מאמר שיטה

ניתוח הזחה של אוטם שריר הלב מכני (יהלום) חושף Segmental של תפקוד הלב של מעובריים בדג

4.8K צפיות

DOI:

10.3791/60547

6 בפברואר 2020

במאמר זה

סיכום

המטרה של פרוטוקול זה היא לפרט את השיטה החדשנית להערכת תפקוד הלב הסגור של הדגים העובריים תחת התנאים הפיזיולוגיים והפתולוגיים.

תקציר

דג zebrafish מנוצל יותר ויותר כאורגניזם מודל עבור cardiomyopathies והתחדשות. השיטות הנוכחיות שהערכת תפקוד הלב אינן מאמינות באופן אמין במכניקה של מכניקה סגורה ואינן מתפקדות בקלות בדגי הזייברפיש. כאן אנו מציגים שיטת חצי אוטומטי, קוד פתוח עבור הערכה כמותית של דו מימדי (4D) בתפקוד הלב הסגור: ניתוח הזחה של דפורמציה מכנית אוטם שריר הלב (יהלום). דגים מעובריים הטרנסגניים הvivo באמצעות מערכת מיקרוסקופ פלואורסצנטית בעלת האור, עם סנכרון תלת-ממדי של תנועות לב. רכשה לבבות דיגיטליים תלת-ממדיים שוחזרו ב-end-systole ולאחר הסיום, וחדר החדר היה מחולק באופן ידני לתוך ערכות נתונים בינאריות. לאחר מכן, הלב הונחה מחדש ושנדגם מחדש לאורך הציר הקצר האמיתי, והחדר היה מחולק באופן שווה לשמונה מנות (I-VIII) לאורך הציר הקצר. בשל מטוסי דגימה מחדש שונים מטריצות ב-end-systole ולסיים דיאמאנס, מטריצה המרה הוחל על רישום התמונה כדי לשחזר את הקשר המרחבי המקורי בין הסיסטולי שנדגמו מחדש התמונה מטריצות דיאסטולי. לאחר רישום התמונה, וקטור העקירה של כל קטע מקצה-systole כדי הקצה-דיאמטה התבססה על העקירה של מרחב המסה בשלושה ממדים (3D). היהלום מראה כי מקטעי שריר הלב הבזליים הסמוכים לתעלת הלוח עוברים את הדפורמציה המכנית הגבוהה ביותר, והם הפגיעים ביותר לפגיעה בליבו בדוקסורוביצין. באופן כללי, יהלום מספק תובנות הרומן לתוך מכניקת לב הסגורה בעוברי הפליטה מעבר לחלק המפלט המסורתי (EF) תחת שני התנאים הפיזיולוגיים והפתולוגיים.

מבוא

כימותרפיה המושרה רעילות הלב ספיקת לב שלאחר מכן הם אחת הסיבות העיקריות הפסקת כימותרפיה1. לכן, הערכה תפקודית הלב ממלאת תפקיד מכריע בזיהוי רעילות לב, וחשוב מכך, בחיזוי של פגיעת לב מוקדמת בעקבות כימותרפיה2. עם זאת, גישות נוכחיות למגבלות מפגש הערכה תפקודית הלב. שיטות כגון שבר הוצאה חדרית השמאלי (lvef) לספק רק מכניקת הלב העולמי לעתים קרובות מתעכב לאחר פציעה3,4. רקמת דופלר הדמיה מספק מידע אוטם שריר הלב סגורה אך סובל מתוך מצופה משמעותי והשתנות הבין-מצופה, בין השאר בשל תלות זווית של קרן אולטרסאונד5. מעקב מיוחד דו מימדי (2D) משתמש במצב B של האקו, אשר תיאורטית מבטלת את התלות בזווית, אבל הדיוק שלה מוגבל על ידי תנועה מחוץ למישור6. לכן, גישה קפדנית לתפקוד לבבי לב שאינו מהווה מחסור הן במחקר והן במסגרות קליניות.

בהקשר זה, פיתחנו שיטת כימות 4 ד לניתוח של תפקוד לב סגור שנקרא ניתוח הזחה של דפורמציה מכנית של אוטם שריר הלב (DIAMOND), כדי לקבוע את וקטורים העקירה של מסנטרואידים המוניים במרחב תלת-ממדי. הגשתי יהלום עבור הערכה vivo של תפקוד לב והרעלת לב דוקסורוביצין המושרה עם דג (danio rerio) כמו מודל בעלי חיים, שנבחר בשל שריר הלב שלהם מתחדשות וגנים התפתחותיים שמרו מאוד7. אנחנו עוד לעומת הזחה היהלום סגורה עם הוצאה הכללית הפליטה (EF) נחישות והזן 2D לאחר טיפול דוקסורוביצין. על ידי שילוב העקירה יהלום עם 4D האור מיקרוסקופ פלורסנט (LSFM) רכשה עיבוד של לבבות מתחלקים בדגים, יהלום מראה כי מקטעי שריר הלב הבזליים הסמוכים לתעלת מלוח לעבור את העיוות המכני הגבוה ביותר הם רגישים ביותר לפגיעה חמורה דוקסורוביצין לב8.

   

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי הוועדה לטיפול בעלי חיים מוסדיים באוניברסיטת UCLA (IACUC), וניסויים בוצעו בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המשרד לחקר בעלי חיים באוניברסיטת UCLA.

1. גידול Tg (cmlc2: mCherry) זברדג ואוסף של עוברים

  1. פעל בהתאם להליכי הדיור, הרבייה והעובר כמתואר בשיטות הגידול והרבייה שהוקמו בעבר. לפרטים, ראה Messerschmidt et al.9.
  2. לטפל העוברים שנאספו עם 0.003% 1-פניאיל-2-thiourea (PTU) ב E3 בינוני 18 h הפריה כדי לשמור על שקיפות העוברים עבור הדמיה LSFM.

2. טיפול דוקסורוביצין כדי לגרום לפציעה קרדיולוגית

  1. ב 3 ימים הפריה (dpf), לטפל העוברים עם דוקסורוביצין בריכוז של 10 μM ב-E3 דגים בינוני מים. לאחר טיפול של 24 שעות עד 4 dpf, להחליף את המדיום דוקסורוביצין עם מדיום E3 טרי.
    התראה: דוקסורוביצין היא תרופה לכימותרפיה. ציוד הגנה אישי מתאים (PPE) נדרש והפסולת צריכה להיות מסולק במכולות פסולת ביולוגית.

3. אפנון מסלול מחריץ

  1. טיפול דג זברה עוברים עם מעכב מסלול חריץ (2s)-N-[(3, 5-difluorophenyl)-L-alanyl-2-פניאיל] גליצין 1, 1-דימתוליקסיל אסתר (dapt) בריכוז של 10 μm ב-E3 דגים בינונית מים מ 3 – 6 dapt.
  2. מיקרותזריק את החריץ במורד התחום התאיים (nicd) ונאורגלין -1 (Nrg-1) mrna בריכוזים של 10 pg/nl ו-5 pg/nL, בהתאמה, לשלב 1-תא העוברים שלבים8,10.
    הערה: מיקרוהזרקה מבוצעת תחת מיקרוסקופ עם תמיכה של משאבת האוויר כדי לשלוט במדויק את עוצמת הקול מוזרק. הזרקת ה-mRNA לתוך התא מתבצעת כאשר הביצית המופרית נמצאת בשלב הראשון של התא. לפרטים על ההכנה והרצף של ה-mRNAs, ראו חן ואח '8. לפרטים על ההזרקה והכנת מחטי הזרקה, ראו רוזן ואח '.10.

4. הדמיה של LSFM וסנכרון לאחר הדמיה

  1. לקבלת טכניקות הדמיה של LSFM ואלגוריתם סינכרון לאחר הדמיה, ראה פרטים בפרסומים הקודמים9,11.
    הערה: בקצרה, המערכת שלנו מנצלת לייזר גל רציף כמקור התאורה לתדמית כל קווי הדגים הטרנסגניים. מודול הזיהוי מורכב משתי מצלמות מדעיות משלימות מתכת תחמוצת מוליכים למחצה (sCMOS) ושני סטים של מסננים עבור דימות ערוץ כפול. מודול הזיהוי מניצב מותקן במישור התאורה. כל מסגרת lsfm נרכשת בזמן חשיפה של 20 אלפיות שנייה, בעוד הכוח הפתרון בחתך הרוחב הוא ~ 0.65 יקרומטר וגודל השלב בין מסגרות עוקבות הוא ~ 2 יקרומטר. לייזר 589 ננומטר שימש להלהיב אותות פלורסנט מטעם הדובדבן.

5. שחזור של הלב הסיסטולי התלת-ממדית והדיאסטולי

  1. פתח את התיקיה שנוצרה על-ידי אלגוריתם הסינכרון לאחר מכן, פתח את התיקיה "פלט". בחר את המישור האמצעי של הלב וטען את התיקייה כולה לתוך ImageJ. מצא את השלב הראשון דיאסטולי ו הסיסטולי ולהקליט את מספר המסגרת.
  2. פתח את התיקיה "פלט/לפי מדינה" וחפש את התיקיות בעלי אותם מספרים כמו מספרי המסגרות שנרשמו זה עתה. להמיר את התמונות בתיקיה לתוך 3D TIFF (תבנית קובץ תמונה מתויג) ולשם אותם "דיאמד. tif" ו-"systole. tif".

6. פילוח של החדר

  1. פתח את תוכנת ניתוח התמונה (ראה טבלת חומרים). לחץ על קובץ | פתח נתונים, וטען "דיאמגנב. tif" ו-"systole. tif". הזן את הגודל voxel בהתאם להגדרות הדימות.
    הערה: עבור מערכת lsfm בשימוש, גודל voxel אופייני הוא 0.65 יקרומטר x 0.65 יקרומטר x 2 יקרומטר.
  2. לחץ על "פילוח" הפאנל ומקטע באופן ידני את החלק החדר של הלב. הכלי "הסף" המובנה שיכול לבחור את כל האזורים שמעל לעוצמה מסוימת יכול להקל על תהליך זה. החדר הוא התא העבה יותר. עם הזריחה החזקה יותר
    הערה: הקפידו להסיר את התעלה הקמורה ואת מערכת העיכול בחדר הניתוח המקוסף, משום שהוא משפיע על ניתוחי העקירה.
  3. לאחר שפילוח מתבצע, לחץ על החלונית "פרוייקט". קליק ימני על המילה "דיאמייד". . תוויות. טיף-" סיגנב תוויות. tif"כרטיסיות במסוף ולחץ"ייצוא נתונים בשם"כדי לשמור את הנתונים כקבצי TIFF 3d.

7. יצירת מקביפידים מלבניים לרישום תמונה

  1. הפעל "prepImage_1. m" בסביבת התיכנות (ראה טבלת חומרים). פתח "prepImage_1. m", "impath" בשורה 5 כך התיקיה מכילה את קבצי TIFF המקורי מקוטע, ולשנות "פרוסה" בשורה 4 למספר פרוסות של הקבצים tif 3d.
  2. לאחר הפעלת הקוד, זה יפיק חמישה 3D קבצים חדשים TIFF ("test. tif", "diastole_200. tif", "systole_200. tif", "diaLabel. tif", ו "sysLabel200. tif"), כמו גם שתי תיקיות חדשות ("resample_dia" ו-"resample_sys").

8. דגום מקרוב לבבות סיסטולי 3D לאורך המישור ציר קצר

  1. יבא את כל חמשת קבצי TIFF תלת-ממדיים לתוכנת ניתוח התמונה (ראה טבלת חומרים).
    הערה: גודל voxel אינו משתנה.
  2. עבור לחלונית Multiplanar ישורי . בחר באפשרות "diastole_200. tif" כנתונים העיקריים. יישר את ציר ה-X (הקו הירוק במישור ה-XY) עם הציר הארוך האנכי של החדר, ויישר את ציר Z (הקו האדום במישור YZ) עם הציר הארוך האופקי של החדר.
    הערה: הציר הארוך והאנכי נקבע על-ידי מציאת הציר הארוך ביותר המחבר את הקודקוד ואת מערכת הזרימה במישור ה-XY, והציר הארוך האופקי נקבע על-ידי מציאת הציר הארוך ביותר המחבר את הקודקוד ואת מערכת הזרימה במישור YZ. סובב את הציר על-ידי הצבת הסמן בסוף הציר.
  3. בחרו שלוש נקודות אקראיות ממישור YZ האלכסוני (מישור הציר הקצר) באופן כנגד כיוון השעון והקליטו את נקודות הציון שלהם במיקום תלת-ממדי.
    הערה: ודא שהנקודות נבחרות באופן כנגד כיוון השעון.
  4. חזור על שלבים 8.2 ו-8.3 עבור "systole_200. tif".
  5. לחץ על החלונית "פרוייקט". צור אובייקט "פרוסה" עבור "diastole_200. tif" על-ידי לחיצה ימנית על "diastole_200. tif" וחיפוש אובייקט "פרוסה". לחיצה שמאלה על עצם הפרוסה שנוצרה בדיוק, ובחלונית ' מאפיינים ' | אפשרויות, לבדוק "להגדיר מישור" ולבחור שלוש נקודות "הגדרת מישור". הזן את הקואורדינטות של שלוש הנקודות משלב 7.3.
  6. חזור על שלב 8.5 עבור "systole_200. tif".
    הערה: אובייקט הפרוסה שנוצר צריך להיות בעל השם "פרוסה 2".
  7. לחץ לחיצה ימנית על "diastole_200. tif" וחפש את "דגום ממנותמונה משתנה" וצור את האובייקט. בחלונית ' מאפיינים ', בחרו 'פרוסה' כ 'הפניה' ולחצו על ' החל'. הדבר אמור ליצור אובייקט בשם "diastole_200 השתנה".
  8. לחץ לחיצה ימנית "diastole_200 השתנה" וחפש "דגום מדגימה" וצור את האובייקט. לבחור "גודל Voxel" כמו "מצב" ולשנות "voxel גודל" להיות x = 1, y = 1 ו-z = 1 בחלונית מאפיינים .
  9. לחץ על "החל". פעולה זו אמורה ליצור אובייקט בשם "diastole_200. שנדגם מחדש". קליק ימני "diastole_200. resampled" ולשמור אותו כקובץ TIFF 3D.
  10. חזור על אותו צעד עבור "diaLabel. tif" ו-"test. tif". שמור "diaLabel. שנדגם מחדש" ו "בדיקה. שנדגם מחדש" כקבצי TIFF 3D. חזור על אותו שלב עבור "systole_200. tif", "sysLabel. tif", ו-"test. tif" באמצעות "פרוסה 2" כהפניה, ושמור "systole_200. שנדגם מחדש", "Syslabel. שנדגם מחדש", ו-"test2. resampled" כקבצי 3D TIFF.
    הערה: ודא שיש סך של שישה קבצי TIFF שנשמרו בשלב זה.

9. חלוקת הלב החדש שנדגם

  1. יבא את כל ששת הקבצים שנדגמו משלב 8 ל-ImageJ. בחר פרוסה מתוך "systole_200. שנדגמו מחדש" שבה התעלה המובחרת מדמיין בבירור. הקלט את מספר הפרוסה.
    1. השתמשב"תמונה" | המרה | סובבאת הפונקציה "ImageJ" כך שתעלת הלוח תהיה אנכית. החל את אותו סיבוב על כל הקבצים. סגור את כל החלונות ושמור את כל השינויים.
    2. להעביר "diastole_200. שנדגמו מחדש", "diaLabel. שנדגם מחדש", ו "test. שנדגמו מחדש" לתיקיה "resample_dia", ולהעביר "systole_200. שנדגמו מחדש", "sysLable. שנדגם מחדש", ו "test2. resampled" לתיקיה "resample_sys".
  2. פתח את "divider_2_8_pieces." שינוי "Impath" בשורה 5 ו "impath" בשורה 395 לספריית התמונה. שנה את המשתנה "אמצע" בשורה 22 וקו 411 למספרי הפרוסה שבהם תעלת הלוח המאובריקולארית מדמיין בבירור "systole_200. הדגימה מחדש" ו-"diastole_200.
  3. הפעל את הקוד, ובחלונות שהתבקש לחץ פעם אחת במרכז החדר ולחץ פעם אחת במרכז התעלה מלוח. זה צריך להיעשות פעמיים עבור שניהם סיסטולה ו דיאמ, תמונות.

10. רישום של מטריצות סיסטולי ו התמונה דיאסטולי

  1. פתח את "register_3. m" ושנה את "Impath" בשורה 4 לנתיב תיקיית התמונה. ייתכן שייקח 5 – 20 דקות להפעיל קוד זה בהתאם לעוצמת החישוב של המערכת.
    הערה: מקבילים באופן מלאכותי יצרו מקביפידים מלבניים בשלב 7 משמשים עבור רישום קשיח תלת-ממדי השומר על המרחק בין שתי נקודות וזוויות מנוי על ידי שלוש נקודות. כאשר הקצה-דיאמד מקבילים מלבני (אדום) רשום לסוף systole מרובע מקבילון מלבני (ירוק), המיקום שלאחר מבצע 3D מתיר את הנגזרת של מטריצה ייחודית של שינוי נוקשה המורכב סיבוב ותרגום מן המטריצה בסוף מטריצה לסיים systole מטריצה (איור 1H). אנו מבצעים את הרישום ואת תפלגות מזעור אנרגיה כדי denoise מטריקס לאחר שינוי באמצעות תיבת הכלים עיבוד תמונה (ראה לוח חומרים). לתיאור מתמטי מפורט, אנא ראו חן ואח '8.

11. פלט של וקטורי הזחה

  1. פתח את "displacement_4. m" ושנה את "impath" בשורה 4 לנתיב תיקיית התמונה.
  2. הפעל את "displacement_4.txt", המייצר קובץ "vector8. txt" בתיקיה "וקטורים". לאחר שהקובץ "vector8. txt" פתוח, יהיה מטריצה של 8 x 4. לכל שורה של המטריצה יש ארבעה מספרים, שהם הגניטודות של רכיב X, רכיב Y, רכיב Z וגודל SUM של וקטור ההזחה של מקטע מסוים של החדר.
    הערה: וקטור העקירה מושגת על ידי חישוב העקירה של הסנטאיד ההמוני של כל קטע במרחב תלת-ממדי. אנו מחשבים את figure-protocol-1 הקואורדינטות של מרכז המסה התלת-ממדי (pS ו-pd) (כאשר k מציין את קואורדינטת X, Y או Z, בהתאמה) של כל פלח (I-VI) בערכת הנתונים של פילוח מתוך סיסטולה כדי דיאמנק (איור 1J). אנו מגדירים את הסנטאיד figure-protocol-2 ההמוני בחלל התלת-ממדי כדלקמן:
    figure-protocol-3
    כאשר Cx = x, cy = y, ו-Cz = z, mi = המסה של כל קטע (אני ≤ i ≤ VI), m = מספר voxels של כל קטע, ו ρ = הפונקציה צפיפות כאזור מקוטע הוא 1 ואילו השאר הוא 0. הנורמה-L2 של וקטורי ההזחה לאורך הציר X, Y ו-Z ושיטת התזוזה של הסכום מחושבים במהלך מחזור הלב. יש בסך הכל שמונה שורות במטריצה. השורה הראשונה והשורה השמינית מכילות את התעלה המועלת ומתעלמים מכך בניתוח שלנו. מקטעים I ל-VI מיוצגים באמצעות השורה השניה לשורה השביעית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

התהליך שדרכו היהלום פותח כדי להעריך את תפקוד הלב הסגור של 3D מוצג באיור 1. לאחר רכישת תמונות lsfm ושחזור ב-3d של הלב דג זברה העובריים (איור 1א), מטוס הציר הקצר האמיתי נקבע כמישור הניצב לציר האנכי והאופקי, שניהם נקבעים באמצעות מציג מרובה מטוסים (איור 1B). הלב היה לאחר מכן לאחר מכן לאורך המישור ציר קצר (איור 1ג), ומחולק לשמונה חלקים שווים היוו בזוויות אפי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

אסטרטגיה קפדנית לקוונפיקציה של תפקוד אוטם שריר הלב הוא קריטי כדי להעריך מכניקה לב מעבר המסורתית EF, ידוע להיות מחוון חסר רגישות ומתעכב של פציעה שריר הלב1,4,12. מכאן, יש כבר עניין הולך וגדל סמנים של שינויים שריר הלב המוקדמים, וגוף הולך וגדל של הספרות תומך בפרמטרים שריר הלב לדפורמציה כאינדיקטור מוקדם לחיזוי המוח החדרית4,13. מדידת האקו של המוח השמאלי (LV) מספק שיטה מבוססת ש...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים הכריזו כי לא קיים ניגוד אינטרסים.

תודות

העבודה הנוכחית ממומנת על ידי איגוד הלב האמריקני מענקים 16SDG30910007 ו 18CDA34110338, ועל ידי המכונים הלאומיים של מענקי בריאות HL083015, HL111437, HL118650, ו HL129727.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Amira6FEIתוכנה לניתוח תמונות
DAPTMillipore SigmaD5942-5MG
דוקסורוביצין הידרוכלורידMillipore SigmaD1515-10MG
אתיל 3-אמינובנזואט מתאן סולפונאטMillipore SigmaE10521-10Gטריקאין
MATLABMathWorksסביבת תכנות
ארגז הכלים לעיבוד תמונה MATLABארגז הכלים לעיבוד תמונהשל MathWorks

מקורות

  1. Ewer, M. S., Ewer, S. M. Cardiotoxicity of anticancer treatments. Nature Reviews Cardiology. 12 (9), 547-558 (2015).
  2. Thavendiranathan, P., Wintersperger Bernd, J., Scott, F. D., Thomas D, M. H. Cardiac MRI in the Assessment of Cardiac Injury and Toxicity From Cancer Chemotherapy. Circulation: Cardiovascular Imaging. 6 (6), 1080-1091 (2013).
  3. Mickoleit, M., et al. High-resolution reconstruction of the beating zebrafish heart. Nature Methods. 11 (9), 919-922 (2014).
  4. Thavendiranathan, P., et al. Use of Myocardial Strain Imaging by Echocardiography for the Early Detection of Cardiotoxicity in Patients During and After Cancer Chemotherapy. A Systematic Review. 63 (25), Part A 2751-2768 (2014).
  5. Collier, P., Phelan, D., Klein, A. A Test in Context: Myocardial Strain Measured by Speckle-Tracking Echocardiography. Journal of the American College of Cardiology. 69 (8), 1043-1056 (2017).
  6. Hanekom, L., Cho, G. Y., Leano, R., Jeffriess, L., Marwick, T. H. Comparison of two-dimensional speckle and tissue Doppler strain measurement during dobutamine stress echocardiography: an angiographic correlation. European Heart Journal. 28 (14), 1765-1772 (2007).
  7. Poss, K. D., Wilson, L. G., Keating, M. T. Heart regeneration in zebrafish. Science. 298 (5601), 2188-2190 (2002).
  8. Chen, J., et al. Displacement analysis of myocardial mechanical deformation (DIAMOND) reveals segmental susceptibility to doxorubicin-induced injury and regeneration. JCI Insight. 4 (8), e125362(2019).
  9. Messerschmidt, V., et al. Light-sheet Fluorescence Microscopy to Capture 4-Dimensional Images of the Effects of Modulating Shear Stress on the Developing Zebrafish Heart. Journal of Visualized Experiments. (138), e57763(2018).
  10. Rosen, J. N., Sweeney, M. F., Mably, J. D. Microinjection of Zebrafish Embryos to Analyze Gene Function. Journal of Visualized Experiments. (25), e1115(2009).
  11. Lee, J., et al. 4-Dimensional light-sheet microscopy to elucidate shear stress modulation of cardiac trabeculation. The Journal of Clinical Investigation. 126 (5), 1679-1690 (2016).
  12. Lenneman, C. G., Sawyer, D. B. Cardio-Oncology: An Update on Cardiotoxicity of Cancer-Related Treatment. Circulation Research. 118 (6), 1008-1020 (2016).
  13. Geyer, H., et al. Assessment of Myocardial Mechanics Using Speckle Tracking Echocardiography: Fundamentals and Clinical Applications. Journal of the American Society of Echocardiography. 23 (4), 351-369 (2010).
  14. Castro, P. L., Greenberg, N. L., Drinko, J., Garcia, M. J., Thomas, J. D. Potential pitfalls of strain rate imaging: angle dependency. Biomedical Sciences Instrumentation. 36, 197-202 (2000).
  15. Seo, Y., Ishizu, T., Aonuma, K. Current Status of 3Dimensional Speckle Tracking Echocardiography: A Review from Our Experiences. Journal of Cardiovascular Ultrasound. 22 (2), 49-57 (2014).
  16. Amzulescu, M. S., et al. Improvements of Myocardial Deformation Assessment by Three-Dimensional Speckle-Tracking versus Two-Dimensional Speckle-Tracking Revealed by Cardiac Magnetic Resonance Tagging. Journal of the American Society of Echocardiography. 31 (9), 1021-1033 (2018).
  17. Wolterink, J. M., Leiner, T., Viergever, M. A., Išgum, I. Reconstruction, Segmentation, and Analysis of Medical Images. Zuluaga, M. A., et al. , Springer International Publishing. 95-102 (2016).
  18. Avendi, M. R., Kheradvar, A., Jafarkhani, H. A combined deep-learning and deformable-model approach to fully automatic segmentation of the left ventricle in cardiac MRI. Medical Image Analysis. 30, 108-119 (2016).
  19. Packard, R. R. S., et al. Automated Segmentation of Light-Sheet Fluorescent Imaging to Characterize Experimental Doxorubicin-Induced Cardiac Injury and Repair. Scientific Reports. 7 (1), 8603(2017).
  20. Jay Kuo, C. C., Chen, Y. On data-driven Saak transform. Journal of Visual Communication and Image Representation. 50, 237-246 (2018).
  21. Natarajan, N., et al. Complement Receptor C5aR1 Plays an Evolutionarily Conserved Role in Successful Cardiac Regeneration. Circulation. 137 (20), 2152-2165 (2018).
  22. Zhukov, L., Barr, A. H. IEEE Visualization VIS 2003. , 597-602 (2003).
  23. Nielles-Vallespin, S., et al. In vivo diffusion tensor MRI of the human heart: Reproducibility of breath-hold and navigator-based approaches. Magnetic Resonance in Medicine. 70 (2), 454-465 (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

4D

מאמרים קשורים