RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Research Article
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
כאן, אנו מציגים פרוטוקול להפגין שיטת התנהגות המדגימה את האופן שבו מאפיינים חזותיים חלופיים, כגון אותות תנועה, משפיעים על החלטות כיווניות בדגים. נתונים מייצגים מוצגים על המהירות והדיוק שבו שיינר הזהב (הערות Crysoleucas) לעקוב אחר תנועות דגים וירטואליים.
התנהגות קולקטיבית של החיות נובעת ממניעים אישיים ואינטראקציות חברתיות החיוניות לכושר אישי. לדגים הרבה מאוד חקירות בהשראת התנועה הקולקטיבית, במיוחד, יכולתם לשלב מידע סביבתי וחברתי על פני ההקשרים האקולוגיים. הפגנה זו ממחישה טכניקות המשמשות לכמת את התגובות ההתנהגותית של דגים, במקרה זה, הזהב הפנס (הערות קריומיקויוס), לגירויים חזותיים באמצעות הדמיית מחשב וניתוח תמונה דיגיטלית. הפיתוחים האחרונים בהדמיה ממוחשבת מאפשרים בדיקה אמפירית במעבדה שבה ניתן לשלוט בתכונות חזותיות ולהשפיע בעורמה כדי לבודד את מנגנוני האינטראקציות החברתיות. מטרת שיטה זו היא לבודד תכונות חזותיות שיכולות להשפיע על החלטות כיווניות של הפרט, בין אם בודד או עם קבוצות. פרוטוקול זה מספק פרטים בתחום הפיזי של מבוך Y, ציוד הקלטה, הגדרות וכיול של המקרן וההנפשה, שלבים ניסיוניים וניתוחי נתונים. טכניקות אלה מציגות שהנפשת המחשב עלולה לעורר תגובות ביולוגית בעלת משמעות. כמו-כן, הטכניקות מסתגלות בקלות לבדיקת השערות, תחומים ומינים חלופיים למגוון רחב של יישומים ניסיוניים. השימוש בגירויים וירטואליים מאפשר הפחתה והחלפה של מספר בעלי החיים החיים הנדרשים, וכתוצאה מכך מפחית את הוצאות המעבדה.
הפגנה זו בודקת את ההשערה כי הבדלים יחסיים קטנים במהירויות התנועה (2 אורך הגוף לשנייה) של הקשר הווירטואלי ישפרו את המהירות ואת הדיוק שבו הנוצצים לעקוב אחר רמזים כיוונים שסופקו על ידי הווירטואלי צלליות. תוצאות מראות כי החלטות שינרים כיוונית מושפעים באופן משמעותי על ידי עליות במהירות של רמזים חזותיים, אפילו בנוכחות של רעש רקע (67% התמונה קוהרנטיות). בהעדר הוראות תנועה, הנבדקים בחרו את ההנחיות שלהם באופן אקראי. הקשר בין מהירות ההחלטות ומהירות הרמיזה היה משתנה והגדילה במהירות האות הייתה השפעה צנועה בלתי פרופורציונלית על דיוק כיווני.
בעלי חיים חשים ומפרשים את בית הגידול שלהם ברציפות כדי לקבל החלטות מושכלות בעת האינטראקציה עם אחרים וניווט בסביבה רועשת. אנשים יכולים לשפר את המודעות שלהם וקבלת החלטות על ידי שילוב מידע חברתי למעשיהם. מידע חברתי, עם זאת, נובע במידה רבה מן היסק באמצעות רמזים לא מכוונים (כלומר, תמרונים פתאומיים כדי למנוע טורף), אשר יכול להיות לא אמין, ולא באמצעות אותות ישירים אשר התפתחו כדי לתקשר הודעות ספציפיות (למשל, העגלה רקוד בדבורי דבש1. זיהוי האופן שבו אנשים מעריכים במהירות את הערך של רמזים חברתיים, או כל מידע חושי, יכול להיות משימה מאתגרת עבור חוקרים, במיוחד כאשר אנשים נוסעים בקבוצות. החזון ממלא תפקיד חשוב המסדירים אינטראקציות חברתיות2,3,4 ומחקרים הדגיבו את רשתות האינטראקציה שעלולות להתעורר בבתי ספר לדגים המבוססים על שדה השקפה5של כל אדם, . שישה מטרים בתי ספר לדגים הם מערכות דינמיות, עם זאת, ומקשה על בידוד תגובות בודדות לתכונות מסוימות, או התנהגויות שכנה, בשל הקוטביות הטבועה וגורמים מייסדים הנובעים מאינטראקציות בין חברי הקבוצה. מטרת פרוטוקול זה היא להשלים את העבודה הנוכחית על-ידי בידוד האופן שבו תכונות חזותיות חלופיות יכולות להשפיע על החלטות כיווניות של אנשים המטיילים לבד או בתוך קבוצות.
היתרון של הפרוטוקול הנוכחי הוא לשלב ניסוי מניפולטיבי עם טכניקות ויזואליזציה של המחשב כדי לבודד את התכונות החזותיות היסודיים שאדם עשוי לחוות בטבע. באופן ספציפי, Y-מבוך (איור 1) משמש לכווץ בחירה כיוונית לתגובה בינארית ולהציג תמונות אנימציה מחשב שנועד לחקות את התנהגויות שחייה של שכנים וירטואליים. תמונות אלה מוקרן מתחת למבוך לחקות את הצלליות של שחייה הפרטים מתחת אחד או יותר הנושאים. המאפיינים החזותיים של צלליות אלה, כגון מורפולוגיה, מהירות, קוהרנטיות, והתנהגות שחייה מותאמים בקלות כדי לבדוק השערות חלופיות7.
נייר זה מדגים את כלי השירות של גישה זו על ידי בידוד כיצד אנשים של מודל מיני דגים חברתיים, את הפנס הזהוב (הקפאת מיגונאס), להגיב למהירות היחסית של שכנים וירטואליים. מוקד הפרוטוקול, כאן, הוא האם ההשפעה הכוללת של השכנים הוירטואליים משתנה עם המהירות שלהם, ואם כן, מכמת את הצורה של מערכת היחסים הנצפתה. במיוחד, הרמז הכיווני נוצר על ידי בעל חלק קבוע של הצלליות לפעול כמנהיגים ולנוע באופן מידי לעבר זרוע אחת או אחרת. הצלליות הנותרות מתנהגות כשחקנים מתנווננים על-ידי הזזת באופן אקראי כדי לספק רעשי רקע שניתן לכוונן על-ידי התאמת יחס המנהיג/שחקן ההסיח. יחס המנהיגים להסיח את דעתו של האותות הכיוורים וניתן להתאימו בהתאם. הצלליות של השחקן יישארו מוגבלים לאזור ההחלטה ("DA", איור 1A) על-ידי הצלליות שישקפו את הגבול. מנהיג צלליות, עם זאת, מותר לעזוב את אזור DA ולהיכנס לזרוע המיועד שלהם לפני התפוגגות לאט ברגע הצלליות חצה 1/3 אורך הזרוע. כאשר מנהיגים עוזבים את התובע המחוזי, מנהיג חדש צלליות לתפוס את מקומם ולשחזר את הנתיב המדויק שלהם כדי להבטיח כי היחס מנהיג/שחקן נשאר קבוע התובע המחוזי במהלך הניסוי.
השימוש בדגים וירטואליים מאפשר לשלוט במידע החושי החזותי, תוך ניטור התגובה היוונית של הנושא, העשוי לחשוף את המאפיינים החדשניים של ניווט חברתי, תנועה או קבלת החלטות בקבוצות. הגישה המשמשת כאן יכולה להיות מיושמת על מגוון רחב של שאלות, כגון השפעות של לחץ תת-קטלני או מחלה על אינטראקציות חברתיות, על ידי מניפולציה של אנימציה המחשב כדי לייצר דפוסים התנהגותיים של מורכבות שונות.
כל הפרוטוקולים הניסיוניים אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועדת השימוש של המעבדה הסביבתית, ארה ב מהנדס צבא ומחקר ופיתוח מרכז, Vicksburg, MS, ארה ב (IACUC 2013-3284-01).
1. עיצוב מבוך חושי
2. ציוד הקלטה
3. כיול הגדרות תאורה, מקרן ומצלמה
4. כיול תוכנית הקרנה חזותית: רקע
) באמצעות תוכנית הגירוי החזותית על-ידי התאמת הפרמטרים הדרושים.5. כיול תוכנית הקרנה חזותית: גירויים חזותיים
הערה: עיבוד והנפשה של גירויים חזותיים ניתן לעשות גם בעיבוד באמצעות השלבים שלהלן כמדריכים יחד עם הדרכות של הפלטפורמה. שרטוט של הלוגיקה של התוכנית הנוכחית מסופקת (איור 3) ופרטים נוספים ניתן למצוא ב Lemasson ואח '. (2018)7. השלבים הבאים מספקים דוגמאות לשלבי הכיול שננקטו בניסוי הנוכחי.
6. הכנה לבעלי חיים
7. הליך ניסיוני
8. ניתוח נתונים
השערה ועיצוב
כדי להדגים את השירות של מערכת ניסיונית זו בדקנו את ההשערה כי את הדיוק שבו הזהב הזהוב לעקוב אחר הרמז החזותי ישתפר עם מהירות של המקל הזה. סוג פראי פנס הזהב שימשו (N = 16, אורך הגוף, BL, ומשקולות רטוב, WW, היו 63.4 ± 3.5 mm ו 1.8 ± 0.3 g, בכבוד). הקוהרנטיות של הגירויים החזותיים (יחס המנהיג/שחקן ההסיח) תוקנו ב-0.67, בעוד שאנו מניפולציה את המהירות שבה מהירות התנועה שלנו (כלומר, המנהיגים) הועברו ביחס לאותם שחקני ההסיח. רמות מהירות של צלליות מנהיג המספקים את הרמזים כיווניות נע מ 0-10 BL/s (בהפרשים של 2), אשר משתרע על טווח של מהירויות בדרך כלל נחשב לשקף מתמשך, ממושך, או פרץ שחייה מצבי הפעילות בדגים12. ברמת השליטה, 0, צלליות המנהיג היו מכוונות לכיוון זרוע היעד בקרב שחקנים באופן אקראי מונחה, אבל אף אחד הצלליות לא זז. זרוע היעד נבחרה באופן אקראי עבור כל משפט על ידי התוכנית. יחידות מרחק הן באורך הגוף, אשר הוגדר על ידי האורך הרגיל ממוצע של הנבדקים שלנו, והזמן הוא בשניות. ניתוח הנציגים הנוכחי מתמקד במדידת משתני תגובה ראשוניים (מהירות החלטה ודיוק), אך גם עיצוב הניסוי מאפשר לחוקרים לחלץ מידע נוסף על-ידי מעקב אחר תנועות נושא וניתוח קינמטיקה.
נושאי הדגים שלנו שוכנו. לאחר סעיף 6 של הפרוטוקול כל נושא נחשף לרמה אחת של הטיפול בכל יום. אנחנו באקראי גם בתוך רמת הטיפול הנושא (מהירות cue) על פני הימים ואת הסדר שבו הנושאים נבדקו בכל יום. ליניארי וכללית אפקטים מעורבים השפעות מעורבת (LMM ו-GLMM, בהתאמה) שימשו כדי לבדוק את ההשפעות של מהירות צללית מובילה על המהירות והדיוק שבו הנושאים בעקבות גירויים חזותיים. מזהה הנושא נכלל כאפקט האקראי בשני הדגמים.
נתונים וממצאים
בהעדר כל הרמזים תנועה פנס הזהב פעל כצפוי ובחר את כיוונו באופן אקראי (גירוי מהירות = 0, הבדיקה הבינומית, n שמאל= 33, nימינה= 40, = 0.45, P = 0.483). בעוד שרוב הנושאים לא הראו סימנים של התנהגות מלחיצה בתוך התחום ועשה החלטה מכרעת בתוך הזמן המוקצב (5 דקות), 22% מהנושאים הראו חוסר רצון לעזוב את אזור ההחזקה או להיכנס לאזור ההחלטה. נתונים מדגים אלה לא הססניים לא נכללו בניתוח. הנותרים 78% מהנושאים שלנו הראו שיפור משמעותי בדיוק שבו הם עקבו אחר גירויים כיוונית כמהירות של גירויים אלה גדל (GLMM, z = 1.937, P = 0.053). איור 5A מראה את האופי של קשר זה, שבו אנו מוצאים להגדיל את 1.2-קיפול בדיוק כיוונית עבור כל עלייה ברמת מהירות גירוי. מערכת יחסים זו היא בלתי מידתית בלבד ואינה מרמזת על מענה הסף לשינויים במהירות האות. עליות מהירות גירוי גם הובילו לעלייה משמעותית במהירות החלטה (LMM, F1, 56= 4.774, P = 0.033). עם זאת, כפי שניכר באיור 5B המגמה במהירות החלטה לא עקבית משתנה מאוד על פני רמות מהירות גירוי. מה ברור בנתונים אלה מהירות החלטה היא כי לקח נושאים, בממוצע, בכל מקום מ 5-20x יותר לעשות את ההחלטה שלהם כאשר הגירויים היו זזים מאשר כאשר הם לא היו (מהירויות החלטה של 4.6 ± 2.3 s ו 81.4 ± 74.7 s עבור גירוי מהירויות של 0 ו-8, בהתאמה, ± סטנדרטי, SD). אכן, ללא רמת השליטה לא מצאנו שינוי משמעותי במהירות החלטה כפונקציה של מהירות הגירוי.

איור 1. תחום Y-מבוך. תמונה של מכשיר מבוך Y עבור מבחן קבלת החלטות. ביאורים מייצגים את הפעולות הבאות: אזור החזקה (HA, ירוק), אזור החלטה (DA, כחול), זרוע החלטה שמאלית (אידה) וזרוע החלטה נכונה (RDA). ב. התמונה של Y-מבוך וחדר עם תאורה המסלול מתכווננת מיקום gige (רק אחד מארבעת האורות התקורה הפסים גלויים). ג. תמונה של מבוך Y (מבט צדדי) כולל מיקום המקרן אשר נעול על ידי הכרכרה הזזה כדי לחסל את התנועות במהלך, או בין, מבחנים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

איור 2. רקע וכיול גירוי. תמונה של מבוך Y מואר עם צבע רקע אחיד ועוצמת פיקסל בעוצמה (קו ירוק) בין אזור ההחזקה לבין אזור ההחלטה, DA (ממוצע פיקסל עוצמת 112 ± 1278). מעבר הצבע האור שנוצר על-ידי הנורה (נקודה חמה) של המקרן נראה בבירור. ב. תמונה המציגה את היישור של התחזיות עם ה-DA. ג. תמונת המבוך עם הרקע המסונן וצללית בודדה המתוכננת במרכז ה-DA לכיול (גודל, מהירות). התוספת של הרקע מעבר הדרגתי ב (ג) תוצאות ברקע כהה יותר (ממוצע פיקסל עוצמת 143.1 ± 5.5) והרבה פחות שונות מרחבית (מקדם וריאציה טיפות מ 11.4 (א.) כדי 0.03 (ג). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

איור 3. סכמטית של הזרימה הכללית של פעולות בתוכנית ההדמיה המשמשת בניסויים. לפרטים פרוצדורליים נוספים ראו7. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

איור 4. ניסוי ניסיוני עם צלליות ומציאות דגים. A. תמונה (חי) שיינר זהוב עוזב את אזור ההחזקה (מעגל ירוק). ב. תמונה של הפנס הזהוב (חי) באזור ההחלטה (מעגל ירוק) בין הצלליות דגים וירטואליים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

איור 5. דיוק ומהירות של תגובות כיווניות לשינויים במהירות היחסית של אותות תנועה. A. גרף של הדיוק החלטה הדג שבו הפנס הזהוב עקב הצלליות ' מנהיג ' המותווים נגד מהירות גירוי (BL/s). ב. גרף מהירות ההחלטה של הדג הותווה כנגד מהירות הגירוי (BL/s). נתונים הם המשמעות של ± שגיאות סטנדרטיות, SE. קבוצות של 15 צלליות וירטואליות הופצו באופן אקראי בכל אזור ההחלטה ברמת קוהרנטיות של 67% (10 מתוך 15 הצלליות שפעלו כמנהיגים, הנותרים 5 צלליות שפעלו כמסטנים) ואנו מגוון את ה מהירות של המנהיגים מ 0-10 BL/s. מהירויות ההסיח של השחקן נשאר קבוע ב-1 BL/s בכל רמות מהירות, למעט הפקד שבו אף אחד הצלליות לא זז. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
כל המחברים תרמו לתכנון הניסיוני, ניתוח וכתיבת נייר. A.C.U. ו-C.M.W. התקנה ואסף את הנתונים. . למחברים אין מה לגלות
כאן, אנו מציגים פרוטוקול להפגין שיטת התנהגות המדגימה את האופן שבו מאפיינים חזותיים חלופיים, כגון אותות תנועה, משפיעים על החלטות כיווניות בדגים. נתונים מייצגים מוצגים על המהירות והדיוק שבו שיינר הזהב (הערות Crysoleucas) לעקוב אחר תנועות דגים וירטואליים.
אנחנו מודים לבריטון הייקסון. על סיוע ההתקנה תוכנית זו נתמכת על ידי תוכנית המחקר הבסיסי, איכות הסביבה ומתקנים (EQI; ד ר אליזבט פרגוסון, מנהל טכני, ארה ב מרכז מחקר ופיתוח מהנדס צבאי.
| מצלמת IP בשחור לבן | נולדוס, ליסבורג, וירג'יניה, ארה"ב | https://www.noldus.com/ | |
| אלומיניום מוחצן | 80/20 בע"מ, קולומביה סיטי, אינדיאנה, ארה"ב | 3030-S | https://www.8020.net 3.00 אינץ' X 3.00 אינץ' פרופיל מחורץ T חלק, שמונה חריצי T פתוחים |
| מתנע דג סנפיר עם Vpak, כדורים מוחצנים 1.5 מ"מ | Zeigler Bros. Inc., Gardners, PA, USA | http://www.zeiglerfeed.com/ | |
| זוהר זהב | חוות סול מינו, AR, ארה"ב | http://saulminnow.com/ | |
| ImageJ (v 1.52h) תוכנה חופשית | המכון הלאומי לבריאות (NIH), ארה"ב | https://imagej.nih.gov/ij/ | |
| תאורת מסלול LED | Lithonia Lightening, Conyers, GA, USA | BR20MW-M4 | https://lithonia.acuitybrands.com/residential-track |
| Oracle 651 ויניל בחיתוך לבן | 651Vinyl, לואיוויל, קנטקי, ארה"ב | 651-010M-12:5ft | http://www.651vinyl.com. ניתן להזמין גדלים שונים. |
| מקרן עילי PowerLite 570 | Epson, לונג ביץ', קליפורניה, ארה"ב | V11H605020 | |
| https://epson.com/For-Work/Projectors/Classroom/PowerLite-570-XGA-3LCD-Projector/p/V11H605020 Processing | Foundation | https://processing.org/ | |
| R (3.5.1) תוכנה חופשית | פרויקטR למחשוב | סטטיסטי | https://www.r-project.org/ |
| אולטרה-לבן מסך קולנוע 360 | פתרונות מסך אלטרנטיביים, קלינטון, מישיגן, ארה"ב | 1950 | https://www.gooscreen.com. חייב לקרוא למערכת Z-Hab בגודל חיתוך מיוחד |
| Pentair Aquatic Ecosystems, אפופקה, פלורידה, ארה"ב | https://pentairaes.com/. התקשרו לפרטים ומידות. |