מאמר שיטה

הדור של מודל עכברוש של אי ספיקת כבד חריפה על ידי שילוב 70% כריתת הריאה חלקית ופרצטמול

DOI:

10.3791/60146

⸱

27 בנובמבר 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1National Institute of Immunology, 2Center for Cellular and Molecular Biology

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ספיקת כבד חריפה מודל בעלי חיים שפותחה במחקר הנוכחי מציג חלופה אפשרית למחקר של טיפולים פוטנציאליים. המודל הנוכחי מעסיק את ההשפעה המשולבת של פציעה פיזית ומושרה בתרופות בכבד ומספק חלון זמן מתאים כדי ללמוד את הפוטנציאל של טיפולים חדשניים.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אי ספיקת כבד חריפה (אלף) היא מחלה קלינית הנגרמת על ידי חבלות שונות וכתוצאה מכך אובדן מטבולית, ביוכימית, סינתזה, ו הרעלים פונקציות של הכבד. במקרים של נזק בלתי הפיך ביותר בכבד, השתלת כבד אורתוטרופי (OLT) נשאר הטיפול היחיד הזמין. כדי ללמוד את הפוטנציאל התרפויטי של טיפול באלף, הבדיקה המוקדמת במודל החי של אלף היא חיונית. במחקר הנוכחי, מודל אלף בחולדות פותחה על ידי שילוב 70% כריתת hepatectomy חלקית (PHx) וזריקות של פרצטמול (APAP) המספק חלון טיפולי של 48 h. חציון ואת האונות לרוחב השמאלי של הכבד הוסרו לבלו 70% ממסת הכבד APAP ניתנה 24 שעות בניתוח עבור 2 ימים. הישרדות בבעלי חיים באלף המושרה נמצאה בירידה חמורה. ההתפתחות של אלף אושרה על ידי שינוי רמות הסרום של האנזימים אלטין העברת אמינו (ALT), אספרטט העברת אמינו (AST), פוספטאז אלקליין (ALP); שינויים בזמן הפרותרומבין (PT); והערכה של היחס המנורמל הבינלאומי (INR). המחקר של הפרופיל ביטוי הגן על ידי qPCR חשף עלייה ברמות הביטוי של גנים המעורבים אפופטוזיס, דלקת, ובהתקדמות של פציעה בכבד. התנוונות מניוון של hepatocytes וחדירה של תאים חיסוניים נצפתה על ידי הערכה היסטולוגית. הסבירות של אלף אושרה על ידי שיקום של רמות ההישרדות והסרום של ALT, AST, ו-ALP לאחר השתלת הטחול של החולדה בריאה syngeneic. מודל זה מציג חלופה אמינה למודלים הזמינים בעלי חיים כדי ללמוד את הפתופסולוגיה של אלף, כמו גם להעריך את הפוטנציאל של טיפול הרומן של אלף. השימוש בשתי גישות שונות מאפשר גם לבחון את ההשפעה המשולבת של פגיעה בכבד ובתרופות הנובעות מסמים. השגות והכדאיות של ההליך הנוכחי הוא יתרון נוסף של המודל.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אי ספיקת כבד חריפה (אלף) מוגדר על ידי האגודה האמריקנית לחקר מחלות כבד כהתפתחות מהירה של פגיעה בכבד חריפה ללא סימנים קודמים של נזק מאופיין ליקוי חמור של סינתטי, מטבולית, ו הרעלים פונקציות של הכבד1. אלף שונה מכשל כבד כרוני שבו הכישלון מתרחש כתוצאה של פגיעה בכבד הנגרמת על פני תקופה ארוכה של זמן מ ספיקת כבד כרונית חריפה (aclf), שבו נזק לכבד פתאומי מתרחש כתוצאה של מחלות כבד כרונית2,3,4. התרופה הזמינה היחידה עבור אלף היא השתלת כבד אורתוטופית (OLT), או מוות עלול להתרחש. בשל המחסור של תורמי הכבד, שיעור התמותה בחולים הסובלים מאלף הוא גבוה מאוד.

כדי ללמוד את הפוטנציאל של גישות טיפוליות חלופיות ולהבין טוב יותר את הפתופסיולוגיה של אלף, מודלים בעלי חיים שיכולים לשקף את אלף המתרחשים בבני האדם הם זקוקים. רבים מדגמי החיות הזמינים שכבר הינם בעלי מספר חסרונות. ההשפעות של פרצטמול (APAP) קשות להתרבות, אך יש להן את הדמיון הקרוב ביותר במונחים של הערכים הטמפורלית, הקליניים, הביוכימיים והפתולוגיים. Apap מודלים בעלי חיים המושרה לעתים קרובות בעיות בשל נוכחותם של טהמוגלובינמיה נגרמת על ידי חמצון של המוגלובין על ידי apap ו intermediates שלה5,6,7. בעיה נוספת היא חוסר ביכולת התגובה המשתקף על ידי תגובות מינון בלתי צפויות ואת זמן המוות. אלף מודלים בעלי חיים המיוצרים באמצעות פחמן טטרהכלוריד(ccl4) יש שיקול העוני המסכן8,9,10,11. קונקבלנה (קון a) וליפוסכריד (lps)-המושרה אלף בעלי חיים מודלים לא משקפים את הדפוס הקליני של המחלה האנושית, למרות שיש להם יתרונות במחקר של מנגנונים סלולריים המעורבים מחלות בכבד אוטואימוניות במחקר של אלח דם בהתאמה12,13,14,15. באופן דומה, thioacetamide (TAA) גם דורש ביוטרנספורמציה כדי מטבוליזם פעיל thioacetamide סולפוקסיד ומראה וריאציה מינים16,17,18,19. ד-גלטוסמיטין (d-Gal) מייצרת מספר שינויים ביוכימיים, מטבוליים ופיסיולוגיים הדומים לאלף, אך אינו מסוגל לשקף את כל המצב הפתולוגי של אלף20,21,22,23. היו מעט מאוד נסיונות לשלב שתיים או יותר מהשיטות האלה כדי לפתח דגם אלף שמסוגל לשקף את תסמונת אלף בצורה טובה יותר13. לכן, מחקרים נוספים נדרשים לפתח מודל שיכול לשקף את הפרמטרים של המחלה, יש התפתחות טובה יותר, ומספק מספיק זמן כדי ללמוד את ההשפעות של התערבות טיפולית.

במחקר הנוכחי, המודל האלטרנטיבי של אלף בחולדות נוצר על ידי שילוב ההשפעות של כריתת hepatectomy (PHx) ומינונים נמוכים יותר של מגיב hepatoרעילים. Apap יש תפקיד מבוסס היטב גרימת פציעה בכבד5,24,25. זהו כאבים בשימוש נרחב הוא רעיל לכבד במינון supratherapeutic על ידי יצירת מטבוליטים רעילים. APAP הוא הגורם למותם של רבים במדינות מפותחות. פגיעה גופנית נגרמת על ידי כריתת hepatectomy יוזם הפעלה של תהליכים שונים המעורבים דלקת, כמו גם התחדשות הכבד. הזרקה של הסוכן hepatotoxic APAP גורם לסביבה עוינת בכבד, מניעת התפשטות של hepatציטים. זה מפחית את תקופת הלחץ על בעל החיים, אשר כאשר בשילוב עם מינונים קטנים יותר של hepatotoxin, מוביל לשגות טוב יותר של ההליך. לכן, באמצעות מודל זה, השפעה שוללת של שני סוגים של פציעות בכבד נחקרו. כדי לאפיין את דגם אלף החי המפותח, הפרמטרים הפיזיולוגיים והביוכימיים נחקרו. ההיבישה המוצלחת של אלף אושרה על ידי השתלת החולדה בריאה syngeneic.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ההליך המתואר להלן אושר על ידי ועדת האתיקה של בעלי החיים המוסדי של המכון הלאומי לאימונולוגיה, ניו דלהי. מספר האסמכתא הטורית של האישור מהווה המשך 355/14.

1. הכנה

  1. היכונו להליך הכירורגי כמתואר קודם על ידי Das B et al.26.
  2. השתמש 6 – 8-שבוע בן המטבעי חולדות Wistar עם משקל הגוף של 200 – 250 g.
  3. בית בעלי החיים תחת תנאים סטנדרטיים טיפול בבעלי חיים ולהאכיל אותם עם החולדה העכבר libitum לפני ואחרי ההליך.
  4. בעת ביצוע 70% PHx, להשתמש בשילוב קוקטייל סטנדרטי של קטמין הידרוכלוריד (100 מ"ג/ק"ג משקל הגוף) ו xylazine (10 מ"ג/ק"ג משקל הגוף), אשר מוזרק intraperitoneally.
    הערה: סוג ההרדמה שבשימוש יכול להיות השפעות פוסט-אופרטיביות על התמותה והתחלואה.
  5. במהלך השתלת התא, השתמשו בהרדמה ממסים נדיפים (2-כלורט-2-(difluoromethoxy)-1, 1, 1-trifluoro-ethane) כדי להקטין את זמן ההחלמה של בעל החיים לאחר ניתוח ההשתלה.
  6. לגרום ולתחזק את ההרדמה הבין-משתמשים במערכת הרדמה אישית. שמור על זרימת החמצן ב-4 ליטר/דקות. לשימוש האינדוקציה isofלאנה ב 4% לשימוש תחזוקה 2 – 3% במהלך הניתוח.

2. הליכים מוקדמים

  1. הintraperitoneally את החולדה על ידי הזרקת התערובת הקטמין-xylazine שתוארה בשלב 3.1. לאשר את ההרדמה המלאה על ידי צובט את הבוהן של החיה. הליכים נוספים מתבצעים רק כאשר אין רפלקס דוושה.
  2. על מנת למנוע התייבשות, יש למרוח לשתי העיניים שטיפת מתיל מבוססת-תאית.
  3. רסן את בעל החיים ההרדמה. ללוח כירורגי באמצעות קלטת לבנה מניחים את בעל החיים עם צד הבטן הפונה כלפי מעלה, ומבטיחים שהפה הוא בצד המרוחק מהאדם המבצע את המבצע.
  4. להסיר את השיער מאזור כירורגי הימנית העליונה באמצעות קוצץ חשמלי.
  5. לחטא את האתר כירורגי על ידי שלושה חלוקים לסירוגין של povidone יוד ו 70% אתנול באמצעות רפידות כותנה מעוקר בתנועה מעגלית.

3. כריתת הלוע חלקית (PHx) כדי להסיר 70% ממסת הכבד

הערה: בצע את ההליך הכירורגי כולו תחת סביבה סטרילית במכסה זרימה למינארי. השתמש רק כלי ניתוח סטרילי כדי למזער את הסיכון של זיהום בניתוח. הסרת 70% של מסת הכבד, המכונה 70% כריתת hepatectomy (70% PHx), בוצעה כמתואר על ידי ג ' מיטשל ו-H. וילאנביא, 200827.

  1. לפני תחילת הניתוח, לאשר את ההרדמה המלאה של החיה על ידי צובט את הבוהן שלה. הליכים נוספים מתבצעים רק כאשר אין רפלקס דוושה.
  2. סמן את העור להיות נחתך ממש מתחת עצם החזה, בניצב xiphoid, ובמקביל לחזה.
  3. מניחים סדין סטרילי נקי שיש לו פתח של כ 3 ס"מ x 1 ס מ מעל העור המסומן.
  4. בצע חתך רוחבי של סביב 2 – 3 ס מ לאורך הקו המסומן עם אזמל. . השתמש בלהב כירורגי מס ' 22 הסירו בעדינות את ההחזקה של העור לשכבת השריר הבסיסית בקרבת האזור המעוקר תוך שימוש בתיאורי כותנה עקרים.
  5. לאחר מכן, בצע חתך רוחבי דרך שכבת הצפק בדיוק מתחת לתהליך xiphoid.
  6. בעזרת שני טיפים מלוחים להתשחת כותנה, לחשוף את האונה השמאלית של הכבד על ידי הפעלת לחץ עדין על החזה. מניחים קצה כותנה אחד על האזור הסרמטי של החלק המבוקר וקצה הכותנה השני מתחת לאזור המגורש כדי להרים את אונה הכבד.
  7. להחליק 8 – 10 ס מ לולאה לאורך חוט ניילון סטרילי (גודל 4 – 0, 0.15 מ"מ קוטר) סביב אונה הכבד חשוף. קח את הלולאה לבסיס של האונה קרוב hilum בעזרת מלקחיים מיקרובתר או ניצנים לחלח כותנה.
  8. בעזרת מחזיק המחט יקרוסקופיים מיקרו מלקחיים, לקשור את שני הקצוות של הלולאה, הצבת הקשר קרוב לבסיס של האונה ככל האפשר כדי לצמצם את כלי הדם ולהפחית את הדימום לאחר האונה הכבד מוסר. . קשור שני קשרים נוספים בצד השני
  9. נקוט זהירות לא לקשור את הקשר קרוב מדי לכלי הדם הסמוכים, אשר עלול אחרת לגרום חסימה בורידים (היצרות).
  10. השימוש מספריים יקרוסקופיים לחתוך את האונה הקשורה ממש מעל הקשר, אשר משאיר מסה דהוי של רקמה הנקרא גדם האיסכמי במקום האונה.
    הערה: כבד חולדה, כמו אלה של עכברים, מחולק לארבע אונות נפרדות: האונה החציוני, האונה הימנית לרוחב, שמאל האונה השמאלית, ואת האונה מזונבת, אשר מייצגים כ 40%, 20%, 30%, ו 7% ממסת הכבד הכולל, בהתאמה. כל שילוב של האונות האלה ניתן להסיר לבלו 70% הכבד מסה. במחקר הנוכחי, האונה החציוני ואת האונות הצדדיים השמאלית הוסרו.
  11. אתר בקפידה את האונה החציוני מבלי לפגוע בגדם הנותר של האונה הצדדית השמאלית. בעדינות למשוך את זה מתוך חלל הבטן, ובבסיס של עניבה האונה 8-10 ס מ החוט ניילון ארוך (גודל 4-0) הקשר כפי שהוזכר קודם לכן. . קשור שני קשרים נוספים בצד השני בסדר בזהירות ולהסיר את האונה החציוני קשור לקחת את כל אמצעי הזהירות שהוזכרו.
  12. לאחר הסרת האונות, תפר את הצפק באמצעות כרוממית 4-0 תפר עם תפרים מתמשך ואחריו העור בתפירה עם תפר קטוע.
  13. החל povidone יוד על העור המקיף את התפרים כדי למנוע זיהום.
  14. הסר את הסדין העטוף והוצא את בעל החיים מלוח הניתוח.

4. טיפול פוסט-פעיל בבעלי חיים

  1. Intraperitoneally להזריק את בעל החיים עם מנה של 12 mg cefo, 1 מ ל של 5% גלוקוז פתרון עם מזרק 1 mL כדי להגן עליו מפני הסיכון של זיהום לאחר הניתוח.
  2. ניהול הזרקה תת עורית של מלוקסיאם כאבים (1 מ"ג/ק"ג משקל הגוף) להקלה על הכאב לאחר הניתוח ולעקוב אחר זה על ידי שתי מינונים יותר, שמירה על משטר כמנה אחת ליום.
  3. הבית בעלי החיים המופעלים תחת תנאים סטנדרטיים של 12 h מחזור אור/כהה וניטור במרווחי זמן קבועים.

5. הזרקת סם בעלי חיים בעלי מערכת חלקית כדי לגרום לכשל בכבד

  1. לאחר 24 שעות הניתוח, כאשר בעלי החיים התאושש בהצלחה מ 70% PHx, למדוד את משקל הגוף של בעל החיים ואחריו הזריקות.
  2. הכנס 750 מ"ג/ק"ג משקל הגוף של APAP intraperitoneally בחיות hepatectomized תוייזציה באופן חלקי 24 שעות לאחר 70% PHx בעקבות בעלי החיים ' התאוששות מוצלחת מההליך כירורגי. חזור על המינון שוב לאחר 24 שעות.
    הערה: שתי מינונים של APAP מנוהלים intraperitoneally לבעל החיים (כלומר, 24 h ו 48 h לפרסם את ההליך 70% PHx, בהתאמה).
  3. בכל פעם לאחר ההזרקה של APAP, למדוד את משקל הגוף של החיה להתאושש.
    הערה: APAP (biocetamol) הוא מוזרק בעלי חיים כפתרון 150 mg/mL ב 2% אלכוהול בנזיל.

6. השתלת הפציטים בריאות בדגמי אלף בעלי חיים

הערה: כדי ללמוד את הסבירות של אלף בחולדות, השתלת מלשין בריא לעכברושים בעלי חיים בתוך הבשר המושרה ביחד עםמנה אחת של apap. במחקר הנוכחי, כדי לספק זמן רב לתאים המושתלים עבור ביות ו העפילו, ההשתלה נעשתה רק לאחר לתת אתהמינון 1 של apap. החולדה הפטציטים מבודדת על ידי פרוטוקול שפורסם לראשונה על ידי ברי וחברים ואח '28 ומאוחר יותר הותאם במחקרים שונים29,30,31 עם כמה שינויים. עבור השתלת הטחול של תאים בדגם אלף בעלי חיים, בצע את השלבים שהוזכרו להלן.

  1. מניחים את העכברוש לתוך תא פולי (מתיל מתיונין) עבור אינדוקציה של הרדמה עם 4% isof, ו 4 זרימת חמצן L/min עבור חולדה של 250 – 350 גרם משקל הגוף. בדוק את עומק ההרדמה על ידי חוסר רפלקסים פדלים כאשר צובט את הבוהן של החיה.
  2. הניחו את העכברוש הרדימים על הלוח הכירורגי, כך שהחלק השמאלי שלו פונה כלפי מעלה. שמרו על הרדמה בשעה 2-3% משאיפת האינהלציה באמצעות דובר מתאים.
  3. לגלח את העור על האזור לרוחב שמאל לעקר אותו על ידי הפתרון יוד povidone.
  4. לעשות חתך רוחבי על האזור מגולח של העור.
  5. בצע חתך של 1 – 2 ס מ בשכבת הצפק כדי לחשוף את הטחול.
  6. הסירו בעדינות את הטחול של חלל הצפק והרימו אותו בעזרת שתי עצות לגבי כותנה.
  7. שמור את התאים (בדרך כלל 107 לכל בעל חיים) להיות מושתלים מושעה 50 ΜL imdm מדיה במזרק 1 מ"ל אינסולין עם מחט של 29 G.
  8. בעדינות לנקב את המחט לתוך קליפת הטחול ולשחרר את ההשעיה התא לתוך הטחול בתוך 2 – 3 דקות.
  9. לאחר השתלת התא הושלמה, בזהירות להוציא את המחט ולחלק את האזור של ניקוב המחט עם קצה כותנה לחלח כדי למנוע דליפה של ההשעיה התא מהאתר.
  10. סגרו את הצפק והעור באמצעות תפר של 4-0 שנספג באופן רציף ובלתי פוסק בהתאמה.
  11. החל povidone פתרון יוד על העור במקום התפרים כדי למנוע זיהום באתר המופעל.
  12. Intraperitoneally להזריק 1 מ"ל נפח של 12 מ"ג/mL של אנטיביוטיקה (למשל, cefoסעה) פתרון ותת-עורי להזריק כאבים (g., מלוקסיעם) 1 מ"ג/ק"ג משקל הגוף לחיה כחלק טיפול פוסט-פעיל. הזיזו את החיה לכלוב חם ומתאושש.
  13. לשמור על החיה המופעלת בבידוד בתנאים נורמליים של 12 h מחזור אור/כהה עד הפצעים המנתחים החלימו לחלוטין. הדבר עשוי להימשך שלושה – ארבעה ימים.

7. אפיון ההתפתחות של אלף

  1. המתת חסד בעלי חיים על ידי מנת יתר של פתרון קטמין-xylazine 2 h לאחרהמינון 2 של apap טיפול ולאסוף דגימות דם ורקמות.
  2. איסוף סרום מדם למחקרים ביוכימיים32.
  3. עיבוד דוגמיות של רקמת הכבד עבור לימודי היסטולוגית וגנים ביטויים33,34,35.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אחוז ההישרדות במודלים של בעלי חיים של אלף
המינון האופטימלי של APAP לגרום אלף בשילוב עם 70% PHx היה מתוקננת כמו 750 מ"ג/ק"ג משקל הגוף. משטר הטיפול החל 24 שעות לאחר 70% PHx, כאשר בעלי החיים התאושש לחלוטין מהניתוח, וכללה שתי מנות APAP במרווחי זמן 24 h. התמותה נצפתה בשיעור של 80% לאחר הממשל של המינון השני של APAP, 48 h לאחר הניתוח. אחוז ההישרדות נותח והותווה דרך שיטת קפלן-מאייר (איור 1). השגות בזמן המוות ותקופת הזמן המסופקים על ידי מודל זה הופכת אותו למועמד מתאים לחקר התערבות...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התפתחותו של דגם בעלי חיים מתאים לאלף היא החשובה ביותר להבנת הפתוגנזה וההתקדמות של אלף. מודל מאופיין היטב של אלף בעלי חיים גם מספק את ההזדמנות לפיתוח ולניסוי של גישות טיפוליות חדשות נגד אלף. ניסיונות רבים נעשו לפתח מודל רלוונטי קלינית של אלף6,12,21,23,46,47,48. רוב מחקרים אלה או לנצל הליכים כ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

. למחברים אין מה לגלות

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכת על ידי מענק הליבה שהתקבל מהמחלקה לביוטכנולוגיה, ממשלת הודו למכון הלאומי לאימונולוגיה, ניו דלהי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
פרצטמול (ביוצטמול)EG Pharmaceuticalsאין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
ערכת פוספטאז אלקליין (DEA)מערכת קלינית אלמוגים, הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מנתח אוטומטיטוליפ, אלטו סנטרקרוז, הודומנתח ביוכימי Screen Maaster 3000לבדיקת תפקודי כבד
בטדין ( תמיסת פובידון-יוד)Win-Medicare; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
ארון בטיחות ביולוגי (Class I)קרטוס בינלאומי; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מיקרוסקופ שדה בהיראולימפוס, יפןLX51
Cefotaxime (טקסים®)אלקם; הזרקתנתרן cefotaxime בהודו, ללא מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
ארה"בCLS431752
קולגנאז סוג IGibco מאת Life Technologies17100-017
Cotton BudsPure Swabs Pvt Ltd; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
גיליון וילונותJSD כירורגיות, דלהי, הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
DPX MountantSigma; US6522
תמיסת Eosin Y,סיגמא אלכוהולית; HT110132 ארה"ב
הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מערכת הרדמת גזUgo Basile; איטליה211000
גלוקוזהיימדיה, הודוGRM077
קרם להסרת שיער (Veet®)רקיט בנקיזר, הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
תמיסת המטוקסילין,הסיגמא של מאייר; ארה"בMHS16
מלח נתרן הפריןHimedia; הודוRM554
Hyaluronidase מאשכי כבשיםסיגמא; ארה"בH6254
I.V. צינורית (Plusflon)Mediplus, הודוRef 1732411420
מזרקי אינסוליןBD; ארה"ב REF 303060
איזופלורן (פוראן®)Asecia QueenboroughNo B506קטמין הרדמה באינהלציה
(Ketamax®)טרויקה פרמצבטיקה בע"מקטמין הידרוכלוריד IP, ללא מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מלוקסיקם (Melonex®)אינטס פרמצבטיקה בע"מ; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מחזיקי מחטים מיקרו ישר &
מרסיאן מעוקל		; אנגליהBS-13-8
מחזיקי מחט מיקרו ישר &
מרסיאן מעוקל		; אנגליהBS-13-8
MicrotomeHisto-Line Laboratories, איטליהMRS3500
חוט ניילוןMighty; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
פרפורמלדהידהימדיה; הודוGRM 3660
Percoll®GE Healthcare17-0891-01
Refresh Tears/Eyemist GelAllergan India Private Limited/Sun Pharma, IndiaP3060אין מספר קטלוגי ספציפי
RPMIHimedia; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
אזמלכירורגיה גדולה; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מספרייםניתוחים גדולים; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
ערכת SGOT (ASAT)מערכת קלינית אלמוגים, הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
ערכת SGPT (ALAT)מערכת קלינית אלמוגים, הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
Shandon Cryotome E CryostatThermo Electron Corporation; ארה"באין מספר קטלוגי ספציפי
סוכרוזסיגמא; ארה"בS0389
להב כירורגי מס' 22La Medcare, הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
מועצה כירורגיתמתוצרתללא מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
סרט לבן כירורגי3M הודו; הודו1530-1סרט כירורגי מיקרופור
תופרEthicon, Johnson & ג'ונסון, הודוNW 5047
מזרקים (1 מ"ל, 26 גרם)דיספו ואן; הודואין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
גוזם (קליפר)של פיליפסNL9206AD-4 DRACHTEN QT9005
בראוןאין מספר קטלוגי ספציפי (רכש מקומי)
William's E MediaHimedia; הודוAT125
קסילזין (Xylaxin®)Indian Immunologicals Limitedתרופות הרגעה, טרום הרדמה, משככי כאבים ומרפי שרירים
מסננת תאים סיגמא; מלקחיים ניתוחים גדולים; מקומית את מכונת שקילה

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Polson, J., Lee, W. M. AASLD position paper: the management of acute liver failure. Hepatology. 41, 1179-1197 (2005).
  2. Chung, R. T., et al. Pathogenesis of liver injury in acute liver failure. Gastroenterology. 143, 1-7 (2012).
  3. Fyfe, B., Zaldana, F., Liu, C. The Pathology of Acute Liver Failure. Clinical Liver Disease. 22, 257-268 (2018).
  4. Lefkowitch, J. H. The Pathology of Acute Liver Failure. Advances in Anatomic Pathology. 23, 144-158 (2016).
  5. Mitchell, J. R., et al. Acetaminophen-induced hepatic necrosis. I. Role of drug metabolism. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 187, 185-194 (1973).
  6. Rahman, T. M., Hodgson, H. J. Animal models of acute hepatic failure. International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 81, 145-157 (2000).
  7. Rahman, T. M., Selden, A. C., Hodgson, H. J. A novel model of acetaminophen-induced acute hepatic failure in rabbits. Journal of Surgical Research. 106, 264-272 (2002).
  8. Dashti, H., et al. Thioacetamide- and carbon tetrachloride-induced liver cirrhosis. European Surgical Research. 21, 83-91 (1989).
  9. Demirdag, K., et al. Role of L-carnitine in the prevention of acute liver damage-induced by carbon tetrachloride in rats. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 19, 333-338 (2004).
  10. Sheweita, S. A., Abd El-Gabar, M., Bastawy, M. Carbon tetrachloride-induced changes in the activity of phase II drug-metabolizing enzyme in the liver of male rats: role of antioxidants. Toxicology. 165, 217-224 (2001).
  11. Sinicrope, R. A., Gordon, J. A., Little, J. R., Schoolwerth, A. C. Carbon tetrachloride nephrotoxicity: a reassessment of pathophysiology based upon the urinary diagnostic indices. American Journal of Kidney Diseases. 3, 362-365 (1984).
  12. Takada, Y., Ishiguro, S., Fukunaga, K. Large-animal models of fulminant hepatic failure. Journal of Artificial Organs. 6, 9-13 (2003).
  13. Takada, Y., et al. Increased intracranial pressure in a porcine model of fulminant hepatic failure using amatoxin and endotoxin. Journal of Hepatology. 34, 825-831 (2001).
  14. Leist, M., Wendel, A. A novel mechanism of murine hepatocyte death inducible by concanavalin A. Journal of Hepatology. 25, 948-959 (1996).
  15. Mizuhara, H., et al. Strain difference in the induction of T-cell activation-associated, interferon gamma-dependent hepatic injury in mice. Hepatology. 27, 513-519 (1998).
  16. Bruck, R., et al. Hypothyroidism minimizes liver damage and improves survival in rats with thioacetamide-induced fulminant hepatic failure. Hepatology. 27, 1013-1020 (1998).
  17. Chieli, E., Malvaldi, G. Role of the microsomal FAD-containing monooxygenase in the liver toxicity of thioacetamide S-oxide. Toxicology. 31, 41-52 (1984).
  18. Fontana, L., et al. Serum amino acid changes in rats with thioacetamide-induced liver cirrhosis. Toxicology. 106, 197-206 (1996).
  19. Peeling, J., et al. Cerebral metabolic and histological effects of thioacetamide-induced liver failure. American Journal of Physiology. 265, 572-578 (1993).
  20. Blitzer, B. L., et al. A model of fulminant hepatic failure in the rabbit. Gastroenterology. 74, 664-671 (1978).
  21. Diaz-Buxo, J. A., Blumenthal, S., Hayes, D., Gores, P., Gordon, B. Galactosamine-induced fulminant hepatic necrosis in unanesthetized canines. Hepatology. 25, 950-957 (1997).
  22. Maezono, K., Mawatari, K., Kajiwara, K., Shinkai, A., Maki, T. Effect of alanine on D-galactosamine-induced acute liver failure in rats. Hepatology. 24, 1211-1216 (1996).
  23. Patzer, J. F., et al. D-galactosamine based canine acute liver failure model. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 1, 354-367 (2002).
  24. Newsome, P. N., Plevris, J. N., Nelson, L. J., Hayes, P. C. Animal models of fulminant hepatic failure: a critical evaluation. Liver Transplantation. 6, 21-31 (2000).
  25. Yoon, E., Babar, A., Choudhary, M., Kutner, M., Pyrsopoulos, N. Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity: a Comprehensive Update. Journal of Clinical and Translational Hepatology. 4, 131-142 (2016).
  26. Das, B., et al. Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice. Journal of Visualized Experiments. , (2018).
  27. Mitchell, C., Willenbring, H. A reproducible and well-tolerated method for 2/3 partial hepatectomy in mice. Nature Protocols. 3, 1167-1170 (2008).
  28. Berry, M. N., Friend, D. S. High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells: a biochemical and fine structural study. Journal of Cell Biology. 43, 506-520 (1969).
  29. Fry, J. R., Jones, C. A., Wiebkin, P., Bellemann, P., Bridges, J. W. The enzymic isolation of adult rat hepatocytes in a functional and viable state. Analytical Biochemistry. 71, 341-350 (1976).
  30. Green, C. J., et al. The isolation of primary hepatocytes from human tissue: optimising the use of small non-encapsulated liver resection surplus. Cell Tissue Bank. 18, 597-604 (2017).
  31. Ismail, T., et al. Growth of normal human hepatocytes in primary culture: effect of hormones and growth factors on DNA synthesis. Hepatology. 14, 1076-1082 (1991).
  32. Greenfield, E. A. Sampling and Preparation of Mouse and Rat Serum. Cold Spring Harbor Protocols. 11, (2017).
  33. Walsh, K. M., Timms, P., Campbell, S., MacSween, R. N., Morris, A. J. Plasma levels of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and tissue inhibitors of metalloproteinases -1 and -2 (TIMP-1 and TIMP-2) as noninvasive markers of liver disease in chronic hepatitis C: comparison using ROC analysis. Digestive Diseases and Sciences. 44, 624-630 (1999).
  34. Thiele, N. D., et al. TIMP-1 is upregulated, but not essential in hepatic fibrogenesis and carcinogenesis in mice. Scientific Reports. 7, 714(2017).
  35. Li, C. P., Li, J. H., He, S. Y., Li, P., Zhong, X. L. Roles of Fas/Fasl, Bcl-2/Bax, and Caspase-8 in rat nonalcoholic fatty liver disease pathogenesis. Genetics and Molecular Research. 13, 3991-3999 (2014).
  36. Kim, W. R., Flamm, S. L., Di Bisceglie, A. M., Bodenheimer, H. C. Serum activity of alanine aminotransferase (ALT) as an indicator of health and disease. Hepatology. 47, 1363-1370 (2008).
  37. Henry, L. Serum transaminase levels in liver disease. Journal of Clinical Pathology. 12, 131-137 (1959).
  38. Giannini, E. G., Testa, R., Savarino, V. Liver enzyme alteration: a guide for clinicians. Canadian Medical Association Journal. 172, 367-379 (2005).
  39. Hammam, O., et al. The role of fas/fas ligand system in the pathogenesis of liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Hepatitis Monthly. 12, 6132(2012).
  40. Prystupa, A., et al. Activity of MMP-2, MMP-8 and MMP-9 in serum as a marker of progression of alcoholic liver disease in people from Lublin Region, eastern Poland. The Annals of Agricultural and Environmental Medicine. 22, 325-328 (2015).
  41. Sekiyama, K. D., Yoshiba, M., Thomson, A. W. Circulating proinflammatory cytokines (IL-1 beta, TNF-alpha, and IL-6) and IL-1 receptor antagonist (IL-1Ra) in fulminant hepatic failure and acute hepatitis. Clinical and Experimental Immunology. 98, 71-77 (1994).
  42. Schwabe, R. F., Brenner, D. A. Mechanisms of Liver Injury. I. TNF-alpha-induced liver injury: role of IKK, JNK, and ROS pathways. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 290, 583-589 (2006).
  43. Ataseven, H., et al. The levels of ghrelin, leptin, TNF-alpha, and IL-6 in liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma due to HBV and HDV infection. Mediators of Inflammation. 2006, 78380(2006).
  44. Ambrosino, G., et al. Cytokines and liver failure: modification of TNF- and IL-6 in patients with acute on chronic liver decompensation treated with Molecular Adsorbent Recycling System (MARS). Acta Bio Medica Atenei Parmensis. 74, Suppl 2 7-9 (2003).
  45. Robert, A., Chazouilleres, O. Prothrombin time in liver failure: time, ratio, activity percentage, or international normalized ratio. Hepatology. 24, 1392-1394 (1996).
  46. Francavilla, A., et al. A dog model for acetaminophen-induced fulminant hepatic failure. Gastroenterology. 96, 470-478 (1989).
  47. Terblanche, J., Hickman, R. Animal models of fulminant hepatic failure. Digestive Diseases and Sciences. 36, 770-774 (1991).
  48. Tunon, M. J., et al. Rabbit hemorrhagic viral disease: characterization of a new animal model of fulminant liver failure. Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 141, 272-278 (2003).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Acute Liver FailurePartial HepatectomyAcetaminophen HepatotoxicityRat ModelSurgical ProcedureBiochemical AnalysisHistological EvaluationGene ExpressionHepatocyte TransplantationSurvival Assessment

מאמרים קשורים