מאמר שיטה

הערכת הבדל צבע בשליה עם רצף פוליציטמיה של אנמיה תאומה

DOI:

10.3791/61312

⸱

17 ביוני 2020

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Reproductive Medicine, Affiliated Shenzhen Maternity and Child Healthcare Hospital, Southern Medical University, 2Division of Fetal Medicine, Department of Obstetrics, Leiden University Medical Center, 3Fetal Medicine Unit & Prenatal Diagnosis Center, Department of Obstetrics, Shanghai First Maternity and Infant Hospital, Tongji University School of Medicine, 4Division of Neonatology, Department of Pediatrics, Leiden University Medical Center

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בתאומים מונוכוריונים עם רצף פוליציטמיה של אנמיה תאומה (TAPS), התאום התורם וחלק השליה המקביל לו חיוורים, בעוד שלתאום המקבל ולחלק השליה שלו יש היבט פלטורי. מוצג כאן פרוטוקול לכימות הבדלי הצבע בצד האימהי של שליית TAPS לאחר הלידה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

רצף פוליציטמיה של אנמיה תאומים (TAPS) מתרחש ב-5% מהתאומים המונוכוריוניים ומאופיין בהבדלים גדולים בהמוגלובין בין תאומים. קריטריוני האבחון לאחר הלידה ל-TAPS מבוססים על פרמטרים המטולוגיים ומאפייני שליה. בדיקת שליה לאחר הלידה מראה שצבע הצד האימהי בין טריטוריות השליה של התאומים האנמיים והפוליציטמיים שונה להפליא. הבדל הצבע בשליה TAPS גבוה יותר בהשוואה לשליה מונוכוריונית עם עירוי עוברי-עוברי חריף סביב הלידה; לפיכך, זה משמש כקריטריון אבחון נוסף עבור TAPS. תוכנה כגון ImageJ מאפשרת מדידה מבוססת מחשב של עוצמת הצבע בשליות TAPS. עם זאת, טרם תוארה שיטה מפורטת לחישוב הבדלי צבע בין רכיבים אנמיים ופוליציתמיים של שליית TAPS. הפרוטוקול המוצג כאן מספק שיטה שלב אחר שלב לניתוח הבדלי צבע בצד האימהי של שליית TAPS באמצעות תוכנת ImageJ.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

TAPS היא צורה כרונית של תסמונת עירוי עוברי-עוברי ומאופיינת בהבדל גדול בהמוגלובין בין תאומים (Hb) ללא סימנים של רצפי אוליגו-פוליהידראמניוס1. הפתוגנזה העיקרית של TAPS קשורה לארכיטקטורת השליה הייחודית, עם רק כמה אנסטומוזות זעירות המאפשרות עירוי כרוני ובמהירות נמוכה מהתורם (תאום אנמי) למקבל (תאום פוליציטמי)2,3,4. אבחנה לאחר לידה של TAPS מבוססת על בדיקות המטולוגיות המראות הבדל גדול בהמוגלובין והבדל גדול בספירת הרטיקולוציטים ו/או הזרקת שליה עם צבע המראה רק אנסטומוזה זעירה5. עם זאת, ספירת הרטיקולוציטים לא תמיד נמדדת בלידה, והזרקת שליה אינה מבוצעת באופן שגרתי ברוב המרכזים לרפואת העובר. קריטריון אבחון נוסף עשוי להיות שימושי כדי לסייע באבחון מקרים ללא מדידות ספירת רשתית וללא הזרקת צבע שליה. הבדל צבע בולט בין העור החיוור של תאום תורם לעור הרב של התאום המקבל קיים באופן עקבי בתאומים TAPS בלידה. הבדל צבע דומה של הצד האימהי בין טריטוריות השליה של התאומים האנמיים והפוליציטמיים מתגלה גם בבדיקה גסה.

לאחרונה הועלתה השערה כי הבדל צבע שליה זה עשוי לשמש כשיטה פשוטה ומדויקת לאישור אבחנת TAPS לאחר לידה6. כימות הבדלי הצבע בשליות TAPS חוסך זמן בהשוואה להזרקת שליה. בנוסף, כימות הבדלי הצבע בשליות TAPS הוא חסכוני יותר בהשוואה לספירת הרטיקולוציטים. החומרים המשמשים בשיטה זו זמינים בקלות במסגרות קליניות לכן, שיטה זו מספקת קריטריונים פשוטים ומדויקים לאבחון TAPS. הפרוטוקול מתאר שיטה מפורטת לכימות הבדלי צבע מהצד האימהי של שליה מונוכוריונית עם TAPS.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה אושר על ידי ועדת האתיקה של המרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן, ובדיקה לאחר הלידה של שליה תאומה חד-כוריונית אנושית היא חלק מהטיפול הסטנדרטי במרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן. קבלת הסכמה לבדיקה לאחר הלידה של שליה תאומה חד-כוריונית אנושית מוותרת במרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן.

1. איסוף שליה של TAPS ובדיקה ברוטו

  1. השתמש בכל השליות התאומות החד-כוריוניות האנושיות עם TAPS הניתנים בכל גיל הריון. שמור על השליה התאומה האנושית החד-כוריונית שלמה ככל האפשר. העבירו את השליה המונוכוריונית בעדינות ככל האפשר, אם יש צורך בהסרה ידנית.
    הערה: לאחר הלידה, מיילדות או ניאונטולוגים צריכים להעביר את שליית TAPS לקופסת פלסטיק ולאחר מכן למעבדה.
  2. כאשר התינוק הראשון נולד, השתמש במהדק אחד כדי להדק את חבל הטבור כדי לסמן את סדר הלידה כראשון. כאשר התינוק השני נולד, השתמש בשני מהדקים כדי להדק את חבל הטבור כדי לסמן את סדר הלידה כשני.
  3. יש לבחון את השליה מבחינה מקרוסקופית, כולל שלמות השליה, סוגי החדרות חבל הטבור, מספר כלי הטבור ובדיקה גסה של הקרום המחלק כדי לאשר את הכוריוניות. אסוף את הממברנה הבין-תאומה לאבחון פתולוגי של מונוכוריוניות. קוטר השליות של TAPS תלוי בגיל ההריון.
    הערה: יש לבצע בדיקה תוך שבוע לאחר הלידה כדי למנוע היווצרות קרישי דם דביקים בצד האם.
  4. שומרים את השליה בקירור (1-4 מעלות צלזיוס) בקופסת פלסטיק יבשה עד לבדיקה, במידת הצורך.

2. הכנת הצד האימהי השליה

  1. חתוך את קרום מי השפיר לאורך קצה השליה בעזרת מספריים. שימו לב לכלי הדם על הממברנה ואם קיימת החדרת חבל הטבור כדי למנוע זרימת דם ממסת השליה.
    הערה: בהחדרת חבל הטבור, כלי הדם מחבל הטבור עוברים אל פני קרום מי השפיר למרחק מה לפני שהם נצמדים למסת השליה. אם חותכים את כלי הדם ה"עירומים", הדם ממסת השליה עלול לזרום החוצה ולעשות בלגן.
  2. הסר קרישי דם בזהירות כדי למנוע נזק לאונות השליה.
  3. ארגן את אונות השליה בצד האימהי כדי לחסל את הפער בין האונות. לשליה יש בדרך כלל כ-15 אונות וניתן לזהות אותן בצד האימהי.

3. הכנה לתיעוד

  1. הניחו את השליה על לוח פלסטיק כשהצד האימהי פונה כלפי מעלה.
  2. חשוף את הצד האימהי של השליה לאור (פיזור אחיד באמצעות שתי מנורות זהות בצד שמאל וימין). השתמש במנורות שיש להן פונקציה להתאמת עוצמת האור.
  3. כדי להפחית את ההשתקפות, צלם תמונות דיגיטליות עם מצלמה (טבלת חומרים) בתנאי תאורה קלים והימנע מחשיפה ישירה למקור האור.
  4. צלם תמונות בניצב לצד האימהי של השליה.

4. מדידה ממוחשבת באמצעות ImageJ

  1. פתח את ImageJ במחשב על ידי לחיצה על סמל התוכנה.
  2. לחץ על "קובץ", ואז על "פתח" כדי לפתוח את תמונת השליה. לאחר פתיחת התמונה הנדרשת, לחץ על "תמונה" | "צבע", ולאחר מכן "כלי ערוצים" כדי לבחור את "צבע" מרשימת השחרורים.
    הערה: התוכנה יכולה לזהות באופן אוטומטי את צבע האובייקט הנמדד. השליה אדומה. בתוכנה, לאחר לחיצה על "צבע", תמונת השליה תומר אוטומטית לערוץ ספקטרום אדום.
  3. לחץ על "בחירות ביד חופשית" כדי לעצב בהתאמה את החלק הפלטורי והחיוור של התאומים הפוליציטמיים והאנמיים באמצעות בדיקה ויזואלית של עוצמת צבע שונה של הצד האימהי של השליה.
  4. לחץ על "נתח" | "היסטוגרמה". השג את ההיסטוגרמה של עוצמת הצבע לאחר בחירת האזור הצלע או האזור החיוור, בהתאמה. המצב המוצג בהיסטוגרמת העוצמה מייצג את הצבע הנוכח ביותר באזור השליה שנבחר.
  5. חשב את יחס הפרש הצבעים על ידי חלוקת מצב עוצמת הצבע של התאום האנמי במצב עוצמת הצבע של התאום הפוליציטמי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בדיקת שליה מספקת מידע רב ערך לאבחון TAPS. שליות TAPS מאופיינות בנוכחות של מעט אנסטומוזות וסקולריות קטנות1 (איור 1, איור 2). תכונה זו של שליית TAPS קשורה לפתוגנזה של TAPS ומהווה קריטריון אבחון לאחר הלידה. בדומה לצבע היילודים בלידה, חלק השליה של התאום המקבל ב-TAPS הוא בדרך כלל כהה ופלטורי, וחלק השליה של התאום התורם חיוור ואנמי (איור 3).

התוצאות מראות כי מדידת הבדלי הצבע בין שתי טריטו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

נקודות מפתח להשגת בדיקה אופטימלית על סמך הניסיון שלנו כוללות: 1) מתן השליה בעדינות ככל האפשר כדי למנוע נזק, במיוחד כאשר מצוין הסרה ידנית; 2) בדיקת שליית MC זמן קצר לאחר הלידה כדי למנוע היווצרות קרישי דבק (רצוי תוך מספר ימים); 3) הסרה עדינה של כל קרישי הדם, הימנעות מנזק לאונות השליה; 4) חשיפת הצד האימהי של שליית MC לתנאי אור אחידים ומזעור השתקפות האור; ו-5) צילום תמונות של הצד האימהי לפני הזרקת צבע של הצד העוברי, ולאחר מכן כימות יחס הפרש הצבעים באמצעות ImageJ. בפרוטוקול זה, נעשה שימוש ב-I...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה מומן על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מספר מענק: 81801465), פרויקט סנמינג לרפואה בשנג'ן (מספר מענק: SZSM201512012) ותוכנית המחקר והפיתוח הלאומית של סין (מספר מענק: 2018YFC1002900).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מזרקים 20 מ"לBD Plastipak300613
צבע צבעRoyal Talens Schoolverf36716010 (כחול); 36715010 (ירוק); 36712350 (צהוב); 36713570 (ורוד)
מצלמה דיגיטליתCanon Inc.ixus 125 hs
ImageJNational Institute of HealthFor Windows ImageJ מצורף ל-64 סיביות Java 1.8.0_112
צנתרי טבורVygon1270.08 (8 F)
1270.08 (5 F)
1270.04 (4 F)
1270.03 (3.5 F)
1270.02 (2.5 F)

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lopriore, E., et al. Twin anemia-polycythemia sequence in two monochorionic twin pairs without oligo-polyhydramnios sequence. Placenta. 28 (1), 47-51 (2007).
  2. Zhao, D., et al. Placental share and hemoglobin level in relation to birth weight in twin anemia-polycythemia sequence. Placenta. 35 (12), 1070-1074 (2014).
  3. Lopriore, E., et al. Assessment of feto-fetal transfusion flow through placental arterio-venous anastomoses in a unique case of twin-to-twin transfusion syndrome. Placenta. 28 (2-3), 209-211 (2007).
  4. Lopriore, E., et al. Quantification of feto-fetal transfusion rate through a single placental arterio-venous anastomosis in a monochorionic twin pregnancy. Placenta. 30 (3), 223-225 (2009).
  5. Tollenaar, L. S. A., et al. Improved prediction of twin anemia-polycythemia sequence by delta middle cerebral artery peak systolic velocity: new antenatal classification system. Ultrasound in Obstetrics and Gynecology. 53 (6), 788-793 (2019).
  6. Tollenaar, L. S., et al. Color Difference in Placentas with Twin Anemia-Polycythemia Sequence: An Additional Diagnostic Criterion. Fetal Diagnosis and Therapy. 40 (2), 123-127 (2016).
  7. Zhao, D. P., et al. Prevalence, size, number and localization of vascular anastomoses in monochorionic placentas. Placenta. 34 (7), 589-593 (2013).
  8. De Paepe, M. E., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations. Pediatric and Developmental Pathology. 5 (1), 37-44 (2002).
  9. Lewi, L., et al. Placental sharing, birthweight discordance, and vascular anastomoses in monochorionic diamniotic twin placentas. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 197 (6), 581-588 (2007).
  10. Robertson, E. G., Neer, K. J. Placental injection studies in twin gestation. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 147 (2), 170-174 (1983).
  11. Lewi, L., et al. The outcome of monochorionic diamniotic twin gestations in the era of invasive fetal therapy: a prospective cohort study. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 199 (5), (2008).
  12. Slaghekke, F., et al. Fetoscopic laser coagulation of the vascular equator versus selective coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: an open-label randomised controlled trial. Lancet. 383 (9935), 2144-2151 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

ImageJTAPS
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים