פרוטוקול זה מתאר גישה מגובשת לניתוח עצבי הפנים במודל החולדה, כולל תיאורים של דפוסים inducible שונים של פציעה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
ניתוח עצבי הפנים במודל חולדה כדי ללמוד עיכוב Axonal והתחדשות
במאמר זה
סיכום
תקציר
פרוטוקול זה מתאר שיטות עקביות ומתחדשות כדי ללמוד להתחדשות האקאליות ועכבות במודל של פגיעה בעצב הפנים חולדה. עצב הפנים יכול להיות מניפולציות לאורך כל אורכו, מפלח התוך-גולגולתי שלה אל המסלול החיצוני שלה. ישנם שלושה סוגים עיקריים של פגיעה בעצב המשמש למחקר ניסיוני של מאפייני רגנרציה: התאהבות עצבים, transection, ופער העצבים. מגוון התערבויות אפשריות הוא עצום, כולל מניפולציה כירורגית של העצב, משלוח של ריאגנטים נוירואקטיבי או תאים, או מניפולציות מרכזי או איברים הקצה. היתרונות של מודל זה ללימוד התחדשות עצבים כוללים פשטות, התמדה, עקביות בין מינים, שיעורי הישרדות אמין של החולדה, ו בגודל אנטומי מוגבר ביחס מודלים murine. המגבלות שלה כרוכות מניפולציה גנטית מוגבלת יותר לעומת מודל העכבר ואת יכולת ההתחדשות של החולדה, כגון מדען עצבי הפנים חייב להעריך נקודות זמן להתאוששות ואם לתרגם את התוצאות לבעלי חיים גבוהים יותר ולימודי אדם. מודל החולדה לפגיעה בעצב הפנים מאפשר פונקציונליות, אלקטרופיסיולוגית, ופרמטרים היקמריים לפרשנות והשוואה של התחדשות העצב. הדבר מתגאה בפוטנציאל עצום לקידום ההבנה והטיפול בהשלכות ההרסניות של פגיעה בעצב הפנים בחולים אנושיים.
מבוא
פגיעה בעצב הגולגולת בראש ובצוואר יכול להיות משני כדי מולדות, זיהומיות, אידיופטית, iatrogenic, טראומטי, נוירולוגי, אונולוג'יק, או חבלות מערכתית1. עצב הגולגולת השביעי, או עצב הפנים, מושפע בדרך כלל. השכיחות של תפקוד עצבי הפנים יכול להיות משמעותי, כפי שהוא משפיע על 20 כדי 30 לכל 100,000 אנשים בכל שנה2. ענפי המנוע העיקריים של עצב הפנים הם הזמן, הנזיזים, הלסת התחתונה, שוליים וענפים בצוואר הרחם; בהתאם לענף מעורב, ההשלכות יכולות לכלול יכולת למניעת הדלקת ריר אוראלי, יובש הקרנית, חסימה בשדה ויזואלי משני כדי ptosis לדיסאראז, או הפנים א-סימטרי2,3. תחלואה ארוכת טווח כוללת תופ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל התערבויות בוצעו בהתאמה קפדנית עם הנחיות המכון הלאומי לבריאות (NIH). הפרוטוקול הניסיוני אושר על ידי המועצה לטיפול בעלי חיים מוסדיים של אוניברסיטת מישיגן & השימוש הוועדה (IACUC) לפני היישום. מבוגרת בת 10 שבועות. שהיו משתמשים בחולדות
1. לפני היום הפעיל
- להבטיח מלאי המתאים של כלי ניתוח מעוקר, תרופות משכך כאבים, תרופות הרדמה, וחמצן לפני יום הפעולה. נא עיין בטבלת החומרים לקבלת רשימה מלאה.
2. התקנה מראש
- הקפידו על מרחב עבודה נאות, כולל מקום לשני אנשים לפחות (המנתח ועוזר).
הערה: יש צורך בשולחן הפעלה ייעודי, מקום להתקנת מכונת ההרדמה, ומקום אחסון הולם לאספקה מחוטאת וגיבוי.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
לאחר הליך הניתוח הראשוני, ישנם שני סוגים עיקריים של מדדי התוצאה: מדידות סדרתיות בעלי חיים ומדידות הדורשות הקרבת החיה. דוגמאות של מדידות טוריות כוללות אלקטרופיזיולוגיה assays כגון פעולה שרירים מורכבים המדד הפוטנציאלי30, הערכות של תנועת שריר הפנים דרך באמצעות לייזר או וידאו פירושו9, או אפילו הדמיה חיה חוזרת של לצמיחה מחודשת של עצב הפנים בעלי חיים מונגניים פלורסנט31,32.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מודל פציעה הפנים חולדה הגוף התפתחה כמערכת המגוונת ביותר עבור הערכה של גורמים neurotrophic בשל נגישות כירורגית שלה, מסעף דפוס, ומשמעות פיזיולוגית27,29,33,34,35,36. השילוב של הדגמת וידאו ויישום של נתוני בעלי חיים טרנסגניים פותח אפשרויות חדשות עבור המחקר המדעי של תופעות התחדשות עצבים. מודל זה מאפשר אפיון שיטתי ומפורט של התגובה ה.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
. למחברים אין מה לגלות
תודות
S.A.A. ממומנת על ידי האקדמיה האמריקנית לפלסטיקה הפנים וניתוח שיחזור לזלי ברנשטיין תוכנית מענקים.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 1.8% איזופלורן | VetOne | 13985-030-40 | |
| 11-0 מיקרו-תפרים ניילון | AROSuture | TK-117038 | |
| 4-0 תפר מונוקריל | VWR | 75982-084 | |
| בופרנורפין SR | ZooPharm | MIF 900-006 | |
| קרפרופן | סיגמא-אולדריץ' | MFCD00079028 | |
| כלורהקסידין | VWR | ||
| מלקחיים תכשיטנים | VWR | 21909-458 | |
| מפסק מיקרו Weitlaner | VWR | 82030-146 | |
| מספריים מיקרו | VWR | 100492-348 | |
| מספריים מיני טנוטומיה | VWR | 89023-522 | |
| מספר 15 להב אזמל | VWR | 102097-834 | |
| מיקרוסקופ הפעלה | Leica | ||
| ג'ל עיניים וזלין | Pharmaderm | B002LUWBEK | |
| מים סטריליים | VWR | 89125-834 | |
| דבק רקמות | Vetbond, 3M | NC9259532 | |
| כרית מוליך מים | Aqua Relief System | ARS2000B | |
| Bupivacaine | השתמש כמשכך כאבים מקומי |
מקורות
- Chan, J. Y. K., Byrne, P. J. Management of facial paralysis in the 21st century. Facial Plastic Surgery. 27 (4), 346-357 (2011).
- Razfar, A., Lee, M. K., Massry, G. G., Azizzadeh, B. Facial Paralysis Reconstruction. Otolaryngologic Clinics of North America. 49 (2), 459....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
