פרוטוקול מתואר לשימוש בפחמן דו-חמצני בגז טבעי של גז טבעי כדי לטפח מיקרו-אצות בבריכות פתוחות של מסלולי מרוצים. הזרקת גז Flue נשלטת באמצעות חיישן pH, וצמיחת מיקרו-אצות מנוטרת באמצעות מדידות בזמן אמת של צפיפות אופטית.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
פרוטוקול מתואר לשימוש בפחמן דו-חמצני בגז טבעי של גז טבעי כדי לטפח מיקרו-אצות בבריכות פתוחות של מסלולי מרוצים. הזרקת גז Flue נשלטת באמצעות חיישן pH, וצמיחת מיקרו-אצות מנוטרת באמצעות מדידות בזמן אמת של צפיפות אופטית.
בארצות הברית, 35% מכלל פליטות הפחמן הדו-חמצני (CO2) מגיעות מתעשיית החשמל, ש-30% מהן מייצגות ייצור חשמל בגז טבעי. Microalgae יכול biofix CO2 10 עד 15 פעמים מהר יותר מאשר צמחים ולהמיר ביומסה של אצות למוצרים מעניינים, כגון דלקים ביולוגיים. לפיכך, מחקר זה מציג פרוטוקול המדגים את הסינרגיות הפוטנציאליות של גידול מיקרו-אצות עם תחנת כוח בגז טבעי הממוקמת בדרום מערב ארצות הברית באקלים חם וצחיח למחצה. טכנולוגיות חדישות משמשות להגברת לכידת הפחמן וניצולו באמצעות מין האצות הירוק Chlorella sorokiniana, אשר ניתן לעבד אותו עוד יותר לדלק ביולוגי. אנו מתארים פרוטוקול הכולל בריכת מסלול מרוצים פתוחה חצי אוטומטית ודנים בתוצאות הביצועים שלה כאשר היא נוסתה בתחנת הכוח החשמלית טוסון, בטוסון, אריזונה. גז פלואו שימש כמקור הפחמן העיקרי לשליטה ב-pH, וכלורלה סורוקיניאנה טופחה. מדיום אופטימלי שימש לגידול האצות. כמות ה- CO2 שנוספה למערכת כפונקציה של זמן הייתה במעקב צמוד. בנוסף, גורמים פיזיקוכימיים אחרים המשפיעים על קצב גדילת האצות, תפוקת הביומסה וקיבוע הפחמן היו מנוטרים, כולל צפיפות אופטית, חמצן מומס (DO), מוליכות חשמלית (EC) וטמפרטורות אוויר ובריכות. התוצאות מצביעות על כך שניתן להשיג תפוקת מיקרו-אצות של עד 0.385 גרם/ליטר במשקל יבש ללא אפר, עם תכולת שומנים של 24%. מינוף הזדמנויות סינרגטיות בין פולטי CO2 לחקלאים אצות יכול לספק את המשאבים הדרושים להגברת לכידת הפחמן תוך תמיכה בייצור בר-קיימא של דלקים ביולוגיים של אצות ומוצרים ביולוגיים.
ההתחממות הגלובלית היא אחת הסוגיות הסביבתיות החשובות ביותר שהעולם מתמודד איתן כיום1. מחקרים מצביעים על כך שהגורם העיקרי הוא העלייה בפליטת גזי החממה, בעיקר CO2, באטמוספרה עקב פעילות אנושית 2,3,4,5,6,7. בארה"ב, הצפיפות הגדולה ביותר של פליטות CO2 מקורה בעיקר בשריפת דלקי מאובנים במגזר האנרגיה, במיוחד תחנות ייצור חשמל 3,7,8,9. לפיכך, טכנולוגיות לכידה וניצול פחמן (CCU) התגלו כאחת האסטרטגיות העיקריות להפחתת פליטות גזי חממה 2,7,10. אלה כוללים מערכות ביולוגיות המשתמשות באור השמש כדי להמיר CO2 ומים באמצעות פוטוסינתזה, בנוכחות חומרי מזון, לביומסה. השימוש במיקרו-אצות הוצע בשל קצב הצמיחה המהיר, יכולת קיבוע CO2 גבוהה וכושר ייצור גבוה. בנוסף, למיקרו-אצות יש פוטנציאל ביו-אנרגיה רחב מכיוון שניתן להמיר את הביומסה למוצרים בעלי עניין, כגון דלקים ביולוגיים שיכולים להחליף דלקי מאובנים 7,9,10,11,12.
מיקרו-אצות יכולות לגדול ולהשיג המרה ביולוגית במגוון מערכות גידול או כורים, כולל בריכות מסלול מרוצים פתוחות ופוטו-ביוריאקטורים סגורים 13,14,15,16,17,18,19. חוקרים חקרו את היתרונות והמגבלות הקובעים את הצלחתו של המעבד הביולוגי בשתי מערכות הטיפוח, בתנאים פנימיים או חיצוניים 5,6,16,20,21,22,23,24,25 . בריכות מרוצים פתוחות הן מערכות הטיפוח הנפוצות ביותר ללכידת פחמן ולניצולו במצבים שבהם ניתן להפיץ גז פלואור ישירות מהערימה. סוג זה של מערכת טיפוח הוא זול יחסית, קל להגדיל אותו, יש לו עלויות אנרגיה נמוכות, ויש לו דרישות אנרגיה נמוכות לערבוב. בנוסף, ניתן למקם בקלות מערכות אלה בשיתוף פעולה עם תחנת הכוח כדי להפוך את תהליך ה- CCU ליעיל יותר. עם זאת, ישנם כמה חסרונות שיש לקחת בחשבון, כגון המגבלה בהעברת מסת גז /נוזל CO2. למרות שישנן מגבלות, בריכות מסלול מרוצים פתוחות הוצעו כמערכת המתאימה ביותר לייצור דלק ביולוגי מיקרואלגלי חיצוני 5,9,11,16,20.
במאמר זה נפרט שיטה לגידול מיקרו-אצות בבריכות מרוצים פתוחות המשלבת לכידת פחמן מגז הפלואו של תחנת כוח בגז טבעי. השיטה מורכבת ממערכת חצי אוטומטית השולטת בהזרקת גז חליל על בסיס pH התרבית; המערכת מנטרת ומתעדת את מצב תרבית כלורלה סורוקיניאנה בזמן אמת באמצעות צפיפות אופטית, חמצן מומס (DO), מוליכות חשמלית (EC) וחיישני טמפרטורת אוויר ובריכה. ביומסה של אצות ונתוני הזרקת גז פלואור נאספים על ידי אוגר נתונים כל 10 דקות במתקן החשמל של טוסון. תחזוקת זני אצות, הרחבה, מדידות בקרת איכות ואפיון ביומסה (למשל, מתאם בין צפיפות אופטית, g/L ותכולת שומנים) מבוצעים במעבדה באוניברסיטת אריזונה. פרוטוקול קודם התווה שיטה לאופטימיזציה של הגדרות גזי פלואור כדי לקדם צמיחת מיקרו-אצות בפוטו-ביוריאקטורים באמצעות סימולציה ממוחשבת26. הפרוטוקול המוצג כאן הוא ייחודי בכך שהוא משתמש בבריכות מסלול מרוצים פתוחות ומתוכנן להיות מיושם באתר בתחנת כוח בגז טבעי על מנת לעשות שימוש ישיר בגז הפלואור המופק. בנוסף, מדידות צפיפות אופטית בזמן אמת הן חלק מהפרוטוקול. המערכת כמתואר מותאמת לאקלים חם למחצה (Köppen BSh), המציג משקעים נמוכים, שונות משמעותית במשקעים משנה לשנה, לחות יחסית נמוכה, שיעורי אידוי גבוהים, שמיים בהירים וקרינת שמש אינטנסיבית27.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
1. מערכת צמיחה: הגדרות בריכת מרוצים פתוחה חיצונית
2. מערכת בקרת pH
3. בחירת אצות ותחזוקת זן (אור וטמפרטורה)
הערה: האצות הירוקות Chlorella sorokiniana DOE 1412 בודדה על ידי יורגן פול (ברוקלין קולג')30,31 ונבחרה על ידי הברית הלאומית לדלקים ביולוגיים מתקדמים וביו-תוצרים (NAABB); בחירתו התבססה על מחקרי אפיון הזן הקודמים שבוצעו על ידי Huesemann et al.32,33 . המחקר שלהם בנוגע לסינון אצות, פרודוקטיביות ביומסה וחקלאות מדומה אקלים (למשל, טמפרטורה ואור) באזור הדרום-מערבי בעת שימוש בבריכות מרוצים פתוחות חיצוניות, עדכן את השיטה המשמשת בפרויקט זה.
4. הרחבה ובקרת איכות
5. הכנה בינונית מרוכזת לגידול בריכה פתוחה
6. חיסון בריכת מרוצים פתוחה חיצונית
7. ניסוי גדילת אצווה בתחנת הייצור
8. דגימה וניטור בדידים
9. קצירת אצות וסיבוב יבולים
10. ניהול נתונים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות ניסיוניות קודמות מהמעבדה שלנו מצביעות על כך שגידול מיקרו-אצות באמצעות בריכת מסלול מרוצים פתוחה אוטומטית למחצה יכול להיות משולב עם תהליכי לכידת פחמן. כדי להבין טוב יותר את הסינרגיה בין שני התהליכים האלה (איור 2), פיתחנו פרוטוקול והתאמנו אותו לטיפוח מין האצות הירוקות Chlorella sorokiniana בתנאים חיצוניים באקלים חם למחצה. גז טבעי גז פלואור הושג מתחנת ייצור חשמל תעשייתית. פרוטוקול זה משתמש בטכנולוגיות שונות כדי להעריך את הפרודוקטיביות של ביומסה של אצות: (1) גדילת אצות באמצעות חיי...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
במחקר זה אנו מדגימים כי צימוד סינרגטי של לכידת פחמן בגז פלואור וטיפוח מיקרו-אצות אפשרי באקלים צחיח למחצה חם. הפרוטוקול הניסיוני של מערכת בריכת מסלולי המרוצים האוטומטית למחצה משלב טכנולוגיה חדישה לניטור פרמטרים רלוונטיים בזמן אמת המתאמים לצמיחת אצות בעת שימוש בגז פלואור כמקור פחמן. הפרוטוקול המוצע נועד להפחית את אי הוודאות בגידול אצות, שהוא אחד החסרונות העיקריים של בריכות מסלול המרוצים 20,21,36. מניסיוננו, השלבים הקריטיים ביותר ש...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה באמצעות פרויקט הבדיקה האזורי של אצות, משרד האנרגיה האמריקאי DE-EE0006269. אנו מודים גם לאסטבן חימנז, ג'סיקה פיבלס, פרנסיסקו אצ'דו, חוזה סיסנרוס, צוות RAFT, מארק מנספילד, צוות תחנת הכוח UA וצוות תחנת הכוח TEP על כל עזרתם.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מנוע מהירות מתכוונן (מערכת גלגל הנעה) | Leeson | 174307 | שיעור 174307.00, סוג: מתח SCR; אמפר: 10 |
| סירות משקל אלומיניום | פישר סיינטיפיק | 08-732-102 | פישרברנד אלומיניום כלי שקילה |
| אמוניום (III) (NH?)? [Fe(C?H? או?)?] | פישר סיינטיפיק | 1185 - 57 - 5 | הכנה בינונית. אמוניום ברזל (III) ציטראט |
| אמוניום פוספט | סיגמא-אולדריץ' | 7722-76-1 | כימיקל זה משמש למדיום האופטימלי |
| מלח נתרן אמפיצילין | סיגמא אולדריץ' | A9518-5G | כימיקל זה משמש למניעת זיהום אצות |
| Autoclave | Amerex Instrument Inc | Hirayama HA300MII | |
| Bacto agar | Fisher Scientific | BP1423500 | Fisher BioReagents |
| אקונומיקה | אקונומיקה קוטל חיידקים | קלורוקס | |
| (H3BO3) | Fisher Scientific | 10043-35-3 | יסודות קורט: חומצה בורית |
| סידן כלוריד דיהידראט (CaCl2*2H2O) | Sigma-Aldrich | 10035-04-8 | תכשיר בינוני. סידן כלוריד דיהידראט |
| Carboys (20 ליטר) | Nalgene - Thermo Fisher Scientific | 2250-0050PK | פוליפרופילן Carboy עם ידיות |
| צנטריפוגה | Beckman Coulter, Inc | J2-21 | |
| Chloroform | Sigma-Aldrich | 67-66-3 | כימיקל זה משמש למיצוי שומנים |
| Citraplex 20% Iron | Loveland Products | SDS מס' 1000595582 -17-LPI | https://www.fbn.com/direct/product/Citraplex-20-Iron#product_info |
| קובלט (II) חנקת הקסהידרט (Co(NO3)2*6H2O) | Sigma-Aldrich | 10026-22-9 | יסודות קורט: קובלט (II) מדחס הקסהידרט חנקתי |
| Makita | MAC700 | ציוד זה משמש למערכת הזרקת CO2 | |
| שסתום בקרה | Sierra Instruments | SmartTrak 100 | פריט זה צריך להיות מותאם אישית ליישום שלך. במקרה שלנו, נעשה בו שימוש בתערובת של 5% CO2 ו-95% אוויר. |
| נחושת (II) סולפט פנטהידראט (CuSO4*5H2O) | סיגמא-אולדריץ' | 7758-99-8 | יסודות קורט: נחושת (II) סולפט פנטהידראט |
| לוגר נתונים: יחידת קמפבל CR3000 | Scientific Campbell | CR3000 | ציוד זה משמש לשליטה בכל המערכת, המנוע וההקלטה של הנתונים |
| תמיסת חמצן מומס | Campbell Scientific | 14055 | תמיסת אלקטרוליט חמצן מומס DO6002 - פריט מס'. 211085 |
| בדיקת חמצן מומס | Sensorex | ? | חיישן חמצן מומס DO6400/T עם תקשורת דיגיטלית |
| פתרון כיול מוליכות אלקטרו-מוליכות | Ricca Chemical Company | 2245 - 32 (R2245000-1A) | תקן מוליכות, 5000 uS/cm ב-25C (2620 עמודים לדקה TDS כ-NaCl) |
| חיישן בדיקה מוליכות אלקטרו-מוליכות | Hanna Instruments | HI3003/D | בדיקת מוליכות זרימה דרך - חיישן NTC, מחבר DIN, כבל 3 מטר |
| חומצה אתילנדיאמינטטראצטית מלח דיסודיום דיהידראט (Na2EDTA*2H2O) | סיגמא-אולדריץ' | 6381-92-6 | הכנה בינונית: חומצה אתילנדיאמינטטראצטית מלח דיסודיום מסנני דיהידראט |
| פישר סיינטיפיק | 09-874-48 | ווטמן מסנני מיקרופייבר זכוכית ללא קלסר | |
| צלוחיות פישר | סיינטיפיק | 09-552-40 | פיירקס פרנבך צלוחיות |
| תנור | Hogentogler | דגם: F6020C-80 | סינטיפיק תרמולין F6020C - מייבש |
| זכוכית תנור מופל 80VWR International LLC | 75871-430 | סוג 150, 140 מ"מ קוטר | |
| משפך זכוכית | פישר סיינטיפיק | FB6005865 | פישרברנד משפכים ארוכי גזע זכוכית לשימוש חוזר |
| מכסה מנוע זרימה למינארי | פישר המילטון Safeair Safeair | Mouse נירוסטה Safeair hume hood | |
| מגנזיום סולפט heptahydrate (MgSO4*7H2O) | Fisher Scientific | 10034 - 99 - 8 | בינוני הכנה: מגנזיום סולפט heptahydrate |
| מתנול | סיגמא-אולדריץ' | 67-56-1 | מיצוי שומנים ממס |
| מפזר מיקרו בועות | Pentair Aquatic Eco-Systems | 1PMBD075 | ציוד זה משמש למערכת הזרקת CO2 |
| מיקרו-אצות: כלורלה סורוקיניאנה | NAABB | DOE 1412 | |
| מיקרוסקופ | קארל זייס | ||
| 4291097 עוזר מיקרוגל מיצוי | MARS, CEM Corportation | CEM Mars 5 Xtraction 230/60 מערכת תגובה מואצת במיקרוגל. דגם: 907601 | |
| MnCl2*4H2O | Sigma-Aldrich | 13446-34-9 | מרגמות מנגן (II) כלוריד טטרהידראט |
| פישר סיינטיפיק | FB961B | פישרברנד מרגמות חרסינה | |
| מאייד חנקן | אורגנומציה | N-EVAP 112 אידוי חנקן (מערכת חימום OA-SYS) | |
| תנור | VWR International LLC | 89511-410 | תנור אוויר מאולץ |
| ההנעה | מדחף ציר אופקי בעל 8 להבים. זה מגיע בדרך כלל כחלק מכור גלגל ההנעה. | ||
| מנוע גלגל ההנעה | Leeson | M1135042.00 | Leeson, דגם: CM34025Nz10C; 1/4 כ"ס; וולט 90; FR 34; 62 סל"ד. |
| Pestles | Fisher Scientific | FB961M | עלי חרסינה פישרברנד |
| משדר pH ו-EC משדר | Hanna Instruments | HI98143 | Hanna Instruments HI98143-04 pH ומשדר EC עם משדר גלווני מבודד 0-4V. |
| פתרונות כיול pH | Fisher Scientific | 13-643-003 | Thermo Scientific Orion pH Buffer Bottles |
| חיישן בדיקת pH Hanna | Instruments | HI1006-2005 | Hanna Instruments HI1006-2005 אלקטרודת pH טפלון עם סיכה תואמת 5 מ'. |
| טיפים לפיפט | פישר סיינטיפיק | 1111-2821 | 1000 ul טיפ אחד בוגר קצה כחול במתלים |
| פיפטר | פישר סיינטיפיק | 13-690-032 | Eppendorf Reserch בתוספת פיפטות נפח מתכווננות משתנה: קובטות פלסטיק חד ערוציות |
| פישר 14377017 מדעי | BrandTech מותג קובטות פלסטיק | ||
| צלחות | פישר סיינטיפיק | 08-757-100D | קורנינג פלקון בקטריולוגי צלחות פטרי עם מכסה |
| אשלג | כימיקל זה משמש להכנה הבינונית האופטימלית. הוא נקנה בחברת דשנים מקומית | ||
| אשלגן פוספט דו-בסיסי (K2HPO4) | Sigma-Aldrich | 7758 -11 - 4 | הכנה בינונית: אשלגן פוספט דו-בסיסי |
| Pyrex בקבוקי אחסון מדיה לשימוש חוזר | פישר סיינטיפיק | 06-414-2A | בקבוקי 1 ליטר ו-2 ליטר - PYREX GL45 מכסי בורג עם אטמי תקע |
| בריכת | לקנות ציוד דומה בכתובת | ||
| https://microbioengineering.com/products חיישן צפיפות אופטית בזמן אמת | אוניברסיטת אריזונה | ציוד זה תוכנן ונבנה על ידי חבר בקבוצה | |
| כבל RS232 | Sabrent | Sabrent USB 2.0 לכבל ממיר DB-9 RS-232 טורי (9 פינים), ערכת שבבים פורה, Hexnuts, [Windows 10/8.1/8/7/VISTA/XP, Mac OS X 10.6 ומעלה] 2.5 רגל (CB-DB9P) | |
| שולחן | שייקרתסיסה של אצות 150 סל"ד | ||
| נתרן פחמתי (Na2CO3) | סיגמא-אולדריץ' | 497-19-8 | נתרן פחמתי |
| נתרן מוליבדט דיהידראט (Na2MoO4*2H2O) | סיגמא-אולדריץ' | 10102-40-6 | הכנה בינונית: נתרן מוליבדט דיהידראט |
| נתרן חנקתי (NaNO3) | סיגמא-אולדריץ' | 7631-99-4 | הכנה בינונית: נתרן חנקתי |
| ספקטופוטומטר | פישר סיינטיפיק חברה | 14-385-400 | Thermo Fisher Scientific - 10S UV-Vis GENESTYS ספקטרופוטומטר מחזיק תא Longpath גלילי; מסיר ייחוס פנימי, מנורת פלאש קסנון; פוטודיודה כפולה מסיליקון; 240V, 50 עד 60Hz נבחר אוטומטית. |
| מבחנות | פישר סיינטיפיק | 14-961-27 | פישרברנד צינורות זכוכית בורוסיליקט חד פעמיים עם קצה רגיל (10 מ"ל) |
| צמדים תרמיים מסוג K | אומגה | KMQXL-125G-6 | |
| אוריאה | סיגמא-אולדריץ' | 2067-80-3 | |
| מערכת סינון ואקום | פישר סיינטיפיק | XX1514700 | מחזיק מסנן ואקום מזכוכית MilliporeSigma, 47 מ"מ. המערכת כוללת: חיבור בקבוק זכוכית טחון, תמיכת מסנן זכוכית גסה ובקבוק |
| משאבת ואקום | Grainger | Marathon מוגן תרמית G588DX - MOD 5KH36KNA510X. HP 1/4. סל"ד 1725/1425 | |
| אבץ גופרתי הפטהידראט (ZnSO4*7H2O) | סיגמא-אולדריץ' | 7446-20-0 | אבץ גופרתי הפטהידראט |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.