מוצג כאן פרוטוקול לביסוס אוטם פונטינה חריף במודל חולדה באמצעות גירוי חשמלי עם פעימה אחת.
מאמר שיטה
מוצג כאן פרוטוקול לביסוס אוטם פונטינה חריף במודל חולדה באמצעות גירוי חשמלי עם פעימה אחת.
אוטם פונטינה הוא תת-סוג השבץ הנפוץ ביותר במחזור הדם האחורי, בעוד שחסר מודל מכרסמים המחקה אוטם פונטינה. בתנאי כאן הוא פרוטוקול להקמת מודל חולדה בהצלחה של אוטם פונטינה חריפה. עכברושים במשקל של כ-250 גרם משמשים, ובדיקה עם נדן מבודד מוזרקת לסונים באמצעות מערכת סטריאוטקסית. פצע מיוצר על ידי גירוי חשמלי עם פעימה אחת. הציון של לונגה, הציון של בורדרסון, ובדיקת איזון הקורה משמשים להערכת גירעונות נוירולוגיים. בנוסף, בדיקת somatosensory להסרת דבק משמש כדי לקבוע את תפקוד sensorimotor, ואת בדיקת מיקום הגפיים משמש כדי להעריך proprioception. סריקות MRI משמשות לאחר מכן כדי להעריך את האוטם בvivio, וכתמים TTC משמש כדי לאשר את האוטם במבחנה. כאן, אוטם מוצלח מזוהה כי הוא ממוקם על בסיס anterolateral של פונים rostral. לסיכום, שיטה חדשה מתוארת כדי לבסס מודל אוטם פונטין חריפה חולדה.
מאז שנות ה-80, דגם חסימת העורקים המוחיים האמצעי (MCAO) המושרה על ידי נימי סיליקון נמצא בשימוש נרחב במחקר שבץ בסיסי1. שיטות אחרות (כלומר, תפירה של ענף אחד של MCA2 ואוטם מוקד המושרה פוטוכימית) שימשו גם. מודלים אלה כבר כונה מודלים שבץ מבוססי MCA תרמו רבות לחקירות של מנגנונים פתופיזיולוגיים הבסיסיים שבץ וטיפולים פוטנציאליים. למרות שיש מגבלות של מודליםניסיוניים אלה 3,4, שיטות אלה שימשו מעבדות רבות5,6. מודלים מבוססי MCA קו מייצגים קו במחזור הקדמי; עם זאת, כמה דיווחים חקרו מודלים מחקים שבץ במחזור האחורי7.
ישנם הבדלים משמעותיים בין האטיולוגיה, מנגנונים, ביטוי קליני, ופרוגנוזה בין משיכות זרימת הדם הקדמי והאחורי8. לכן, אין אפשרות להחיל את התוצאות הנגזרות מדגמי קו מחזור קדמיים על שבץ מחזור אחורי. לדוגמה, חלון זמן ההתרמה למחזור הקדמי הוארך ל- 6 שעות, עם חלק קטן של מחקרים המשתרעים עד 24 שעות בהתבסס על ממצאיהדמיה 9. עם זאת, חלון הזמן למחזור הדם האחורי עשוי להיות ארוך יותר מ- 24 שעות, על פי דיווחיםקודמים 10 וחוויות קליניות שלנו. חלון זמן התרעה מוארך זה חייב להיחקר ואושר נוסף במודלים ניסיוניים.
לגבי משיכות מחזור הדם האחורי, אוטם פונטינה הוא תת הסוג הנפוץ ביותר, מהווה 7% מכל מקרי שבץ איסכמי11,12. על פי טופוגרפיה אוטם, אוטם פונטינה מחולקים אוטם פונטינה מבודד ולא מבודד13. אוטמי פונטינה מבודדים מסווגים לשלושה סוגים המבוססים על המנגנונים הבסיסיים: מחלת עורקים גדולים (LAD), מחלת ענף עורקים בסילאר (BABD) ומחלת עורקים קטנים (SAD). הידע על המנגנונים, הביטוי והאבחנה של אוטם פונטינה נגזר מחקירות קליניות שלמקרים 14. עם זאת, מודל מכרסמים מחקה אוטם פונטינה נחקר פחות.
במחקרים קודמים, לפזר את הפציעה של גזע המוח מעורבים פונים נחקר7. קבוצה אחת ניסתה ליצור מודל אוטם פונטינה באמצעות קשירה של עורק הבזיליקום (BA)15. קבוצה אחרת השתמשה בתפר מונופילמנט ניילון 10-0 כדי לתפור באופן סלקטיבי ארבע נקודות של BA proximalבאופן סלקטיבי 16. מודל זה מחקה LAD, אבל רוב אוטמי פונטינה נובעים BABD ו SAD. בנוסף, קשירה סלקטיבית של BA הוא ניתוח מסובך ויש לו שיעור מוות גבוה.
מסופק כאן הוא פרוטוקול מפורט עבור קל לביצוע, בקלות לשכפל, ומודל חולדה מוצלח של אוטם פונטינה חריפה על ידי גירוי חשמלי.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הפרוטוקול נבדק ואושר על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסד ושימוש של בית החולים המזוהה השני של האוניברסיטה הרפואית של גואנגג'ואו, מוסד מוכר על ידי AAALACi. החולדות סופקו על ידי מרכז בעלי החיים של האוניברסיטה הרפואית הדרומית.
1. בעלי חיים
2. הקמת אוטם בפונים
3. בדיקות התנהגותיות
4. אישור אוטם על ידי MRI
5. אישור אוטם על ידי כתם TTC
6. סטטיסטיקה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
שש חיות היו נתונות לפרוטוקול הניתוח שתואר לעיל. קבוצת הביקורת כפי ש המוצגת באות 4 כללה שישה חולדות. פרוסות המוח המוצגות בדמות 4 נגזרו מחולדה אחת לכל קבוצה.
סריקת ה-MRI הראתה כי האוטם היה ממוקם על בסיס הפוני(איור 4א). מאז הגשוש הוזרק 2 מ"מ בצד שמאל של קו האמצע, האוטם היה ממוקם לרוחב. אוטם זה מחקה אוטם פונטינה אנטרולטרלי בחולים(איור 4א). מכיוון שהשתמשו בנתדן מבודד, לא היה אוטם ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחקר הנוכחי מספק פרוטוקול ליצירת מודל עכברוש אוטם פונטינה חריפה. מודל זה יכול לשמש למחקר על פרוגנוזה ושיקום (כולל כאב כרוני לאחר שבץ) בחולים שבץ פונטינה.
ישנן מספר נקודות חוזק של שיטה זו. ראשית, הוא מספק מודל חולדה של אוטם פונטינה חריפה עבור מחקרים עתידיים. כאמור, אוטם פונטינה הוא תת-סוג שבץ נפוץ שקיבל פחות תשומת לב. חסרון גדול של מחקר שבץ היה חוסר מודל אוטם פונטינה ספציפי. שנית, בהשוואה למודל עכברוש אוטם פונטינה הקיים על ידי קשירה של BA15,...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
אין ניגוד אינטרסים.
מחקר זה נתמך כספית על ידי הקרן הלאומית למדע של סין (81471181 ו 81870933) לי. ג'יאנג והקרן הלאומית למדע של סין (מס ' 81601011), הקרן למדעי הטבע של מחוז ג'יאנגסו (לא. BK20160345) לג'יי ז'ו ועל ידי התוכנית המדעית של ועדת הבריאות העירונית של גואנגג'ואו (20191A011083) עד Z. Qiu.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 4-0 יניקה | שנחאי ג'ינג'ונג | מכשירים כירורגיים | |
| סרט דבק | שנחאי ג'ינג'ונג | מכשירים כירורגיים | |
| מערכת הרדמה לבעלי חיים | RWD | ללבוש מסכה בעת השימוש במערכת | |
| מלט עצם | שנחאי ג'ינג'ונג | מכשיר כירורגי | |
| מהדק מרפא | שנחאי ג'ינג'ונג | כירורגי מכשיר | |
| מספריים רקמות כלליות | שנחאי Jinzhong | מכשיר כירורגי | |
| IndoPhors | Guoyao של סין | עיקור | |
| Isoflurane | RWD | 217181101 | |
| מכשיר לייצור נגעים | שנחאי Yuyan | ביצוע נגע | |
| מערכת MRI | Bruker Biospin | אישור אוטם in vivo | |
| מחזיק מחט | שנחאי Jinzhong | מכשיר כירורגי | |
| Penicilin | Guoyao של סין | למניעת זיהום | |
| Anke | זקוק לשינוי | ||
| כלשהו Q-tips | שנחאי Jinzhong | מכשיר כירורגי | |
| מספריים | גזירה שנחאי Jinzhong | מכשיר | |
| כירורגימכשיר סטריאוטקסי | RWD | ||
| מחט תפר | שנחאי ג'ינג'ונג | מכשיר כירורגי | |
| החזקת רקמות | שנחאי ג'ינג'ונג | מכשיר כירורגי | |
| TTC | סיגמא-אולדריץ' | BCBW5177 | לאישור אוטם במבחנה |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה
בקש הרשאה