הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

דגירה פחד באמצעות פרוטוקול מיזוג פחד מורחב לחולדות

8.1K צפיות

DOI:

10.3791/60537

22 באוגוסט 2020

במאמר זה

סיכום

אנו מתארים פרוטוקול מורחב של מיזוג פחד המייצר אי-ניסיון יתר ופחד מחשירה בחולדות. פרוטוקול זה כרוך באימון יחיד עם 25 זיווגים של הלם טון (כלומר, אימון יתר) והשוואה של תגובות הקפאה מותנות במהלך בדיקות הקשר וסימן 48 שעות (לטווח קצר) ו-6 שבועות (לטווח ארוך) לאחר האימון.

תקציר

זיכרון רגשי נחקר בעיקר עם פרדיגמיות של מיזוג פחד. התניה פחד היא סוג של למידה שדרכה אנשים לומדים את היחסים בין אירועים aversive וגירויים ניטרליים אחרת. ההליכים הנפוצים ביותר לחקר זיכרונות רגשיים כרוכים בהתניה של פחד בחולדות. במשימות אלה, הגירוי ללא תנאי (ארה"ב) הוא הלם רגל שהוצג פעם או מספר פעמים על-פני מפגשים בודדים או מספר מפגשים, והתגובה המותנה (CR) מקפיאה. בגרסה של הליכים אלה, הנקראת "מיזוג פחד cued", טון (גירוי מותנה, CS) מזווג עם רעידות רגל (ארה"ב) במהלך שלב האימון. במהלך הבדיקה הראשונה, בעלי חיים נחשפים לאותו הקשר שבו התקיימה ההכשרה, ותגובות הקפאה נבדקות בהיעדר רעידות רגליים וגוונים (כלומר, מבחן הקשר). במהלך הבדיקה השנייה נמדדת ההקפאה כאשר ההקשר משתנה (לדוגמה, על ידי מניפולציה של הריח והקירות של התא הניסיוני) והטון מוצג בהיעדר רעידות רגליים (כלומר, מבחן רמז). רוב הליכי מיזוג הפחד cued כרוכים כמה זיווגים הלם טון (למשל, 1-3 ניסויים בפגישה אחת). יש עניין הולך וגדל בגרסאות פחות נפוצות הכוללות מספר רב של זיווגים (כלומר, עודף ניסיון) הקשורים לאפקט ארוך טווח הנקרא דגירה של פחד (כלומר, תגובות הפחד גדלות עם הזמן ללא חשיפה נוספת לאירועים או גירויים מותנים). משימות מורחבות של מיזוג פחד היו המפתח להבנת ההיבטים ההתנהגותיים והנוירוביולוגיים של הדגירה של הפחד, כולל הקשר שלה עם תופעות פסיכולוגיות אחרות (למשל, הפרעת דחק פוסט-טראומטית). כאן, אנו מתארים פרוטוקול מורחב של מיזוג פחד המייצר אי-ניסיון יתר ופחד דגירה בחולדות. פרוטוקול זה כרוך באימון יחיד עם 25 זיווגים של הלם טון (כלומר, אימון יתר) והשוואה של תגובות הקפאה מותנות במהלך בדיקות הקשר וסימן 48 שעות (לטווח קצר) ו-6 שבועות (לטווח ארוך) לאחר האימון.

מבוא

זיכרון הוא תהליך פסיכולוגי המקיף שלבים שונים: רכישת מידע, איחוד (מאפשר יציבות של מידע שנרכש) ואחזור (ראיות לתהליך האיחוד)1. במהלך שלב האיחוד, מתרחשים הקמה של חיבורים סינפטיים חדשים ושינוי של חיבורים קיימים מראש. הדבר מצביע על הצורך לתקופה של זמן שבמהלכה אירועים מולקולריים ופיזיולוגיים האחראים לשינויים אלהמתרחשים 1,2. שינויים פיזיולוגיים או מולקולריים אלה משתנים בין אם האירועים שאוחזרו טעונים רגשית או לא (כלומר, זיכרון רגשי). לדוגמה, מחקרים הראו כי גרעין הים הניצי ותסביך האמיגדלה הבסקית רלוונטיים במיוחד לזיכרון הרגשי3,,4,,

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הפרוטוקול הבא אושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימוש של אוניברסיטת Fundación Konrad Lorenz (IACUC-KL). ההכרזה האוניברסלית בדבר זכויות בעלי חיים שהונפקה על ידי הליגה הבינלאומית לזכויות בעלי חיים בז'נבה, שווייץ (1989) ועקרונות אתיים של ניסויים בבעלי חיים שהונפקו על ידי ICLAS היו מכובדים.

1. הכנת נושא

  1. בחר חולדות Wistar בוגר זכר (n = 12). להאוסן אותם בקבוצות של ארבעה לכלוב במשך שלושה ימים של התאקלמות, לפני תחילת פרוטוקול האימונים והבדיקה. לספק לחולדות גישה חופשית למים לאורך כל הניסוי. שלוט בטמפרטורת החדר בין 20°C ל-25°C, תחת מחזור בהיר של 12 שעה (אורות דולקים בשעה 07:00).
    הערה: זנים חולדה הראו ביצועים דיפרנציאליים במהל....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

וריאציות באחוז זמן ההקפאה בשלבים שונים של האימון נותחו עבור כל הנושאים (n = 12) באמצעות בדיקת t תלויה (טבלה 1). בעלי חיים היו פעילים וחקרו את התא הניסיוני במהלך שלוש הדקות הראשונות של האימון (היום הראשון של הפרוטוקול), זמן שבמהלכו לא נמסרו גוונים או זעזועים (כלומר, קו הבסיס-BL). כפיצג באות 2A, אחוז זמן ההקפאה במהלך 25 הזיווגים הבאים של הלם טון (M = 48.88; SE = 4.37) היה גבוה משמעותית מאשר במהלך BL (M = 14.65; <.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פרוטוקול מיזוג הפחד המורחב הנוכחי הוא גישה יעילה ותקפה להערכת זיכרון רגשי בתקופות קצרות (48 שעות) ותקופות ארוכות טווח (6 שבועות). לפיכך, הפרוטוקול מאפשר ללמוד עודף על תופעות דגירה וחשש בחולדות. בין היתרונות השונים של פרוטוקול זה הם להלן. הוא מציע שני סוגים של בדיקות זיכרון, כלה הקשר וסימן, המאפשרים לזהות את ההשפעה הה דיפרנציאלית של שני עיכובים (48 שעות ו- 6 שבועות) על פני מניפולציות הקשר וסימן. שנית, המשימה כרוכה אימון יחיד 28 דקות, אשר בתורו מייצר השפעות ארוכות טווח המשתרעות על ידי מספר שבועות. יתרון זה הוא יוצא דופן, ב.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

לסופרים אין מה לחשוף.

תודות

תמיכה כספית במחקר זה סופקה על ידי Fundación אוניברסיטת קונרד לורנץ - מענק מספר 9IN15151. המחברים רוצים להודות למחלקת התקשורת באוניברסיטת קונרד לורנץ על עזרתם בהקלטה ועריכה של הסרטון, במיוחד נטליה ריברה ואנדרס סראנו (מפיקים). כמו כן, ניקול פלר-סדובסקי ולוסיה מדינה על הערותיהם על כתב היד, וג'ואנה בררו, דיקן באוניברסיטת קורפורציה איבריאמריקנה, לשיתוף פעולה מוסדי. למחברים אין ניגודי עניינים.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
חומצה אצטית (חומצה אתנואית)https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/acetic_acid
חבילת זרם גירוי מרתיעMED Associates IncENV-420https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/
מבחן קונטקסטואלי protocol.prohttp://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ
מבחן רמז protocol.prohttp://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ
קיר מעוקל הכנסMED Associates IncVFC-008-CWIhttps://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/
נתונים processing.ziphttp://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ
NIR/White Light Control BoxMED Associates IncNIR-100
שינוי מהיר יחידת רצפה/פאן לעכברMED Associates IncENV-005FPU-Mhttps://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/
ארון שולחן קטן וספק כוחMED Associates IncSG-6080Dhttps://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/
ממריץ/סקרמבלר עצמאי (115 וולט / 60 הרץ)MED Associates IncENV-414Shttps://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/
תא מיזוג פחד סטנדרטיMED Associates IncVFC-008
https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ פרוטוקול הדרכה VFC.pro
עבור RatMED Associates IncMED-VFC-SCT-R
חבילת התניה של פחד וידאו http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/

מקורות

  1. Frankland, P. W., Bontempi, B. The organization of recent and remote memories. Nature Reviews Neuroscience. 6 (2), 119-130 (2005).
  2. Suzuki, A., Mukawa, T., Tsukagoshi, A., Frankland, P. W., Kida, S. Activation of LVGCCs and CB1 receptors requi....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

שילובי צליל-שוקמבחן הקשרמבחן רמזתגובת קיפאוןפרוטוקול אימון-יתרזיכרון רגשיחולדות Wistar