הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

המינהל לרדיומעקב אחר פליטת פוזיטרון ברזולוציה גבוהה הטומוגרפיה של המוח האנושי: יישום ל-FDG-Fdg

10.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/60259

⸱

22 באוקטובר 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Monash Biomedical Imaging, Monash University, 2Australian Research Council Centre of Excellence for Integrative Brain Function, 3Turner Institute for Brain and Mental Health, Monash University, 4Department of Medical Imaging, Monash Health, 5Department of Electrical and Computer Systems Engineering, Monash University

במאמר זה

סיכום

כתב יד זה מתאר שני פרוטוקולים לניהול רדיומעקב עבור FDG-PET (אינפוזיה קבועה ובולי עירוי פלוס) ומשווה אותם לניהול בולוס. הרזולוציות הטמפורלית של 16 s הם השגה באמצעות פרוטוקולים אלה.

תקציר

טומוגרפיה פונקציונלית של פליטת פוזיטרון (fPET) מספקת שיטה למעקב אחר מטרות מולקולריות במוח האנושי. עם מתויג באופן אקטיבי של גלוקוז אנלוגי, 18F-fluordeאוקסימסוכר (fdg-fdg), כעת ניתן למדוד את הדינמיקה של חילוף החומרים גלוקוז עם רזולוציות הזמן מתקרבים אלה של דימות תהודה מגנטית תפקודית (fMRI). זה מדד ישיר של ספיגת גלוקוז יש פוטנציאל עצום להבנת תפקוד המוח נורמלית נורמלי בודק את ההשפעות של מחלות מטבולית ונוירוניווניות. עוד, ההתקדמות החדשה בחומרה MR-PET היברידית לאפשר ללכוד תנודות בגלוקוז ובחמצן בדם בו באמצעות fMRI ו-FDG-Fdg.

הרזולוציה הטמפורלית והאות לרעש של התמונות FDG-Fdg תלויה באופן ביקורתי בניהול המעקב אחר הרדיו. עבודה זו מציגה שני פרוטוקולי אינפוזיה מתמשכים חלופיים ומשווים אותם לגישת ההזנה המסורתית. היא מציגה שיטה לרכישת דגימות דם, לנעילת זמן PET, MRI, הגירוי ניסיוני, וניהול משלוח מעקב לא מסורתי. באמצעות גירוי חזותי, תוצאות הפרוטוקול מציגות מפות קורטיטיות של תגובת הגלוקוז לגירויים חיצוניים ברמה בודדת עם רזולוציה זמנית של 16 s.

מבוא

טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים (PET) היא טכניקת דימות מולקולרי רב עוצמה המשמשת רבות בהגדרות קליניות ומחקר (ראו Heurling ואח '1 לסקירה מקיפה לאחרונה). המטרות המולקולריות שניתן לצלם באמצעות PET מוגבלות רק על ידי הזמינות של מכשירי רדיו, ומכשירי מעבר רבים פותחו לקולטנים עצביים של מטבוליזם התמונה, חלבונים, ואנזימים2,3. במדעי המוח, אחד מהרדיומשדרים הנפוצים ביותר הוא 18F-פלואורודיט גלוקוז (FDG-PET), אשר מודד ספיגת גלוקוז, מפורש בדרך כלל כמדד של מטבוליזם המוח של גלוקוז. המוח האנושי דורש אספקה קבועה ואמינה של גלוקוז כדי לספק את דרישות האנרגיה שלה4,5, ו 70-80% של מטבוליזם המוח של גלוקוז משמש על ידי נוירונים במהלך הילוכים סינפטית6. שינויים בחילוף החומרים לגלוקוז מוחין נחשבים ליזום ולתרום לתנאים רבים, כולל פסיכיאטרי, נוירוניווניות, והסכמי האינוים7,8,9. יתר על כן, כמו ספיגת fdg פרופורציונאלית לפעילות סינפטית10,11,12, הוא נחשב מדד ישיר יותר מבולבל פחות של פעילות עצבית בהשוואה דם נרחב יותר בשימוש הדמיה מגנטית תפקודית התלויה ברמת התהודה (BOLD-fMRI) תגובה. BOLD-fMRI הוא מדד עקיף של פעילות עצבית ומודד שינויים בהמוגלובין המודנטי המתרחשים לאחר מפל של שינויים נוירוכלי דם בעקבות פעילות עצבית.

רוב FDG-PET מחקרים של המוח האנושי לרכוש תמונות סטטיות של ספיגת גלוקוז מוחין. המשתתף נח בשקט למשך 10 דקות עם עיניהם פקוחות בחדר חשוך. מינון הרדיונותב המלא מנוהל כמנת על פני תקופה של שניות, והמשתתף מונח על 30 דקות נוספות. לאחר תקופת הספיגה, המשתתפים מוצבים במרכז הסורק PET, ותמונת PET המשקפת את התפלגות ה-FDG המצטברת במהלך המחזור של ספיגת הזמן והסריקה. לפיכך, הפעילות העצבית הסדורה באינדקס על-ידי תמונת PET מייצגת את הממוצע המצטבר של כל הפעילות הקוגניטיבית על פני תקופות ספיגה וסריקה ואינו ספציפי לפעילות קוגניטיבית במהלך הסריקה. שיטה זו סיפקה תובנה מצוינת לחילוף החומרים של המוח ותפקוד עצבי. עם זאת, הרזולוציה הטמפורלית שווה למשך הסריקה (לעתים קרובות ~ 45 דקות, מניב ביעילות מדידה סטטית של ספיגת גלוקוז; זה משווה באופן בלתי מוצדק לתגובה עצבית במהלך תהליכים קוגניטיביים וניסויים נפוצים בדימות מוחי. בשל הרזולוציה הטמפורלית המוגבלת, השיטה מספקת מדד לא ספציפי של ספיגת גלוקוז (כלומר, לא נעול לפעילות או תהליך קוגניטיבי) ואינו יכול לספק מדדים של שינויים בתוך הנושא, דבר שעלול להוביל למסקנות מדעיות שגויות בשל לפרדוקס של סימפסון13. פרדוקס סימפסון הוא תרחיש, שבו יחסים המוח התנהגות מחושב בין הנבדקים לא בהכרח מעיד על אותן יחסים נבדק בתוך הנבדקים. יתרה מזאת, נסיונות אחרונים להחיל אמצעי קישוריות פונקציונליים ל-FDG-PET יכולים רק למדוד קישוריות בין הנושאים. לפיכך, ניתן להשוות הבדלים בקישוריות בין קבוצות ולא ניתן לחשב אותן עבור נושאים בודדים. למרות שהוא נושא במחלוקת מה בדיוק הרוחב-נבדק מודד14, זה ברור כי מדדים מחושבים בין-אבל לא בתוך הנושאים לא ניתן להשתמש בסמנים עבור מצבי מחלה או משמש כדי לבחון את המקור של וריאציה בודדת.

בחמש השנים האחרונות, פיתוח ונגישות רחבה יותר של סורקי MRI בו בו-מחמד בו-מחדש גרם מחקר מחודש העניין FDG-PET הדמיה2 ב מדעי המוח קוגניטיבי. עם ההתפתחויות הללו, החוקרים התמקדו שיפור הרזולוציה הטמפורלית של FDG-PET לגשת לסטנדרטים של BOLD-fMRI (~ 0.5-2.5 s). שים לב כי הרזולוציה המרחבית של BOLD-fMRI יכול לגשת לרזולוציות subמילימטר אבל הרזולוציה המרחבית של FDG-PET מוגבלת באופן מהותי סביב 0.54 מ"מ רוחב מלא בחצי המקסימלי (FWHM) בשל טווח פוזיטרון15. הרכישות הדינמיות של FDG-PET, המשמשות לעתים קרובות קלינית, משתמשות בשיטת ניהול ההזנה ומשחזרים את נתוני מצב הרשימה לתוך סלים. השיטה הדינמית של FDG-PET מציעה רזולוציה זמנית של כ-100 s (לדוגמה, Tomasi ואח '16). זה בבירור הרבה יותר טוב בהשוואה FDG סטטי-PET הדמיה אבל הוא לא דומה BOLD-fMRI. בנוסף, החלון בו ניתן לבחון את תפקוד המוח מוגבל, משום שריכוז הפלסמה בדם של FDG מצטמצם זמן קצר לאחר ההזנה.

כדי להרחיב את החלון הנסיוני הזה, קומץ של מחקרים17,18,19,20,21 הסתגלו שיטת העירוי לרדיומעקב שהוצעה בעבר על ידי קרסון22, . עשריםואחד בשיטה זו, לפעמים מתואר "פונקציונלי FDG-PET" (FDG-fpet, מקביל ל-MRI מודגש-f), מכשיר הרדיו מנוהל כעירוי קבוע במהלך הסריקה של PET כולו (~ 90 דקות). המטרה של פרוטוקול האינפוזיה היא לשמור על אספקת פלזמה קבועה של FDG לעקוב אחר שינויים דינאמיים ספיגת גלוקוז לאורך זמן. במחקר הוכחת קונספט, Villien יין ואח '21 השתמשו בפרוטוקול אינפוזיה קבוע ו-MRI בו/fdg-fמחמד להראות שינויים דינאמיים ספיגת גלוקוז בתגובה גירוי שחמט עם ברזולוציה הטמפורלית של 60 s. מחקרים שלאחר מכן השתמשו בשיטה זו כדי להציג משימה נעולה FDG-fמחמד (כלומר, זמן נעול גירוי חיצוני19) ו-fdg-fהקשורות למשימה (כלומר, לא זמן-נעול הגירוי החיצוני17, 18) ספיגת גלוקוז. באמצעות שיטות אלה, FDG-fהחלטות הזמני לחיות מחמד של 60 s הושגו, אשר הוא שיפור משמעותי מעל שיטות בולוס. הנתונים הראשוניים מראים ששיטת האינפוזיה יכולה לספק רזולוציות בזמן של 20-60 עד19.

למרות התוצאות המבטיחות משיטת האינפוזיה המתמדת, העקומות הרדיואקטיביות של המחקרים האלה מראים ששיטת האינפוזיה אינה מספיקה כדי להגיע למצב יציב בתוך פרק הזמן של 90 דקות סריקה19,21. בנוסף להליך האינפוזיה הקבוע, קרסון22 הציע גם הליך בולוס/אינפוזיה היברידי, שבו המטרה היא להגיע במהירות שיווי משקל בתחילת הסריקה, ולאחר מכן לקיים את רמות רדיואקטיביות פלזמה בשיווי משקל ל משך הסריקה. Rischka ואח '20 לאחרונה להחיל את הטכניקה הזאת באמצעות 20% בולוס פלוס 80% אינפוזיה. כצפוי, הפונקציה של קלט העורקים עלתה במהירות מעל רמות בסיסיות והיא הייתה מתמשכת בקצב גבוה יותר, בהשוואה לתוצאות באמצעות נוהל אינפוזיה בלבד19,21.

מאמר זה מתאר את פרוטוקולי הרכישה להשגת רזולוציה גבוהה FDG-fסריקות PET באמצעות אינפוזיה בלבד ו-בולוס/אינפוזיה מעקב. פרוטוקולים אלה פותחו לשימוש בסביבת MRI בו-PET בו עם זמן הרכישה של 90-95 דקות19. בפרוטוקול, דגימות דם נלקחים לכמת סרום פלזמה רדיואקטיבית עבור הקוונפיקציה העוקבים של תמונות PET. בעוד המוקד של הפרוטוקול הוא יישום של שיטות אינפוזיה לדימות מוחי פונקציונלי באמצעות מודגש-fMRI/fdg-fחיית מחמד, שיטות אלה ניתן להחיל על כל מחקר fdg-fלחיות מחמד ללא קשר אם MRI סימולטני, BOLD-f MRI, טומוגרפיה ממוחשבת (CT), או תמונות נוירולוגיות אחרות נרכשים. איור 1 מציג את תרשים הזרימה של ההליכים בפרוטוקול זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

פרוטוקול זה נבדק ואושר על ידי ועדת האתיקה לחקר האדם של אוניברסיטת מונש (אישור מספר CF16/1108-2016000590) בהתאם להצהרה הלאומית האוסטרלית על התנהלות אתית במחקר האנושי24. הליכים פותחו בהדרכת פיזיקאי רפואי מוסמך, טכנלוג לרפואה גרעינית ורדיוגרף קליני. על החוקרים להתייחס למומחים המקומיים שלהם ולהנחיות לניהול קרינה מייננת בבני אדם.

1. ציוד נדרש וסגל

  1. ראו את רשימת החומרים לחדר הסורק, למעבדת הרדיוכימיה ולחומרים כלליים. ספק מסחרי שימש. למעקב הרדיואלי
  2. בסביבה הזמנית של ה-MRI-PET, השתמש בארבעה אנשי צוות: רדיוגרף (RG) כדי להריץ את הסריקה, טכנלוג לרפואה גרעינית (NMT) כדי לפקח על הניהול של מעקב הרדיו ורכישת דגימות דם, עוזר מעבדה (לוס אנג'לס) כדי לסובב את הדם, ועוזר מחקר (RA) האחראי לפקח על התכנון הנסיוני והצגת הגירוי.

2. הכנה

  1. הכנה למינון מעקב על ידי NMT
    1. חשב את עוצמת העירוי שתנוהל במהלך הסריקה. בפרוטוקול זה, שיעור העירוי הוא 0.01 mL/s מעל 95 דקות. כך, ב 95 דקות סריקה, המשתתפים מקבלים 0.01 mL/s x 60 s x 95 min = 57 mL.
    2. לחשב את מינון מעקב כי יהיה מדולל לתוך הפתרון מלוחים מנוהל. בפרוטוקול זה, מנה מוחלטת של 260 MBq ניתנת למשתתף מעל 95 דקות. מינון זה נבחר כדי להגביל את החשיפה לקרינה כדי 4.9 mSv, כדי לשמור בתוך סיווג ' ברמה נמוכה הסיכון על פי הגנה הקרינה האוסטרלית הסוכנות לבטיחות גרעינית (ARPANSA) הנחיות לחשיפה של בני אדם כדי קרינה מייננת25. הדעיכה נכונה 260 MBq מנקודת העירוי (47.5 דקות) בחזרה ל-T0. באמצעות משוואה 1, לפתור עבור0
      figure-protocol-1
      כאשרt הוא רדיואקטיביות (mbq) באמצע זמן העירוי של האינפוזיה,0 הוא רדיואקטיביות הראשונית, ו λ הוא הדעיכה הרדיואקטיבית הקבוע הספציפי למעקב. עבור FDG, הערך של הוא λ ≈ 0.693/T1/2. T1/2 הוא מחצית החיים של 18F (110 דקות).
      הערה: בדוגמה זו,t = 260 mbq, λ = 0.693/110, ו-t =-47.5, אז A0 = 350.942 mbq.
    3. לחשב את המינון הנדרש רדיומעקב עבור השקית מלוחים 100 mL שישמשו לניהול המינון למשתתף. מכשיר הרנטגן הדרוש לשקית המלח מדולל בנפח כולל של 5 מ ל ומצויר במזרק של 5 מ ל. לכן, עבור שקית מלוחים 100 mL, גורם הדילול הוא נפח של תמיסת מלח (100 mL) בנוסף את נפח 5 מ ל של המזרק עם מעקב רדיו. הנפח הכולל של 105 mL מחולק בנפח האינפוזיה של 57 mL (כלומר, 105 mL/57 mL = 1.842). So, הרדיואקטיביות הכוללת בנפח של 5 מ ל נדרש בנוסף לתיק 100 mL הוא0 x מקדם דילול (כלומר, 350.942 mbq x 1.842 = 646.44 mbq). מוסיפים את הרדיו. לשקית המלח
      הערה: חשוב לציין כי הפעילות המחושבת של 646.44 MBq המתווסף לשקית המלח היא הפעילות הדרושה בתחילת האינפוזיה. באופן כללי, המינון עבור פרוטוקול זה מוכנים בין 15 דקות עד 1 h לפני המינהל. לכן, חשוב לקדם את הריקבון של הרדיואיזוטופ. . משוואה 1 ב2.1.2 יכול לשמש כדי להסביר את זה, איפה הזמן (t) הוא המספר הכולל של דקות מהכנת המינון כאשר הפעילות תנוהל, At = 646.44 mbq, על ידי פתרון עבור0.
    4. . הכן את מינון הקרקע משיכת 20 מ ל מהתיק לתוך מזרק ומכסה אותו. כיול את המזרק והתווית של 20 מ ל המזרק מכויל כבדיקת התייחסות כדי לוודא שרדיואקטיביות התפזרו באופן שווה בתוך השקית התמיסת מלח.
    5. . הכן את המינון באמצעות מזרק 50 mL, משיכה 60 mL מן השקית והכובע עם פקק של קומבי אדום. מזרק זה לא מכויל, כמו ריכוז של הרדיואקטיביות ידוע מרגע זה התווסף לשקית מלוחים (שלב 2.1.3). אחסן את שני הזרקים במעבדת הרדיוכימיה עד שתהיה מוכן לסריקה.
      הערה: ניתן לצייר נפח 60 mL במזרק 50 mL, כי מזרקים טרמו מסומנים 20% מעל הכרך המסומן (כלומר, מזרק 50 mL מסומן 60 mL).
    6. הכן את מינון האסמכתא. מילוי בקבוקון 500 mL עם כ 480 מ ל של מים מזוקקים. לצייר את 10 MBq של 18F-fdg לתוך מזרק, מתוקן לזמן התחלת הסריקה (באמצעות משוואה 1) ולהוסיף אותו הבקבוקון. למעלה הנפח עד 500 mL מארק עם מים מזוקקים יותר מערבבים ביסודיות. תוויות מוספית לפני ואחרי כיול עבור המזרק.
  2. הכנה לחדר סורק על ידי NMT
    1. לאחר הצבת המשתתף בסורק, יש מעט מאוד מקום לתמרן או להציל את הקו לדגימות אינפוזיה או דם אם החסימה מתרחשת. הכן את חדר הסורק כדי למזער את הסיכוי לחסימה בשורה.
    2. ודא שכל ציוד איסוף הדם נמצא בהישג יד מאתר הגבייה. מניחים את התחתונים בקצה הצינורית ועל כל משטח שיחזיק מיכלי דם. מניחים פחים לפסולת רגילה ופסולת ביולוגית בהישג יד של אתר איסוף הדם.
  3. הכנת משאבת אינפוזיה על ידי NMT
    1. הגדר את משאבת העירוי בחדר הסורק בצד שיתחבר למשתתף. לבנות לבנים להוביל סביב הבסיס של המשאבה ולמקם את המגן העופרת מול המשאבה. חבר את הצינורות עבור משאבת האינפוזיה המספקת את האינפוזיה למשתתף ולוודא שקצב העירוי הנכון הוזן. עבור פרוטוקול זה, התעריף הוא 0.01 mL/s.
    2. הראשי אבובים לפני שהוא מחובר צינורית של המשתתף. חברו את המינון של 20 מ ל למשאבת העירוי. בקצה הצינורות שיהיו מחוברים למשתתף, חברו ברז תלת-כיוון ומזרק של 20 מ ל ריק. ודא כי הברז ממוקם כדי לאפשר הפתרון 18F-fdg לזרום מן המינון לקרקע דרך אבובים ולאסוף רק לתוך המזרק הריק.
    3. יש לקבוע מראש את משאבת העירוי לנפח העיקרי של 15 מ ל. בחר את הלחצן הראשי על המשאבה ועקוב אחר ההנחיות כדי לסדר את הקו.
    4. חברו את מזרק 50 mL למשאבת האינפוזיה במקום המינון לקרקע. המינון 15 מ"ל על הברז שלושה כיוון יכול להישאר שם עד המשתתף הוא מוכן להיות מחובר המשאבה.
  4. הכנה למשתתף באמצעות ה-NMT, RA ו-RG.
    1. יעצו למשתתפים במהירות של 6 שעות, וכדי לצרוך רק מים (בערך שתי כוסות), לפני הסריקה.
    2. יש לנהל את נוהלי ההסכמה ולרכוש אמצעים נוספים (למשל, סקרים דמוגרפיים, סוללות קוגניטיביות וכו '). יש את NMT ו RG לנהל את מסכי הבטיחות, סקירה NMT בטיחות סריקת PET (g., הדרה עבור הריון, סוכרת, כימותרפיה או הקרנות במהלך 8 השבועות הקודמים, ואלרגיות ידוע), ואת הבטיחות RG משתתף בטיחות סריקת MRI (g., הדרה של שתלים הריון, רפואי או לא רפואי, שתלים דנטליים שאינם נשלפים, קלאוסטרופוביה).
    3. . לסדר את המשתתף
      1. השתמש בשתי הצינורית: אחד עבור מינון המינון והשני עבור דגימות דם. הצינורית המתאימה ביותר משתנה על פני המשתתפים, אך הווריד המתאים ביותר צריך להיות שמור עבור איסוף הדם. צינורית בגודל 22 גרם היא המידה המינימלית המועדפת. לאסוף בדיקת דם בסיסית 10 mL בעוד cannulating. לנתק את כל הריקונים מלוחים תחת לחץ כדי לשמור על התמדה של הקו.
      2. בדוק את רמת הסוכר בדם של המשתתף ואמצעי דם בסיסיים אחרים (לדוגמה, המוגלובין) ממדגם הבסיס.
  5. מיצוב משתתף בסורק על-ידי RG ו-NMT
    1. יש למקם את מיקום ה-RG של המשתתף בסורק. עבור סריקות ארוכות, זה הכרחי כדי להבטיח נוחות על מנת להפחית את הסיכון של המשתתף להפיל את הפריט התנועה בשל אי נוחות. על המשתתף להיות מכוסה בשמיכה חד פעמית כדי לשמור על טמפרטורת גוף נוחה.
    2. יש את NMT לשטוף את הצינורית כדי להבטיח שהוא פטנט עם התנגדות מינימלית לפני חיבור קו העירוי. לאחר ההתחברות, אבובים יכול להיות מודבק בקלות ליד פרק היד. הנחה את המשתתף לשמור על זרועו מזדתקת. השתמש בתומך כגון קצף או כריות לנוחות. יש גם את NMT לבדוק את הצינורית כי ישמש דגימות פלזמה כדי להבטיח כי הוא מסוגל למשוך דם עם התנגדות מינימלית. ייתכן שיהיה צורך לחבר צינור הארכה מוכן עם תמיסת מלח רגיל כדי להפוך את הצינורית נגיש יותר בעוד המשתתף הוא בסורק. אם הדבר נדרש, יש לבדוק אותו לפני הזמן הדרוש.
    3. לאחר הנושא הוא בסורק נשא, יש לבדוק NMT כי יש להם גישה מתאימה שתי הצינורית.
    4. הודע ל-NMT להודיע ל-RG ו-RA אם יש בעיות בצינורית איסוף הדם, בצינורית האינפוזיה, או במשאבת האינפוזיה (למשל, חסימה, סוללה, היווצרות מצברים) בכל עת במהלך הסריקה.

3. סרוק את המשתתף

  1. הפעלת הסריקה באמצעות הפונקציה NMT, RG ו-RA
    1. בתחילת הסריקה, למקם את NMT בחדר הסורק כדי לפקח על ציוד אינפוזיה. ודא NMT הוא לובש הגנה לשמיעה באמצעות מגן המכשול כדי למזער את החשיפה לקרינה ממנה במידת האפשר.
    2. כאשר ה-RG מבצע את סריקת האיתור כדי להבטיח שהמשתתפים במצב הנכון, בדוק את הפרטים עבור רכישת PET (לדוגמה, משך הסריקה, איסוף נתונים במצב רשימה, איזוטופ נכון).
    3. תכנן את הפרוטוקול כך שרכישת PET תתחיל ברצף ה-MRI הראשון. ה-RG מכין ומפעיל את רצף ה-MRI. זמן ההתחלה של הרכישה 95 דקות PET הוא זמן-נעול לתחילת רצף ה-MRI. אם נדרש, NMT צריך לספק את ההזנה בזמן רכישת PET (איור 1).
    4. . הפעל את משאבת העירוי ה-RG צריך לסמן את NMT (למשל, באמצעות סימן האגודל) כדי להתחיל את המשאבה 30 לאחר תחילת הרכישה PET. פרוטוקול זה מפעיל את משאבת העירוי של 30 לאחר זמן התחלת הסריקה כדי לספק מאגר בטיחות במקרה של כשל סריקה. זה גם מבטיח את התמונה הראשונה שצולמה במהלך הסריקה PET מפתחות את המוח לפני הממשל רדיומעקב עבור פעילות זמן מלאה עקומת נתונים. יש את NMT להתבונן המשאבה כדי להבטיח שהוא התחיל להחדיר את 18F-fdg וכי אין חסימה מיידית של הקו.
    5. האם RA ליזום כל גירוי חיצוני בזמן המוסכם (כלומר, בתחילת בלוק פונקציונלי/נסיוני) ולחשב את הזמנים עבור דגימות דם. טופס הקלטה לדוגמה מוצג בתוספת 1. האם RA לחשב את הזמן החזוי של כל דגימת דם ולספק עותקים למסייע NMT ומעבדה (לוס אנג'לס). האם RA לוודא NMT לוקח את דגימות הדם בערך בזמן הנכון, ומפקחת ציוד (למשל, משאבת אינפוזיה, גירוי) עבור כל סימן של שגיאות.
  2. קחו דגימות דם במרווחי זמן קבועים
    1. יש NMT ו RA לקחת מדגם אחד כל 10 דקות. יש בדרך כלל 10 דגימות בסך הכל, לא כולל את דגימת הבסיס.
    2. אם השגת סריקת MRI בו עם סריקות PET, יש NMT ללבוש הגנה שמיעה בעת הכניסה לחדר הסורק.
    3. יש את NMT ללבוש כפפות לנקות את הקצה של צינורית נקייה. בעוד שאתר הצינורית מתייבש, יש לפתוח 5 מ ל ומזרק של 10 מ ל, ומרוקן, ומחית מלוחים של 10 מ ל.
    4. באמצעות מזרק 5 מ ל, משיכת 4-5 mL של דם טרי ולהשליך את המזרק בפסולת הביולוגית.
    5. באמצעות מזרק 10 מ ל, לסגת עד 10 מ ל של דם. אמצעי האחסון עשוי להיות מוגבל על-ידי הקלות שניתן להנמכת בדם. חשוב למזער כל התנגדות לאחר מכן גרימת נזק לתאי הדם האדומים שיכולים המוליז. בנקודת האיסוף, יש לסמן את האות NMT ל-RA, מי יסמן את הפעם בטופס הרשומה (תוספת 1) כשעת הדגימה ' בפועל '.
    6. חבר את מזרק 10 מ ל לתוך האבק ולאחר מכן הפקיד את הדם בצינור הדם הרלוונטי.
    7. רוקן במהירות את הצינורית עם 10 מ ל של תמיסת מלח, מנותקת תחת לחץ, כדי למזער כל סיכוי של קרישת קו.
    8. קח מיד את דגימת הדם למעבדת. הרדיוכימיה לניתוח
  3. . לסובב את הדם על-ידי הלוס אנג'לס
    1. קח את ה-LA לקבל את כל הציוד מוכן (שולחן 1) וללבוש כפפות. שלושה ארונות מדפים יצאו לדגימות: אחד עבור צינורות דם, אחד ללטף את המדגם, ואחד עבור דגימות ממולאות בצנרת (לפני ואחרי ספירה).
      1. יש את ה-LA לשנות בקביעות כפפות במהלך ההליך, במיוחד כאשר הטיפול בצינור ספירה. אם ל-LA יש זיהום פלזמה רדיואקטיבי על הכפפות שלהם, ניתן להעבירו לצינור הספירה ולהגדיל בצורה מתונה את מספר הספירות המוקלטות של המדגם.
    2. דגימת הדם יכולה להיות ממוקמת בצנטריפוגה כזמינות של היתרי איוש משאבים, כי הזמן שדגימת הדם נלקחה, והזמן שנספר צוין. סובב את כל הדגימות בכוח צנטריפוגלי. באופן יחסי של 724 x g הגדרות הצנטריפוגה המשמשות עבור פרוטוקול זה הן 2,000 rpm עבור 5 דקות עם ההאצה ועקומות האטה שנקבעו לשמונה.
    3. ברגע שהדגימה מטועלת, הניחו את הצינור במתלה הליטוף. הסר את כיסוי הצינור כדי לא להפריע להפרדת המדגם. מניחים צינור ספירת מתויג במתלה. התווית צריכה להתאים. לצינור הדם
    4. ודא שהקצה מהודק היטב לפיפטה. . תכין טישו לטפטוף פיפטה בהתמדה 1,000 μL של פלזמה מצינור הדם, העבר לצינור הספירה והחלף את העפעפיים בצינור הספירה ובצינור הדם.
    5. מניחים את צינור הספירה לתוך המונה היטב ולספור עבור 4 דקות. הקלט את שעת ההתחלה של הספירה בגיליון הרשומות (' זמן מדידה ') עבור כל דוגמה. פעולה זו נדרשת עבור תיקונים עוקבים לזמן ההתחלה של רכישת PET. בזמן מאוחר יותר נקודות במהלך הסריקה, יש לה לבצע כל צעד ברצף מהיר כדי למנוע הצבר של דגימות.
    6. היפטר מפסולת מוצר דם. בשקיות בידוד

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

שיטות ספציפיות ללמידה
כאן, מדווחים פרטים ספציפיים ללמידה עבור תוצאות הנציג. פרטים אלה אינם קריטיים להליך וישתנו לאורך הלימודים.

משתתפים ותכנון משימות
משתתפים (n = 3, שולחן 2) עברו במקביל מודגש-f-MRI/fdg-fלימוד מחמד. כפי שכתב היד מתמקד בפרוטוקול רכישת PET, תוצאות ה-MRI אינן מדווחות. המשתתפים קיבלו 260 MBq של 18F-fdg במהלך הסריקה 95 דקות. משתתף 1...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

FDG-PET היא טכנולוגיה רבת עוצמה דימות המודד ספיגת גלוקוז, מדד של מטבוליזם המוח של גלוקוז. עד היום, רוב מחקרי מדעי המוח באמצעות FDG-PET להשתמש בגישה מסורתית לניהול ההזנה, עם רזולוציית תמונה סטטית המייצגת את האינטגרל של כל פעילות מטבולית במהלך הסריקה2. כתב יד זה מתאר שני פרוטוקולים חלופיים לניהול רדיומעקב: האינפוזיה בלבד (למשל, ויליין ואח ', ג'דאר ואח '19,21) ובולוס היברידי/אינפוזיה (למשל, rischka et al.20) פרוטוקולים...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים לא מצהירים. על ניגוד אינטרסים מקור המימון לא היה מעורב בתכנון המחקר, באיסוף, בניתוח ובפרשנות של נתונים.

תודות

ג ' ולדר נתמך על ידי המועצה האוסטרלי למחקר (ARC) חוקר הקריירה המוקדמת של דיסקברי (DECRA DE150100406). ג'דאר, וורד ו איגן נתמכים על ידי מרכז ה-ARC של מצוינות לתפקוד המוח האינטגרטיבי (CE114100007). צ'ן ולי נתמכות במימון קרן התרבות רגנור.

, ג'דאר, וורד, קארי. ומקנטייר עיצב את הפרוטוקול , קארי, מקנטייר, סאסו. ופאלון אספו את המידע , ג'דר, וורד, פרקס. וסאסו ניתחו את המידע ג'דאר, וורד, קארי ומקנטייר. כתבו את הטיוטה הראשונה של כתב היד כל המחברים סקרו ואישר את הגירסה הסופית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<חזק>ציוד לאיסוף דם
--12-15 שואבי אבקבקטון דיקינסון, ניו ג'רזי ארה"364880הישארו באריזה סטרילית עד שיידרשו להכניס דם לשפופרת
---12-15 צינורות איסוף דם 10 מ"ל LHבקטון דיקינסון367526מסומן במספר הדגימה (למשל, S1, S2…) ולאחר מכן מסומן בזמן הדגימה (למשל, זמן 0 + x דקה [T0+x])
--2-15 מזרק Terumo 10 מ"לTerumo Terumo Tokyo, JapanSS+10Lאלה נערכים ביום המחקר ומכוסים באמפולה שהכילה את מי המלח
- 0.9% מי מלח מצוירים מראש שוטפיםפייזר, ניו יורק, ארה"ב61039117
--12-15 מזרקי טרומו 5 מ"לטרומו טוקיו, יפןSS+05Sהישארו באריזה סטרילית עד שמוכנים למשוך דגימת דם
<חזק>בטיחות ובטיחות פסולת ציודהחפצים מסודרים על כיסא פלסטיק בתוך חדר הסורק באותו צד של הזרוע שממנה יילקחו דגימות הדם. יש להשתמש בשקיות פסולת ביולוגיות ולא ביולוגיות. כפפות ושקיות אשפה יהיו נגישות בקלות בעת הכנת הרדיואקטיביות באזור החלוקה ובעת פיפטינג דגימות הפלזמה. יש להשתמש בשקיות פסולת ביולוגיות ולא ביולוגיות. כל הפסולת הנוצרת נבדקת עם דלפק גייגר כדי לוודא שפסולת מזוהמת רדיואקטיבית מאוחסנת עד שיהיה בטוח להיפטר ממנה בהתאם להנחיות הסוכנות האוסטרלית להגנה מפני קרינה ובטיחות גרעינית (APRANSA) להגנה מפני קרינה סדרה מס' 6 (2017).
- כפפותWestlab, VIC, אוסטרליה663-219
- שקיות פסולתAustar Packaging, VIC, אוסטרליהYIW6090
- רפידות תחתונות לצ'לו ' בלויז' רפידות תחתונות 5 שכבותHalyard Health, NSW, אוסטרליה2765A
--Blue Sharpie penSharpie, TN, ארה"בS30063
><מזרקים במינון חזקנשאר באריזה סטרילית עד שמוכן לשימוש. לכל המזרקים המשמשים במתקן זה יש קיבולת נפח נוספת של 20% מעל הנפח המוצהר על האריזה. זה חשוב עבור מזרק 50 מ"ל שבו נעשה שימוש בקיבולת הכוללת של 60 מ"ל
- 5 מ"לטרומו טוקיו, יפןSS+05S
- 20 מ"לטרומו טוקיו, יפןSS+20L
--50 מ"לטרומו טוקיו, יפןSS*50LE-
-1 מחט טרומו 18 מ"טרומו טוקיו, יפןNN+1838Rיש להישאר באריזה סטרילית עד שיהיה מוכן להזריק [18F]FDG לתוך שקית המלח
- שקית מלח 100 מ"ל 0.9%Baxter Pharmaceutical, IL, USAAHB1307יש להישאר באריזה סטרילית עד שיהיה מוכן להזרקה [18F]FDG
Radiochemistry Lab Supplies
--Heraeus Megafuge 16 צנטריפוגה; Rotor Bioshield 720ThermoScientific MA, ארה"ב75004230כוח צנטריפוגלי יחסי = 724 ההגדרות שלנו הן 2000 סל"ד למשך 5 דקות. עקומות האצה והאטה מוגדרות ל-8
- מונה באר יחידLaboratory Technologies, Inc. IL, ארה"ב630-365-1000בקרת איכות יומית מלאה (כולל ספירת רקע) ופרוטוקול מוגדר ל-18F ו-4 דקות. כיול צולב מתבצע בין דלפק הבאר, כיול המינון והסורק על בסיס דו-חודשי.
--PipetteISG Xacto, וינה, אוסטריהLI10434אנחנו משתמשים ב-100-1000 μ L מוגדר ל-1000μL. הוא מכויל מדי שנה.
--12-15 צינורות ספירת פלזמהטכנו PLAS; SA אוסטרליהP10316SUמסומן באותו אופן כמו צינורות הדם LH
- 12-15 קצות פיפטהExpell Capp, דנמרק5130140-1
--3 מדפי מבחנהגנרייםנבדקו עם מונה גייגר כדי לוודא שאין עליהם זיהום קרינה
- בקבוק נפח 500 מ"ל ומים מזוקקיםגנריזקוק לכ-500 מ"ל מים מזוקקים כדי להכין את הייחוס לספירת גמא
- שעונים מסונכרנים בחדר הסורקים, בקונסולה ובמעבדת הרדיוכימיהגנריותמתבצעות באופן שגרתי במתקן על בסיס שבועי
- מוניטור המוגלוביןEKF אבחון קרדיף, בריטניה Haemo Control.3000-0810-6801בקרת איכות מומלצת על ידי היצרן שבוצעה לפני בדיקה על המשתתף' דגימת דם.
--גלוקומטרRoche Accu-Chek6870252001Accu-Chek Performa משמש למדידת רמות הסוכר בדם של המשתתפים במילימול/ליטר. בקרת האיכות מתבצעת מדי יום באמצעות בדיקת בקרת תמיסה בריכוז גבוה ונמוך.
<ציוד חזק>שינוןבדוק את תאריכי התפוגה והכשיר את NMT להתכונן באופן אספטי לקנולציה.
--חוסם עורקים רגולטוריCBC Classic Kimetec GmBHK5020
--20, 22 ו-24 קנולות מדבראון, Melsungen גרמניה4251644-03; 4251628-03; 4251601-03
--תחבושות TEGADERM3M, MN USA1624W
- ספוגיות אלכוהול וכלורהקסידיןReynard Health Supplies, NSW אוסטרליהRHS408
--0.9% אמפולות מי מלח 10 מ"ל; עבור שוטףפייזר, ניו יורק, ארה"ב61039117
--מזרקי 10 מ"לטרומו טוקיו, יפןSS+10L
---ברז תלת כיווניBecton Dickinson Connecta394600
--IV bungSafsite Braun PA ארה"ב415068
-צינור הארכה אופציונלי, סט הארכת מיקרו-קדחM Devices, דנמרקIV054000
<חזק>סורק ציוד חדר-
-סימנס ביוגרף 3T mMRסימנס, ארלנגן, גרמניה
- מגן מחסום עופרת ניידGammasonicsבהתאמה אישית. ממוקם בקו גאוס 2000 עם גלגלים נעולים כדי לספק מיגון נוסף של הרדיואקטיביות המחוברת למשאבת העירוי.
משאבת עירוי BodyGuard 323 MR משאבת עירוי מותניתקיסריה אלקטרוניקה רפואית300-040XPתואמת MR. דגם זה מאושר לשימוש בסורקי 1.5 ו-3T ב-2000 גאוס עם גלגלים נעולים.
--צינורות משאבת אינפוזיהקיסריה אלקטרוניקה רפואית100-163X2YNKSצינורות הם סט מתן עם שסתום אנטי-סיפון ומנעול לואר זכר (REF 100-163X2YNKS).
--לבני עופרתנבנהנבדק עבור כוח תרגום פרומגנטי
<חזק>ציוד אחר
--מגני מזרקBiodex, ניו יורק ארה"בנבנה בהתאמה אישיתיש מגן מזרק טונגסטן 5 מ"ל בטוח ל-MR, כמו גם מגן עופרת של 50 מ"ל שנבדק למשיכה פרומגנטית לפני השימוש בסורק MR-PET. הוא משמש להובלת המינון הרדיואקטיבי ממעבדת הרדיוכימיה לסורק כדי למזער את החשיפה לקרינה ל-NMT.
--מונה גייגר דגם 26-1 Integrated FriskerLudlum Measurements, Inc. TX USA48-4007זה מכויל מדי שנה ומשמש לניטור זיהום ופסולת פוטנציאליים. זה לא נלקח לסורק MR-PET.
ב את כל ל בדיקות סנכרון - מגן מחסום עופרת מותנה MR בהתאמה אישית

מקורות

  1. Heurling, K., et al. Quantitative positron emission tomography in brain research. Brain Research. 1670, 220-234 (2017).
  2. Chen, Z., et al. From simultaneous to synergistic MR-PET brain imaging: A review of hybrid MR-PET imaging methodologies. Human Brain Mapping. 39 (12), 5126-5144 (2018).
  3. Jones, T., Rabiner, E. A. The development, past achievements, and future directions of brain PET. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 32 (7), 1426-1454 (2012).
  4. Kety, S. S. Metabolism of the nervous system. , Elsevier. 221-237 (1957).
  5. Sokoloff, L. The metabolism of the central nervous system in vivo. Handbook of Physiology, section I, neurophysiology. 3, 1843-1864 (1960).
  6. Harris, J. J., Jolivet, R., Attwell, D. Synaptic energy use and supply. Neuron. 75 (5), 762-777 (2012).
  7. Mosconi, L., et al. FDG-PET changes in brain glucose metabolism from normal cognition to pathologically verified Alzheimer's disease. European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 36 (5), 811-822 (2009).
  8. Pagano, G., Niccolini, F., Politis, M. Current status of PET imaging in Huntington's disease. European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 43 (6), 1171-1182 (2016).
  9. Petit-Taboue, M., Landeau, B., Desson, J., Desgranges, B., Baron, J. Effects of healthy aging on the regional cerebral metabolic rate of glucose assessed with statistical parametric mapping. Neuroimage. 7 (3), 176-184 (1998).
  10. Chugani, H. T., Phelps, M. E., Mazziotta, J. C. Positron emission tomography study of human brain functional development. Annals of Neurology. 22 (4), 487-497 (1987).
  11. Phelps, M. E., Mazziotta, J. C. Positron emission tomography: human brain function and biochemistry. Science. 228 (4701), 799-809 (1985).
  12. Zimmer, E. R., et al. [18 F] FDG PET signal is driven by astroglial glutamate transport. Nature Neuroscience. 20 (3), 393(2017).
  13. Roberts, R. P., Hach, S., Tippett, L. J., Addis, D. R. The Simpson's paradox and fMRI: Similarities and differences between functional connectivity measures derived from within-subject and across-subject correlations. Neuroimage. 135, 1-15 (2016).
  14. Horwitz, B. The elusive concept of brain connectivity. Neuroimage. 19 (2), 466-470 (2003).
  15. Moses, W. W. Fundamental limits of spatial resolution in PET. Nuclear Instruments and Methods in Physics Research Section A: Accelerators, Spectrometers, Detectors and Associated Equipment. 648, S236-S240 (2011).
  16. Tomasi, D. G., et al. Dynamic brain glucose metabolism identifies anti-correlated cortical-cerebellar networks at rest. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 37 (12), 3659-3670 (2017).
  17. Hahn, A., et al. Quantification of task specific glucose metabolism with constant infusion of 18F-FDG. Journal of Nuclear Medicine. 57 (12), 1933-1940 (2016).
  18. Hahn, A., et al. Task-relevant brain networks identified with simultaneous PET/MR imaging of metabolism and connectivity. Brain Structure and Function. 223 (3), 1369-1378 (2018).
  19. Jamadar, S. D., et al. Simultaneous task-based BOLD-fMRI and [18-F] FDG functional PET for measurement of neuronal metabolism in the human visual cortex. Neuroimage. 189, 258-266 (2019).
  20. Rischka, L., et al. Reduced task durations in functional PET imaging with [18F] FDG approaching that of functional MRI. Neuroimage. 181, 323-330 (2018).
  21. Villien, M., et al. Dynamic functional imaging of brain glucose utilization using fPET-FDG. Neuroimage. 100, 192-199 (2014).
  22. Carson, R. E. PET physiological measurements using constant infusion. Nuclear Medicine and Biology. 27 (7), 657-660 (2000).
  23. Carson, R. E., et al. Comparison of bolus and infusion methods for receptor quantitation: application to [18F] cyclofoxy and positron emission tomography. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 13 (1), 24-42 (1993).
  24. National Health and Medical Research Council. National statement on ethical conduct in human research. , (2007).
  25. Australian Radiation Protection and Nuclear Safety Agency. Code of practice for the exposure of humans to ionizing radiation for research purposes. , (2005).
  26. Jenkinson, M., Beckmann, C. F., Behrens, T. E., Woolrich, M. W., Smith, S. M. FSL. Neuroimage. 62 (2), 782-790 (2012).
  27. Tustison, N. J., et al. N4ITK: improved N3 bias correction. IEEE Transactions on Medical Imaging. 29 (6), 1310(2010).
  28. Avants, B., Klein, A., Tustison, N., Woo, J., Gee, J. C. 16th Annual Meeting for the Organization of Human Brain Mapping. , (2010).
  29. Avants, B. B., Epstein, C. L., Grossman, M., Gee, J. C. Symmetric diffeomorphic image registration with cross-correlation: evaluating automated labeling of elderly and neurodegenerative brain. Medical Image Analysis. 12 (1), 26-41 (2008).
  30. Klein, A., et al. Mindboggling morphometry of human brains. PLoS Computational Biology. 13 (2), e1005350(2017).
  31. Tustison, N. J., et al. Large-scale evaluation of ANTs and FreeSurfer cortical thickness measurements. Neuroimage. 99, 166-179 (2014).
  32. Avants, B. B., et al. A reproducible evaluation of ANTs similarity metric performance in brain image registration. Neuroimage. 54 (3), 2033-2044 (2011).
  33. Burgos, N., et al. Attenuation correction synthesis for hybrid PET-MR scanners: application to brain studies. IEEE Transactions on Medical Imaging. 33 (12), 2332-2341 (2014).
  34. Panin, V. Y., Kehren, F., Michel, C., Casey, M. Fully 3-D PET reconstruction with system matrix derived from point source measurements. IEEE Transactions on Medical Imaging. 25 (7), 907-921 (2006).
  35. Jenkinson, M., Bannister, P., Brady, M., Smith, S. Improved optimization for the robust and accurate linear registration and motion correction of brain images. Neuroimage. 17 (2), 825-841 (2002).
  36. Bludau, S., et al. Cytoarchitecture, probability maps and functions of the human frontal pole. Neuroimage. 93, 260-275 (2014).
  37. Amunts, K., Malikovic, A., Mohlberg, H., Schormann, T., Zilles, K. Brodmann's areas 17 and 18 brought into stereotaxic space-where and how variable? Neuroimage. 11 (1), 66-84 (2000).
  38. Malikovic, A., et al. Cytoarchitectonic analysis of the human extrastriate cortex in the region of V5/MT+: a probabilistic, stereotaxic map of area hOc5. Cerebral Cortex. 17 (3), 562-574 (2006).
  39. Wilms, M., et al. Human V5/MT+: comparison of functional and cytoarchitectonic data. Anatomy and Embryology. 210 (5-6), 485-495 (2005).
  40. Eickhoff, S. B., Heim, S., Zilles, K., Amunts, K. Testing anatomically specified hypotheses in functional imaging using cytoarchitectonic maps. Neuroimage. 32 (2), 570-582 (2006).
  41. Eickhoff, S. B., et al. Assignment of functional activations to probabilistic cytoarchitectonic areas revisited. Neuroimage. 36 (3), 511-521 (2007).
  42. Eickhoff, S. B., et al. A new SPM toolbox for combining probabilistic cytoarchitectonic maps and functional imaging data. Neuroimage. 25 (4), 1325-1335 (2005).
  43. Everett, B. A., et al. Safety of radial arterial catheterization in PET research subjects. Journal of Nuclear Medicine. 50 (10), 1742-1742 (2009).
  44. Takagi, S., et al. Quantitative PET cerebral glucose metabolism estimates using a single non-arterialized venous-blood sample. Annals of Nuclear Medicine. 18 (4), 297-302 (2004).
  45. Zanotti-Fregonara, P., Chen, K., Liow, J. S., Fujita, M., Innis, R. B. Image-derived input function for brain PET studies: many challenges and few opportunities. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 31 (10), 1986-1998 (2011).
  46. O'Loughlin, S., Currie, G. M., Trifonovic, M., Kiat, H. Ambient temperature and cardiac accumulation of 18F-FDG. Journal of Nuclear Medicine Technology. 42 (3), 188-193 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

עירוי רציףשיטת בולוסדגימת דםPET-MRI עם נעילה זמניתגירוי חזותימפות קורטיקליותתגובת גלוקוז
המינהל לרדיומעקב אחר פליטת פוזיטרון ברזולוציה גבוהה הטומוגרפיה של המוח האנושי: יישום ל-FDG-Fdg
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.