בידוד פונקציונלי של יחידות מנוע יחיד של שריר גסטרו-קסטרונומיוס חולדה

סיכום

שיטה זו מאפשרת הקלטה של הכוח של התכווצויות עוויתות וטלטוניות ופוטנציאל פעולה בשלושה סוגים של יחידות מנוע בשריר גסטרוקנמיוס חולדה. הבידוד הפונקציונלי של יחידה מוטורית אחת מושרה על ידי גירוי חשמלי של האקסון.

תקציר

עבודה זו מתארת בידוד פונקציונלי של יחידות מנוע (MUs), שיטה אלקטרופיזיולוגית סטנדרטית לקביעת מאפיינים של יחידות מנוע בשרירים האחוריים (כגון גסטרוקנמיוס מדיאלי, סוליה, או plantaris שריר) בחולדות ניסיוניות. מרכיב חיוני בשיטה הוא יישום של גירויים חשמליים מועברים לאקסון מנוע מבודד מהשורש הפתחי. הגירויים עשויים להימסר במרווחי זמן בין-פולסים קבועים או משתנים. שיטה זו מתאימה לניסויים בבעלי חיים בשלבי בגרות שונים (צעירים, מבוגרים או מבוגרים). יתר על כן, פרוטוקול זה יכול לשמש בניסויים ללמוד השתנות ו פלסטיות של יחידות מנוע ים עורר על ידי קשת גדולה של התערבויות. התוצאות של ניסויים אלה עשויים גם להגדיל את הידע הבסיסי בפיזיולוגיה שרירים ולהיות מתורגם ליישומים מעשיים. הליך זה מתמקד בהכנה הכירורגית להקלטה וגירוי של MUs, עם דגש על הצעדים הדרושים כדי להשיג יציבות הכנה ושחזור של תוצאות.

מבוא

יחידות מנוע (MUs) הן היחידות הפונקציונליות הקטנות ביותר של שרירי השלד. לכן, הבנת הפונקציה שלהם, פלסטיות ומאפיינים כיווץ, כמו גם את המנגנונים של ויסות הכוח שלהם, הוא חיוני להתקדמות בפיזיולוגיה שריר. המאפיינים ההתכווצות הבסיסיים של MUs ואת הפרופורציות של הסוגים הפיזיולוגיים שלהם תועדו עבור שרירים רבים, בעיקר השרירים האחוריים בבעלי חיים ניסיוניים. עם זאת, הן הפלסטיות של מאפייני MU ואת המנגנונים של ויסות כוח MU עדיין לא מובן במלואו.

העיקרון של השיטה המתוארת הוא השפלה נרחבת של שרירי הבטן למעט אחד נחקר כריתת למינקטום על חוליות המותניים על מנת להכין rootlets גחמני דק, כל אחד המכיל אחד "פונקציונלי" axon מנוע, מגורה חשמלית כדי להקליט את הכוח ואת פוטנציאל הפעולה של MU. באמצעות הטכניקה המתוארת במאמר זה, ניתן לבודד יותר ממחצית ההונו-ם של שריר גסטרו-קסטרונומיוס מדיאלי בניסוי מוצלח. גסטרוקנמיוס חולדה מדיאלי מורכב בממוצע 52 MUs (נקבות) או 57 MUs (זכרים) של שלושה סוגים פיזיולוגיים: S (איטי), FR (עמיד מהר) ו FF (ניתן לשומן מהיר)^1,2,ויש^להםתכונות התכווצות משתנה^3. עבור ניסויים השוואת ערכי ממוצע עבור MUs בקבוצות בקרה וניסיוני, בידוד והקלטה של 10-30 MUs עבור כל אחת מקבוצות אלה נחוצים. באופן קריטי, תותבי משתמשים בודדים עשויים להיות נגישים לגירוי לפרקי זמן העולים על שעה אחת. יתר על כן, מאז טכניקה זו מאפשרת להקליט הן כוח MU ופוטנציאל פעולה, שיטה זו מתאימה ללימוד תופעות הקשורות לייצור כוח, הערכת ההשפעה של עייפות, והתבוננות ביחסים בין הכוח ופוטנציאל פעולה.

מחקרים קודמים אישרו כי MU מאפייני התכווצות הם פלסטיק, עשוי להיות מאופנן על ידי התערבויות רבות. ניסויים בטכניקה המתוארת כאן בוצעו על חולדה medial gastrocnemius⁴ או אחרים שרירי אחורי של^{חולדה 5},^{6, כמו גם} על שרירי חתול 7 ,^בשיטהדומה של בידוד MU יחיד. סדרה נוספת של ניסויים באמצעות רכבות של גירויים נמסר במרווחי זמן בין-פולסים משתנים סיפק תצפיות לגבי תהליכי בקרה מוטורית, ואת התוצאות באופן כללי להפנות את תשומת הלב להיסטוריה של גירוי, כולל השפעות ניכרות של שינוי בקנה מידה הזמן של אפילו גירוי אחד, חיוני^{לייצור כוח 8,9}.

ניתן גם ללמוד שיטות דרכים חלופיות באמצעות שיטות חלופיות. ראשית, שיטה אחת היא גירוי ישיר של motoneurons. בורק השתמש בגירוי תאי של motoneurons בחתולים גסטרוקנמיוס ו סוליות עם מיקרואלקטרודות זכוכית המשמשות במקביל כדי לקבוע את המאפיינים האלקטרופיזיולוגיים של^{נוירונים אלה 1,10}. שיטות אחרות הוצעו ללמוד MUs בשרירים אנושיים, אשר דורשים התערבות נמוכה באופן משמעותי. עבור כל שיטות אלה, אלקטרודות מגרה והקלטות מוכנסים לתוך השריר או העצב, ואת הכוח נרשם מן האצבע או מן הרגל. הראשונה של שיטות אלה שימשה כדי ללמוד MUs בשריר הבין-תאי גב הראשון. עבור שריר זה, מתכווץ עם כוח נמוך, באלקטרומיוגרמה נרשם עם אלקטרודה מחט מוכנס לתוך השריר את פוטנציאל הפעולה של יחידה מוטורית פעילה אחת בלבד זוהו. לאחר מכן הרסיסים של כוח שריר נרשם במקביל ובעקבות כל פוטנציאל פעולה היו בממוצע (ספייק מופעל בממוצע). שיטה זו מאפשרת חילוץ של הכוח של יחידה מוטורית אחת משריר כוח השריר¹¹. עם זאת, החולשה המתודולוגית של הליך זה היא כי אין כוח עווית אחד אלא שברים של התכווצויות טטינית היו בממוצע. ניתן גם ללמוד שיטות קוסמות אנושיות בשיטה השנייה של גירוי חשמלי תוך שרירי באמצעות אלקטרודה^{המוכנסת לשריר 12}, המעוררת שבר של עץ סקסוני, המוביל להפעלה של יחידה מוטורית אחת. השיטה השלישית היא גירוי זעיר עם אלקטרודה מוכנסת לתוך העצב. כאשר האלקטרודה מפעילה רק אקסון מנוע אחד בעצב, רק יחידת מנוע אחת חוזה^13. לשיטות האחרונות יש כמה מגבלות, כולל יציבות ואיכות ההקלטה, הגבלות אתיות וגישה לחומר הניסיוני. פרוטוקול זה נעשה שימוש נרחב בחתולים בשנות ה-70 וה-80^וה-14.

פרוטוקול

כל ההליכים צריכים להיות מאושרים על ידי ועדת האתיקה המקומית ולדבוק בהנחיות האיחוד האירופי בנושא טיפול בבעלי חיים, כמו גם בחוק הלאום להגנה על בעלי חיים.

הערה: כל נסיוה המעורב בהליך זה חייב להיות מאומן בהליכים כירורגיים בסיסיים וחייב לקבל רישיון תקף לביצוע ניסויים בבעלי חיים.

1. הרדמה

1. להרדים את העכברוש עם הזרקת תוך-אפרטונל של נתרן פנטוברביטל (מנה ראשונית של 60^{מ"ג-ק"ג -1).}
2. לאחר כ-5 דקות, בדקו את עומק ההרדמה על-ידי צביטת האוזן או ההתכה עם מרטוטים קהים. עבור לשלבים הבאים של הפרוטוקול רק כאשר לא נצפתה פעולת רפלקס.
3. במהלך הניתוח, לבדוק את פעולות רפלקס החיה כל 10-15 דקות ולהשלים הרדמה אם החיה מגיבה צביטה עם תנועה (בדרך כלל, 10 מ^{ג·ק"ג -1}·h^-1 נתרן פנטוברביטל, IP).

2. כירורגיה

1. הכן את החיה להליך הניתוח על ידי גילוח הפרווה מעל הגב השמאלי מהעקב עד הירך (החלק הראשון, בידוד שרירים ועצבים), האחורי הימני מהעקב עד הירך (החלק השני, אלקטרודה הקרקע), ואת הישבן מהזנב לחלקי בית החזה (החלק השלישי, כריתת למינקט). חיטוי אינו נחוץ בשל אופיו החריף של הניסוי.
   1. מניחים את העכברוש על בטנו על משטח חימום (37°C ± 1°C.
2. כריתת למינקט
   1. באמצעות מספריים חדות, לחתוך את העור לאורך עמוד השדרה מsacrum עד חוליות בית החזה.
   2. הפרד את העור מהשרירים הבסיסיים.
   3. באמצעות מספריים קצה בוטה, לחתוך את שריר longissimus משני צידי תיבות העצה ותהליכים ספיניים המותניים.
   4. זהה את חוליית S1 כמקטע הנמוך ביותר. באמצעות מספריים חדות קהות, גזור והסר את התהליכים הספיניים מ-L6 ל-L2. לאחר מכן, באמצעות rongeurs בסדר, להסיר את התהליכים הרוחביים L6-L2 ולבצע כריתת למינציה מעל L6 – L2 קטעים (תהליכים רוחביים הראשון, אז למינה, להתחיל עם קטע חוליות L6) כדי לחשוף את קטעי המותניים של חוט השדרה מכוסה על ידי מאטר דורה. היזהרו לא לחתוך את עצם העצם ואת L1 תהליך ספיני, אשר ישמש כמקום קיבעון עבור אי-תנועה של בעלי חיים.
   5. באמצעות מספריים חדות, לחתוך את חוט השדרה (שבר סיבתי שלה) ואת השורשים גב וגחוני ברמת קטע חוליות L2, בגבול העליון של כריתת למינקטום. מניחים חתיכות קטנות של קצף ג'ל מיובש כדי להפסיק לדמם. לאחר מכן, מניחים צמר גפן דק וספוג תמיסת מלח מעל מקטעי חוט השדרה החשופים.
3. בידוד של שריר גסטרו-קסטרונומיוס ומדיאלי ועצביו
   1. באמצעות מספריים חדים קהים, לעשות חתך אורכי בצד האחורי של האיבר האחורי השמאלי, מגיד אכילס עד הירך.
   2. אחז בעור בעזרת המכריחים והפרד את העור מהשרירים הבסיסיים משני צידי החתך.
   3. אתר את הפוסה popliteal בחלק האחורי של מפרק הברך, אשר מכוסה על ידי שריר femoris שרירי. באמצעות מספריים, לעשות חתך בין החלק הקדמי והחלק האחורי של השריר הזה.
   4. נעים כלפי מעלה, חותכים את שני ראשי שרירי הירך כל הדרך עד לירך כדי לחשוף את עצב הירך.
   5. באמצעות מרטפים קהים ומספריים, להפריד את החוץ מהראש המדל של שריר גסטרוקנמיוס ולחתוך את החדרה דיסטלית (גיד אכילס) של שריר גסטרוקנמיוס מדיאלי. לשמר את רסיס גיד אכילס זמן רב ככל האפשר על מנת להשתמש בו כדי להתחבר מתמר הכוח.
   6. זהה את העצב הגסטרו-קסטרונומי (MG) המדל. באמצעות המקציצות ומספריים, לחתוך את כל בטחונות הנותרים של עצב הירך, כולל בטחונות שרירי אחוריים ו semitendinosus. השאר את כלי הדם של האספקה לגסטרו-קונומיוס המדל שלם.
   7. להשחיל קשירה לא אלסטית דרך גיד אכילס ו לעשות שלושה קשרים.
   8. מניחים חתיכת צמר גפן ספוגה בתמיסת מלח מתחת לעצב ולשריר החשופים.
   9. באמצעות מכריחים משונן, לסגור את העור מעל האזור המופעל.
   10. באמצעות מספריים חדות, לעשות חתך 2 ס"מ בעור רקמת חיבור הבסיסית לאורך הצד הקדמי של האיבר האחורי השמאלי עבור השתקה עם מהדק מתכת (3.1.6.).

3. הכנה להקלטה וגירוי

1. עמוד חוליות קיבעון רגל וסידורי שרירים
   1. באמצעות מלחצי פלדה, לתקן את האיבר האחורי השמאלי על ידי לשים את המלחציים על השוקה.
   2. מניחים את החולדה במסגרת מתכווננת בהתאמה אישית (חוט נחושת מבודד, 1 מ"מ), משכו את מגני העור סביב כריתת ה למינקטור באמצעות ארבע ליגטורות ותפרו את העור למסגרת כדי ליצור בריכה לשמן פרפין (גודל של כ-50 מ"מ x 50 מ"מ) מעל חוט השדרה החשוף.
   3. באמצעות משקולת #55 מקציצות, להרים את מאטר דורה בצומת של חוט השדרה, לחתוך אותו caudally עד עצם העצם ולמשוך אותו.
   4. באמצעות מוט זכוכית קהה, שורשים נפרדים שמאלה וימין גב וגהוני ברמות רצופות, דואג לא לפגוע בהם.
   5. מלאו את הבריכה מעל חוט השדרה בשמן פרפין חם (37°C), המכסה את השורשים החשופים של גיחוך הגב.
   6. מניחים את החולדה על לוח האלומיניום בהזמנה אישית (אורך 260 מ"מ, רוחב 120 מ"מ, גובה 80 מ"מ) עם בריכה (אורך 135 מ"מ, רוחב 100 מ"מ, עומק 45 מ"מ) עבור האחוריים שלו המחוברים למערכת החימום בלולאה סגורה. הצלחת היא מקום שבו החיה תהיה משותקת והניסוי יבוצע.
   7. תקן את המלחציים על המוט האחורי השמאלי עם מוט המתכת כדי לשתק את ההינדימב.
   8. לתקן את עמוד החוליות על ידי הצבת מהדקי פלדה על עצם העצם ואת חוליית L1 כדי לשתק את גוף החי ולחסל את החפצים בהקלטות כוח הקשורות תנועות נשימה.
   9. חבר את שריר הגסטרו-קסטרונומיה השמאלי עם הקשירה הלא-אלסטית לתמר הכוח (עם תאימות של 50 μm/250 mN, טווח מדידה 0-1000 mN) דרך גיד אכילס.
   10. למלא את התא לאחוריים עם חם (37 ° C) שמן פרפין כדי לכסות את שריר גסטרוקנמיוס מדיאלי ולשמור על טמפרטורת השמן ב 37 ° C ± 1 ° C באמצעות בדיקת הטמפרטורה והמערכת האוטומטית.
2. מיקום אלקטרודות עבור פוטנציאל פעולה הקלטה וגירוי
   1. הכנס אלקטרודה חוט כסף דו קוטבית דרך החלק האמצעי של שריר גסטרו-קסטרונומיוס מדיאלי, ניצב לציר הארוך שלו. שמור על מרחק של כ-5 מ"מ בין שתי האלקטרודות הממוקמות לאורך ציר ארוך של השריר. אלקטרודות אלה ישמשו לתיעוד פוטנציאל פעולה של יחידה מוטורית (MUAPs). חבר את האלקטרודות למפרר הרעש הנמוך.
   2. למתוח את השריר המופעל למתח פסיבי של 100 mN, נשלט על ידי מתמר כוח. עבור חולדה גסטרו-קסטרונומיוס מתיחה זו MUs של שלושה סוגים לפתח את כוח עווית^{הגבוה ביותר 15}.
   3. באמצעות מספריים חדות, לעשות חתך 2 ס"מ בעור של האיבר האחורי הימני ולהכניס אלקטרודה חוט כסף כדי לשמש אלקטרודה התייחסות.
   4. מניחים ומסדרים לוח מתכת מבודד בהזמנה אישית (גודל 30 מ"מ x 13 מ"מ) מעל שורשי עמוד השדרה החשופים. לשים זוגות שמאליים של שורשים גחוניים ודום (L4, L5 ו L6) על הצלחת.
   5. מוסיפים תמיסת מלח לבריכה שנוצרה על ידי העור סביב כריתת ה למינקט. רמת תמיסת מלח צריכה להיות מתחת לצלחת המבודדת.
   6. מניחים חוט כסף מגרה אלקטרודה (שני חוטי כסף, 0.5 מ"מ קוטר, אורך 50 מ"מ) על שורשי עמוד השדרה החשופים, מניחים מוט חיובי 3 מ"מ מעל הצלחת בשמן, ואילו הקוטב השלילי בתמיסת מלח (נוסף לבריכה, מתחת לצלחת) ולהתחבר למגרה.

4. הקלטות יחידת מנוע

1. מגרה עם פולסים מלבניים חשמליים (משך 0.1 ms, משרעת עד 0.5 V), בחר את השורשים הפתחיים (L4, L5 ו- L6); גירוי שורש גחני מעורר התכווצות של השרירים ואילו אין השפעה כזו עבור שורשי גב. לחסל שורשי גב מהצלחת. עבור גסטרו-קסטרונומיוס המדל, רוב האקסונים נמצאים בשורש הגה-5 L5.
2. באמצעות זוג מקצות דומונט #55 ומשקפיים מגדילים, לפצל שורשי גחם L5 או L4 לתוך חבילות עדינות מאוד של אקסונים (לתפוס את הקצה החתוך של rootlet גחם עם שני מקציות ולקלף את השורשים בנפרד); למקם אחת מחבילות אלה על אלקטרודה חוט כסף ולעורר (0.1 ms פולסים מלבניים של משרעת עד 0.5 V) כדי להשיג פעילות של MU יחיד. תמיכה מוצקה (מוט מתכת) שימושית מאוד לטיפול בחבילות דקות של אקסונים, אשר יכול לשמש כתמיכה ביד לשימוש במרטים. שים לב גם שיש צורך במקור אור נוסף.
3. על ידי הגדלת עוצמת הגירוי בהדרגה, לזהות MU יחיד על בסיס הדמות "הכל או אף אחד" של התכווצות עווית וגירוי פוטנציאלי פעולה. בדוק בקפידה את הפעילות המעוררת בגירוי סביב הסף.
   1. כאשר יותר מMU אחד הוא מתכווץ בשריר למד והגדלת הרמה של הכוח, כמו גם הגדלת משרעת או שינוי צורה של פוטנציאל הפעולה גלויים, לחזור לשלב 4.2 ולחלק את החבילה של אקסונים שוב. שים לב כי ההתועבוסות החזקות ביותר ב- gastrocnemius חולדה מדיאלי יש כ 70 פעמים כוח עווית גדול יותר מאשר החלשים ביותר וכאשר MU חזק מאוד הוא עוויתות השני, MU חלש לא יכול להיות ברור. שים לב גם כי כמה MUs יש סיבי השריר שלהם ממוקם מתוך אזור ההקלטה של האלקטרודה והם אינם גלויים אלקטרומיוגרמה; במקרה כזה שינויים במשרעת הגירוי עשויים להשפיע על הכוח אך לא בפוטנציאל פעולה.
4. לעורר יחידה מוטורית עם פרוטוקול גירוי הכרחי למטרת ניסוי. לקבלת פרוטוקול גירוי בסיסי הדרוש לחישוב כל המאפיינים הבסיסיים של כיווץ יחידת מנוע ופוטנציאל פעולה, כלול את הפעולות הבאות.
   1. כלול 5 גירויים ב- 1 הרץ (5 עוויתות בודדות מוקלטות בממוצע; ממוצע הוא ביטול רעש, וזה חשוב במיוחד עבור MUs החלש ביותר).
   2. כלול סדרה של גירויים בתדרים 10, 20, 30, 40, 50, 60, 75, 100 ו- 150 הרץ עם משך של 500 ms (הקלטות אלה מאפשרות חישוב של קשרי תדר הכוח, הכוח הטטני המרבי ב- 150 הרץ, כמו גם את ה-sag ב- 20-40 הרץ).
   3. כלול את מבחן העייפות (tetani עורר על ידי רכבות של 14 גירויים בתדר 40 הרץ, חוזר בכל שנייה במשך 4 דקות).
   4. כלול מרווחי זמן של 10 שניות לפחות בין כל רכיבי הפרוטוקול לעיל.
   5. חזור על התהליך עם יחידות מנוע מבודדות רצופות.
5. לסיים את הניסוי ולהמתת סד החיה באמצעות ניהול תוך-אפרטוניאלי של מנה קטלנית של נתרן פנטוברביטל (180 מ"ג-ק"ג^-1).

5. מכשיר אלקטרוני

הערה: תוכנית המחשב המותאמת אישית שולטת בממריץ, ומספקת את האפשרות ליצור תבניות גירוי משתנות, כולל אלה שצוינו בשלב 4.4. התוכנית משתפת פעולה עם ממיר אנלוגי לדיגיטלי (לפחות 10 kHz עבור MUAP והקלטות כוח).

1. חבר את מגן ה-AC למחשב באמצעות הממיר האנלוגי-לדיגיטלי ובמקביל לאוסצילוסקופ.
2. חבר את מתמר הכוח למחשב באמצעות הממיר האנלוגי-לדיגיטלי ובמקביל לאוסצילוסקופ. השתמש מתמר כוח כדי לשלוט בכוח שריר פסיבי במהלך הניסוי. שים לב כי במהלך הניסוי, הכוח הפסיבי עשוי להקטין; לכן, יש צורך להגדיל את אורך השריר כדי לשמור על כוח שריר פסיבי קבוע.

תוצאות

ניתן לחשב פרמטרים של התכווצויות של יחידות מוטוריות ופוטנציאל פעולה על בסיס הקלטות כאשר מובטחים תנאים יציבים של הקלטות. איור 1 מציג הקלטה מייצגת של עווית אחת של MU מהיר. העקבות העליונים מראים את פוטנציאל הפעולה של היחידה המוטורית. העיכוב בין אספקת גירוי והתחלה של פוטנציאל הפעולה של יחידת המנוע הוא בשל זמן מוליכות מהשורש הפתח לשריר. איור 2 מציג הקלטה מייצגת של כוח הטטנוס הבלתי מרוסן של MU מהיר ורכבת של פוטנציאל פעולה יחידה מוטורית.

דיון

אם מבוצע כראוי על ידי מדענים מנוסים, הרכיב הכירורגי של הפרוטוקול המתואר צריך להסתיים בתוך כשעתיים. יש לנקוט טיפול מיוחד כדי לשמור על מצבים פיזיולוגיים יציבים של בעל החיים במהלך הניתוח, במיוחד טמפרטורת הגוף ועומק של הרדמה, אשר צריך להיות נשלט באופן שיטתי על ידי הערכת פינה רפלקסים גמילה. לאחר הניתוח, ניתן יהיה לשמור על תנאי הקלטה יציבים למשך שש שעות לפחות.

ההליך הניסיוני המכריע מתחיל בפיצול שורש האוורור לנתביים דקים מאוד המובילים לבידוד של אקסון מנוע יחיד לשריר הנחקר. למעשה, סיבים דקים של שורשים...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מתמר כוח	בהתאמה
מלקחיים	Fine Science Tools	No. 11255-20	Dumont #55 עם שוקיים קלות ועדינות במיוחד
מלקחיים	Fine Science Tools	No. 11150-10	Extra Fine Greafe Clinicps
	Fine Science Tools	No. 11026-15	דפוס מיוחד לאחיזה מעולה
מלקחיים	Fine Science כלים	מס' 11023-10	דק 1x2 שיניים
מלקחיים	מדע עדין כלים	מס' 11251-20	דומונט #5
המוסטטים	כלי מדע עדינים	מס' 13003-10	הרטמן
	מכשירי דשא	S1U5A
רעש נמוך ביו-אמפלייפר	מכשירי דיוק עולמיים	קוד הזמנה 74030
מחזיקי מחט	בסדר כלי מדע	מס' 12503-15	עם לסתות טונגסטן קרביד
Rongeurs	כלי מדע עדינים	מס' 16021-14	מספריים פרידמן-פירסון
	כלי מדע עדינים	מס' 14101-14	ישר חד / קהה עם לולאות אצבעות גדולות
מספריים	מדע עדינים	מס' 14075-11	קהים / קהים מעוקלים
	כלי מדע עדינים	מס' 14084-08	בון משובח
	במיוחד כלי מדע עדינים	מס '15000-00	ישר, אידיאלי לחיתוך עצבים
מכשירי דשא	ממריץ	S88	ממריץ דופק מרובע פלט כפול

אישית יחידת בידוד כלי מספריים מספריים