Method Article

שינויי טמפרטורה מצטברים לרבייה מקסימלית והשריצה באסטיאנקס מקסיקו

DOI:

10.3791/61708

⸱

February 14th, 2021

 ,  ,  , 
1Department of Biology, University of Maryland

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מאמר זה מתאר את תנאי המעבדה הבסיסיים ואת הפרוטוקולים למשטר טמפרטורה מצטבר כדי לעורר השרצה מקסימלית במקסיקו tetra Astyanax mexicanus, שהוא מודל מתפתח למחקרים התפתחותיים ואבולוציוניים.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הטטרה המקסיקנית, אסטיאנקס מקסיקניוס, היא מערכת מודלים מתפתחת למחקרים בפיתוח ובאבולוציה. קיומם של משטח עיניים (דגי קרקע) ומערה עיוורת (דגי מערה) במין זה מהווה הזדמנות לחקור את המנגנונים שבבסיס האבולוציה המורפולוגית וההתנהגותית. דגי מערה פיתחו תכונות קונסטרוקטיביות ורגרסיביות חדשניות. השינויים הקונסטרוקטיביים כוללים עליות בלוטות הטעם והלסתות, איברי חישה קו לרוחב, ושומן הגוף. השינויים הרגרסיביים כוללים אובדן או הפחתת עיניים. פיגמנטציה מלנין, התנהגות חינוך, תוקפנות, ושינה. כדי לחקור שינויים אלה באופן ניסיוני, חיוני להשיג מספר רב של עוברים הולידו. מאז שדגי פני השטח ודגי המערה המקוריים של א. מקסיקו נאספו בטקסס ובמקסיקו בשנות התשעים, צאצאיהם מגורים באופן שגרתי להתרבות ולהוליד מספר רב של עוברים במעבדת ג'פרי. למרות הרבייה נשלטת על ידי שפע מזון ואיכות, מחזורים כהים בהירים, וטמפרטורה, מצאנו כי שינויי טמפרטורה מצטברים לשחק תפקיד מפתח בגירוי השרצה מקסימלית. העלייה ההדרגתית בטמפרטורה מ-72 מעלות צלזיוס ל-78 מעלות צלזיוס בשלושת הימים הראשונים של שבוע הרבייה מספקת שניים-שלושה ימי השרצה רצופים עם מספר מרבי של עוברים איכותיים, ולאחר מכן ירידה הדרגתית בטמפרטורה מ-78 מעלות צלזיוס ל-72 מעלות צלזיוס בשלושת הימים האחרונים של שבוע ההשרצה. ההליכים המוצגים בסרטון זה מתארים את זרימת העבודה לפני ובמהלך שבוע רבייה במעבדה עבור הצטברות טמפרטורה מגורה השרצה.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למקסיקנים של הטלוסט אסטיאנקס יש צורת שטח (דגי שטח) עם עיניים, ורבים ושונים של מערות עיוורות שוכנות (דגי מערות) צורות1,2. דגי המערה התפתחו בחשיכה מתמדת ותחת מגבלות מזון, וכתוצאה מכך הופיעו תכונות קונסטרוקטיביות ורגרסיביותחדשניות 3. התכונות הקונסטרוקטיביות כוללות עליות בלוטות הטעם וגודל הלסת, איברי חישה של הקו לרוחב, עתודות שומן. התכונות הרגרסיביות כוללות אובדן או הפחתה של פיגמנטציה מלנין, עיניים, והתנהגויות, כגון שינה, חינוך, ותוקפנות. תכונה של מערכת Astyanax היא פוריות מלאה בין שתי הצורות, המאפשרת שימוש במיפוי לוקוסים של תכונות כמותיות (QTL) כדי לקבוע את האזורים הגנומי....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הליך זה אושר על ידי הנחיות טיפול בבעלי חיים מוסדיים של אוניברסיטת מרילנד, קולג 'פארק (כיום IACUC 469 #R-NOV-18-59; פרוייקט 1241065-1).

figure-protocol-1
איור 1. לוחות שנה במהלך שבוע רבייה ושבוע ללא רבייה. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

1. יום שני

  1. בין השעות 09:10-10:00, בצע בדיקות מים וצעדים 1.1.1-4 להלן.
    1. רשום את טמפרטורות ה....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנחנו בדרך כלל מגדלים ומולידים צאצאים של דגי שטח שנאספו במקור בנסימיינטו דל ריו צ'וי בסן לואיס פוטוסי, מקסיקו (דגי פני השטח של ריו צ'וי) ומעיינות סן שלמה בפארק המדינה בלמורהה, טקסס (דגי שטח מטקסס) ודגי מערות שמקורם בקואבה דה אל פצ'ון (דג מערת פצ'ון) בטמאוליפס, מקסיקו וקואבה דה לוס סביוס (דג המערה לוס סאבינוס) וסוטאנו דה לה טינאיה (דג מערת טינאיה) בסן לואיס פוטוסי מקסיקו.

במהלך שבוע רבייה, נתונים נאספים עבור טנקים שונים. העוברים המושרצים בכל מיכל נצפים לכמות ואיכות. הכמות נרשמת כגבוהה, בינונית .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Astyanax mexicanus הוא מודל ביולוגי חדשני כי שרצים לעתים קרובות ניתן גידלו בקלות במעבדה1,2. מכיוון שאנו מעוניינים במנגנונים ההתפתחותיים העומדים ביסוד שינויים אבולוציוניים בדגי המערה של א. מקסיקו, הייצור והשימוש בעוברים חיוניים למטרות המחקר שלנו. המטרה העיקרית של שמירה על מלאי מבוגר של דגים היא ייצור עוברים ומטגנים צעירים לשימוש בניסויים התפתחותיים ולחידוש מלאי הרבייה של מבוגרים. מדי פעם, מבוגרים עשויים לשמש גם לפיזיולוגיה, ניסויים התנהגותיים או .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מודים לדיוויד מרטסיאן, דידרה הייזר, איימי פארקהרסט, קרייג פוט ומנדי נג על תרומות יקרות ערך למתקן התרבות של מעבדת ג'פרי א. מקסיקו. המחקר במעבדת ג'פרי נתמך כיום על ידי מענק NIH EY024941.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
תולעים שחורותמזרח אקווטיקס, לנקסטר, פנסילבניהרשתות
ביציבהתאמה אישית
AquaCave Lake Forest, IL.ללא
ערכת בדיקה קולורימטריתPetcoמק"ט:11916API ערכת בדיקת pH במים מתוקים
פתיתי חלמון ביצהפנטאייר, מיניאפוליס, מינסוטהללא
קערות אצבעותקרונות תרבות 741004 אספקה ביולוגית של קרוליינה, 4.5 אינץ', 250 מ"ל
רשתות ידניותכל חממת חנות
לעובריםפישר סיינטיפיק51-029-321HPM405 L
מלחי ים מיידיים באוקיינוסספקטרום מותגים, בלקסבורג, וירג'יניהללא
מתילן כחולסיגמא-אולדריץ', סנט לואיס, MOM9140
פסטר פיפטספישר סיינטיפיק13-678-205.75 אינץ'.
פתרון השרייה נטוכל חנות
מחזור נוטרפיןאמזוןללאחיזוק חיידקים
להזנה חיהכל מקור
סטריאומיקרוסקופכל מקור
מדחוםכל מקור
טטרה פריכיות טרופיותספקטרום מותגים, בלקסבורג, וירג'יניהאף אחד
רבייה ללא שרימפס מלח לחיות מחמדלחיות מחמד מקרר

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jeffery, W. R. Cavefish as a model system in evolutionary developmental biology. Developmental Biology. 231, 1-12 (2001).
  2. Jeffery, W. R. Emerging model systems in evo-devo: cavefish and mechanisms of microevolution. Evolution & Development....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Astyanax mexicanusSurface FishCave FishIncremental TemperatureEmbryo CollectionBreeding ProtocolSpawning StimulationEmbryo StagingIncubator SetupWater Temperature

Related Articles