Method Article

העכבר שלי בהריון? הערכת אולטראסאונד בתדר גבוה

DOI:

10.3791/61893

⸱

March 18th, 2021

 , 
1Department of Pediatrics, New York University Grossman School of Medicine, 2Department of Anesthesiology, New York University Grossman School of Medicine, 3Department of Cell Biology, New York University Grossman School of Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה יכול לעזור לייעל ניסויים הדורשים עכברים מתוזמן בהריון על ידי קביעת מצב ההריון, גיל ההיריון, ואובדן הריון. מוצג כאן הוא פרוטוקול כדי להמחיש שיטות להערכת הריונות העכבר, כמו גם מלכודות פוטנציאליות (חפצי תמונה) שעשויים לחקות הריון.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

העכבר הוא המודל של בעלי חיים יונקים של בחירה עבור מחלות אנושיות רבות ותהליכים ביולוגיים. ביולוגיה התפתחותית דורשת לעתים קרובות עכברים בהריון מבוים כדי לקבוע תהליכים מתפתחים בנקודות זמן שונות. יתר על כן, רבייה אופטימלית ויעילה של עכברי מודל דורש הערכה של הריונות מתוזמן. בדרך כלל, עכברים הם הזדווגו לילה, ואת נוכחותו של תקע הנרתיק נקבע; עם זאת, הערך החיזוי החיובי של טכניקה זו הוא תת-אופטימלי, וצריך לחכות כדי לדעת אם העכבר באמת בהריון. ביומיקרוסקופיה אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה היא כלי יעיל ויעיל להדמיה: 1) אם עכבר בהריון; 2) לאיזה שלב הריון הגיע העכבר; ו -3) אם יש הפסדים תוך רחמיים. בנוסף לעוברים והעוברים, החוקר חייב גם לזהות חפצים נפוצים בחלל הבטן כדי לא לטעות אלה עבור רחם gravid. מאמר זה מספק פרוטוקול להדמיה יחד עם דוגמאות הממחישות.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

העכבר הוא המודל היונק המועדף על מחלות אנושיות רבות ותהליכים ביולוגיים1,2,3,4. מחקר בביולוגיה התפתחותית דורש לעתים קרובות עכברים בהריון מבוים כדי לקבוע תהליכים מתפתחים בנקודות זמן שונות5,6,7,8. יתר על כן, רבייה אופטימלית ויעילה של עכברי מודל דורשת הערכה של הריונות מתוזמן, במיוחד כאשר החוקרים חוקרים את ההשפעות של מוטציה בגן על ההתפתחות. בדרך כלל, החוקרים להזדווג עכברים הטרוזיגואליים לילה, לחפש תקע הנרתיק מוקדם בבוקר ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל השלבים בפרוטוקול זה פועלים בהתאם למדריך לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה שפורסם על ידי המכונים הלאומיים לבריאות ואושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית הספר לרפואה גרוסמן באוניברסיטת ניו יורק.

1. הזדווגות של עכברים עבור הריונות מתוזמן

  1. שייך את העכבר הנשי המתאים (בדרך כלל הטרוזיגוטה) בכלוב עם העכבר הגברי המתאים (בדרך כלל הטרוזיגוטה) להזדווגות לילה.
  2. הפרד את העכברים למחרת בבוקר. לחלופין, ברציפות להזדווג עם העכברים הנשיים והזכריים, ובכך להגדיל את הסיכויים להריון.
    הערה: עם זאת, הריון מתוזמן במדויק לא יכול להיות סמוך ובטוח עם החלופה, ובימוי של עוברי עכבר על ידי אולטרסאונד אינו ברור, במיוחד כאשר תהליך המחלה ת....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה יאפשר לחוקר לקבוע בביטחון אם עכבר בהריון, כולל בשלבים המוקדמים ולקבוע אם יש הפסדים עובריים או עובריים ברורים לפני הלידה ללא צורך להקריב את הסכר ההריוני. פרוטוקול זה שימושי במיוחד בעת רבייה עכברים מהונדסים גנטית; בדרך כלל, צלבים הטרוזיגוזיים x הטרוזיגיים להניב צאצאים הומוזיגיים מובילים לכישלון בהתפתחות נאותה, מה שגורם לקטלניות טרום לידתית. איור 1 מתאר מצב מייצג שבו עוברים מתים בהדרגה ולאחר מכן עוברים הריון מחדש באמצע ההיריון. איור 2 מראה כיצד למצוא את.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הצעד הראשון החשוב ביותר בהדמיה הוא לזהות את הנרתיק ולאחר מכן לקבוע את bifurcation של קרן הרחם שמאלה וימינה. על ידי ביצוע כל קרן הרחם, imager סביר פחות לזהות לולאות של המעי כמו הרחם. יתר על כן, הבנת הווריאציות במראה המעי (עם / בלי חומר צואה) חשוב להבדיל בין אלה לרחם; מדי פעם, "כדורים" צואה בלולאות מעיים עשוי לחקות רחם gravid (בהריון). למרות שמחברים אחרים תיארו את האבחנה של הריון ובימוי של התפתחות עוברית עכבר17,18,19 כולל גילוי של.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
קרם
אתנול, קוצץ
גזה או KimWipes
איזופלורן
חמצן רפואי (לא חובה)
סרט
מערכת הדמיית עכבר (כולל הגדרת הרדמה ופלטפורמת הדמיה)Fujifilm Visual Sonicsמגווןכל מערכת עם בדיקת מתמר אולטרסאונד בתדר מרכזי של 40 מגה-הרץ
סכין גילוח (לא סכין גילוח בטיחותי)
סולם (לשקילת עכבר)
ג'ל
אפילציה פרווה 70% רפואי אולטרסאונד

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bogue, M. A., et al. Mouse Phenome Database: an integrative database and analysis suite for curated empirical phenotype data from laboratory mice. Nucleic Acids Research. 46, 843-850 (2018).
  2. Ito, R., Takahashi, T., Ito, M.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

High Frequency UltrasoundMouse Pregnancy AssessmentGestational Age DeterminationUterine Horn ImagingEmbryo DetectionPregnancy Loss IdentificationAbdominal Artifact RecognitionTransducer PositioningBladder Vagina LocalizationMouse Breeding Protocol

Related Articles