כאן, אנו מציגים פרוטוקול אלקטרוקרדיוגרפיה (ECG) פולשנית, הממוטב לעכברים לאחר הלידה המוקדמת, שאינו דורש שימוש בהרדמה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
אלקטרוקרדיוגרפיה (ECG) כבר זמן רב להסתמך על כשיטה יעילה ואמינה של הערכת תפקוד לב וכלי דם (ולב וכלי דם) במודלים אנושיים ובעלי חיים של מחלה. קצב לב, קצב וספסיות בודדים, בשילוב עם פרמטרים כמותיים שנאספו מ-ECG, משמשים להערכת שלמות מערכת מוליכות הלב, כמו גם את הפיזיולוגיה המשולבת של מחזור הלב. מאמר זה מספק תיאור מקיף של השיטות והטכניקות המשמשות לביצוע ECG לא פולשני על גורי עכברים perinatal וילודים כבר ביום שלאחר הלידה הראשון, ללא צורך בשימוש בהרדמה. פרוטוקול זה נועד לטפל ישירות בצורך בשיטה מתוקנה ותוכלית להשגת ECG בעכברים שזה עתה נולדו. מנקודת מבט תרגום, פרוטוקול זה מוכיח להיות יעיל לחלוטין לאפיון של פגמים מולדים קרדיו-ריאה שנוצרו באמצעות קווי עכבר טרנסגניים, ובמיוחד לניתוח פגמים גרימת קטלניות או במהלך הימים הראשונים לאחר הלידה. פרוטוקול זה גם נועד לטפל ישירות בפער בספרות המדעית כדי לאפיין ולספק נתונים נורמטיביים הקשורים התבגרות של מערכת מוליכות הלב לאחר הלידה המוקדמת. שיטה זו אינה מוגבלת לנקודת זמן ספציפית לאחר הלידה, אלא מאפשרת איסוף נתוני ECG בגורי עכבר ילודים מלידה ועד ליום 10 לאחר הלידה (P10), חלון בעל חשיבות קריטית למודל מחלות אנושיות ב-vivo, עם דגש מיוחד על מחלות לב מולדות (CHD).
מבוא
ניתן למדוד את תפקוד הלב בדרכים שונות, הנפוצות ביותר כוללות שימוש אלקטרוקרדיוגרפיה (ECG) כדי לנתח את התנהלות הזרם החשמלי דרך הלב, כמו גם את מחזור הלב הכולל שלהותפקוד 1. אלקטרוקרדיוגרפיה ממשיכה להיות כלי אבחון שימושי לזיהוי ואפיון של חריגות לב במודלים אנושיים ובעלי חיים שלמחלה 1,2. אי סדרים בקריאה אלקטרוקרדיוגרם ניתן למצוא בהתפתחות לב חריגה (כלומר, מחלת לב מולדת (CHD),והוא יכול לכלול הפרעות בקצב הלב המתבטאות כשינויים בקצב הלב (למשל, ברדיקרדיה) וקצב (למשל, "בלוקי לב"), המי רמז על פגמים בשלמות ו/או תפקודו של שריר הלב הבסיסי. שינויים כאלה עלולים לגרום לחולים לתפקוד לב מסכן חיים (למשל, אי ספי....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הפרוטוקול הבא פועל בהתאם לסטנדרטים של הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ולשימוש של אוניברסיטת ניו אינגלנד. התבוננות מקרוב בפרוטוקול אמורה לספק קריאת א.ק.ג. משביעת רצון בכל היילודים שנבדקו (n > 70).
1. הכנות להתקנים
- חבר את ההתקן ליציאת ה-USB של מחשב שבו תוכנת ECG הורדה עליו. התקן המדידה יתחיל להתחמם באופן אוטומטי עד (37°C/98.6 °F). יחידת החימום הפנימית כלולה ביחידת המדידה ומחממת רק את משטח הפלסטיק. אלקטרודות חוט הכסף אינן מחוממות.
- אפשר כ-15 דקות עד שפני השטח יגיעו לטמפרטורה. השתמש בזמן זה כדי לאסוף ולהגדיר בעלי חיים.
הערה: הפרוטוקול עשוי להיות מושהה בשלב זה והפלטפורמה יכולה להישאר מחוברת וחימום למשך פרק זמן ממושך. בהיעד....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
ECG אידיאלי יהיה אות ברור, בולט המאפשר את כל הגלים להיות מנותח במספר מסגרות זמן שונות (איור 1). המעבדה העסיקה בתחילה יישום מותאם אישית של מערכת אלקטרומיוגרפיה כדי לייצר ECGs באיכות לא מספקת, אשר אפשרה לנו רק לנתח פרמטרים בסיסיים כגון קצב לב(איור S1). עבודה זו השראה עם חברה לפתח אב טיפוס חדש ECG מכשיר במיוחד לניתוח של גורי עכברים לאחר הלידה מוקדם.
לקריאה באיכות ירודה אין פעימות ניכרות, מראה הפרעה ברורה, ויש לו גלים או חוסר עקביות על פני הקריאה (
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
נקודות הנתונים שנאספו ביום הראשון של גורי עכברים הן מעט מתחת לערכים הצפויים הממוצעים לעכברים בוגרים (500-700 פעימות לדקה). 8 יש עלייה בקצב הלב ככל שהעכבר מזדקן, אשר נופל יותר בקנה אחד עבור הערכים הצפויים (טבלה 1). עם זאת, חשוב להדגיש כי ערכי יילודים היו בקצה התחתון של טווח זה, ותומכים ברעיון שיש לתעד ערכים נורמטיביים באופן ספציפי לגיל. שיטה זו שונה מאשר פרוטוקולים אלקטרוקרדיוגרם אחרים בכך שאין טראומה פיזית לעכבר. הפרוטוקול אינו פולשני לחלוטין, אינו דורש שימוש בהרדמה, והוא אופטימלי.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים מדווחים שאין ניגודי עניינים.
תודות
המחברים מכירים בתמיכה נדיבה מאות הלבבות הזעירים (KLT), תוכנית ה-COBRE של UNE (מספר מענק NIGMS P20GM103643; LAF), ותכנית מלגת SURE באוניברסיטת ניו אינגלנד (VLB), כמו גם תמיכה טכנית למטופלים מאשיש מור (iWorx, דובר, NH). איור 3, איור 4 ואיור S1 נוצרו באמצעות תוכנת Biorender.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| תוכנת LabScribe4 | iWorx | LabScribe4 | המשמשת להקלטת א.ק.ג |
| עכבר יילודים מערכת נשימה | iWorx | RS-NMECG: מכשיר א.ק.ג לעכבר יילודים | א.ק.ג |
| דבק מוליך טנסיבי ג'ל | Parker Laboratories, Inc | 22-60 | טק-ג'ל המשמש כג'ל מוליך לא.ק.ג |
מקורות
- Pappano, A. J., Wier, W. G. Cardiovascular Physiology. 11, Elsevier. 40-41 (2019).
- Kaese, S., Verheule, S. Cardiac electrophysiology in mice: A matter of size. Frontiers in Physiology. 3, Semptember 1-19 (2012).
- Sisakian, H.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
