Science and Technology, 2Laboratory of Adult Stem Cell and Tissue Regeneration, National Defense Medical Center, 3School of Dentistry, National Yang-Ming University, 4Department and Graduate Institute of Biology and Anatomy, National Defense Medical Center, 5Department of Gerontological Health Care, National Taipei University of Nursing and Health Sciences, 6Division of Rheumatology/Immunology/Allergy, Department of Internal Medicine, Tri-Service General Hospital, National Defense Medical Center, 7Department of Physiology and Biophysics, Graduate Institute of Physiology, National Defense Medical Center, 8Division of Urology, Department of Surgery, Tri-Service General Hospital, National Defense Medical Center

במאמר זה

סיכום

אנחנו שפותחה. ומתארות פרוטוקול מבוסס על הרעיון ספינינג רטוב, לבנייה של מבוססי ג'לטין biomaterials בשימוש של יישום הנדסת רקמות.

תקציר

מאמר זה מציג שיטה זולה כדי לבדות ג'לטין, כמו פולימר טבעי, לתוך סיבי monofilament או צורות אחרות המתאימות. דרך ספינינג בשיטה רטובה, ג'לטין סיבים המיוצרים על ידי ההבלטה חלקה במדיום קרישה מתאים. כדי להגדיל את השטח פונקציונלי של סיבים אלה ג'לטין והיכולת שלהם לחקות את התכונות של רקמות, ג'לטין שאפשר לעצב לטופס צינור בהתייחסות לרעיון הזה. נבדק על ידי בדיקות במבחנה ויוו, הצינורות ג'לטין מדגימים פוטנציאל גדול עבור יישום בהנדסת רקמות. מתנהג כחומר מילוי מתאים הפער, ג'לטין צינורות יכול לשמש כתחליף הרקמה באזור הפגוע (למשל, במערכת העצבים או לב וכלי דם), כמו גם לקדם התחדשות על-ידי מתן תחליף ישירה של תאי גזע, המעגלים העצביים. פרוטוקול זה מספק הליך מפורט ליצירת biomaterial מבוסס פולימר טבעי, וצפויה יישומה באופן משמעותי לטובת פיתוח correlative פולימרים טבעיים, המסייעים לממש אסטרטגיות התחדשות רקמות.

מבוא

הפיתוח האחרון התחדשות רקמות כוללת את היישום של הנדסת רקמות, אשר מייצג את אתגר עבור השיפור של אסטרטגיות טיפוליות חדשות בטיפולים רפואיים. לדוגמה, הפוטנציאל מוגבל של מערכת העצבים התחדשות, הבאים מפציעה או מחלה, מהווה בעיה בריאותית משמעותית ברחבי העולם. בשל המורכבות של התהליכים הקשורים pathophysiological עם מערכת העצבים, השימוש בשתל מסורתי או היישום של ייצוב ניתוח הוכח להציע הטבות בתוצאות פונקציונלי, אבל אין שום ראיה חזקה עבור ההשפעות של קיבוע עמוד שדרה ניתוח1,2. ברקמות האזור הפגוע איבד והוחלף האסטרוציטים המושרה hypertrophically3, בסופו של דבר ויוצרים הצלקת גליה צפופה4,5. מטריצה זו משמש כמחסום כי רחובות ההתאוששות של העצב לתפקד6,7 , לכן, במידה רבה מעכבת התחדשות. לכן, חומר מילוי מתאים הפער צפוי למנוע האובדן של רקמת ולהפחית את היווצרות של רקמת צלקת-הקשורים על ידי שמירה על השלמות של האזור הפגוע, כמו גם על-ידי מתן החלפה ישירה של תאים עצביים, המעגלים כדי לקדם התחדשות האקסון.

Biomaterials פולימריים היה מועדף כמו פיגומים לתרפיה התחדשות רקמות, בהתבסס על התקנון של התקדמות ההתנהגות ואת הרקמה תא או האקסון וכלה בתמיכה מטריצה חוץ-תאית טבעיים (ECM). התבנית סיבים נחשבת בדרך כלל אבן בניין לחומרים שונים, בשל מבנה חד-ממדי8. הסיבים יכול להיות מושגת בדרך כלל על-ידי ההבלטה להמיס או רטוב ספינינג שיטה; עם זאת, גודל גדול והעלות של הציוד וכל הקושי לבצע בשיטות אלה הם מאתגרים. בנוסף, רוב העבודה הקשורים סיבי פולימר התמקדו חומרים סינתטיים או ללא הפרדות צבע. פולימרים טבעיים כמקור biomaterial מציעים מאפיינים הביו טוב יותר עבור גוף האדם. בכל זאת, כדי להשיג את היישור של סיבי פולימר טבעי הוא יחסית קשה יותר של פולימר סינתטי מקורות9. ומכאן, ההמרה של פולימר טבעי כמו מקור עשיר לחלבון לתוך סיבי biomaterial הוא לאסטרטגיה חשובה – לא רק הסיבים biomaterial יכול להיות ישירות מבודד מן חומר הגלם, וכך להימנע של טרנספורמציה מיותרים כדי מונומרים, אבל סיבי חלבון יש גם מראה טוב של מאפיינים חיוביים10.

בהקשר זה, אנו מתארים שיטה זולה עיבוד עבור ייצור סיבי פולימר טבעי דרך התפיסה הבסיסית של ספינינג רטוב, זה יכול להיות מיושם על המשקל מעבדה עבור הנדסת רקמות. ספינינג רטוב מבוצעת על ידי ההבלטה קרישה של פתרון פולימרי לתוך nonsolvent פולימר מתאימים. פתרון מתאים, צמיגה מסטול לתוך בינוני קרישת הדם גורמת מולקולות הפולימר להתמוסס. שלב המעבר, חוטים לאבד את המסיסות שלהם ואז הם זירז בצורה של שלב11פולימר מוצק. בהתייחס לתפיסה זו, אנו מורחב ואז ההתפתחות של הג'לטין לתוך הטופס שפופרת של תהליך היציקה, אשר נחשב ראוי ליישום התחדשות רקמות. בנוסף, ביסודה, אנו גם לפתח כל צורה של חומר מסיבי ג'לטין (למשל, צינור ג'לטין מסתכמת מסיבי ג'לטין מספר), לשני היישומים הרצויים.

ג'לטין, פולימר טבעי מתכלה, נוצר מ קולגן שפגע בסימני, הידרוליזה, כולל כל מדינה הסליל semicrystalline, אמורפי או משולשת של קולגן12. ידוע הזה קולגן הוא החלבון מבניים חיוני של כל רקמות החיבור של חולייתנים, חסרי חוליות13,14, אשר דומה למבנה חלבון של ECM העיקרי שגורם עצב צמיחה, במקביל, מחליף את כמות גדולה של גליקוזאמינוגליקן מופרש במהלך פגיעות בעמוד השדרה. לכן, השימוש של ג'לטין כמקור יהיה בחירה מצוינת עבור כל רכב רפואי. מלבד היותו מקור זול, ג'לטין הוא גם מתכלה, cytocompatible ומוכח קלינית להיות זמני פגם מילוי15. התפתחה צורת צינור, בדיקות במבחנה ויוו המתוארים כאן מדגימים כי ג'לטין יש הביו מעולה התאמתם רקמות בעתיד יישומי הנדסה. בתרבית עם תאי גזע אנושי אדיפוז, ג'לטין צינורות לשפר תאית התמיינות לתוך ובתאים עצביים באמצעות צביעת nestin חיובי כסמן תאי העצבים. יתר על כן, ג'לטין מספקות הפער חומר, המיוצר על ידי השיטה נוסדה במחקר זה, כמו צפוי להיות לניהול ובטוחה וכדי נהנים מאוד רקמות מהנדסים לפיתוח correlative פולימרים טבעיים עבור השיפור של רקמות אסטרטגיות התחדשות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

רקמות השומן התקבלו ניתוחים אורתופדיים כמו המאושר על ידי המוסדיים סקירה הלוח של Tri-שירות כללי החולים, טייפה, טייוואן, R.O.C. הליכים הכוללים נושאים בעלי חיים אושרו על ידי ועדת אכפת לי חיה-National מרכז רפואי ההגנה, טייוואן (R.O.C).

1. להרטיב ספינינג תהליך

  1. פתרון הכנה
    1. להמיס 5 גר' אבקת ג'לטין ב- 100 מ של מים מזוקק פעמיים כדי לקבל 5% (w/v) פתרון ריכוז.
    2. מערבבים את התערובת לאט ב 60-70 ° C בלילה כדי להשיג פיזור הומוגנית לחלוטין ללא בועות.
  2. רטוב ספינינג
    1. מערך סיבים
      הערה: תיאור סכמטי של השיטה מוצג איור 1א'. הגדרת ספינינג מצויד עם מכונת משאבת סחרור (ראה טבלה של חומרים) זה מספק מהירות דיוק גבוהה ושולטת מסירה חלקה של הזרם.
      1. מתחברים מזרק 26 G x 1/2 אינץ ' (0.45 מ מ x 12 מ"מ) כמו מזרק פתרון ברור ויניל אבובים.
      2. הכן 100 מ של 99.5% פתרון אצטון בכוס הספל כדי לשמש את האמבטיה קרישת הדם.
      3. להפעיל את המכונה משאבת סחרור 21 סל"ד (3.25 mL/min) ולתת לעמוד למשך מספר שניות בפתרון אצטון לפני גלגול זה הפתרון ג'לטין.
      4. להוציא את הסיבים ג'לטין מהפתרון אצטון, לטבול אותם לתוך 2.5% (w/v) של polycaprolactone/דיכלורומתאן (PCL/DCM) פתרון עם 1:20 (w/w).
      5. תן הג'לטין סיבי בפתרון PCL/DCM יבש למשך הלילה, מתחת למכסה המנוע בטמפרטורת החדר.
    2. היווצרות שפופרת
      הערה: תיאור סכמטי של השיטה מוצג באיור 1ב'.
      1. להשתמש קטטר ורידי היקפיים של 24 G x 3/4 אינץ ' (0.7 מ"מ x 19 מ"מ) שפופרת עובש.
      2. לטעון את הצנתר בתוך תמיסת ג'לטין והחזק אותו שם למשך 3 s.
      3. לטעון את הצנתר בתוך תמיסת אצטון והחזק למשך 1 דקות.
      4. לטעון את הצנתר שוב לתוך הפתרון ג'לטין והחזק אותו שם למשך 3 s.
      5. חזור על x 20 זה הליך חלופי.
      6. להוציא את הקטטר מהפתרון אצטון ולתת את הצינור עי יבש בטמפרטורת החדר במשך 5 דקות.
      7. בעדינות להוציא ברכבת התחתית ג'לטין הצנתר על-ידי שימוש עוצר דימום ולהעביר בזהירות את הצינור הג'לטין לתוך כוס פיפטה פסטר עם טבילת 2.5% (w/v) של הפתרון PCL/DCM.
      8. תן את פסטר פיפטה שמכילה שהג'לטין שפופרת ואת PCL/DCM פתרון יבש לילה, מתחת למכסה המנוע בטמפרטורת החדר.

2. מורפולוגיה של הצינור ג'לטין

  1. לטעון את חתיכת צינור ג'לטין מיובשים על גדם פחמן.
  2. שים המדגם לתוך המכונה coater לרעוד. להוציא יון (ראה טבלה של חומרים) המעיל המדגם בזהב 60 s; לאחר מכן, להתבונן מורפולוגיה שלה על-ידי סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים (ראה טבלה של חומרים).

3. תרבות של תאי גזע אנושי אדיפוז

  1. מקם את רקמות השומן (המתקבל אוראלי רקמת שומן על ידי ניתוח הקליני) לתוך צלחת פטרי המכילות 10 מ"ל של העברת פתרון המורכב 0.1 M באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS) 1% פניצילין/סטרפטומיצין, 0.1% גלוקוז.
  2. חתוך את הרקמות לחתיכות קטנות (פחות מ- 1 מ מ2) עם להב סכין.
  3. העברת הרקמות לתוך צינור פלסטיק 15 מ"ל צנטריפוגה ב 500 x g למשך 5 דקות.
  4. הסר את תגובת שיקוע, דגירה שהגופה צינור פלסטיק המכיל 10 מ"ל הנשר של Dulbecco ששונה בינוני (DMEM, בהיקף של 4 מ מגלוטמין פירובט נתרן 1 מ מ, 15 מ ג/ליטר פנול אדום) עם 0.1% collagenase ב 37 מעלות צלזיוס, באווירה humidified המכיל 95% אוויר ו-5% CO2, עבור יום אחד.
  5. Centrifuge צינור פלסטיק ב x 500 g למשך 5 דקות, למחוק את תגובת שיקוע בקפידה (אל תיגע המשקע), להשעות את המשקע בעדינות על-ידי הוספת 10 מ"ל של DMEM המכיל 10% סרום שור עוברית (FBS) ואז ומשהים 1 יום ב 37 ° C , באווירה humidified המכיל 95% אוויר ו-5% CO2.
  6. Centrifuge צינור פלסטיק ב x 500 g למשך 5 דקות ולמחוק את תגובת שיקוע בקפידה; לאחר מכן, הוסף 1 מ"ל של תאי גזע בינוני (המורכב של תקין ללא סרום בינוני (K-SFM), 5% FBS N-acetyl-L-ציסטאין, חומצה אסקורבית-2-פוספט, סטרפטומיצין, שהוא גוסס) להשעות את המשקע, להעביר אותו לתוך בקבוקון תרבות T25 המכיל 4 מיליליטר גזע בינוני תא, ומשהים 3 ימים ב- 37 מעלות צלזיוס, באווירה humidified המכיל 95% אוויר ו-5% CO2.
  7. למחוק את תגובת שיקוע, להוסיף 1 מ"ל של 0.25% טריפסין-ethylenediaminetetraacetic חומצה (EDTA), דגירה זה ב 37 מעלות צלזיוס, באווירה humidified המכיל אוויר 95% ו- 5% CO2 3.5 דקות, כדי לנתק את התאים מתחתית הבקבוק תרבות.
  8. להוסיף 1 מ"ל של FBS, להשהות את התערובת, להעביר אותו צינור microcentrifuge.
  9. Centrifuge את המתלים ב 500 x g למשך 3.5 דקות להשעות את המשקע עם 1 מ"ל של תאי גזע בינוני, להעביר אותו הבקבוקון תרבות המכיל 5 מ של תאי גזע בינוני; לאחר מכן, לשמור את זה 37 ° C באווירה humidified המכיל 95% אוויר ו-5% CO2.
  10. לשמר את תת-תרבות על-ידי שינוי המדיום תאי גזע כל 3 ימים.

4. טיפוח של תאים על המרקע ג'לטין

  1. לעקר את הצינור ג'לטין עם אור UV עבור 2 h; . ואז, לטבול אותו ב- 75% (v/v) אתנול, לשטוף אותה 2 x עם תאי גזע בינוני להסיר האתנול שיורית.
  2. לאסוף תאי גזע אדיפוז אנושי (hASCs) הבקבוקון תרבות.
    1. הסר בינוני את הבקבוק תרבות.
    2. להוסיף 1 מ"ל של 0.25% טריפסין-EDTA, דגירה ב 37 מעלות צלזיוס באווירה humidified המכיל 95% אוויר ו-5% CO2 3.5 דקות, כדי לנתק hASCs מתחתית הבקבוק תרבות.
    3. להוסיף 1 מ"ל של FBS, להשהות את התערובת, להעביר אותו צינור microcentrifuge.
    4. Centrifuge את הצינור microcentrifuge ב x 500 g למשך 3.5 דקות; לאחר מכן, למחוק את תגובת שיקוע בקפידה, להשעות את המשקע עם 1 מ"ל של תאי גזע בינוני.
  3. למקם את הצינור הג'לטין לתוך צלחת 6-ובכן המכיל 3 מ"ל של תאי גזע בינוני, זרע 4 x 104 של hASCs אל הצינור; דגירה אותם 2 שבועות ב 37 מעלות צלזיוס, באווירה humidified המכיל 95% אוויר ו-5% CO2.
  4. לשנות המדיום תאי גזע כל 3 ימים כדי לספק מספיק תזונה צמיחת תאים.

5. Immunocytochemistry

  1. הסר את תאי גזע בינוני ולשטוף היטב עם PBS.
  2. לתקן את הצינור עם תאים עם 0.1% חומצה אצטית סינתטית למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר.
  3. לשטוף את x 2 טוב עם PBS.
  4. הוספה של חומרים פעילי שטח (NP-40, 0.05%) תקופת דגירה של 10 דקות בטמפרטורת החדר.
  5. לשטוף את x 3 טוב עם PBS.
  6. להוסיף 2% עז נורמלית בסרום, דגירה בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות.
  7. Decant הפתרון הוספת נוגדן ראשוני nestin (סמן תא עצבי קדמון), דגירה בין לילה ב 4 º C.
  8. לשטוף את x 3 טוב עם PBS.
  9. הוספת נוגדנים משניים חמור אנטי-mouse-fluorescein isothiocyanate (FITC) ולשמור את הדגימה בחושך כבר שעתיים.
  10. לשטוף את x 3 טוב עם PBS.
  11. להוסיף 1 מ"ל של Hoechst 33342 כתם הגרעינים, תקופת דגירה של 10 דקות בטמפרטורת החדר.
  12. לשטוף היטב בעדינות, התבוננו בו תחת מיקרוסקופ זריחה.

6. בבדיקת התאימות Vivo

הערה: חולדות עם משקל בין 201-225 גרם נבדקו בהצלחה באמצעות פרוטוקול זה.

  1. הרדמה
    1. זירוז ולשמור על הרדמה; רצוי, עזים ומתנגד של עכברוש (בן שבוע 8 ספראג Dawley חולדה, נקבה) באמצעות זריקה תוך שרירית של tiletamine ו- zolazepam (25 מ ג / ק ג + 25 מ"ג / ק"ג, בהתאמה), חריגות השירותים הווטרינריים (5 מ"ג/ק"ג). לבצע מבחן גירוי לכאב בהקשת האצבעות של החולדה כדי לאשר את ההרדמה.
  2. עיקור וסירוס של האתר כירורגית
    1. לגלח לנקות את העור של שטח הטרפז של עכברוש (על גבו של הצוואר), לנגב את זה עם povidone-היוד להכין את התנאי אספטי של העור (100 מ"ג/מ"ל).
    2. מכסים את העכברוש עם וילונות כירורגי סטרילי כדי לצמצם העברת חיידקים וזיהום עוקבות של האתר כירורגית.
  3. השרשה של הצינור ג'לטין
    1. חותכים בעדינות את העור של עכבר שטח הטרפז עם מספריים כירורגיים.
    2. ליצור פצע של 2 ס מ ומניחים את הצינור ג'לטין ישירות על השכבה בין fascia השריר.
  4. ניתוח postimplantation
    1. לסגור את הפצע עם תפר ניילון, לנגב את זה עם povidone יוד פתרון (100 מ"ג/מ"ל).
    2. זירוז העכברוש באמצעות זריקה תוך שרירית של ketoprofen (2.5 מ"ג/ק"ג), צפאזולין (15 מ"ג/ק"ג).
    3. שמור את החולדה בתנאים aseptic במשך 7 ימים.
  5. המתת חסד
    1. עכברוש הוא מורדמים באמצעות חנק2 CO לפי הנחיות AVMA המתת חסד. לאשר את מותו של עכבר על ידי צביטה הבוהן וזנב, ואחריו החזה לגעת כדי להבטיח את פעימות הלב.
    2. לחתוך את החולדה בעדינות עם סכין אזמל, להסיר את הרקמה מושתל, לצלם תמונות להשגחה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

במחקר זה, פיתחנו בהצלחה את הג'לטין לתוך סיבי (איור 2א) ואת צינורות (איור 2ב, ג) דרך מושג ספינינג רטוב ידידותי למשתמש. חומרים אלה מבוססי ג'לטין יכול להיות מנוצל כמו כל כלי רפואי, בהתאם הצורה שלהם. בהתחשב בכך כי השטח פונקציונלי ואת מסגרת של חומרים כאלה מתאימים יותר עבור התחדשות רקמות, בדקנו את הביו צינור ג'לטין על-ידי ביצוע בדיקות במבחנה ויוו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הצגנו את התפתחות biomaterials מבוססי ג'לטין על-ידי שימוש פשוט רטוב ספינינג טכניקה שניתן להחיל במחקר של פולימרים טבעיים עבור התחדשות רקמות. עבודה זו הפגין את האפשרות של ייצור ג'לטין כמקור חלבון נהדר ללא התוספת של מקורות אחרים, במטרה לייעל את המאפיינים של ג'לטין עצמה. התפתחות biomaterials מבוססי ג'לטין בוצע לחלוטין בטמפרטורת החדר (22-26 מעלות צלזיוס). הכנה פתרון עדין הוא שלב קריטי בתוך הפרוטוקול, כמו שמירה על ריכוז של פתרון מדויק, זע את הפתרון בצורה חלקה מאוד להימנע בועות. הופעת בועות הפתרון, במיוחד כאשר נטען לתוך המזרק, ת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי משרד הלאומי הביטחון (MAB-105-070; MAB-106-077; MAB-107-032; MAB-107-065), משרד המדע והטכנולוגיה (רוב 107-2320-B016-016), בית חולים כללי Tri-שירות, הלאומית ההגנה המרכז הרפואי, טייוואן (TSGH-C106-046; TSGH-C106-115; TSGH-C107-041), בית החולים הכללי נג-חסין ואת שיתוף הפעולה של המרכז הרפואי של הביטחון הלאומי (CH-NDMC-107-8).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<הכנת תמיסה>חזקה:
ג'לטין מסוג B (חזיר)FerakArt. -Nr. 10733500 גרם בקבוקון
<חזק>תהליך ספינינג רטוב:
משאבה פריסטלטיתגילסוןדגם M312Minipuls*3
מחבר צינור פלסטיקWorld Precision Instruments140111 קופסה
מזרקסטריקני5A0625854126Gx1/2 אינץ' (0.45 x 12 מ"מ)
אצטוןפראקArt. -Nr. 00010בקבוקון 2.5 ליטר
פוליקפרולקטון CAPA 6500פרסטורפ24980-41-4-דיכלורומתאן
 ScharlauCL034210001 ליטר
בקבוקון זכוכית פסטרפיפטה פישר סיינטיפיק13-678-20A-מכשירי
HemostatShinetecST-B021-קטטר
ורידי היקפי (Introcan Certo)B. Braun1B0325824124Gx3/4 אינץ' (0.7 x 19 מ"מ)
<חזק>מורפולוגיה של צינור הג'לטין:
מכונת ציפוי מקרטע יונים היטאצ'יe1010-מיקרוסקופ
אלקטרונים סורקהיטאצ'יS-3000N-
<חזק>גידול תאים על צינור הג'לטין:
טריפסין-EDTAGibco488625בקבוקון 100 מ"ל
סרום בקר עובריGibco923119500 מ"ל
מדיום הנשר השונה של Dulbecco Gibco31600-034אבקת
קרטינוציט-SFM בינוניGibco10744-019בקבוקון 500 מ"ל
בקבוקון T25 בקבוקתרבית TPP90025VENT סוג
צלחת 6 בארותפלקון1209938-
<חזק>אימונוציטוכימיה:
פוספט חוצץמלח Gibco654471בקבוקון 500 מ"ל
קרחון חומצה אצטיתFerakArt. -Nr. 00697בקבוקון 500 מ"ל
NP-40 פעילי שטח (תמיסת טרגיטול)Sigma056K0151בקבוקון 500 מ"ל
בקבוקון רגיל של סרום עיזיםVector LaboratoriesS-1000-20בקבוקון 20 מ"ל, תרכיז
נסטין (נוגדן ראשוני)סנטה קרוז ביוטכנולוגיהSC-23927-חמור
נגד עכברים-פלואורסצאין איזותיוציאנט ( נוגדן משני)Santa Cruz BiotechnologySC-2099-Hoechst
33342AnaspecAS-83218בקבוקון 5 מ"ל
in vivo בדיקת תאימות ביולוגית:
Tiletamine+zolazepam VirbacBC91בקבוקון 5 מ"ל
קסילזיןבאייר קוריאהKR03227בקבוקון 10 מ"ל
קטופרופןAstar14062322 מ"ל בקבוקון
תמיסת פובידון-יודEverstarHA1612024 ליטר חבית
CefazolinChina Chemical & תרופות18P909בקבוקון 1 גרם
להב אזמלמכשירי ShinetecST-B021-מספריים
כירורגייםמכשירי ShinetecST-B021-

מקורות

  1. Bagnall, A. M., Jones, L., Duffy, S., Riemsima, R. P. Spinal fixation surgery for acute traumatic spinal cord injury. Cochrane Database of Systematic Reviews. 1, 004725(2008).
  2. Fehlings, M. G., Perrin, R. G. The role and timing of early decompression for cervical spinal cord injury: update with a review of recent clinical evidence. Injury. 36, Suppl 2 13-26 (2005).
  3. Yang, L., Jones, N. R., Stoodley, M. A., Blumbergs, P. C., Brown, C. J. Excitotoxic model of post-traumatic syringomyelia in the rat. Spine. 26, 1842-1849 (2001).
  4. Rolls, A., et al. Two faces of chondroitin sulfate proteoglycan in spinal cord repair: a role in microglia/macrophage activation. PLoS Medicine. 5, 1262-1277 (2008).
  5. Properzi, F., Asher, R. A., Fawcett, J. W. Chondroitin sulphate proteoglycans in the central nervous system: changes and synthesis after injury. Biochemical Society Transactions. 31, 335-336 (2003).
  6. Fawcett, J. W., Asher, R. A. The glial scar and central nervous system repair. Brain Research Bulletin. 49, 377-391 (1999).
  7. Yang, Z., Mo, L., Duan, H., Li, X. Effects of chitosan/collagen substrates on the behavior of rat neural stem cells. Science China Life Sciences. 53, 215-222 (2010).
  8. Chawla, K. K. Fibrous Materials. , Cambridge University Press. London, UK. (1998).
  9. Pickering, K. L., Aruan Efendy, M. G. A review of recent developments in natural fibre composites and their mechanical performance. Composites Part A-Applied Science and Manufacturing. 83, 98-112 (2016).
  10. Lundgren, H. P. Synthetic fibers made from proteins. Advances in Protein Chemistry. 5, 305-351 (1954).
  11. Radishevskii, M. B., Serkov, A. T. Coagulation mechanism in wet spinning of fibres. Fibre Chemistry. 37, 266-271 (2005).
  12. Yannas, I. V. Collagen and gelatin in the solid state. Journal of Macromolecular Science Part C Polymer Reviews. 7, 49-106 (1972).
  13. Baer, E., Cassidy, J. J., Hiltner, A. Hierarchical structure of collagen composite Systems: lessons from biology. Pure and Applied Chemistry. 6, 961-973 (2009).
  14. Harrington, W. F., Von Hippel, P. H. The structure of collagen and gelatin. Advances in Protein Chemistry. 16, 1-138 (1961).
  15. Veis, A. The Macromolecular Chemistry of Gelatin. , Academic Press. New York, NY. (1994).
  16. Freyman, T. M., Yannas, I. V., Gibson, L. J. Cellular materials as porous scaffolds for tissue engineering. Progress in Materials Science. 46, 273-282 (2001).
  17. Michalczyk, K., Ziman, M. Nestin structure and predicted function in cellular cytoskeletal organization. Histology and Histopathology. 20, 665-671 (2005).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

סיב ג'לטיןצינור ג'לטיןתרבית תאי גזעמיקרוסקופיה אלקטרונית סורקתסמן לתאים עצבייםהשתלה בבעלי חייםתמיסת פוליקפרולקטוןקבינה לבטיחות ביולוגית
תהליך לכייר רטוב-ספינינג מבוססי ג'לטין על התחדשות רקמות
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.